梁華軍，閻 瀾，曹永兵，姜遠(yuǎn)英，顏天華 (．中國藥科大學(xué)藥學(xué)院，江蘇 南京 0009；.第二軍醫(yī)大學(xué)藥學(xué)院新藥研究中心，上海 00433)

雷帕霉素(rapamycin)又名西羅莫司(sirolimus)，是20世紀(jì)70年代從鏈球菌屬微生物吸水鏈霉菌(Streptomyceshygroscopicus)中分離得到的大環(huán)內(nèi)酯類次級(jí)代謝產(chǎn)物[1]，最初用于治療白色念珠菌(Candidaalbicans)引起的感染，但由于其作用無選擇性，在殺死白色念珠菌的同時(shí)也能傷害到宿主正常細(xì)胞，故其應(yīng)用受限。近年來研究表明,雷帕霉素具有免疫抑制活性，現(xiàn)在多聯(lián)合用藥治療腫瘤或器官移植[2]。

雷帕霉素靶(TOR)蛋白是在研究雷帕霉素抗細(xì)胞過度增殖過程中發(fā)現(xiàn)的。真核細(xì)胞中，雷帕霉素與一個(gè)相對分子質(zhì)量為12 000的小分子蛋白FKBP12結(jié)合，TOR蛋白是兩者結(jié)合后的作用靶點(diǎn)[3]。 Heitman等[4]在分析不同釀酒酵母突變菌株對雷帕霉素敏感性差別時(shí)發(fā)現(xiàn)，TOR蛋白具有兩個(gè)同系物TOR1p和TOR2p，隨后在人類細(xì)胞中也發(fā)現(xiàn)了這兩個(gè)同源蛋白的存在。研究證明，TOR1蛋白是rapamycin-FKBP12復(fù)合物的作用靶點(diǎn)。但也有例外，在布氏錐蟲(Trypanosomabrucei)中，與rapamycin-FKBP12復(fù)合物結(jié)合的是TOR2蛋白。

近30年來，隨著癌癥放化療、器官移植和艾滋病患者人數(shù)的增加、廣譜抗生素及免疫抑制劑的大量使用，靜脈導(dǎo)管植入及腔內(nèi)支架的普及應(yīng)用，深部真菌病，尤其是白色念珠菌所致的深部真菌感染發(fā)病率逐年增加[5]。氟康唑因其具有良好的生物利用度和較少的不良反應(yīng)成為目前臨床應(yīng)用最廣泛的抗系統(tǒng)性真菌感染的藥物；但由于其僅具有抑菌作用，故在長期治療和重復(fù)給藥過程中產(chǎn)生了快速發(fā)展的耐藥性。在我國，雖然因觀察時(shí)間、菌株來源以及地域不同，白色念珠菌的耐藥率從14.1%～84.2%不等，但近年來白色念珠菌耐藥性呈明顯的上升趨勢[6-8]。抗真菌藥物種類有限及對抗真菌的耐藥性問題已成為臨床白色念珠菌感染治療失敗的最主要原因，不僅造成患者痛苦，也消耗了大量社會(huì)醫(yī)療資源，使真菌病防治面臨更為嚴(yán)峻的挑戰(zhàn)。因此，研發(fā)針對白色念珠菌的高效且低耐藥性的藥物非常重要。TOR通路參與調(diào)控白色念珠菌細(xì)胞生長、菌絲形成，而酵母態(tài)與菌絲態(tài)的轉(zhuǎn)變既參與調(diào)控細(xì)胞的生長周期，又與白色念珠菌致病力、毒力密切相關(guān)。因此，TOR通路相關(guān)蛋白是潛在的抗真菌藥物新靶標(biāo)。

1 白色念珠菌TOR信號(hào)通路結(jié)構(gòu)

1.1TOR蛋白結(jié)構(gòu) TOR蛋白高度保守，白色念珠菌TOR蛋白結(jié)構(gòu)與釀酒酵母(Saccharomycescerevisiae)結(jié)構(gòu)類似。釀酒酵母TOR蛋白三級(jí)結(jié)構(gòu)如圖，其中FRB(FKBP12-Rap binding domain)是rapamycin-FKBP12復(fù)合物與TOR蛋白結(jié)合的重要區(qū)域。當(dāng)FRB被雷帕霉素結(jié)合后，分子中的激酶活性域(kinase domain)無法暴露，TOR蛋白激酶便不能發(fā)揮功能。

