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        核桃不同品種(系)對(duì)細(xì)菌性黑斑病的抗性鑒定

        2014-07-05 10:55:58孫俊
        湖北農(nóng)業(yè)科學(xué) 2014年5期

        孫俊

        摘要:選取遼寧地區(qū)12個(gè)核桃(Juglans regia)主栽品種(系)的兩年生嫁接苗,采用5種方法分別接種核桃細(xì)菌性黑斑病菌(Xanthomonas campestris)進(jìn)行抗病鑒定,并比較各品種(系)苗期抗性差異,同時(shí)比較及篩選接種方法。

        關(guān)鍵詞:核桃(Juglans regia);抗性;細(xì)菌性黑斑病病菌(Xanthomonas campestris)

        中圖分類號(hào):S664.1;S436.612.14 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A 文章編號(hào):0439-8114(2014)05-1058-03

        胡桃(Juglans regial) 原產(chǎn)中亞,又叫核桃、羌桃、合桃等。是胡桃科(Juglandaceae)胡桃屬(Juglans)多年生落葉喬木。中國(guó)的核桃栽培歷史悠久,種質(zhì)資源豐富。核桃仁中含有豐富的脂肪、蛋白質(zhì)、碳水化合物及微量元素,具有較高的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值。中醫(yī)認(rèn)為核桃性溫、味甘、無(wú)毒,有健胃、補(bǔ)血、潤(rùn)肺、養(yǎng)神等功效[1]。20世紀(jì)90年代以來(lái),各國(guó)科學(xué)家通過(guò)營(yíng)養(yǎng)學(xué)和病理學(xué)研究認(rèn)為,核桃對(duì)于心血管疾病、Ⅱ型糖尿病、癌癥和神經(jīng)系統(tǒng)疾病有一定的康復(fù)治療和預(yù)防效果。隨核桃的種植面積擴(kuò)大,核桃病害發(fā)生越來(lái)越嚴(yán)重,核桃細(xì)菌性黑斑病的發(fā)生最為嚴(yán)重,尤其是在遼寧地區(qū),造成大量的落葉、落果,引起巨大的經(jīng)濟(jì)損失。藥劑試驗(yàn)證明用鋅銅波爾多液和細(xì)菌靈防治效果較好。

        本研究對(duì)我國(guó)核桃黑斑病的研究現(xiàn)狀進(jìn)行了分析,選取遼寧地區(qū)12個(gè)核桃主栽品種(系),采用5種接種方法,系統(tǒng)地測(cè)定了不同核桃品種(系)對(duì)細(xì)菌性黑斑病菌(Xanthomonas campestris)的抗性差異,從而為核桃的抗病育種及科學(xué)防治提供一定的理論基礎(chǔ)。

        核桃在幼果期受害后,果面上出現(xiàn)黑色小斑點(diǎn),病斑擴(kuò)大,呈不規(guī)則下陷斑,并深入果肉,果實(shí)黑腐早落。成熟果實(shí)發(fā)病后,外果皮變黑,果仁呈現(xiàn)不同程度的干癟和黑斑,出油率和食用價(jià)值大大降低。葉片受害后,在葉脈處形成多角形病斑,嚴(yán)重時(shí)病斑相互融合,病葉皺縮畸形。嫩梢受害后,病斑長(zhǎng)條形、褐色稍凹陷,病斑包圍枝條一圈時(shí),病斑以上枝條枯死[2]。

        病菌在病枝、芽?jī)?nèi)及病斑內(nèi)越冬,翌年春季核桃展葉期借雨水和昆蟲活動(dòng)進(jìn)行傳播。先感染葉片,病芽初展開時(shí)嫩葉極易受害,然后由葉片傳播到果實(shí)和枝條上?;ㄐ蛞惨资芮秩径a(chǎn)生水漬狀斑。雄花受侵染時(shí),花粉也可以傳病。蚜蟲、蜜蜂、壁虱、螞蟻和舉肢蛾也能傳播病害。氣溫在4~30 ℃時(shí)對(duì)葉片感病,5~27 ℃對(duì)果實(shí)能感病、潛育期10~15 d,侵入的細(xì)菌主要破壞柔膜組織。發(fā)病的輕重與雨水有關(guān)。溫度高濕度大的雨季發(fā)病高峰期一般在核桃展葉期至開花期 [3]。

