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        青海產(chǎn)小葉黑柴胡總皂苷提取工藝的優(yōu)選

        2014-07-05 11:33:27張丹陶燕鐸顏學(xué)偉曹緯國王剛
        湖北農(nóng)業(yè)科學(xué) 2014年5期
        關(guān)鍵詞:柴胡皂苷總皂苷小葉

        張丹 陶燕鐸 顏學(xué)偉 曹緯國 王剛

        摘要:采用單因素試驗(yàn)與正交試驗(yàn)相結(jié)合優(yōu)化小葉黑柴胡(Bupleurum smithii Wolff var. parvifolium Shan et Y. Li)總皂苷的提取工藝,考察了提取溫度、提取溶劑pH、乙醇濃度、料液比(g/mL,下同)、提取次數(shù)和提取時(shí)間對(duì)小葉黑柴胡總皂苷得率的影響。結(jié)果表明,小葉黑柴胡總皂苷的較優(yōu)提取工藝條件為料液比1∶10,乙醇濃度80%,提取次數(shù)3次,提取時(shí)間1.0 h,提取溫度80 ℃,提取溶劑pH為9。該工藝條件下,小葉黑柴胡總皂苷的得率為2.78%。驗(yàn)證試驗(yàn)表明該工藝穩(wěn)定可行,可為小葉黑柴胡的深入研究提供參考。

        關(guān)鍵詞:小葉黑柴胡(Bupleurum smithii Wolff var. parvifolium Shan et Y. Li);總皂苷;提取工藝;正交試驗(yàn)

        中圖分類號(hào):R284.2 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A 文章編號(hào):0439-8114(2014)05-1139-03

        柴胡為常用中藥之一,中國藥典[1]規(guī)定柴胡藥材基源為柴胡(Bupleurum chinense DC.)和狹葉柴胡(Bupleurum scorzonerifdium Willd.),近年來柴胡藥材需求量較大,資源緊張,導(dǎo)致柴胡藥材價(jià)格不斷攀升,急需擴(kuò)大藥用資源。小葉黑柴胡(Bupleurum smithii Wolff var. parvifolium Shan et Y. Li)主要分布于青海、寧夏、甘肅、山西和內(nèi)蒙古等地,資源量較大,為青海、寧夏等地商品柴胡的主流品種[2]。其皂苷類成分與柴胡相似[3],重慶醫(yī)科大學(xué)中藥化學(xué)成分研究組前期研究表明小葉黑柴胡中柴胡皂苷a的含量可達(dá)到0.5%以上[4],遠(yuǎn)高于藥典柴胡藥材的標(biāo)準(zhǔn),具有較大的開發(fā)利用價(jià)值。

        本研究擬建立小葉黑柴胡中柴胡總皂苷的較優(yōu)提取工藝,為純化制備高純度的小葉黑柴胡總皂苷奠定基礎(chǔ),提高小葉黑柴胡的生產(chǎn)附加值,以達(dá)到對(duì)高原特色生物資源深度開發(fā)利用的目的。

        1 材料與方法

        1.1 材料

        1.1.1 原料與試劑 小葉黑柴胡(購于青海西寧,經(jīng)中國科學(xué)院西北高原生物研究所梅麗娟副研究員鑒定為小葉黑柴胡(Bupleurum smithii Wolff var. parvifolium Shan et Y. Li)。

        柴胡皂苷a標(biāo)準(zhǔn)品(中國藥品生物制品鑒定所提供,批號(hào):110777-200507);香蘭素、甲醇、95%乙醇、冰醋酸、正丁醇、高氯酸等均為分析純。

        1.1.2 儀器與設(shè)備 UV-1800型分光光度計(jì)(上海箐華科技儀器有限公司);數(shù)顯三用恒溫水浴箱(江蘇省金壇市榮華儀器制造有限公司);旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(上海亞榮生化儀器廠);F-80型高速粉碎機(jī)(金壇市金城國勝實(shí)驗(yàn)儀器廠);AL204型電子分析天平(瑞士梅特勒-托利多)。

        1.2 方法[5-8]