圖1 TOR蛋白三級(jí)結(jié)構(gòu)示意圖[9]

釀酒酵母TOR蛋白在TOR信號(hào)通路中存在兩種復(fù)合物，TORC1(TOR complex 1)和TORC2(TOR complex 2)。TORC1主要影響細(xì)胞瞬時(shí)生長，與營養(yǎng)、應(yīng)激、核糖體的合成等有關(guān)，通常對雷帕霉素敏感；而TORC2主要調(diào)節(jié)細(xì)胞骨架的運(yùn)動(dòng)能力，通常對雷帕霉素不敏感。釀酒酵母TORC1和TORC2的結(jié)構(gòu)組成如圖2。

圖2 釀酒酵母TOR通路中復(fù)合物TORC1和TORC2的組成及作用示意圖[10]

根據(jù)同源性預(yù)測，構(gòu)成白色念珠菌TORC1的組分有TOR1p、Tco89p、Kog1p、Lst8p。其中，Tco89p參與調(diào)節(jié)細(xì)胞完整性，Kog1p參與調(diào)節(jié)生長，Lst8p[11]與白色念珠菌對雷帕霉素敏感性有關(guān)。白色念珠菌中目前未發(fā)現(xiàn)TOR2蛋白存在。釀酒酵母TORC2包括TOR1p、Avo1p、Avo2p、Avo3p和Lst8p。其中，白色念珠菌Tsc11p是釀酒酵母菌Avo3p同源蛋白[12]，與鞘脂(sphingolipid)生物合成有關(guān)；而白色念珠菌中與Avo1p、Avo2p的同源蛋白功能暫未明確。

1.2TOR信號(hào)通路上游組成 釀酒酵母TOR信號(hào)通路上游存在一條路徑：VAM6-EGOC-TORC1。復(fù)合物EGOC(exit from growth arrest complex)位于TORC1上游，由Gtr1p、Gtr2p、Ego1p、Ego3p組成，調(diào)節(jié)細(xì)胞自噬、氨基酸轉(zhuǎn)運(yùn)通透酶Gap1p的活性。如果缺失EGOC會(huì)導(dǎo)致液泡酸化缺陷。Binda 等[13]發(fā)現(xiàn)，釀酒酵母Rag GTP酶類似物Gtr1p，作為與液泡膜相關(guān)的EGOC的一個(gè)組成部分，以對亮氨酸、組氨酸敏感的方式激活TORC1。Gtr1GTP持續(xù)過表達(dá)，可部分緩解TORC1由于亮氨酸缺乏引起的功能抑制；而激活Gtr1GDP 引起TORC1活性的持續(xù)降低；Gtr1p與GTP或GDP結(jié)合狀態(tài)由鳥嘌呤核苷酸交換因子(GEF)Vam6p調(diào)節(jié)。

Zakikhany等[14]推測白色念珠菌 Gtr1p 是GTP結(jié)合蛋白，該蛋白在艾滋病患者口腔中分離得到的白色念珠菌中表達(dá)升高， 其作用機(jī)制有待進(jìn)一步分析證明。白色念珠菌Gtr2p與酵母Gtr2p蛋白同源，與自噬相關(guān)，正向調(diào)節(jié)RNA聚合酶Ⅱ(RNA polⅡ)啟動(dòng)子。白色念珠菌中并未鑒定出與酵母Ego1p、Ego3p同源的蛋白。白色念珠菌Vam6p可能與酵母Vam6p類似，也參與氨基酸轉(zhuǎn)運(yùn)，維持液泡功能完整性，這有待進(jìn)一步的研究證明。