        陳善義等[4]采用針刺法接種健康核桃枝條和葉片進(jìn)行致病性測(cè)定,并通過(guò)對(duì)病原菌的分離、致病性測(cè)定和16S rDNA序列分析,確定其病原菌分類地位,分析證明該病原細(xì)菌為Xanthomonas campestris。

        1 材料與方法

        1.1 栽培品種(系)

        核桃品種(系)遼寧1號(hào)、遼寧4號(hào)、遼寧5號(hào)、遼寧6號(hào)、遼寧7號(hào)、禮品1號(hào)、禮品2號(hào)、寒豐、薄殼香、“30301”、“19-12”、“19-21”共計(jì)12個(gè),均為兩年生嫁接苗,由遼寧省經(jīng)濟(jì)林研究所核桃研究室提供。其中“30301”、“19-12”、“19-21”為選育的優(yōu)系;遼寧5號(hào)、“30301”、“19-12”以核桃楸為砧木,其他品種(系)是以核桃為砧木。4月定植于溫室大棚中,5月底進(jìn)行接種試驗(yàn)。

        1.2 菌株準(zhǔn)備

        采用常規(guī)分離法進(jìn)行病原菌分離和純化[5]。在肉汁胨培養(yǎng)基平板上劃線并于28 ℃下培養(yǎng)。分離純化后所得菌株于斜面中4 ℃保存。挑取單菌落用肉汁胨培養(yǎng)基擴(kuò)大培養(yǎng),4 d后接種,菌體懸浮液接種,濃度為108 CFU/mL。

        1.3 接種方法

        采用5種方法進(jìn)行接種。(A)噴霧接種葉片。接種前24 h噴霧保濕,以保證葉片氣孔張開,每棵植株隨機(jī)選取20片葉片做好標(biāo)記并用菌體懸浮液噴霧接種,重復(fù)3次(共60片);(B)針刺噴霧接種葉片。每棵植株隨機(jī)選取10片葉片做好標(biāo)記并針刺后用菌體懸浮液噴霧接種,重復(fù)3次(共30片);(C)針刺涂抹接種葉片。每棵植株隨機(jī)選取10片葉片做好標(biāo)記并針刺后以棉簽涂抹接種,重復(fù)3次(共30片);(D)針刺噴霧接種新梢。每棵植株上隨機(jī)選取5個(gè)新梢做好標(biāo)記并針刺后用菌體懸浮液噴霧接種,重復(fù)3次(共15枝);(E)針刺涂抹接種新梢。每棵植株上隨機(jī)選取5個(gè)新梢做好標(biāo)記并針刺后以棉簽涂抹接種,重復(fù)3次(共計(jì)15枝)。以上每種處理以不接種病原菌為對(duì)照。接種后48 h內(nèi)控制濕度90%,接種后15~17 d調(diào)查各處理的發(fā)病率。

        發(fā)病率=■×100%

        2 結(jié)果與分析

        不同核桃品種(系)對(duì)核桃細(xì)菌性黑斑病菌抗性鑒定結(jié)果見(jiàn)表1。由表1可知,12個(gè)品種(系)的核桃苗接種后感病情況差異較大。由于A、B兩種方法最接近田間自然發(fā)病條件,因此苗期核桃抗性以方法A和B的平均值作為主要參考。其中遼寧7號(hào)發(fā)病率最低,抗性最好;其次是禮品1號(hào)和遼寧4號(hào)也表現(xiàn)出較高的抗性。而“30301”發(fā)病率高達(dá)74.17%,抗性最低,其次是遼寧1號(hào),發(fā)病率為55.00%。新梢發(fā)病率也有差異,其中接種后遼寧7號(hào)和寒豐未發(fā)現(xiàn)病斑,而薄殼香新梢發(fā)病率較高。