        1.2.1 標(biāo)準(zhǔn)品溶液的制備 精密稱取柴胡皂苷a標(biāo)準(zhǔn)品9.6 mg,置10 mL容量瓶中,加甲醇溶解并定容至刻度,搖勻即得。

        1.2.2 供試品溶液的制備 精密稱取小葉黑柴胡粗粉5.0 g,置具塞三角瓶中,加入80%乙醇溶液100 mL,稱定質(zhì)量,浸泡過夜后超聲提取60 min,冷卻至室溫后稱重,用80%乙醇溶液補(bǔ)足減失的質(zhì)量,搖勻后過濾,精密量取續(xù)濾液10 mL濃縮至干后,加甲醇溶解、轉(zhuǎn)移至10 mL容量瓶并定容,作為供試品溶液。

        1.2.3 最大吸收波長的測(cè)定 取柴胡皂苷a標(biāo)準(zhǔn)品溶液和供試品溶液各0.2 mL,分別置10 mL具塞比色管中,揮發(fā)干溶劑后,各加入0.2 mL 5%香草醛-冰醋酸溶液和0.8 mL高氯酸,搖勻,60 ℃恒溫水浴加熱20 min,取出后置冰水浴中冷卻15 min,再加入5 mL冰醋酸,搖勻,在200~800 nm波長范圍內(nèi)掃描。

        1.2.4 線性關(guān)系的考察 分別精密量取柴胡皂苷a標(biāo)準(zhǔn)品溶液0、0.1、0.2、0.4、0.6、0.8 mL,置10 mL具塞比色管中,按照“1.2.3”操作顯色,以第1管做空白對(duì)照,于“1.2.3”確定的最大吸收波長下分別測(cè)定其吸光度,計(jì)算線性回歸方程。

        1.2.5 小葉黑柴胡總皂苷含量的測(cè)定 精密量取供試品溶液0.5 mL置于10 mL具塞比色管中,按照“1.2.3”方法顯色后,于“1.2.3”確定的最大吸收波長下測(cè)定其吸光度,并依據(jù)線性回歸方程計(jì)算樣品中總皂苷的含量。

        1.2.6 單因素試驗(yàn)

        1)考察提取溫度對(duì)小葉黑柴胡總皂苷得率的影響。稱取小葉黑柴胡粗粉3份,每份約5.0 g,置圓底燒瓶中各加入40 mL 80%的乙醇溶液,分別在70、80、90 ℃ [9]下各回流提取3次,每次1.0 h。合并3次提取液,濃縮至干,加甲醇溶解、轉(zhuǎn)移并定容至100 mL容量瓶中,過濾,取續(xù)濾液按照“1.2.5”方法測(cè)定并計(jì)算樣品中總皂苷的含量。

        2)考察提取溶劑pH對(duì)小葉黑柴胡總皂苷得率的影響。稱取小葉黑柴胡粗粉3份,每份約5.0g,置圓底燒瓶中各加入40 mL 80%的乙醇溶液,分別用濃度為30%的氨水調(diào)整其pH為7.0、8.0、9.0,于80 ℃水浴下各回流提取3次,每次1.0 h。合并3次提取液,濃縮至干,加甲醇溶解、轉(zhuǎn)移并定容至100 mL容量瓶中,過濾,取續(xù)濾液按照“1.2.5”方法測(cè)定并計(jì)算樣品中總皂苷的含量。

        1.2.7 正交試驗(yàn) 選取影響小葉黑柴胡總皂苷提取效果的乙醇濃度(A)、料液比(B)(g/mL,下同)、提取次數(shù)(C)及提取時(shí)間(D)作為考察因素,提取溫度與提取溶劑pH的設(shè)定依據(jù)“1.2.6”試驗(yàn)結(jié)果,以小葉黑柴胡總皂苷的得率為考察指標(biāo),選用L9(34)正交試驗(yàn)考察各因素對(duì)小葉黑柴胡總皂苷提取效果的影響。正交試驗(yàn)因素與水平見表1。

