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        人參快繁條件的優(yōu)化

        2014-07-01 23:28:38于立榮
        關(guān)鍵詞:實(shí)驗(yàn)

        蘭 蘭,陳 笑,于立榮,魏 健

        (長(zhǎng)春師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院,吉林長(zhǎng)春 130032)

        人參快繁條件的優(yōu)化

        蘭 蘭,陳 笑,于立榮,魏 健

        (長(zhǎng)春師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院,吉林長(zhǎng)春 130032)

        以人參種子在無(wú)菌條件下培養(yǎng)出來(lái)的無(wú)菌苗的幼嫩葉片以及不同器官、人參成體的塊莖及葉作為外植體,接種到附加著不同濃度的NAA、KT、IAA、6-BA以及它們分別組合的MS固體培養(yǎng)基上;總結(jié)出外植體在同樣的誘導(dǎo)條件下有很大的差異,且不同的培養(yǎng)基對(duì)外植體的影響不同。結(jié)果表明,MS+NAA0.1mg·L-1+KT0.5mg·L-1是誘導(dǎo)愈傷組織的最好的培養(yǎng)基;最理想的誘導(dǎo)叢生芽的培養(yǎng)基為MS+6-BA1.5 mg·L-1+NAA0.5mg·L-1;最佳誘導(dǎo)不定芽生根的培養(yǎng)基為MS+KT0.5mg·L-1+IAA0.3mg·L-1+6-BA0.2mg·L-1+活性炭3g;移栽、扦插的試管苗在爐灰渣中生長(zhǎng)得最旺盛,所以最理想的基質(zhì)是爐灰渣。

        人參;培養(yǎng)基;快速繁殖;無(wú)菌苗;誘導(dǎo)

        人參(PanaxginsenyC,A mey)是草本植物,多年生,隸屬于五加科。它可治勞傷虛損、反胃吐食、虛咳喘促、自汗暴脫、眩暈頭痛、消渴、小兒慢驚、久虛不復(fù)等一切氣血津液不足之癥,在滋補(bǔ)藥物、保健藥物、保健食品、化妝品中占有重要地位[1]。人參的主要作用是調(diào)節(jié)中樞神經(jīng)系統(tǒng),除此之外,還可以改善心臟功能、降血糖、抗腫瘤、抗衰老, 效果是多方面的[2-5]。由于人參的神秘性和奇特性,目前它的身價(jià)越來(lái)越高,市場(chǎng)越來(lái)越大,應(yīng)用范圍也越來(lái)越廣。從傳統(tǒng)的強(qiáng)心強(qiáng)身藥物,到流行的保健品,再到時(shí)髦的化妝品,幾乎都加上人參的成分或名號(hào),令人對(duì)人參產(chǎn)生了濃厚的興趣,越來(lái)越多的學(xué)者開(kāi)始更深入而廣泛地研究人參[6-9]。野生人參對(duì)生長(zhǎng)環(huán)境的要求非常嚴(yán)格,其生長(zhǎng)的地段多在海拔300~800m以下的低山;喜歡陰涼氣候,春季氣溫達(dá)到15℃,土壤溫度在10℃左右,人參才能出芽;喜歡漫射光和散射光,散射光具有光譜中最為豐富的紫外光;對(duì)水分要求也比較嚴(yán)格,適宜空氣濕度為40%~80%,土壤濕度為40%~50%之間。對(duì)人參進(jìn)行開(kāi)發(fā)可以很好地解決人們的需求,提高其市場(chǎng)價(jià)值[10-15]。本實(shí)驗(yàn)選用的材料是無(wú)菌苗及人參成體,并對(duì)人參成體進(jìn)行了嚴(yán)格的消毒,利用組織培養(yǎng)的方法,對(duì)人參的無(wú)性快速繁殖技術(shù)進(jìn)行了討論,研究了不同植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑及其組合對(duì)人參愈傷組織的誘導(dǎo)和增殖效應(yīng),從而更有效地對(duì)人參進(jìn)行開(kāi)發(fā)研究。