        各品種(系)的發(fā)病癥狀見(jiàn)圖1,其中遼寧7號(hào)癥狀最輕,在葉片上僅表現(xiàn)出輕微的退綠斑,禮品1號(hào)的病斑也極小,表現(xiàn)為針尖狀褐色斑點(diǎn);最嚴(yán)重為“30301”,病斑最多且逐漸融合,遼寧1號(hào)病斑較大。

        3 小結(jié)與討論

        國(guó)內(nèi)外關(guān)于核桃細(xì)菌性黑斑病的病原、發(fā)病規(guī)律等均已有較系統(tǒng)的研究,而關(guān)于病害的防治中多為藥劑防治的篩選等,關(guān)于品種(系)抗病性的研究較少。鑒于此,本研究就遼寧省核桃苗期主栽品種(系)對(duì)細(xì)菌性黑斑病的抗性做了初步試驗(yàn),并對(duì)接種方法做了比較,結(jié)果顯示,人工接種條件下不同栽培品種(系)表現(xiàn)明顯的抗性差異,其中遼寧7號(hào)、禮品1號(hào)和遼寧4號(hào)抗性較強(qiáng); “30301”、遼寧1號(hào)和“19-21”抗性較弱。

        本試驗(yàn)存在一定的局限性,接種材料為兩年生的嫁接苗,與成株期相比樹勢(shì)、樹體各方面均存在較大的差異;試驗(yàn)在溫室大棚中進(jìn)行并且人工接種,與露地自然發(fā)病條件相比有較大差異。但試驗(yàn)結(jié)論能對(duì)抗病育種起到一定的指導(dǎo)作用。

        參考文獻(xiàn):

        [1] 李時(shí)珍.本草綱目(下冊(cè))[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,1982.

        [2] 張永強(qiáng),朱惠英,馮 強(qiáng),等.核桃黑斑病病原研究與防治試驗(yàn)初

        報(bào)[J].甘肅林業(yè)科技,2004,29(2):41-42.

        [3] 李海菊,郝新科,牛 卿,等.核桃黑斑病發(fā)生與防治[J].河北果樹,2004(5):44-45.

        [4] 陳善義,陶萬(wàn)強(qiáng),王 合,等.北京地區(qū)核桃黑斑病病原菌的分離、致病性測(cè)定和16S rDNA序列分析[J].果樹學(xué)報(bào),2011, 28(3):469-473.

        [5] 方中達(dá).植病研究方法[M].北京:中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社,1998.193-194.

        摘要:選取遼寧地區(qū)12個(gè)核桃(Juglans regia)主栽品種(系)的兩年生嫁接苗,采用5種方法分別接種核桃細(xì)菌性黑斑病菌(Xanthomonas campestris)進(jìn)行抗病鑒定,并比較各品種(系)苗期抗性差異,同時(shí)比較及篩選接種方法。

        關(guān)鍵詞:核桃(Juglans regia);抗性;細(xì)菌性黑斑病病菌(Xanthomonas campestris)

        中圖分類號(hào):S664.1;S436.612.14 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A 文章編號(hào):0439-8114(2014)05-1058-03