        1.2.8 驗(yàn)證試驗(yàn) 分別精密稱取3份小葉黑柴胡藥材,每份20.0 g,依據(jù)單因素試驗(yàn)與正交試驗(yàn)結(jié)果優(yōu)選的工藝條件提取小葉黑柴胡總皂苷,測(cè)定并計(jì)算其含量。

        2 結(jié)果與分析

        2.1 最大吸收波長的確定

        依據(jù)“1.2.3”操作,結(jié)果標(biāo)準(zhǔn)品和供試品溶液顯色后均在612 nm處有較大吸收,因此選擇612 nm為測(cè)定波長。

        2.2 線性關(guān)系的考察

        依據(jù)“1.2.4”測(cè)定結(jié)果,以吸光度值A(chǔ)為縱坐標(biāo),以標(biāo)準(zhǔn)品溶液濃度C為橫坐標(biāo)計(jì)算,求得回歸方程:A=2.195 C+0.129,r=0.999 2,線性范圍為0.096~0.768 mg/mL。

        2.3 小葉黑柴胡總皂苷含量測(cè)定結(jié)果

        依據(jù)“1.2.5”操作,結(jié)果測(cè)得小葉黑柴胡藥材中總皂苷的含量為2.81%。

        2.4 單因素試驗(yàn)結(jié)果與分析

        2.4.1 提取溫度對(duì)小葉黑柴胡總皂苷得率的影響 按照“1.2.6”項(xiàng)下提取溫度對(duì)柴胡總皂苷提取的影響試驗(yàn)操作并測(cè)定,70、80、90 ℃ 3個(gè)提取溫度條件下,小葉黑柴胡總皂苷的得率分別為1.70%、2.24%和1.56%,由此可見提取溫度對(duì)小葉黑柴胡總皂苷的得率影響較大,其中80 ℃為較優(yōu)提取溫度。

        2.4.2 提取溶劑pH對(duì)小葉黑柴胡總皂苷得率的影響 試驗(yàn)結(jié)果表明,在提取溶劑pH分別為8、9、10 的條件下,小葉黑柴胡總皂苷的得率分別為2.44%、2.48%和2.39%,由此可見提取溶劑pH也是影響小葉黑柴胡總皂苷提取效果的因素之一,其中提取溶劑pH為9時(shí)提取效果較好。

        2.3 正交試驗(yàn)結(jié)果與分析

        按照“1.2.7”正交試驗(yàn)設(shè)計(jì),以柴胡總皂苷的得率為考察指標(biāo),優(yōu)選小葉黑柴胡總皂苷提取工藝條件,其結(jié)果見表2,方差分析結(jié)果見表3。

        由表2極差分析結(jié)果可知,各因素的主次順序?yàn)镃、B、D、A,表明提取次數(shù)對(duì)小葉黑柴胡總皂苷提取效果的影響最大。小葉黑柴胡總皂苷提取的較優(yōu)工藝條件組合為A3B3C3D1,結(jié)合單因素試驗(yàn)結(jié)果,得小葉黑柴胡總皂苷較優(yōu)提取工藝為:料液比1∶10,乙醇濃度80%,提取次數(shù)3次,提取時(shí)間1.0 h,提取溫度80 ℃,提取溶劑pH為9。由表3方差分析結(jié)果可知,因素C作用顯著,其他因素作用不顯著,與極差分析結(jié)果相同。

        2.4 驗(yàn)證試驗(yàn)結(jié)果

        依據(jù)“1.2.8”項(xiàng)下操作,按照“1.2.5”項(xiàng)下測(cè)定,結(jié)果測(cè)得小葉黑柴胡總皂苷的得率分別為2.75%、2.81%和2.78%,平均為2.78%,表明該工藝穩(wěn)定可行。