        1 材料與方法

        1.1 實(shí)驗(yàn)材料

        實(shí)驗(yàn)選取由吉林白山地區(qū)提供的人參種子培養(yǎng)獲得的無(wú)菌苗和成體人參作為實(shí)驗(yàn)材料。

        1.2 實(shí)驗(yàn)方法

        1.2.1 獲得外植體

        1.2.1.1獲得無(wú)菌苗

        選取一定數(shù)量的人參種子,放入250mL廣口瓶中用自來(lái)水浸泡數(shù)小時(shí),再加入0.02%的餐洗凈水浸泡10~15min,用自來(lái)水沖洗干凈。加入75%的酒精浸泡4min,倒去酒精,以無(wú)菌水漂洗2~3次(重復(fù)一次)。

        將種子轉(zhuǎn)到另一個(gè)滅過(guò)菌的100~150ml的三角瓶中,將約為20mL 0.1%的升汞液注入瓶中,經(jīng)過(guò)1min的滅菌浸泡,并連續(xù)使用無(wú)菌水沖洗,至少5~6次,才能夠?qū)⑸瘡氐壮?。從三角瓶中取出消毒后的種子,使用無(wú)菌濾紙去除種子上的水分,在MS+NAA1.0mg·L-1+6-BA2.0mg·L-1固體培養(yǎng)基上接種。培養(yǎng)溫度非常重要,應(yīng)為(25±2)℃,每一個(gè)粒種子相距1.5cm左右,經(jīng)過(guò)大概20d的培養(yǎng)即可獲得無(wú)菌苗,以用作組織培養(yǎng)的外植體材料。

        1.2.1.2 人參成體莖塊葉的消毒

        先用水沖洗干凈泥土,再用加餐洗凈的自來(lái)水浸泡,用自來(lái)水沖洗,移至超凈工作臺(tái)上,用75%的酒精浸泡10~30s。以無(wú)菌水沖洗4次后,迅速倒入0.1%的HgCl2溶液中浸泡8~12min,傾去HgCl2溶液,再用無(wú)菌水沖洗4~5次。

        1.2.2 接種

        將已獲得的無(wú)菌苗移入超凈工作臺(tái)上,將無(wú)菌苗小心地從培養(yǎng)容器中取出,盡量不要損傷葉片。在無(wú)菌濾紙上切下葉片,再用解剖刀將葉片切成0.3~0.5cm2的小塊,接種于培養(yǎng)基上,并且要讓其背面接觸培養(yǎng)基,這樣有利于愈傷組織的產(chǎn)生。葉片切塊在培養(yǎng)容器中的放置密度以相互之間間隔1.5cm為宜。

        將已消毒的人參置于超凈工作臺(tái)上,將根、葉柄切成可鑒定的0.3~0.5cm的小段,平放在培養(yǎng)基上;如果是葉片,同上切成可鑒定的0.3~0.5cm2的小塊,葉片平鋪于培養(yǎng)基上。

        1.2.3 叢生芽的誘導(dǎo)

        要選出最適合的培養(yǎng)基,具體方法:所選擇的無(wú)菌葉片一定要具備愈傷組織,切成小塊,基本培養(yǎng)基選擇MS,進(jìn)行叢生芽誘導(dǎo)。叢生芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基可以附加不同濃度的NAA,6-BA,觀察后得到結(jié)果。

        1.2.4 誘導(dǎo)生根

        在壯苗培養(yǎng)基或芽再生培養(yǎng)基上選取較為強(qiáng)壯的無(wú)根苗,取出后移至MS的基本培養(yǎng)基上,進(jìn)行生根誘導(dǎo),同時(shí)應(yīng)附加不相同濃度的IAA的生根培養(yǎng)基。

        1.2.5 移栽

        打開(kāi)已經(jīng)生根的試管瓶進(jìn)行煉苗,煉苗的必備條件是溫度25℃,5000~10000LX的光照強(qiáng)度,時(shí)間為3~5d。當(dāng)有小群的菌落剛剛出現(xiàn)在培養(yǎng)基的表面時(shí),就及時(shí)地將試管苗從試管瓶中移出。