        胡桃(Juglans regial) 原產(chǎn)中亞,又叫核桃、羌桃、合桃等。是胡桃科(Juglandaceae)胡桃屬(Juglans)多年生落葉喬木。中國(guó)的核桃栽培歷史悠久,種質(zhì)資源豐富。核桃仁中含有豐富的脂肪、蛋白質(zhì)、碳水化合物及微量元素,具有較高的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值。中醫(yī)認(rèn)為核桃性溫、味甘、無(wú)毒,有健胃、補(bǔ)血、潤(rùn)肺、養(yǎng)神等功效[1]。20世紀(jì)90年代以來(lái),各國(guó)科學(xué)家通過(guò)營(yíng)養(yǎng)學(xué)和病理學(xué)研究認(rèn)為,核桃對(duì)于心血管疾病、Ⅱ型糖尿病、癌癥和神經(jīng)系統(tǒng)疾病有一定的康復(fù)治療和預(yù)防效果。隨核桃的種植面積擴(kuò)大,核桃病害發(fā)生越來(lái)越嚴(yán)重,核桃細(xì)菌性黑斑病的發(fā)生最為嚴(yán)重,尤其是在遼寧地區(qū),造成大量的落葉、落果,引起巨大的經(jīng)濟(jì)損失。藥劑試驗(yàn)證明用鋅銅波爾多液和細(xì)菌靈防治效果較好。

        本研究對(duì)我國(guó)核桃黑斑病的研究現(xiàn)狀進(jìn)行了分析,選取遼寧地區(qū)12個(gè)核桃主栽品種(系),采用5種接種方法,系統(tǒng)地測(cè)定了不同核桃品種(系)對(duì)細(xì)菌性黑斑病菌(Xanthomonas campestris)的抗性差異,從而為核桃的抗病育種及科學(xué)防治提供一定的理論基礎(chǔ)。

        核桃在幼果期受害后,果面上出現(xiàn)黑色小斑點(diǎn),病斑擴(kuò)大,呈不規(guī)則下陷斑,并深入果肉,果實(shí)黑腐早落。成熟果實(shí)發(fā)病后,外果皮變黑,果仁呈現(xiàn)不同程度的干癟和黑斑,出油率和食用價(jià)值大大降低。葉片受害后,在葉脈處形成多角形病斑,嚴(yán)重時(shí)病斑相互融合,病葉皺縮畸形。嫩梢受害后,病斑長(zhǎng)條形、褐色稍凹陷,病斑包圍枝條一圈時(shí),病斑以上枝條枯死[2]。

        病菌在病枝、芽?jī)?nèi)及病斑內(nèi)越冬,翌年春季核桃展葉期借雨水和昆蟲活動(dòng)進(jìn)行傳播。先感染葉片,病芽初展開時(shí)嫩葉極易受害,然后由葉片傳播到果實(shí)和枝條上。花序也易受侵染而產(chǎn)生水漬狀斑。雄花受侵染時(shí),花粉也可以傳病。蚜蟲、蜜蜂、壁虱、螞蟻和舉肢蛾也能傳播病害。氣溫在4~30 ℃時(shí)對(duì)葉片感病,5~27 ℃對(duì)果實(shí)能感病、潛育期10~15 d,侵入的細(xì)菌主要破壞柔膜組織。發(fā)病的輕重與雨水有關(guān)。溫度高濕度大的雨季發(fā)病高峰期一般在核桃展葉期至開花期 [3]。

        陳善義等[4]采用針刺法接種健康核桃枝條和葉片進(jìn)行致病性測(cè)定,并通過(guò)對(duì)病原菌的分離、致病性測(cè)定和16S rDNA序列分析,確定其病原菌分類地位,分析證明該病原細(xì)菌為Xanthomonas campestris。

        1 材料與方法

        1.1 栽培品種(系)

        核桃品種(系)遼寧1號(hào)、遼寧4號(hào)、遼寧5號(hào)、遼寧6號(hào)、遼寧7號(hào)、禮品1號(hào)、禮品2號(hào)、寒豐、薄殼香、“30301”、“19-12”、“19-21”共計(jì)12個(gè),均為兩年生嫁接苗,由遼寧省經(jīng)濟(jì)林研究所核桃研究室提供。其中“30301”、“19-12”、“19-21”為選育的優(yōu)系;遼寧5號(hào)、“30301”、“19-12”以核桃楸為砧木,其他品種(系)是以核桃為砧木。4月定植于溫室大棚中,5月底進(jìn)行接種試驗(yàn)。