        3 小結(jié)與討論

        由于影響柴胡皂苷類成分提取的因素較多,本試驗(yàn)采取單因素試驗(yàn)與正交試驗(yàn)相結(jié)合考察了提取溫度、提取溶劑pH、乙醇濃度、料液比、提取次數(shù)和提取時(shí)間等因素對(duì)小葉黑柴胡總皂苷得率的影響,確定了小葉黑柴胡總皂苷的較優(yōu)提取工藝為料液比1∶10,乙醇濃度80%,提取次數(shù)3次,提取時(shí)間1.0 h,提取溫度80 ℃,提取溶劑pH為9。對(duì)該工藝條件進(jìn)行了驗(yàn)證試驗(yàn),小葉黑柴胡總皂苷的得率為2.78%,表明該工藝穩(wěn)定可行,可為小葉黑柴胡的進(jìn)一步開發(fā)利用提供依據(jù)。分析正交試驗(yàn)中各因素對(duì)小葉黑柴胡總皂苷提取的影響可知,提取次數(shù)對(duì)其影響最大,其次單因素考察時(shí)發(fā)現(xiàn)提取溫度對(duì)其影響較大,與正交試驗(yàn)中隨提取時(shí)間增長小葉黑柴胡總皂苷的得率反而下降的結(jié)果相吻合,可能與柴胡皂苷類成分在高溫條件下不穩(wěn)定有關(guān),因此在生產(chǎn)過程中需引起重視。與已知其他研究結(jié)果[9-11]相比較,青海產(chǎn)小葉黑柴胡中總皂苷的含量明顯高于其他地區(qū)柴胡中總皂苷的含量,可能與青藏高原特殊的生態(tài)環(huán)境有關(guān),高原生態(tài)條件苛刻,藥用植物生長緩慢,相關(guān)次生代謝產(chǎn)物含量較高。前期研究也表明小葉黑柴胡與柴胡及狹葉柴胡中皂苷類成分相似,同時(shí)小葉黑柴胡為西北地區(qū)商品柴胡的主流品種之一,資源量豐富,具有較大的開發(fā)價(jià)值,可深入研究。

        參考文獻(xiàn):

        [1] 國家藥典委員會(huì).中國藥典(2010版),Ⅰ部[S].北京:中國醫(yī)藥科技出版社,2010.263.

        [2] 寧夏回族自治區(qū)衛(wèi)生廳.寧夏中藥材標(biāo)準(zhǔn)[M].銀川:寧夏人民出版社,1993.171.

        [3] 王英華,刑世瑞,羽野芳生,等.小葉黑柴胡中皂苷類成分的研

        究[J].中國中藥雜志,1998,23(2):96-98.

        [4] 曹緯國,陶燕鐸,張有金,等.青海產(chǎn)小葉黑柴胡中皂苷類成分的含量分析[J].中國現(xiàn)代應(yīng)用藥學(xué),2012,29(4):323-326.

        [5] 趙 磊,劉本亮,吳福祥,等.柴胡提取工藝的研究[J].中藥材,2004,27(10):764-766.

        [6] 肖功勝,楊 云,孫維英,等.柴胡有效成分提取工藝的研究[J].時(shí)珍國醫(yī)國藥,2008,19(8):1829-1830.

        [7] 鐘巧妮,趙 麗,雷玉霞,等.柴胡總皂苷提取工藝的優(yōu)化[J].醫(yī)藥導(dǎo)報(bào),2007,26(4):408-410.

        [8] 劉 偉,董誠明,范 婷,等.正交試驗(yàn)法優(yōu)選柴胡中柴胡皂苷提取工藝[J].中國醫(yī)院藥學(xué)雜志,2008,28(16):1350-1352.

        [9] 王 鵬,賈凌云,孫啟時(shí),等.不同產(chǎn)地柴胡中柴胡皂苷的含量測(cè)定[J].沈陽藥科大學(xué)學(xué)報(bào),2004,21(3):193-195.

        [10] 王 鵬,王玉生,劉 斌.不同產(chǎn)地柴胡中總皂苷及柴胡皂苷a含量測(cè)定[J].中國藥物與臨床,2008,8(3):228-229.

        [11] 李媛媛,秦雪梅,王玉慶,等.柱前衍生化法評(píng)價(jià)不同品種和產(chǎn)地柴胡藥材和飲片的質(zhì)量[J].中國中藥雜志,2008,33(3):237-240.

