林曉萍　王生華

摘要：對(duì)豬霉形體肺炎的診斷方法進(jìn)行了介紹。

關(guān)鍵詞：豬霉形體；肺炎；診斷

中圖分類號(hào)：S858.3 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：B 文章編號(hào)：1007-273X（2014）02-0047-01

豬霉形體肺炎病又被稱為地方流行性肺炎，俗稱豬氣喘病。是由豬霉形體引起的一種慢性呼吸道傳染病。該病一年四季均可發(fā)生，年齡、性別、品種不同的豬易感性差異不大，密集飼養(yǎng)、營(yíng)養(yǎng)不良以及環(huán)境潮濕通風(fēng)不良和寒冷氣候均易發(fā)病?；钾i長(zhǎng)期生長(zhǎng)發(fā)育不良，飼料利用率低。一般情況下死亡率不高，但繼發(fā)感染也會(huì)造成嚴(yán)重死亡，因此會(huì)造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失，給養(yǎng)豬業(yè)發(fā)展帶來(lái)嚴(yán)重的危害。

1 發(fā)病情況

對(duì)荊門(mén)地區(qū)多家養(yǎng)豬場(chǎng)960頭40～105日齡豬調(diào)查發(fā)現(xiàn)，一般開(kāi)始只有個(gè)別豬發(fā)病，經(jīng)過(guò)抗生素的治療后，病情多不見(jiàn)好轉(zhuǎn)；一個(gè)星期后越來(lái)越多豬發(fā)病，共有131頭，發(fā)病率為13.6%，死亡6頭，死亡率為4.6%。抵抗力弱的仔豬呈急性經(jīng)過(guò)，潛伏期短，癥狀明顯，呈現(xiàn)張口呼吸，喘氣，不愿走動(dòng)。從出現(xiàn)癥狀到死亡的時(shí)間為6～8 d。試用多種抗生素治療效果不佳，甚至病情加重。

2 臨床癥狀

主要癥狀為咳嗽，清晨趕豬喂食和劇烈運(yùn)動(dòng)時(shí)，咳嗽最明顯?？人詴r(shí)站立不動(dòng)，背拱，頸伸直，頭下垂，用力咳嗽多次，嚴(yán)重時(shí)呈連續(xù)的痙攣性咳嗽。常出現(xiàn)不同程度的呼吸困難，呼吸次數(shù)增加和腹式呼吸（喘氣）。食欲變化不大，病勢(shì)嚴(yán)重時(shí)減少或完全不食。病期較長(zhǎng)的小豬，身體消瘦而衰弱，生長(zhǎng)發(fā)育停滯。

3 病原體的分離

采取4頭病豬的各個(gè)肺葉和肺門(mén)淋巴結(jié)用塑料帶裝好密封，冰箱低溫保存。無(wú)菌采取病肺組織剪成1～2 mm的碎塊，放入液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)。因其在液體培養(yǎng)物中渾濁度低，不易觀察，常借助分解葡萄糖產(chǎn)酸使得培養(yǎng)基的顏色變黃來(lái)判斷。初代分離經(jīng)3～5 d，當(dāng)pH值下降至6.8～7.0時(shí)，以20%的接種量轉(zhuǎn)接培養(yǎng)第2代。當(dāng)培養(yǎng)物的pH下降至6.8時(shí)，進(jìn)行涂片鏡檢。同時(shí)將液體培養(yǎng)物適當(dāng)稀釋接種于固體培養(yǎng)基中，置5% CO2 37 ℃培養(yǎng)3～10 d，觀察有無(wú)邊緣整齊、中央隆起、有顆粒的微小菌落生長(zhǎng)[1，2]。

4 病原體鑒定

對(duì)培養(yǎng)物進(jìn)行涂片染色鏡檢，吸一滴培養(yǎng)液于載玻片上，推成薄層，干燥后用甲醛固定2～3 min，用pH 7.2的PBS將姬姆薩溶液稀釋10倍，染色3 h。用pH 7.2的PBS沖洗玻片。后用丙酮脫色10s，待干燥后在油鏡下觀察其形態(tài)。其他血清學(xué)試驗(yàn)也可作為鑒定方法，如微粒凝集試驗(yàn)和補(bǔ)體結(jié)合反應(yīng)等[3]。

5 生理生化試驗(yàn)

5.1 葡萄糖發(fā)酵試驗(yàn)

將霉形體培養(yǎng)物接種于葡萄糖培養(yǎng)基中，置于5% CO2 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)24 h后取出觀察其顏色變化。

5.2 精氨酸水解試驗(yàn)

將霉形體培養(yǎng)液接種于精氨酸培養(yǎng)基中，置于5% CO2 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)24 h后取出觀察其顏色變化。

5.3 洋地黃苷敏感試驗(yàn)

用于區(qū)別需要甾醇與不需要甾醇的霉形體，后者不敏感。將干燥的洋地黃苷?qǐng)A紙片貼于接種了霉形體的平板中央，37 ℃培養(yǎng)后每天觀察，前者生長(zhǎng)