        1.2 菌株準(zhǔn)備

        采用常規(guī)分離法進(jìn)行病原菌分離和純化[5]。在肉汁胨培養(yǎng)基平板上劃線并于28 ℃下培養(yǎng)。分離純化后所得菌株于斜面中4 ℃保存。挑取單菌落用肉汁胨培養(yǎng)基擴(kuò)大培養(yǎng),4 d后接種,菌體懸浮液接種,濃度為108 CFU/mL。

        1.3 接種方法

        采用5種方法進(jìn)行接種。(A)噴霧接種葉片。接種前24 h噴霧保濕,以保證葉片氣孔張開,每棵植株隨機(jī)選取20片葉片做好標(biāo)記并用菌體懸浮液噴霧接種,重復(fù)3次(共60片);(B)針刺噴霧接種葉片。每棵植株隨機(jī)選取10片葉片做好標(biāo)記并針刺后用菌體懸浮液噴霧接種,重復(fù)3次(共30片);(C)針刺涂抹接種葉片。每棵植株隨機(jī)選取10片葉片做好標(biāo)記并針刺后以棉簽涂抹接種,重復(fù)3次(共30片);(D)針刺噴霧接種新梢。每棵植株上隨機(jī)選取5個(gè)新梢做好標(biāo)記并針刺后用菌體懸浮液噴霧接種,重復(fù)3次(共15枝);(E)針刺涂抹接種新梢。每棵植株上隨機(jī)選取5個(gè)新梢做好標(biāo)記并針刺后以棉簽涂抹接種,重復(fù)3次(共計(jì)15枝)。以上每種處理以不接種病原菌為對(duì)照。接種后48 h內(nèi)控制濕度90%,接種后15~17 d調(diào)查各處理的發(fā)病率。

        發(fā)病率=■×100%

        2 結(jié)果與分析

        不同核桃品種(系)對(duì)核桃細(xì)菌性黑斑病菌抗性鑒定結(jié)果見(jiàn)表1。由表1可知,12個(gè)品種(系)的核桃苗接種后感病情況差異較大。由于A、B兩種方法最接近田間自然發(fā)病條件,因此苗期核桃抗性以方法A和B的平均值作為主要參考。其中遼寧7號(hào)發(fā)病率最低,抗性最好;其次是禮品1號(hào)和遼寧4號(hào)也表現(xiàn)出較高的抗性。而“30301”發(fā)病率高達(dá)74.17%,抗性最低,其次是遼寧1號(hào),發(fā)病率為55.00%。新梢發(fā)病率也有差異,其中接種后遼寧7號(hào)和寒豐未發(fā)現(xiàn)病斑,而薄殼香新梢發(fā)病率較高。

        各品種(系)的發(fā)病癥狀見(jiàn)圖1,其中遼寧7號(hào)癥狀最輕,在葉片上僅表現(xiàn)出輕微的退綠斑,禮品1號(hào)的病斑也極小,表現(xiàn)為針尖狀褐色斑點(diǎn);最嚴(yán)重為“30301”,病斑最多且逐漸融合,遼寧1號(hào)病斑較大。

        3 小結(jié)與討論

        國(guó)內(nèi)外關(guān)于核桃細(xì)菌性黑斑病的病原、發(fā)病規(guī)律等均已有較系統(tǒng)的研究,而關(guān)于病害的防治中多為藥劑防治的篩選等,關(guān)于品種(系)抗病性的研究較少。鑒于此,本研究就遼寧省核桃苗期主栽品種(系)對(duì)細(xì)菌性黑斑病的抗性做了初步試驗(yàn),并對(duì)接種方法做了比較,結(jié)果顯示,人工接種條件下不同栽培品種(系)表現(xiàn)明顯的抗性差異,其中遼寧7號(hào)、禮品1號(hào)和遼寧4號(hào)抗性較強(qiáng); “30301”、遼寧1號(hào)和“19-21”抗性較弱。