        1.2.8 驗(yàn)證試驗(yàn) 分別精密稱取3份小葉黑柴胡藥材,每份20.0 g,依據(jù)單因素試驗(yàn)與正交試驗(yàn)結(jié)果優(yōu)選的工藝條件提取小葉黑柴胡總皂苷,測(cè)定并計(jì)算其含量。

        2 結(jié)果與分析

        2.1 最大吸收波長的確定

        依據(jù)“1.2.3”操作,結(jié)果標(biāo)準(zhǔn)品和供試品溶液顯色后均在612 nm處有較大吸收,因此選擇612 nm為測(cè)定波長。

        2.2 線性關(guān)系的考察

        依據(jù)“1.2.4”測(cè)定結(jié)果,以吸光度值A(chǔ)為縱坐標(biāo),以標(biāo)準(zhǔn)品溶液濃度C為橫坐標(biāo)計(jì)算,求得回歸方程:A=2.195 C+0.129,r=0.999 2,線性范圍為0.096~0.768 mg/mL。

        2.3 小葉黑柴胡總皂苷含量測(cè)定結(jié)果

        依據(jù)“1.2.5”操作,結(jié)果測(cè)得小葉黑柴胡藥材中總皂苷的含量為2.81%。

        2.4 單因素試驗(yàn)結(jié)果與分析

        2.4.1 提取溫度對(duì)小葉黑柴胡總皂苷得率的影響 按照“1.2.6”項(xiàng)下提取溫度對(duì)柴胡總皂苷提取的影響試驗(yàn)操作并測(cè)定,70、80、90 ℃ 3個(gè)提取溫度條件下,小葉黑柴胡總皂苷的得率分別為1.70%、2.24%和1.56%,由此可見提取溫度對(duì)小葉黑柴胡總皂苷的得率影響較大,其中80 ℃為較優(yōu)提取溫度。

        2.4.2 提取溶劑pH對(duì)小葉黑柴胡總皂苷得率的影響 試驗(yàn)結(jié)果表明,在提取溶劑pH分別為8、9、10 的條件下,小葉黑柴胡總皂苷的得率分別為2.44%、2.48%和2.39%,由此可見提取溶劑pH也是影響小葉黑柴胡總皂苷提取效果的因素之一,其中提取溶劑pH為9時(shí)提取效果較好。

        2.3 正交試驗(yàn)結(jié)果與分析

        按照“1.2.7”正交試驗(yàn)設(shè)計(jì),以柴胡總皂苷的得率為考察指標(biāo),優(yōu)選小葉黑柴胡總皂苷提取工藝條件,其結(jié)果見表2,方差分析結(jié)果見表3。

        由表2極差分析結(jié)果可知,各因素的主次順序?yàn)镃、B、D、A,表明提取次數(shù)對(duì)小葉黑柴胡總皂苷提取效果的影響最大。小葉黑柴胡總皂苷提取的較優(yōu)工藝條件組合為A3B3C3D1,結(jié)合單因素試驗(yàn)結(jié)果,得小葉黑柴胡總皂苷較優(yōu)提取工藝為:料液比1∶10,乙醇濃度80%,提取次數(shù)3次,提取時(shí)間1.0 h,提取溫度80 ℃,提取溶劑pH為9。由表3方差分析結(jié)果可知,因素C作用顯著,其他因素作用不顯著,與極差分析結(jié)果相同。

        2.4 驗(yàn)證試驗(yàn)結(jié)果

        依據(jù)“1.2.8”項(xiàng)下操作,按照“1.2.5”項(xiàng)下測(cè)定,結(jié)果測(cè)得小葉黑柴胡總皂苷的得率分別為2.75%、2.81%和2.78%,平均為2.78%,表明該工藝穩(wěn)定可行。

