亚洲免费av电影一区二区三区,日韩爱爱视频,51精品视频一区二区三区,91视频爱爱,日韩欧美在线播放视频,中文字幕少妇AV,亚洲电影中文字幕,久久久久亚洲av成人网址,久久综合视频网站,国产在线不卡免费播放

        ?

        纖維原樣蛋白2陽性表達(dá)預(yù)測急性胰腺炎病情的嚴(yán)重程度

        2014-08-04 03:38:06懷佳萍葉曉華蔡振寨陳燕萍
        中華胰腺病雜志 2014年4期
        關(guān)鍵詞:內(nèi)皮細(xì)胞胰腺炎胰腺

        懷佳萍 葉曉華 蔡振寨 陳燕萍

        有學(xué)者認(rèn)為,凝血機(jī)制的異常和血栓形成在重癥急性胰腺炎(SAP)發(fā)病機(jī)制中占重要地位[1],它最終可發(fā)展成彌散性血管內(nèi)凝血(disseminated intravascular coagulation, DIC)和多器官功能衰竭(multiple organ dysfunction syndrome, MODS)[2]。纖維原樣蛋白2(Fgl2)是一種新型的纖維蛋白原,表達(dá)于各種類型的細(xì)胞,在血栓的形成中發(fā)揮重要作用。它能激活凝血酶原酶,繼而激發(fā)凝血系統(tǒng),最終形成血栓,導(dǎo)致微循環(huán)障礙[3]。但Fgl2在SAP發(fā)病機(jī)制中的作用尚不清楚。本研究檢測急性胰腺炎(AP)患者外周血單核細(xì)胞和胰腺組織中Fg12的表達(dá),探討其評估AP嚴(yán)重程度的臨床應(yīng)用價(jià)值。

        一、材料和方法

        1.標(biāo)本收集:收集12例SAP、6例輕癥急性胰腺炎(MAP)患者外周血,分離單個(gè)核細(xì)胞(PBMC),以8名健康志愿者的PBMC作為對照。SAP及MAP的診斷符合中華醫(yī)學(xué)會消化病分會胰腺病學(xué)組制定的標(biāo)準(zhǔn)。另收集2003年至2011年間15例行手術(shù)治療的SAP患者的胰腺組織及11例胰腺癌手術(shù)時(shí)取的癌周胰腺組織,經(jīng)病理檢查證實(shí)為MAP的石蠟切片。

        2.實(shí)時(shí)定量PCR:取分離得到的PBMC,應(yīng)用Trizol抽提細(xì)胞總RNA,并逆轉(zhuǎn)錄成cDNA。引物序列: Fgl2上游為5′-CCTGGAGATTGTGGTTTCGT-3′,下游為5′-TACCATGCCTTTCTCCAAGG-3′; 內(nèi)參β-actin上游為5′-TGTCACCAACTGGGACGATA-3′,下游為5′-GGGGTGTTGAAGGTCTCAAA-3′。 PCR反應(yīng)條件:95℃ 15 s,60℃ 45 s, 72℃ 60 s,40次循環(huán)。根據(jù)反應(yīng)曲線計(jì)算Ct值(Threshold Cycle),采用公式2-ΔΔCt計(jì)算目的基因mRNA相對表達(dá)量。ΔΔCt=(Ct目的基因-Ct管家基因)實(shí)驗(yàn)組-(Ct目的基因-Ct管家基因)對照組。

        3.免疫組化:采用Envision試劑盒檢測外周單核細(xì)胞和胰腺組織的Fgl2表達(dá)。兔抗大鼠Fgl2多抗工作濃度為1∶100,最后DAB顯色,蘇木精復(fù)染,鹽酸乙醇分化,氨水反藍(lán),中性樹膠封片。以PBS代替一抗作為陰性對照。在200倍光鏡下隨機(jī)選取10個(gè)視野,采用Image-Pro Plus 6.0圖像分析軟件測定其平均吸光度值,并進(jìn)行半定量分析。

