岳慧賢 石麗娟 孫培明 （臨沂大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院 山東 臨沂 276000）

一起青年雪山草雞沙門(mén)氏菌病的診治

岳慧賢 石麗娟 孫培明*（臨沂大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院 山東 臨沂 276000）

沙門(mén)氏菌感染可以引起禽類(lèi)各種各樣的急性或慢性疾病，主要分為2種類(lèi)型：第一種是雞白痢沙門(mén)氏菌和雞傷寒沙門(mén)氏菌，第二種是副傷寒沙門(mén)氏菌，其中第一種沙門(mén)氏菌病的危害更嚴(yán)重。雞白痢沙門(mén)氏菌感染引起雞白痢，雞傷寒沙門(mén)氏菌感染引起禽傷寒，兩種沙門(mén)氏菌病在臨床癥狀、流行病學(xué)、病理變化、控制及消滅措施等方面有許多相似之處，但也有一定的差異。雞白痢是危害雛雞的一種主要疾病，多表現(xiàn)為白痢和敗血癥特征，引起雛雞的大批死亡；成年雞不表現(xiàn)急性感染的特征，多呈慢性經(jīng)過(guò)。禽傷寒較常見(jiàn)于育成和成年的雞，在臨床癥狀、病理剖檢變化等方面與雞白痢很難鑒別。該類(lèi)沙門(mén)氏菌病在標(biāo)準(zhǔn)化商品雞場(chǎng)中較少發(fā)生，但在庭院散養(yǎng)雞場(chǎng)中則較多發(fā)生。近些年來(lái)，雞沙門(mén)氏菌病的發(fā)生特點(diǎn)出現(xiàn)一些新的變化，即青年雞的發(fā)病逐漸增多，引起生長(zhǎng)遲緩和后期的生產(chǎn)性能下降，造成嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失，這在草雞養(yǎng)殖中表現(xiàn)的非常明顯。草雞養(yǎng)殖一般采取網(wǎng)上育雛，中雛以后實(shí)行放養(yǎng)的方式，這一養(yǎng)殖方式與青年雞發(fā)生雞沙門(mén)氏菌病有關(guān)。近期，筆者對(duì)山東省臨沂市的一起疑似雞沙門(mén)氏菌病的青年雪山草雞進(jìn)行了診斷，通過(guò)臨床癥狀、病理剖檢變化及實(shí)驗(yàn)室診斷，確診為沙門(mén)氏菌病，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 發(fā)病情況

2014年4月份，山東省臨沂市某雞場(chǎng)的4500余只雪山草雞發(fā)生以雞冠發(fā)白、萎縮為主要特征的疾病，其它表現(xiàn)不明顯。該雞群采用庭院散養(yǎng)方式，在67日齡時(shí)從山東省泰安市某育成雞場(chǎng)引進(jìn)，當(dāng)時(shí)雞群狀況較好，進(jìn)雞10d后，少量雞只出現(xiàn)雞冠發(fā)白的臨床癥狀。雞群發(fā)病時(shí)，曾用阿莫西林飲水，未見(jiàn)明顯效果。截止到就診時(shí)間，雞群病程約30d，沒(méi)有出現(xiàn)明顯死亡，但場(chǎng)主擔(dān)心雞群因外觀而影響其出售價(jià)格而要求診治。

2 臨床癥狀

病雞初期主要表現(xiàn)雞冠發(fā)白，有的肉垂也發(fā)白；隨著病程的延長(zhǎng)，雞冠逐漸萎縮，有的雞冠變小、發(fā)紺，公雞尤為明顯；少數(shù)病雞排黃白色水樣稀糞。雞群采食、飲水?dāng)?shù)量沒(méi)有明顯變化，但病雞精神狀態(tài)受到影響，隨著病程的延長(zhǎng)，發(fā)病雞只逐漸增多。

3 剖檢變化

剖檢病雞2只，公雞和母雞各1只，母雞的病變更明顯。公雞的剖檢變化主要表現(xiàn)在睪丸萎縮，肌胃黏膜和腸道有輕微出血，其它無(wú)明顯變化。母雞的剖檢變化主要表現(xiàn)在卵巢萎縮(無(wú)明顯發(fā)育)，腹膜炎癥(輸卵管黃色滲出物，見(jiàn)圖1)，腸道有出血(比公雞嚴(yán)重)，腸系膜和腸道外膜有明顯的黃色滲出物，其它無(wú)明顯變化。心臟、肝臟、脾臟、腎臟、肺臟等臟器沒(méi)有出現(xiàn)明顯的病變。

4 PCR診斷

以無(wú)菌操作采集病雞的卵巢、睪丸和肝臟(公雞)作為病料，選用報(bào)道的沙門(mén)氏菌通用引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增，上游引物為5-CTTTGGTCGTAAAATAAGGCG-3，下游引物為5-TGCCCAAAGCAGAGAGATTC-3，由上海生工生物技術(shù)公司合成。采用25μl反應(yīng)體系，其中：10×buffer(含Mg2+)2.5μl、2.5 mmol/l 的dNTP 2μl、上游引物1μl、下游引物1μl、Taq DNA聚合酶0.2μl、模板(試劑盒提取的病料組織基因組)3μl，最后補(bǔ)滅菌水至25μl。反應(yīng)條件：95℃預(yù)變性5min，94℃ 30s，55℃ 30s，72℃ 15s，35個(gè)循環(huán)后，72℃延伸10min。PCR產(chǎn)物進(jìn)行1%瓊脂糖凝膠電泳，從病雞的卵巢、睪丸和肝臟(公雞)組織中均擴(kuò)增出預(yù)期大小為260bp目的片段(見(jiàn)圖2)，確定該雞群感染沙門(mén)氏菌。1 2 3 M