        3 小結(jié)與討論

        由于影響柴胡皂苷類成分提取的因素較多,本試驗(yàn)采取單因素試驗(yàn)與正交試驗(yàn)相結(jié)合考察了提取溫度、提取溶劑pH、乙醇濃度、料液比、提取次數(shù)和提取時(shí)間等因素對(duì)小葉黑柴胡總皂苷得率的影響,確定了小葉黑柴胡總皂苷的較優(yōu)提取工藝為料液比1∶10,乙醇濃度80%,提取次數(shù)3次,提取時(shí)間1.0 h,提取溫度80 ℃,提取溶劑pH為9。對(duì)該工藝條件進(jìn)行了驗(yàn)證試驗(yàn),小葉黑柴胡總皂苷的得率為2.78%,表明該工藝穩(wěn)定可行,可為小葉黑柴胡的進(jìn)一步開發(fā)利用提供依據(jù)。分析正交試驗(yàn)中各因素對(duì)小葉黑柴胡總皂苷提取的影響可知,提取次數(shù)對(duì)其影響最大,其次單因素考察時(shí)發(fā)現(xiàn)提取溫度對(duì)其影響較大,與正交試驗(yàn)中隨提取時(shí)間增長小葉黑柴胡總皂苷的得率反而下降的結(jié)果相吻合,可能與柴胡皂苷類成分在高溫條件下不穩(wěn)定有關(guān),因此在生產(chǎn)過程中需引起重視。與已知其他研究結(jié)果[9-11]相比較,青海產(chǎn)小葉黑柴胡中總皂苷的含量明顯高于其他地區(qū)柴胡中總皂苷的含量,可能與青藏高原特殊的生態(tài)環(huán)境有關(guān),高原生態(tài)條件苛刻,藥用植物生長緩慢,相關(guān)次生代謝產(chǎn)物含量較高。前期研究也表明小葉黑柴胡與柴胡及狹葉柴胡中皂苷類成分相似,同時(shí)小葉黑柴胡為西北地區(qū)商品柴胡的主流品種之一,資源量豐富,具有較大的開發(fā)價(jià)值,可深入研究。

        參考文獻(xiàn):

        [1] 國家藥典委員會(huì).中國藥典(2010版),Ⅰ部[S].北京:中國醫(yī)藥科技出版社,2010.263.

        [2] 寧夏回族自治區(qū)衛(wèi)生廳.寧夏中藥材標(biāo)準(zhǔn)[M].銀川:寧夏人民出版社,1993.171.

        [3] 王英華,刑世瑞,羽野芳生,等.小葉黑柴胡中皂苷類成分的研

        究[J].中國中藥雜志,1998,23(2):96-98.

        [4] 曹緯國,陶燕鐸,張有金,等.青海產(chǎn)小葉黑柴胡中皂苷類成分的含量分析[J].中國現(xiàn)代應(yīng)用藥學(xué),2012,29(4):323-326.

        [5] 趙 磊,劉本亮,吳福祥,等.柴胡提取工藝的研究[J].中藥材,2004,27(10):764-766.

        [6] 肖功勝,楊 云,孫維英,等.柴胡有效成分提取工藝的研究[J].時(shí)珍國醫(yī)國藥,2008,19(8):1829-1830.

        [7] 鐘巧妮,趙 麗,雷玉霞,等.柴胡總皂苷提取工藝的優(yōu)化[J].醫(yī)藥導(dǎo)報(bào),2007,26(4):408-410.

        [8] 劉 偉,董誠明,范 婷,等.正交試驗(yàn)法優(yōu)選柴胡中柴胡皂苷提取工藝[J].中國醫(yī)院藥學(xué)雜志,2008,28(16):1350-1352.

        [9] 王 鵬,賈凌云,孫啟時(shí),等.不同產(chǎn)地柴胡中柴胡皂苷的含量測(cè)定[J].沈陽藥科大學(xué)學(xué)報(bào),2004,21(3):193-195.

        [10] 王 鵬,王玉生,劉 斌.不同產(chǎn)地柴胡中總皂苷及柴胡皂苷a含量測(cè)定[J].中國藥物與臨床,2008,8(3):228-229.

        [11] 李媛媛,秦雪梅,王玉慶,等.柱前衍生化法評(píng)價(jià)不同品種和產(chǎn)地柴胡藥材和飲片的質(zhì)量[J].中國中藥雜志,2008,33(3):237-240.