Tsao等[15]發(fā)現(xiàn)白色念珠菌TOR通路上游的另一個(gè)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑：TSC2-RHB1-TOR。Rhebp是真核細(xì)胞中Ras超家族中一個(gè)新發(fā)現(xiàn)的小分子G蛋白，參與調(diào)控多種生理過程，其活性受到GAP蛋白Tsc2p的調(diào)節(jié)。研究發(fā)現(xiàn)，Rheb即為Rhb1p，敲除RHB1基因，白色念珠菌對雷帕霉素的敏感性升高，表明Rhb1p與TOR信號(hào)通路相關(guān)；進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，Rhb1p通過對銨鹽通透酶Mep2p氮源傳感器的調(diào)控，參與調(diào)節(jié)菌絲形成。另外，Rhb1p通過TOR激酶和Mkc1-MAP激酶通路調(diào)節(jié)細(xì)胞壁完整性。

1.3TOR信號(hào)通路下游組成 白色念珠菌中，已經(jīng)證實(shí)的TOR信號(hào)通路作用底物有Sit4p，Mds3p。Lucia等[16]證明Mds3p調(diào)節(jié)依賴pH的形態(tài)變化，參與酵母態(tài)到菌絲態(tài)的轉(zhuǎn)變，以及染色體與生物被膜形成等過程。MDS3基因敲除菌的TOR信號(hào)通路過度激活，核糖體蛋白的優(yōu)先合成以及調(diào)控氮源利用的基因表達(dá)下調(diào)；MDS3基因缺失菌引起的菌絲形成缺陷、轉(zhuǎn)錄缺陷均可被雷帕霉素恢復(fù)。同樣，SIT4基因缺失菌引起的菌絲形成轉(zhuǎn)錄缺陷也可被雷帕霉素恢復(fù)。而帶有TOR1-1等位基因和RBP1缺失菌中，這些缺陷不能被雷帕霉素恢復(fù)。Mds3p和Sit4p能免疫共沉淀，而Sit4p已經(jīng)是TOR信號(hào)通路的一個(gè)效應(yīng)器[17]，表明Mds3p是TOR通路下游的一個(gè)新成員。

Gln3是白色念珠菌TOR信號(hào)通路下游另一個(gè)組成部分[18]。Gln3p編碼的GATA因子，與白色念珠菌的氮代謝有關(guān)。GLN3基因缺失菌在特定的氮源存在時(shí)的生長率明顯降低，同時(shí)缺失GLN3和GAT1時(shí)，菌株生長缺陷更嚴(yán)重。Gln3p可激活銨鹽代謝相關(guān)基因GDH3和MEP2，而與氮源代謝相關(guān)的 GAT1只參與MEP2的表達(dá)，而不是GDH3。另外，GLN3和GAT1也可激活編碼氨基酸通透酶的GAP2基因，并且GLN3對它的激活是氮源依賴性的。GLN3基因缺失時(shí)，Gat1p活性下降50.0%～66.7%。GLN3和GAT1分別缺失時(shí)，菌株對雷帕霉素的敏感降低，對菌絲形成缺陷的影響也與氮源相關(guān)。

酵母Sch9p是TORC1的直接作用底物[19]。Liu等[20]研究表明，Sch9基因敲除后，白色念珠菌細(xì)胞變小，延遲進(jìn)入對數(shù)生長期，菌株對雷帕霉素、咖啡因、十二烷基磺酸鈉(SDS)敏感，并且影響菌絲的形成，在全身感染小鼠模型中的毒力降低。

1.4TOR1p在細(xì)胞內(nèi)定位 TOR1p在生物體內(nèi)的定位多年來一直存在爭議。TOR信號(hào)通路在細(xì)胞質(zhì)內(nèi)和細(xì)胞核內(nèi)調(diào)控多種細(xì)胞進(jìn)程，包括：氨基酸轉(zhuǎn)運(yùn)，核糖體RNAs合成，核糖體蛋白的表達(dá)。Li等[21]研究表明，TOR1p核內(nèi)定位是營養(yǎng)依賴和雷帕霉素敏感的，營養(yǎng)缺陷和雷帕霉素處理引起TOR1p由核內(nèi)外排至細(xì)胞質(zhì)。研究還表明，TOR1p的核內(nèi)定位對35 SrDNA的合成非常重要，但不影響氨基酸轉(zhuǎn)運(yùn)和核糖體蛋白的表達(dá)。Srugill等[22]通過TOR1-GFP證明了釀酒酵母TOR1p定位于液泡。哺乳動(dòng)物TOR蛋白在有些報(bào)道中[23]也是在細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核內(nèi)動(dòng)態(tài)轉(zhuǎn)運(yùn)的。白色念珠菌TOR1p定位有待進(jìn)一步明確。