圖1 卵巢，輸卵管的剖檢圖

圖2 睪丸、肝臟、卵巢組織的PCR檢測(cè)圖M.DL-2000 Marker；1.睪丸；2.肝臟；3.卵巢。

5 治療

全群草雞用左氟沙星0.01%飲水，連用5d；發(fā)病草雞用阿米卡星注射液按10mg/kg體重肌肉注射，1次/d，連用3d；同時(shí)添加電解多維飲水以增強(qiáng)草雞抵抗力。用藥3d后病情逐漸減輕，大群狀態(tài)明顯好轉(zhuǎn),病情得到控制。

6 診治體會(huì)

（1）PCR法具有耗時(shí)短、成本低、診斷準(zhǔn)確的特點(diǎn)，在雞沙門(mén)氏菌病快速診斷和早期治療方面具有一定的意義。但此類(lèi)方法需要特殊的儀器和較高的技術(shù)水平，在實(shí)踐中影響了其應(yīng)用的范圍。（2）本次PCR結(jié)果顯示，病雞的卵巢、睪丸和肝臟組織中均存在沙門(mén)氏菌，其中卵巢的檢測(cè)結(jié)果最理想。建議用PCR檢測(cè)雞沙門(mén)氏菌病時(shí)，從肝臟、心臟、睪丸、卵巢和腦組織等選用2～3個(gè)臟器病料用于檢測(cè)，其中卵巢作為首選檢測(cè)病料，從而提高檢測(cè)的準(zhǔn)確性。（3）本次PCR選用的引物為沙門(mén)氏菌通用引物，所有單純通過(guò)這個(gè)實(shí)驗(yàn)只能確定雞群感染沙門(mén)氏菌病，進(jìn)一步結(jié)合臨床癥狀、流行病學(xué)、剖檢變化等，綜合診斷為第一種沙門(mén)氏菌病，即雞白痢或禽傷寒。雞白痢與禽傷寒非常相似，病原同屬于腸桿菌科一個(gè)單獨(dú)的種，臨床癥狀、流行病學(xué)、病理變化、控制及消滅措施等都比較相似，所以本研究未進(jìn)一步對(duì)雞白痢沙門(mén)氏菌或雞傷寒沙門(mén)氏菌進(jìn)行鑒別診斷。（4）雛雞感染沙門(mén)氏菌，一般肝臟的病變最明顯，表現(xiàn)肝臟表面出現(xiàn)白色的壞死灶。但是青年雞感染沙門(mén)氏菌，肝臟等臟器的病變不明顯，但是生殖器官發(fā)生的萎縮和以黃色、黃白色滲出物為特征的腹膜炎具有重要診斷意義。如果蛋雞在青年期發(fā)生沙門(mén)氏菌病，由于生殖器官的病變，導(dǎo)致產(chǎn)蛋期表現(xiàn)不產(chǎn)蛋和達(dá)不到產(chǎn)蛋高峰；如果產(chǎn)蛋雞感染沙門(mén)氏菌，由于卵黃性腹膜炎的病變，導(dǎo)致產(chǎn)蛋量下降和蛋殼質(zhì)量變差。（5）對(duì)于草雞沙門(mén)氏菌病的治療，常用的廣譜和抗革蘭氏陰性菌抗菌藥都有作用，該病例選用廣譜抗菌藥左氟沙星和革蘭氏陰性殺菌藥阿米卡星具有很好的治療效果。阿米卡星需要注射給藥，該養(yǎng)雞場(chǎng)未曾使用過(guò)，大多數(shù)養(yǎng)雞場(chǎng)都較少使用，注射給藥雖然麻煩，但能保證治療效果。由于沙門(mén)氏桿菌耐藥性的問(wèn)題，有條件的可以通過(guò)藥敏試驗(yàn)篩選高敏藥物，避免盲目用藥。（6）發(fā)病的雞場(chǎng)，建議實(shí)行全進(jìn)全出的飼養(yǎng)方式，加強(qiáng)環(huán)境消毒，消滅可能存在的病原。對(duì)于種雞場(chǎng)尤為重要，因?yàn)樯抽T(mén)氏菌病可以垂直傳播，病雞治愈后可以長(zhǎng)期存在于卵巢中，由于種蛋帶菌而傳給后代，造成早期感染。成年雞一般呈隱性感染或帶菌者，糞便中持續(xù)排出病原菌危害雞群。（7）雞沙門(mén)氏菌病的發(fā)生，多與養(yǎng)殖環(huán)境差有關(guān)，還與飼料飲水不潔有關(guān)。青年草雞多采用散養(yǎng)方式，隨著養(yǎng)殖次數(shù)的增多，環(huán)境逐漸變差，這樣易發(fā)生沙門(mén)氏菌病。因此要預(yù)防本病，必須加強(qiáng)雞場(chǎng)的飼養(yǎng)管理和環(huán)境衛(wèi)生，給予營(yíng)養(yǎng)均衡的飼料，保持飼料和飲水的清潔衛(wèi)生，減少發(fā)病各種誘因，同時(shí)要注意定期的進(jìn)行藥物預(yù)防。

S858.31

B

1007-1733(2014)10-0037-02

2014–07–22）

項(xiàng)目資助：國(guó)家級(jí)大學(xué)生創(chuàng)新創(chuàng)業(yè)訓(xùn)練計(jì)劃項(xiàng)目(201310452066)

*通訊作者