        1.2.8 驗(yàn)證試驗(yàn) 分別精密稱取3份小葉黑柴胡藥材,每份20.0 g,依據(jù)單因素試驗(yàn)與正交試驗(yàn)結(jié)果優(yōu)選的工藝條件提取小葉黑柴胡總皂苷,測(cè)定并計(jì)算其含量。

        2 結(jié)果與分析

        2.1 最大吸收波長的確定

        依據(jù)“1.2.3”操作,結(jié)果標(biāo)準(zhǔn)品和供試品溶液顯色后均在612 nm處有較大吸收,因此選擇612 nm為測(cè)定波長。

        2.2 線性關(guān)系的考察

        依據(jù)“1.2.4”測(cè)定結(jié)果,以吸光度值A(chǔ)為縱坐標(biāo),以標(biāo)準(zhǔn)品溶液濃度C為橫坐標(biāo)計(jì)算,求得回歸方程:A=2.195 C+0.129,r=0.999 2,線性范圍為0.096~0.768 mg/mL。

        2.3 小葉黑柴胡總皂苷含量測(cè)定結(jié)果

        依據(jù)“1.2.5”操作,結(jié)果測(cè)得小葉黑柴胡藥材中總皂苷的含量為2.81%。

        2.4 單因素試驗(yàn)結(jié)果與分析

        2.4.1 提取溫度對(duì)小葉黑柴胡總皂苷得率的影響 按照“1.2.6”項(xiàng)下提取溫度對(duì)柴胡總皂苷提取的影響試驗(yàn)操作并測(cè)定,70、80、90 ℃ 3個(gè)提取溫度條件下,小葉黑柴胡總皂苷的得率分別為1.70%、2.24%和1.56%,由此可見提取溫度對(duì)小葉黑柴胡總皂苷的得率影響較大,其中80 ℃為較優(yōu)提取溫度。

        2.4.2 提取溶劑pH對(duì)小葉黑柴胡總皂苷得率的影響 試驗(yàn)結(jié)果表明,在提取溶劑pH分別為8、9、10 的條件下,小葉黑柴胡總皂苷的得率分別為2.44%、2.48%和2.39%,由此可見提取溶劑pH也是影響小葉黑柴胡總皂苷提取效果的因素之一,其中提取溶劑pH為9時(shí)提取效果較好。

        2.3 正交試驗(yàn)結(jié)果與分析

        按照“1.2.7”正交試驗(yàn)設(shè)計(jì),以柴胡總皂苷的得率為考察指標(biāo),優(yōu)選小葉黑柴胡總皂苷提取工藝條件,其結(jié)果見表2,方差分析結(jié)果見表3。

        由表2極差分析結(jié)果可知,各因素的主次順序?yàn)镃、B、D、A,表明提取次數(shù)對(duì)小葉黑柴胡總皂苷提取效果的影響最大。小葉黑柴胡總皂苷提取的較優(yōu)工藝條件組合為A3B3C3D1,結(jié)合單因素試驗(yàn)結(jié)果,得小葉黑柴胡總皂苷較優(yōu)提取工藝為:料液比1∶10,乙醇濃度80%,提取次數(shù)3次,提取時(shí)間1.0 h,提取溫度80 ℃,提取溶劑pH為9。由表3方差分析結(jié)果可知,因素C作用顯著,其他因素作用不顯著,與極差分析結(jié)果相同。

        2.4 驗(yàn)證試驗(yàn)結(jié)果

        依據(jù)“1.2.8”項(xiàng)下操作,按照“1.2.5”項(xiàng)下測(cè)定,結(jié)果測(cè)得小葉黑柴胡總皂苷的得率分別為2.75%、2.81%和2.78%,平均為2.78%,表明該工藝穩(wěn)定可行。