2 白色念珠菌TOR信號(hào)通路的作用

2.1調(diào)控黏附基因表達(dá) 白色念珠菌的生物被膜在生物和非生物表面都可形成，如：組織、外科支架、牙托、導(dǎo)管等[24]，進(jìn)而產(chǎn)生耐藥性，加重病情。細(xì)胞間黏附作用是白色念珠菌生物被膜形成的關(guān)鍵因素。

真核細(xì)胞的生長與營養(yǎng)成分、生長因子、環(huán)境刺激相關(guān)，增強(qiáng)細(xì)胞間的聯(lián)系，可以提高存活率。對雷帕霉素敏感的TOR1激酶，從酵母到人類細(xì)胞都高度保守，尤其在對細(xì)胞外營養(yǎng)的應(yīng)答方面。Bastidas等[25]通過全基因組轉(zhuǎn)錄分析研究表明白念珠菌TOR1p除了調(diào)控與氮源缺乏應(yīng)答和核糖體合成相關(guān)的基因外，還參與調(diào)節(jié)與細(xì)胞壁完整性、菌絲特異性相關(guān)的基因，包括抑制黏附與菌絲的誘導(dǎo)因子Bcr1p和Efg1p，以及激活黏附與菌絲的抑制因子Nrg1p、Tup1p。

被膜的形成依賴于黏附作用。ALS1、ALS3是ALS(agglutinin like sequence)家族中與被膜形成相關(guān)的基因。HWP1編碼細(xì)胞壁甘露糖蛋白，與被膜形成相關(guān)。Tsuchimori等[26]證明白色念珠菌HWP1基因缺失后感染小鼠，小鼠死亡率顯著降低，在感染小鼠的腎臟的過程中，白色念珠菌不易感染小鼠腎臟，并對上皮細(xì)胞損害降低，表明HWP1增強(qiáng)白色念珠菌黏附和毒力。被膜形成時(shí)，轉(zhuǎn)錄因子BCR1調(diào)控ALS1、ALS3、HWP1的表達(dá)[27]。另外，轉(zhuǎn)錄因子Tec1p，厚垣孢子，菌絲形成的轉(zhuǎn)錄抑制因子Nrg1p，Tup1p也參與黏附基因的表達(dá)調(diào)控，發(fā)揮抑制作用，并受TOR1p的調(diào)控，如圖3。

圖3 TOR通路調(diào)節(jié)黏附基因的示意圖[25]

注：營養(yǎng)缺乏或用雷帕霉素處理時(shí)，TOR1p失活，直接或間接(虛線)下調(diào)轉(zhuǎn)錄抑制因子Nrg1p和Tup1p的表達(dá)，同時(shí)激活轉(zhuǎn)錄增強(qiáng)子Bcr1p和Efg1p，促進(jìn)黏附相關(guān)基因表達(dá)，繼而引起黏附和聚集

2.2影響氮代謝 位于TOR信號(hào)通路TORC1復(fù)合物下游的Gln3p、Gat1p參與白色念珠菌對氮源的代謝。白色念珠菌銨通透酶Mep2p是氮缺乏時(shí)的感受器，Gln3p可激動(dòng)Mep2p。Liao等[14]通過敲除白色念珠菌GLN3和GAT1基因，分別供給不同氮源，以考察TOR通路調(diào)控下細(xì)胞生長狀況。當(dāng)優(yōu)勢氮源谷氨酰胺、銨、精氨酸、尿素存在時(shí)，親本菌生長正常，而GLN3基因缺失菌的生長率降低了25%～40%；氮源為γ-氨基丁酸(GABA)、谷氨酸鹽、脯氨酸、異亮氨酸、色氨酸時(shí)，親本菌生長略微緩慢，但GLN3基因缺失菌在以色氨酸為氮源時(shí)，生長率降低50%。與GLN3不同，在異亮氨酸和色氨酸作為唯一氮源時(shí)，GAT1基因缺失菌的生長率下降達(dá)80.0%～83.3%。