        1.2.6 培養(yǎng)條件

        基本培養(yǎng)基為MS,附加不同濃度的激素及其組合。培養(yǎng)基中必須全部都加入3.5%的蔗糖,1.2%的瓊脂,pH=5.7,光照條件為1500~3500LX,溫度設(shè)置為26±1℃,每天13~17h的光照時(shí)間。

        2 結(jié)果與分析

        2.1 對(duì)人參愈傷組織,不同的植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)有著不同的誘導(dǎo)效應(yīng)

        對(duì)MS培養(yǎng)基附加不同的激素,然后在其上接種經(jīng)過(guò)以上方法處理過(guò)的外植體。30d時(shí),誘導(dǎo)現(xiàn)象在幾種不同的外植體上都有所表現(xiàn)。培養(yǎng)基含有的激素濃度不同,對(duì)誘導(dǎo)愈傷組織的誘導(dǎo)率及生長(zhǎng)勢(shì)的影響也各異(表1)。

        表1 不同濃度的激素的培養(yǎng)基對(duì)誘導(dǎo)愈傷組織的誘導(dǎo)率及生長(zhǎng)勢(shì)影響

        結(jié)果表明,誘導(dǎo)愈傷組織最適合的外植體為無(wú)菌苗的葉及人參成體的根。最佳的培養(yǎng)基為MS+NAA0.1mg·L-1+KT0.5mg·L-1,成活率達(dá)75%以上,長(zhǎng)勢(shì)相對(duì)較好。

        2.2 叢生芽的誘導(dǎo)

        在MS基本培養(yǎng)基上培養(yǎng)切塊后的帶有愈傷組織的葉片,附加不同濃度的NAA,6-BA的芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基,大概4~5w以后,不定芽便開(kāi)始在愈傷組織上產(chǎn)生。統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)說(shuō)明,在MS+NAA0.5mg·L-1+6-BA1.5mg·L-1中生長(zhǎng)得比較好。在壯苗培養(yǎng)基上培養(yǎng)從叢生芽中選取的比較強(qiáng)壯的芽。

        2.3 誘導(dǎo)生根

        無(wú)根苗經(jīng)過(guò)培養(yǎng),大約在7d左右開(kāi)始生根。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)說(shuō)明: MS+KT0.5mg·L-1+6-BA0.2mg·L-1+IAA0.3mg·L-1+活性炭3g是最適合的生根培養(yǎng)基。

        2.4 移栽

        打開(kāi)已經(jīng)生根的試管瓶進(jìn)行煉苗,煉苗的必備條件是溫度為25℃、5000~10000LX的光照強(qiáng)度,時(shí)間為4~6d。當(dāng)有小的菌落剛剛出現(xiàn)在培養(yǎng)基的表面時(shí),就及時(shí)地將試管苗從試管瓶中移出。為了保證一定的成活率,萬(wàn)一沒(méi)有出現(xiàn)菌落則要適當(dāng)延長(zhǎng)煉苗時(shí)間。

        移栽的時(shí)候一定要細(xì)致地從瓶中取出苗,盡可能不要損害苗。苗取出后放入事先備好的干凈清水中,用試管刷或毛刷輕輕地掃除根部,盡可能徹底完全地清除掉苗根部周圍的瓊脂,移至河沙、珍珠巖、肥沃土壤、爐灰渣4種基質(zhì)中。置于26℃的溫度條件下,濕度90%左右的散射光條件下,10d后觀察后得出:移栽的最佳基質(zhì)是爐灰渣,這是由于爐灰渣是經(jīng)過(guò)高溫灼燒形成的。其中通氣性好、菌少,而且吸熱性好的黑色基質(zhì)使?fàn)t灰渣的溫度高,試管苗成活率高。

        3 討論

        在移栽時(shí),特別要洗掉瓊脂,因?yàn)榄傊l(fā)霉容易引起爛根,這樣會(huì)浪費(fèi)資源,還會(huì)耽誤實(shí)驗(yàn)的進(jìn)程,因此在去除瓊脂時(shí)一定要精細(xì)、認(rèn)真。