        3 小結(jié)與討論

        由于影響柴胡皂苷類成分提取的因素較多,本試驗(yàn)采取單因素試驗(yàn)與正交試驗(yàn)相結(jié)合考察了提取溫度、提取溶劑pH、乙醇濃度、料液比、提取次數(shù)和提取時(shí)間等因素對(duì)小葉黑柴胡總皂苷得率的影響,確定了小葉黑柴胡總皂苷的較優(yōu)提取工藝為料液比1∶10,乙醇濃度80%,提取次數(shù)3次,提取時(shí)間1.0 h,提取溫度80 ℃,提取溶劑pH為9。對(duì)該工藝條件進(jìn)行了驗(yàn)證試驗(yàn),小葉黑柴胡總皂苷的得率為2.78%,表明該工藝穩(wěn)定可行,可為小葉黑柴胡的進(jìn)一步開發(fā)利用提供依據(jù)。分析正交試驗(yàn)中各因素對(duì)小葉黑柴胡總皂苷提取的影響可知,提取次數(shù)對(duì)其影響最大,其次單因素考察時(shí)發(fā)現(xiàn)提取溫度對(duì)其影響較大,與正交試驗(yàn)中隨提取時(shí)間增長小葉黑柴胡總皂苷的得率反而下降的結(jié)果相吻合,可能與柴胡皂苷類成分在高溫條件下不穩(wěn)定有關(guān),因此在生產(chǎn)過程中需引起重視。與已知其他研究結(jié)果[9-11]相比較,青海產(chǎn)小葉黑柴胡中總皂苷的含量明顯高于其他地區(qū)柴胡中總皂苷的含量,可能與青藏高原特殊的生態(tài)環(huán)境有關(guān),高原生態(tài)條件苛刻,藥用植物生長緩慢,相關(guān)次生代謝產(chǎn)物含量較高。前期研究也表明小葉黑柴胡與柴胡及狹葉柴胡中皂苷類成分相似,同時(shí)小葉黑柴胡為西北地區(qū)商品柴胡的主流品種之一,資源量豐富,具有較大的開發(fā)價(jià)值,可深入研究。

        參考文獻(xiàn):

        [1] 國家藥典委員會(huì).中國藥典(2010版),Ⅰ部[S].北京:中國醫(yī)藥科技出版社,2010.263.

        [2] 寧夏回族自治區(qū)衛(wèi)生廳.寧夏中藥材標(biāo)準(zhǔn)[M].銀川:寧夏人民出版社,1993.171.

        [3] 王英華,刑世瑞,羽野芳生,等.小葉黑柴胡中皂苷類成分的研

        究[J].中國中藥雜志,1998,23(2):96-98.

        [4] 曹緯國,陶燕鐸,張有金,等.青海產(chǎn)小葉黑柴胡中皂苷類成分的含量分析[J].中國現(xiàn)代應(yīng)用藥學(xué),2012,29(4):323-326.

        [5] 趙 磊,劉本亮,吳福祥,等.柴胡提取工藝的研究[J].中藥材,2004,27(10):764-766.

        [6] 肖功勝,楊 云,孫維英,等.柴胡有效成分提取工藝的研究[J].時(shí)珍國醫(yī)國藥,2008,19(8):1829-1830.

        [7] 鐘巧妮,趙 麗,雷玉霞,等.柴胡總皂苷提取工藝的優(yōu)化[J].醫(yī)藥導(dǎo)報(bào),2007,26(4):408-410.

        [8] 劉 偉,董誠明,范 婷,等.正交試驗(yàn)法優(yōu)選柴胡中柴胡皂苷提取工藝[J].中國醫(yī)院藥學(xué)雜志,2008,28(16):1350-1352.

        [9] 王 鵬,賈凌云,孫啟時(shí),等.不同產(chǎn)地柴胡中柴胡皂苷的含量測(cè)定[J].沈陽藥科大學(xué)學(xué)報(bào),2004,21(3):193-195.

        [10] 王 鵬,王玉生,劉 斌.不同產(chǎn)地柴胡中總皂苷及柴胡皂苷a含量測(cè)定[J].中國藥物與臨床,2008,8(3):228-229.

        [11] 李媛媛,秦雪梅,王玉慶,等.柱前衍生化法評(píng)價(jià)不同品種和產(chǎn)地柴胡藥材和飲片的質(zhì)量[J].中國中藥雜志,2008,33(3):237-240.

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