此外，GLN3基因缺失菌菌絲形成能力缺陷，其毒力和感染力降低，受感染BALB/c小鼠存活率顯著延長，表明Gln3p可增強(qiáng)白色念珠菌致病力。

2.3參與核小體和核糖體蛋白的合成 核小體參與核糖體生物合成(ribosome biogenesis，Ribi)的轉(zhuǎn)錄輸出，促進(jìn)細(xì)胞生長，被高度控制。TOR激酶參與核小體和核糖體蛋白(ribosomal protein，RP)轉(zhuǎn)錄，RP在細(xì)胞生長方面有重要作用，消耗細(xì)胞內(nèi)大部分能量，構(gòu)建生命體骨架，當(dāng)環(huán)境改變時(shí)，細(xì)胞必須迅速調(diào)整RP合成的平衡，以合理利用環(huán)境中的資源。釀酒酵母鋅指蛋白Sfp1p是TORC1下游效應(yīng)器，Sfp1p是調(diào)控Ribi和RP轉(zhuǎn)錄的激活因子[28]，但白色念珠菌中并不存在Sfp1p的同源蛋白。

TORC1另一個(gè)直接作用底物Sch9p也是Ribi和RP的一個(gè)激活因子，并且參與調(diào)控RNA聚合酶Ⅰ和Ⅲ合成與功能。Sch9p被TOR1p磷酸化，從細(xì)胞質(zhì)轉(zhuǎn)移入細(xì)胞核內(nèi)，參與Ribi和RP合成。Sch9p與Sfp1p在細(xì)胞內(nèi)發(fā)揮平行作用，共同參與生物體的生長。在白色念珠菌中，Sch9p在低氧情況下，阻止菌絲的形成，而Sch9基因缺失菌并不影響到生長狀況和抗逆能力，但在低氧情況下(<10% O2)卻產(chǎn)生菌絲形成能力缺陷，這種缺陷可以在TOR1p被抑制的情況下恢復(fù)，雷帕霉素和咖啡因都可抑制TOR1p活性。故白色念珠菌中的TOR蛋白激酶參與Ribi和RP合成的機(jī)制有待進(jìn)一步研究證明。

3 與TOR信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑相關(guān)的通路

釀酒酵母與TOR信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑相關(guān)的其他通路有[29-31]：鈣調(diào)神經(jīng)磷酸酶通路；GAAC通路，與氨基酸合成和利用相關(guān)；Snf1p通路，參與調(diào)節(jié)碳源的利用；逆反應(yīng)通路，參與三羧酸循環(huán)的逆反應(yīng)；PKC通路，與細(xì)胞壁完整性相關(guān)；PKA通路，參與核糖體蛋白合成，抑制應(yīng)激反應(yīng)和進(jìn)入G0期；PHG通路，參與促進(jìn)菌絲生長；自噬途徑，發(fā)生自噬。

由上述可見，在白色念珠菌中也會(huì)存在許多與TOR通路相關(guān)的其他通路。通過這樣的相互作用，可以放大TOR在生物體內(nèi)的作用，也為TOR的研究提供了更多的方向和思路。

3.1與營養(yǎng)通路cAMP-PKA 雷帕霉素可以抑制TOR激酶，從而抑制RP合成，而RP在蛋白質(zhì)的生物合成中起重要作用。TOR和cAMP-PKA都是營養(yǎng)通路，并且都可以在細(xì)胞周期G1期調(diào)控周期進(jìn)程[32]。PKA在轉(zhuǎn)錄應(yīng)答方面，作用顯著，但許多基因需要PKA和TOR的共同調(diào)節(jié)才發(fā)揮正常作用，還有些與營養(yǎng)調(diào)節(jié)相關(guān)的基因既不需要PKA的參與，也不需要TOR的參與，而是靠葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)途徑參與生物體的營養(yǎng)應(yīng)答。

3.2與pH通路Rim101 通過遺傳學(xué)方法研究表明，Mds3p在白色念珠菌適應(yīng)環(huán)境堿性pH方面作用重大。Mds3p表現(xiàn)出與Rim101平行應(yīng)答于偏堿性(neutral-alkaline)pH的特性，已經(jīng)研究成熟的Rim101在應(yīng)答于環(huán)境pH的時(shí)候，Mds3p也發(fā)揮了重要作用，此種現(xiàn)象首先在釀酒酵母中發(fā)現(xiàn)。