        本試驗(yàn)存在一定的局限性,接種材料為兩年生的嫁接苗,與成株期相比樹勢(shì)、樹體各方面均存在較大的差異;試驗(yàn)在溫室大棚中進(jìn)行并且人工接種,與露地自然發(fā)病條件相比有較大差異。但試驗(yàn)結(jié)論能對(duì)抗病育種起到一定的指導(dǎo)作用。

        參考文獻(xiàn):

        [1] 李時(shí)珍.本草綱目(下冊(cè))[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,1982.

        [2] 張永強(qiáng),朱惠英,馮 強(qiáng),等.核桃黑斑病病原研究與防治試驗(yàn)初

        報(bào)[J].甘肅林業(yè)科技,2004,29(2):41-42.

        [3] 李海菊,郝新科,牛 卿,等.核桃黑斑病發(fā)生與防治[J].河北果樹,2004(5):44-45.

        [4] 陳善義,陶萬(wàn)強(qiáng),王 合,等.北京地區(qū)核桃黑斑病病原菌的分離、致病性測(cè)定和16S rDNA序列分析[J].果樹學(xué)報(bào),2011, 28(3):469-473.

        [5] 方中達(dá).植病研究方法[M].北京:中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社,1998.193-194.

        摘要:選取遼寧地區(qū)12個(gè)核桃(Juglans regia)主栽品種(系)的兩年生嫁接苗,采用5種方法分別接種核桃細(xì)菌性黑斑病菌(Xanthomonas campestris)進(jìn)行抗病鑒定,并比較各品種(系)苗期抗性差異,同時(shí)比較及篩選接種方法。

        關(guān)鍵詞:核桃(Juglans regia);抗性;細(xì)菌性黑斑病病菌(Xanthomonas campestris)

        中圖分類號(hào):S664.1;S436.612.14 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A 文章編號(hào):0439-8114(2014)05-1058-03

        胡桃(Juglans regial) 原產(chǎn)中亞,又叫核桃、羌桃、合桃等。是胡桃科(Juglandaceae)胡桃屬(Juglans)多年生落葉喬木。中國(guó)的核桃栽培歷史悠久,種質(zhì)資源豐富。核桃仁中含有豐富的脂肪、蛋白質(zhì)、碳水化合物及微量元素,具有較高的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值。中醫(yī)認(rèn)為核桃性溫、味甘、無(wú)毒,有健胃、補(bǔ)血、潤(rùn)肺、養(yǎng)神等功效[1]。20世紀(jì)90年代以來(lái),各國(guó)科學(xué)家通過(guò)營(yíng)養(yǎng)學(xué)和病理學(xué)研究認(rèn)為,核桃對(duì)于心血管疾病、Ⅱ型糖尿病、癌癥和神經(jīng)系統(tǒng)疾病有一定的康復(fù)治療和預(yù)防效果。隨核桃的種植面積擴(kuò)大,核桃病害發(fā)生越來(lái)越嚴(yán)重,核桃細(xì)菌性黑斑病的發(fā)生最為嚴(yán)重,尤其是在遼寧地區(qū),造成大量的落葉、落果,引起巨大的經(jīng)濟(jì)損失。藥劑試驗(yàn)證明用鋅銅波爾多液和細(xì)菌靈防治效果較好。

        本研究對(duì)我國(guó)核桃黑斑病的研究現(xiàn)狀進(jìn)行了分析,選取遼寧地區(qū)12個(gè)核桃主栽品種(系),采用5種接種方法,系統(tǒng)地測(cè)定了不同核桃品種(系)對(duì)細(xì)菌性黑斑病菌(Xanthomonas campestris)的抗性差異,從而為核桃的抗病育種及科學(xué)防治提供一定的理論基礎(chǔ)。