        二、結(jié)果

        1.外周血單核細(xì)胞Fgl2 mRNA及蛋白的表達(dá):SAP組、MAP組、對照組PBMC的Fg12 mRNA相對表達(dá)量分別為2.13±1.00、1.02±0.36、1.00±0.08。SAP組PBMC的Fg12 mRNA表達(dá)顯著高于MAP組及對照組,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P值均<0.01),而MAP組與對照組的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。SAP組、MAP組、對照組的Fg12蛋白的相對表達(dá)量分別為1.65±0.91、0.87±0.54、0.79±0.1,SAP組PBMC的Fg12蛋白表達(dá)顯著高于MAP組和對照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P值均<0.01),而MAP組和對照組之間的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(圖1)。

        圖1 SAP組(a)、MAP組(b)、對照組(c)PBMC的Fgl2蛋白表達(dá)(免疫組化 ×200,)

        2.胰腺組織Fgl2蛋白表達(dá):SAP患者胰腺組織Fgl2高表達(dá),主要表達(dá)于間質(zhì)細(xì)胞和血管內(nèi)皮細(xì)胞,MAP患者胰腺組織無明顯Fgl2表達(dá)(圖2)。SAP組、MAP組、對照組胰腺組織Fg12蛋白的相對表達(dá)量分別為2.19±1.12、0.71±0.43、0.86±0.19。SAP組胰腺組織Fg12蛋白表達(dá)量顯著高于MAP組和對照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P值均<0.01),而MAP組和對照組之間的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

        圖2 SAP組(a)、MAP組(b)胰腺組織Fgl2蛋白的表達(dá)(免疫組化×200,)

        3.Fgl2表達(dá)與Ranson、APACHEⅡ評分的相關(guān)性:SAP患者的Ranson、APACHEⅡ評分分別為(3.64±1.19)、(10.88±2.28)分,MAP患者為(1.54 ±0.61)、(6.86±1.60)分,SAP患者較MAP患者顯著升高,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P值均<0.001)。SAP患者胰腺組織Fgl2表達(dá)量與SAP患者的Ranson、APACHEⅡ評分均呈正相關(guān)(r值分別為0.937、0.976,P值均<0.01)。

        討論SAP為一種炎癥性疾病,在炎癥過程中,纖維蛋白沉積導(dǎo)致的微血栓形成對病情的發(fā)展起重要作用[4]。Fgl2是一種新的促凝劑,能夠通過其替代途徑直接將凝血酶原轉(zhuǎn)化為凝血酶,促進(jìn)微血栓的形成[5]。 Fgl2主要表達(dá)于活化的巨噬細(xì)胞、T細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞。

        Fgl2啟動(dòng)的凝血途徑是通過“免疫凝血”來實(shí)現(xiàn)的,表達(dá)于微血管內(nèi)皮細(xì)胞、巨噬細(xì)胞和其他一些免疫細(xì)胞的Fgl2是由一系列促炎因子所介導(dǎo)的[6]。Clark等[7]報(bào)道,在TNF-α刺激下,滋養(yǎng)層和蛻膜層大量表達(dá)Fgl2,結(jié)果誘導(dǎo)CBA×DBA/2小鼠流產(chǎn)。

        本研究結(jié)果顯示,SAP組患者PBMC的Fg12 mRNA及蛋白的表達(dá)較MAP組和對照組顯著上調(diào),且主要定位于胰腺炎癥區(qū)域所浸潤的間質(zhì)細(xì)胞和微脈管系統(tǒng)的內(nèi)皮細(xì)胞。文獻(xiàn)報(bào)道,F(xiàn)gl2定位與纖維蛋白(原)的定位一致,表明Fgl2的表達(dá)可引起纖維蛋白沉積,導(dǎo)致微血栓形成,進(jìn)而導(dǎo)致胰腺的病理損傷。雖然本研究采用的MAP組織是胰腺癌周圍的胰腺組織,但Su等[6]報(bào)道肝癌組織及間質(zhì)細(xì)胞均表達(dá)FgI2蛋白,故MAP組織未表達(dá)FgI2蛋白可排除假陰性的可能性。

        通過spearman相關(guān)分析,PBMC的Fgl2表達(dá)與SAP患者入院24 h內(nèi)Ranson、APACHEⅡ評分呈正相關(guān),因此,檢測PBMC的Fgl2的表達(dá)可能具有早期監(jiān)測SAP嚴(yán)重程度的臨床價(jià)值。此外,抗Fgl2抗體治療或抗Fgl2基因療法的有效性在MHC-3肝炎、移植排斥中也已得到證實(shí)[8],可以減輕纖維蛋白的沉積和病理損傷,從而為胰腺炎的治療提供新的靶點(diǎn)。

        參 考 文 獻(xiàn)

        [1] Kakafika A, Papadopoulos V, Mimidis K, et al. Coagulation, platelets, and acute pancreatitis[J]. Pancreas, 2007, 34(1): 15-20.