4 展望

哺乳動(dòng)物mTOR通路在癌癥、錯(cuò)構(gòu)瘤、移植排斥、自身免疫紊亂、心血管疾病、代謝紊亂治療方面都有重要的作用。在果蠅，酵母以及粟酒裂殖酵母、盤狀細(xì)胞黏菌、萊菌衣藻、布氏錐蟲、擬南芥、秀麗隱桿線蟲、黑腹果蠅中也都展開了廣泛研究[33]。TORC1的直接作用底物、TORC2的上游調(diào)節(jié)物質(zhì)和直接作用底物都有待進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)和探索。條件致病菌白色念珠菌TOR信號(hào)通路參與氮源代謝，影響生長，并且參與調(diào)節(jié)黏附、菌絲形成，進(jìn)而調(diào)節(jié)菌株致病力和毒力，對白色念珠菌TOR信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路各分子及其相互作用關(guān)系的研究意義重大，為開拓新的抗真菌藥物奠定理論基礎(chǔ)。

【參考文獻(xiàn)】

[1] Sehgal SN, Baker H, Vézina C. Rapamycin(AY-22,989), a new antifungal antibiotic .II. Fer-mentation, isolation and characterization[J]. J Antibiot, 1975, 28(19): 721-732.

[2] 馬 林, 萬元?jiǎng)? 陳東生. 他克莫司的臨床應(yīng)用[J]. 藥物流行病學(xué)雜志, 2008, 17(1): 8-10.

[3] Harding MW, Galat A, Uehling DE,etal. A receptor for the immuno-suppressant FK506 is a cistrans peptidyl-prolyl isomerase[J]. Nature, 1989, 341 (6244) :758-760.

[4] Heitman J, Movva NR, Hall MN. Targets for cell cycle arrest by the immunosuppressant rapamycin in yeast[J]. Scinece, 1991, 253(5022): 905-909.

[5] Snydman DR. Shifting patterns in the epidemiology of nosocomial Candida infections[J]. Chest, 2003, 123(5 Supp1): 5.

[6] 周建黨, 黃 輝, 陳 穎, 等. 四年間酵母樣真菌感染的病原菌分布與耐藥特征分析[J]. 中國微生態(tài)學(xué)雜志. 2007, 19 (2): 202-203.

[7] 路曉欽, 黎莉華, 周 麗, 等. 白假絲酵母菌感染分布及耐藥性分析[J]. 中國感染控制雜志,2007, 6 (6): 419-421.

[8] 吳文娟，胡綠蔭，孫志華, 等. 獲得性免疫缺陷綜合征患者白假絲酵母分離株基因型及耐藥性分析[J]. 檢驗(yàn)醫(yī)學(xué),2007, 22(6): 684-687.

[9] Dames SA, Mulet JM, Rathgeb-Szabo K,etal. The solution structure of the FATC domain of the protein kinase target of rapamycin suggests a role for redox-dependent structural and cel-lular stability[J]. J Biol Chem, 2005, 280(21): 20558-20564.

[10] Wullschleger S, Loewith R, Hall MN. TOR signaling in growth and metabolism[J]. Cell, 2006, 124(3): 471-484.

[11] Rosenbach A, Dignard D, Pierce JV,etal. Adaptations ofCandidaalbicansfor growth in the mammalian Intestinal tract[J]. Eukaryot Cell, 2010, 9(7): 1075-1086.

[12] Uhl MA, Biery M, Craiget N,etal. Haploin sufficiency-based large-scale forward genetic analysis of filamentous growth in the diploid human fungal pathogenC.albicans[J]. EMBO, 2003, 22 (11): 2668-2678.

[13] Binda M, Péli-Gulli MP, Bonfils G,etal. The Vam6 GEF controls TORC1 by activating the EGO complex[J]. Mol Cell, 2009, 35(5): 563-573.

[14] Zakikhany K, Naglik JR, Schmidt-Westhausen A,etal.Invivotranscript profiling ofCandidaalbicansidentifies a gene essential for interepithelial dissemination[J]. Cell Microbiol, 2007, 9(12): 2938-2954.