        核桃在幼果期受害后,果面上出現(xiàn)黑色小斑點(diǎn),病斑擴(kuò)大,呈不規(guī)則下陷斑,并深入果肉,果實(shí)黑腐早落。成熟果實(shí)發(fā)病后,外果皮變黑,果仁呈現(xiàn)不同程度的干癟和黑斑,出油率和食用價(jià)值大大降低。葉片受害后,在葉脈處形成多角形病斑,嚴(yán)重時(shí)病斑相互融合,病葉皺縮畸形。嫩梢受害后,病斑長(zhǎng)條形、褐色稍凹陷,病斑包圍枝條一圈時(shí),病斑以上枝條枯死[2]。

        病菌在病枝、芽?jī)?nèi)及病斑內(nèi)越冬,翌年春季核桃展葉期借雨水和昆蟲活動(dòng)進(jìn)行傳播。先感染葉片,病芽初展開時(shí)嫩葉極易受害,然后由葉片傳播到果實(shí)和枝條上?;ㄐ蛞惨资芮秩径a(chǎn)生水漬狀斑。雄花受侵染時(shí),花粉也可以傳病。蚜蟲、蜜蜂、壁虱、螞蟻和舉肢蛾也能傳播病害。氣溫在4~30 ℃時(shí)對(duì)葉片感病,5~27 ℃對(duì)果實(shí)能感病、潛育期10~15 d,侵入的細(xì)菌主要破壞柔膜組織。發(fā)病的輕重與雨水有關(guān)。溫度高濕度大的雨季發(fā)病高峰期一般在核桃展葉期至開花期 [3]。

        陳善義等[4]采用針刺法接種健康核桃枝條和葉片進(jìn)行致病性測(cè)定,并通過(guò)對(duì)病原菌的分離、致病性測(cè)定和16S rDNA序列分析,確定其病原菌分類地位,分析證明該病原細(xì)菌為Xanthomonas campestris。

        1 材料與方法

        1.1 栽培品種(系)

        核桃品種(系)遼寧1號(hào)、遼寧4號(hào)、遼寧5號(hào)、遼寧6號(hào)、遼寧7號(hào)、禮品1號(hào)、禮品2號(hào)、寒豐、薄殼香、“30301”、“19-12”、“19-21”共計(jì)12個(gè),均為兩年生嫁接苗,由遼寧省經(jīng)濟(jì)林研究所核桃研究室提供。其中“30301”、“19-12”、“19-21”為選育的優(yōu)系;遼寧5號(hào)、“30301”、“19-12”以核桃楸為砧木,其他品種(系)是以核桃為砧木。4月定植于溫室大棚中,5月底進(jìn)行接種試驗(yàn)。

        1.2 菌株準(zhǔn)備

        采用常規(guī)分離法進(jìn)行病原菌分離和純化[5]。在肉汁胨培養(yǎng)基平板上劃線并于28 ℃下培養(yǎng)。分離純化后所得菌株于斜面中4 ℃保存。挑取單菌落用肉汁胨培養(yǎng)基擴(kuò)大培養(yǎng),4 d后接種,菌體懸浮液接種,濃度為108 CFU/mL。

        1.3 接種方法

        采用5種方法進(jìn)行接種。(A)噴霧接種葉片。接種前24 h噴霧保濕,以保證葉片氣孔張開,每棵植株隨機(jī)選取20片葉片做好標(biāo)記并用菌體懸浮液噴霧接種,重復(fù)3次(共60片);(B)針刺噴霧接種葉片。每棵植株隨機(jī)選取10片葉片做好標(biāo)記并針刺后用菌體懸浮液噴霧接種,重復(fù)3次(共30片);(C)針刺涂抹接種葉片。每棵植株隨機(jī)選取10片葉片做好標(biāo)記并針刺后以棉簽涂抹接種,重復(fù)3次(共30片);(D)針刺噴霧接種新梢。每棵植株上隨機(jī)選取5個(gè)新梢做好標(biāo)記并針刺后用菌體懸浮液噴霧接種,重復(fù)3次(共15枝);(E)針刺涂抹接種新梢。每棵植株上隨機(jī)選取5個(gè)新梢做好標(biāo)記并針刺后以棉簽涂抹接種,重復(fù)3次(共計(jì)15枝)。以上每種處理以不接種病原菌為對(duì)照。接種后48 h內(nèi)控制濕度90%,接種后15~17 d調(diào)查各處理的發(fā)病率。