        [2] Yasuda T, Ueda T, Kamei K, et al. Plasma tissue factor pathway inhibitor levels in patients with acute pancreatitis[J]. J Gastroenterol, 2009, 44:1071-1079.

        [3] Chan CW, Chan MW, Liu M, et al. Kinetic analysis of a unique direct prothrombinase, fgl2, and identification of a serine residue critical for the prothrombinase activity[J]. J Immunol, 2002, 168(10): 5170-5177.

        [4] Zhang XP, Zhang J, Ma ML, et al. Pathological changes at early stage of multiple organ injury in a rat model of s4vere acute pancreatitis[J]. Hepatobiliary Pancreat Dis Int, 2010, 9(1): 83-87.

        [5] Ning Q, Sun Y, Han MF, et al. Role of fibrinogen-like protein 2 prothrombinase /fibroleukin in experimental and human allograft rejection[J]. J Immunol, 2005, 174(11): 7403-7411.

        [6] Su K, Chen F, Yan WM, et al. Fibrinogen-like protein 2/fibroleukin prothrombinase contributes to tumor hypercoagulability via IL-2 and IFN-gamma[J]. World J Gastroenterol, 2008, 14(39): 5980-5989.

        [7] Clark DA, Ding JW, Yu G, et al. Fgl2 prothrombinase expression in mouse trophoblast and decidua triggers abortion but may be countered by OX-2[J]. Mol Hum Reprod, 2001, 7(2): 185-194.

        [8] Gao S, Wang M, Ye H, et al. Dual interference with novel genes mfgl2 and mTNFR1 ameliorates murine hepatitis virus type 3-induced fulminant hepatitis in BALB/cJ Mice[J]. Hum Gene Ther, 2009, 21(8): 969-977.

        猜你喜歡
        內(nèi)皮細(xì)胞胰腺炎胰腺
        同時(shí)多層擴(kuò)散成像對胰腺病變的診斷效能
        淺議角膜內(nèi)皮細(xì)胞檢查
        孕期大補(bǔ)當(dāng)心胰腺炎
        雌激素治療保護(hù)去卵巢對血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷的初步機(jī)制
        細(xì)胞微泡miRNA對內(nèi)皮細(xì)胞的調(diào)控
        哪些胰腺“病變”不需要外科治療
        痰瘀與血管內(nèi)皮細(xì)胞的關(guān)系研究
        18例異位胰腺的診斷與治療分析
        急性胰腺炎致精神失常1例
        中西醫(yī)結(jié)合治療急性胰腺炎55例
        天天看片视频免费观看| 国产精品久久一区性色a| 中文字幕一区韩国三级| av网站免费在线不卡| 丝袜美腿视频一区二区| 无人区一码二码三码四码区| 无码国产精品一区二区免费16| 精品丝袜国产在线播放| 成av人大片免费看的网站| 国产精品内射久久一级二| 亚洲国产精品ⅴa在线观看| 国产在线一区观看| 日韩人妻av不卡一区二区三区| 精品福利一区二区三区| 久久久久亚洲av成人网人人软件| 精品人妻系列无码人妻免费视频| 日韩亚洲欧美精品| 亚洲综合色视频在线免费观看| 久久精品国产av一级二级三级| 精品久久久久久无码人妻蜜桃| 日本成本人三级在线观看| 久久香蕉国产精品一区二区三| 国内自拍偷拍亚洲天堂| 白色月光免费观看完整版| 性av一区二区三区免费| 日本高清视频www| 国产日韩久久久精品影院首页| 琪琪av一区二区三区| 激情综合五月| 久久国产精品久久久久久| 日本在线视频网站www色下载| 国产人成视频免费在线观看| 午夜大片在线播放观看| 少妇伦子伦精品无吗| 国产色诱视频在线观看| 蜜桃视频免费在线视频| 青青草视频在线观看色| 妺妺窝人体色www看美女| 又黄又爽的成人免费视频| 色综合久久久久综合999| 亚洲天堂色婷婷一区二区|