[15] Tsao CC, Chen YT, Lan CY. A small G protein Rhb1 and a GTP ase-activating protein Tsc2 involved in nitrogen starvation-induced morphogenesis and cell wall integrity ofCandidaalbicans[J]. Fungal Genet Biol, 2009, 46(2): 126-136.

[16] Zacchi LF, Gomez-Raja J, Davis DA. Mds3 regulates morphogenesis inCandidaalbicansthrough the TOR pathway[J]. Mol Cell Biol, 2010, 30(14): 3695-3710.

[17] Lee CM, Nantel A, Jiang LH,etal. The serine/threonine protein phosphatase SIT4 modulates yeast-to-hypha morphogenesis and virulence inCandidaalbicans[J]. Mol Microbol, 2004, 51(3): 691-709.

[18] Liao WL, Ramn AM, Fonzi WA. GLN3 encodes a global regulator of nitrogen metabolism and virulence ofCandidaalbicans[J]. Fungal Genet Biol, 2008, 45(4): 514-526.

[19] Huber A, Bodenmiller B, Uotila A,etal. Characterization of the rapamycin-sensitive phosphoproteome reveals that Sch9 is a central coordinator of protein synthesis[J]. Genes Dev, 2009, 23: 1929-1943.

[20] Liu W, Zhao JW, Li XC,etal. The protein kinase CaSch9p is required for the cell growth, filamentation and virulence in the human fungal pathogenCandidaalbica[J]. FEMS Yeast Res, 2010, 10(4): 462-470.

[21] Li H, Tsang CK, Watkins M,etal. Nutrient regulates Tor1 nuclear localization and association with rDNA promoter[J]. Nature, 2006, 442: 1058-1061.

[22] Strugill TW, Cohen A, Diefenbacher M,etal. TOR1 and TOR2 have distinct locations in live cells[J]. Eukaryot Cell, 2008, 7(10): 1819-1830.

[23] Kim JE, Chen J. Cytoplasmic-nuclear shuttling of FKBP12-rapamycin-associated protein is involved in rapamycin-sensitive signaling and translation initiation[J]. PNAS, 2000, 97(26)：14340-14345.

[24] Kojic EM, Darouiche RO. Candida infections of medical devices[J]. Clin Microbiol, 2004, 17(2): 255-267.

[25] Bastidas RJ, Heitman J, Cardenas ME. The protein kinase Tor1 regulates adhesin gene expression inCandidaalbicans[J]. PLoS Pathol, 2009, 5(2): e1000294.

[26] Tsuchimori N, Sharkey LL, Fonzi WA,etal. Reduced virulence of HWP1-deficient mutants ofCandidaalbicansand their interactions with host cells[J]. Infect Immun, 2000, 68(4): 1997-2002.

[27] Nobile CJ, Mitchell AP. Regulation of cell-surface genes and biofilm formation by theC.albicanstranscription factor Bcr1p[J]. Curr Biol, 2005, 15(12): 1150-1155.

[28] Lempi?inen H, Uotila A, Urban J,etal. Sfp1 interaction with TORC1 and Mrs6 reveals feedback regulation on TOR signaling[J]. Mol Cell, 2009, 33(6): 704-716.

[29] Rohde JR, Cardenas ME. Nutrient signaling through TOR kinases controls gene expression and cellular differentiation in fungi[J]. Curr Top Microbiol, 2004, 279: 53-72.

[30] Rohde JR, Bastidas R, Puria R,etal. Nutritional control via Tor sinaling inSaccharomycescerevisiae[J]. Curr Opin Microbiol, 2008, 11(2): 153-160.

[31] Zurita-Martine SA, Cardenas ME. Tor and cyclic AMP-Protein kinase A:two parallel pathways regulating expression of genes required for cell growth[J]. Eukaryot Cell , 2005, 4(1): 63-71.

[32] Pedruzzi I, Dubouloz F, Cameroni E,etal. TOR and PKA signaling pathways converge on the protein kinase Rim15 to control entry into G0 [J]. Mol Cell, 2003, 12(6): 1607-1613.

[33] Soulard A, Cohenl A, Hall MN. TOR signaling in invertebrates[J]. Curr Opin Cell Biol, 2009, 21(6): 825-836.