        發(fā)病率=■×100%

        2 結(jié)果與分析

        不同核桃品種(系)對(duì)核桃細(xì)菌性黑斑病菌抗性鑒定結(jié)果見(jiàn)表1。由表1可知,12個(gè)品種(系)的核桃苗接種后感病情況差異較大。由于A、B兩種方法最接近田間自然發(fā)病條件,因此苗期核桃抗性以方法A和B的平均值作為主要參考。其中遼寧7號(hào)發(fā)病率最低,抗性最好;其次是禮品1號(hào)和遼寧4號(hào)也表現(xiàn)出較高的抗性。而“30301”發(fā)病率高達(dá)74.17%,抗性最低,其次是遼寧1號(hào),發(fā)病率為55.00%。新梢發(fā)病率也有差異,其中接種后遼寧7號(hào)和寒豐未發(fā)現(xiàn)病斑,而薄殼香新梢發(fā)病率較高。

        各品種(系)的發(fā)病癥狀見(jiàn)圖1,其中遼寧7號(hào)癥狀最輕,在葉片上僅表現(xiàn)出輕微的退綠斑,禮品1號(hào)的病斑也極小,表現(xiàn)為針尖狀褐色斑點(diǎn);最嚴(yán)重為“30301”,病斑最多且逐漸融合,遼寧1號(hào)病斑較大。

        3 小結(jié)與討論

        國(guó)內(nèi)外關(guān)于核桃細(xì)菌性黑斑病的病原、發(fā)病規(guī)律等均已有較系統(tǒng)的研究,而關(guān)于病害的防治中多為藥劑防治的篩選等,關(guān)于品種(系)抗病性的研究較少。鑒于此,本研究就遼寧省核桃苗期主栽品種(系)對(duì)細(xì)菌性黑斑病的抗性做了初步試驗(yàn),并對(duì)接種方法做了比較,結(jié)果顯示,人工接種條件下不同栽培品種(系)表現(xiàn)明顯的抗性差異,其中遼寧7號(hào)、禮品1號(hào)和遼寧4號(hào)抗性較強(qiáng); “30301”、遼寧1號(hào)和“19-21”抗性較弱。

        本試驗(yàn)存在一定的局限性,接種材料為兩年生的嫁接苗,與成株期相比樹勢(shì)、樹體各方面均存在較大的差異;試驗(yàn)在溫室大棚中進(jìn)行并且人工接種,與露地自然發(fā)病條件相比有較大差異。但試驗(yàn)結(jié)論能對(duì)抗病育種起到一定的指導(dǎo)作用。

        參考文獻(xiàn):

        [1] 李時(shí)珍.本草綱目(下冊(cè))[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,1982.

        [2] 張永強(qiáng),朱惠英,馮 強(qiáng),等.核桃黑斑病病原研究與防治試驗(yàn)初

        報(bào)[J].甘肅林業(yè)科技,2004,29(2):41-42.

        [3] 李海菊,郝新科,牛 卿,等.核桃黑斑病發(fā)生與防治[J].河北果樹,2004(5):44-45.

        [4] 陳善義,陶萬(wàn)強(qiáng),王 合,等.北京地區(qū)核桃黑斑病病原菌的分離、致病性測(cè)定和16S rDNA序列分析[J].果樹學(xué)報(bào),2011, 28(3):469-473.

        [5] 方中達(dá).植病研究方法[M].北京:中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社,1998.193-194.

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