        人參的培養(yǎng)條件非常嚴(yán)格,所以必須每一步都遵循它的生長(zhǎng)條件,并且確保組培環(huán)境無(wú)菌。如果無(wú)菌工作做得不好,培養(yǎng)的幼苗就會(huì)生長(zhǎng)緩慢甚至培育失敗。所以這次實(shí)驗(yàn)在組培過(guò)程中嚴(yán)格遵守實(shí)驗(yàn)室的要求,達(dá)到真正的無(wú)菌條件,讓實(shí)驗(yàn)更加真實(shí),數(shù)據(jù)更加可信。

        4 結(jié)論

        本實(shí)驗(yàn)對(duì)所選的培養(yǎng)基附加了各種不同的激素濃度,實(shí)驗(yàn)材料所選用的外植體為人參無(wú)菌苗的幼葉。經(jīng)過(guò)培養(yǎng),得到的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)表明:MS+KT0.5mg·L-1+IAA0.3mg·L-1+6-BA0.2mg·L-1+活性炭3 g是誘導(dǎo)不定芽生根的最好的培養(yǎng)基;MS+6-BA1.5mg·L-1+NAA0.5mg·L-1是叢生芽誘導(dǎo)的最佳培養(yǎng)基;MS+NAA0.1mg·L-1+KT0.5mg·L-1則是誘導(dǎo)愈傷組織的最理想的培養(yǎng)基。

        [1]李斌超,嚴(yán)井靜.土人參的栽培技術(shù)及開(kāi)發(fā)利用[J].中國(guó)林副特產(chǎn),1997(3):31-32.

        [2]潘瑞熾.植物組織培養(yǎng)[M].廣州:高等教育出版社,2003(8):60-80.

        [3]曹孜義.現(xiàn)代植物組織培養(yǎng)技術(shù)[M].蘭州:科學(xué)技術(shù)出版社,2003(12):50-55.

        [4]周麗華,呂華飛,吳鍵字,等.莖尖分生組織培養(yǎng)獲得無(wú)病毒康乃馨植株的研究[J].云南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào),1994(4):32-35.

        [5]馬艷麗.越橘組培快繁技術(shù)研究[J].林業(yè)科技,2005(1):3-5.

        [6]李洪雯,陳克玲,宋興榮,等.黑琥珀李半木質(zhì)化嫩梢離體快繁研究[J].西南園藝,2005(1):17-18.

        [7]李品漢.土人參[J].致富之友,2005(9):23.

        [8]倪宏正,曹堅(jiān).早春大棚馬鈴薯脫毒種薯快繁技術(shù)[J].長(zhǎng)江蔬菜,2008(3):37-38.

        [9]劉慶昌,吳國(guó)良.植物細(xì)胞組織培養(yǎng)[M].北京:中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)出版社,2003:20-30.

        [10]鄭加協(xié),李華東.蜜寶菠蘿組織培養(yǎng)及低成本快繁技術(shù)研究[J].果樹(shù)學(xué)報(bào),2011(1):27-30.

        [11]王蓮英,朱秀珍,虞佩珍,等.中國(guó)名貴花卉鑒賞與栽培[M].合肥:安徽科學(xué)技術(shù)出版社,1997:15-23.

        [12]鐘士傳.有機(jī)物和激素對(duì)四倍體刺槐微體快繁的影響[J].林業(yè)科技,2009(1):1-2.

        [13]崔德才,徐培文.植物組織培養(yǎng)與工廠化育苗[M].北京:化學(xué)工業(yè)出版社,2008:30-40.

        [14]吳殿星,楊繁榮.植物組織培養(yǎng)[M].上海:交通大學(xué)出版社,2004:9-35.

        [15]Anderson W C,Carstens J B.Tissue culture propagation lf broccoli.Brassica loeraceo(Italica,group),for use in Flhybrid seed production[J].J Amer Soc Hort Sci,1977,102(1):69-73.

        2014-09-27

        蘭 蘭(1981- ),女,吉林長(zhǎng)春人,長(zhǎng)春師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院碩士研究生,長(zhǎng)春師范大學(xué)基建處助理工程師,從事細(xì)胞遺傳學(xué)研究。

        魏 健(1980- ),男,吉林長(zhǎng)春人,講師,博士,從事植物學(xué)研究。

        S567.5+1

        A

        2095-7602(2014)06-0078-04

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