馬錦陸，李宏宇，陸曉娜，楊文娟

新疆農(nóng)藥檢定所（自治區(qū)農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全監(jiān)督檢驗中心），烏魯木齊 830049

高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜測定梨子中苯醚甲環(huán)唑的殘留

馬錦陸，李宏宇，陸曉娜，楊文娟

新疆農(nóng)藥檢定所（自治區(qū)農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全監(jiān)督檢驗中心），烏魯木齊 830049

建立梨子中高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜檢測苯醚甲環(huán)唑的殘留方法。用乙腈提取，固相萃取柱凈化，定容過膜后，用液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀檢測。結(jié)果：苯醚甲環(huán)唑質(zhì)量濃度在10～200ng/mL之間標(biāo)準(zhǔn)曲線線性良好。添加濃度在10.0～500.0mg/kg，添加回收率為88.0%～117.0%。

高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜；苯醚甲環(huán)唑

苯醚甲環(huán)唑（difenoconazo1e），又名惡醚唑。是三唑類殺菌劑中安全性比較高的一種，其內(nèi)吸性強(qiáng)，殺菌譜廣，是目前防治葉斑病、草莓白粉病、梨黑星病等作物抗性病害的理想殺菌劑，但由于其直接噴灑于蔬菜、水果上，通過食用進(jìn)入人體，積累可能會危害健康。國內(nèi)外對該藥物在食品中的殘留量已經(jīng)做出了嚴(yán)格限制。因此建立一種簡單、快速、準(zhǔn)確、可靠的可用于測定苯醚甲環(huán)唑農(nóng)藥殘留量的檢測方法是很有必要的。

1 檢測材料與方法

梨子中苯醚甲環(huán)唑經(jīng)乙腈高速勻漿提取，上清液經(jīng)固相萃取柱凈化，氮氣濃縮近干后用甲醇定容，過膜后用液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀檢測。

1.1 材料與設(shè)備

苯醚甲環(huán)唑標(biāo)準(zhǔn)品：純度1000.0μg/mL，由農(nóng)業(yè)部環(huán)境質(zhì)量監(jiān)督檢驗測試中心（天津）提供；Supe1c1eanLC-NH2SPE(500mg/6mL)；甲醇：HPLC純；乙腈：HPLC純；甲酸：色譜純；二氯甲烷：分析純。

液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀WATERSACQUIPYUPLCTQD；高速勻漿機(jī)；高速離心機(jī)；固相萃取裝置；渦流混合器；T-200型電子天平；氮吹儀；超聲波清洗儀以及其它實驗室常用儀器設(shè)備。

1.2 色譜條件

色譜柱：ACQUIPY-UPLCBEHC18，2.1×100 mm,1.7μm；柱溫：40℃；進(jìn)樣量：5μL。流動相及流速見表1：

表1 流動相條件

1.3 質(zhì)譜條件

離子源：電噴霧離子源ESI；掃描方式：正離子源；毛細(xì)管電壓：3.0KV；錐孔電壓：40V；離子源溫度：120℃；脫溶劑溫度：350℃；脫溶劑氣流量：700L/h；錐孔氣流量：50L/h；碰撞氣流量：0.12 mL/min。苯醚甲環(huán)唑質(zhì)譜參數(shù)：多重反應(yīng)監(jiān)測（MRM）如表2：

表2 苯醚甲環(huán)唑質(zhì)譜參數(shù)

1.4.1 提取

準(zhǔn)確稱取20.0g梨子樣品放入勻漿機(jī)中，加入40.0mL乙腈，勻漿2min后用濾紙過濾，濾液收集到裝有5g氯化鈉的100mL具塞量筒中，收集濾液30～40mL，蓋上塞子，劇烈震蕩1min，在室溫下靜止10min，使乙腈相和水相分層。

從100mL具塞量筒中準(zhǔn)確吸取10.00mL乙腈相溶液，放人150mL燒杯中，將燒杯放在80℃水浴鍋上加熱，杯內(nèi)緩緩?fù)ㄈ肟諝?，將乙腈蒸發(fā)近干；加入2.0mL甲醇＋二氯甲烷(1＋99)溶解殘渣，蓋上鋁箔待凈化。

1.4.2 凈化

將氨基柱用4.0mL甲醇十二氯甲烷(1＋99)預(yù)淋洗，當(dāng)溶劑液面到達(dá)柱吸附層表面時，立即加入樣品溶液，用15mL離心管收集洗脫液，用6mL甲醇十二氯甲烷(1＋99)洗燒杯后過柱，再用4mL甲醇十二氯甲烷(1＋99)洗燒杯過柱?？諝饬鞔嫡舭l(fā)至近干，用甲醇準(zhǔn)確定容至2.5mL。在混合器上混勻后，經(jīng)0.2μm微濾膜待測。

1.5 標(biāo)準(zhǔn)曲線

苯醚甲環(huán)唑標(biāo)準(zhǔn)曲線的配制：將1000.0μg/ mL的苯醚甲環(huán)唑1mL吸取至10mL容量瓶中，用甲醇稀釋至100μg/mL標(biāo)準(zhǔn)工作液；從苯醚甲環(huán)唑的標(biāo)準(zhǔn)工作液中吸取1mL置于100mL容量瓶中，用甲醇稀釋為1μg/mL標(biāo)準(zhǔn)工作液，并用甲醇逐級稀釋成200.0ng/mL、100.0ng/mL、50.0ng/ mL、20.0ng/mL、10.0ng/mL系列標(biāo)準(zhǔn)溶液，在上述液相色譜/質(zhì)譜條件下進(jìn)行測定。標(biāo)樣線性方程為：y＝269.37x-664.01，相關(guān)系數(shù)為：r2＝0.9991；其中x為苯醚甲環(huán)唑標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度，y為峰面積（見圖1）。

圖1 不同質(zhì)量濃度苯醚甲環(huán)唑的線性關(guān)系

1.6 最低檢出限

在上述條件下，苯醚甲環(huán)唑的最低檢出限為10.0μg/kg。

表3 添加回收率與相對標(biāo)準(zhǔn)偏差

2 結(jié)論

綜上所述，苯醚甲環(huán)唑質(zhì)量濃度在10～200 ng/mL之間相關(guān)系數(shù)為0.9991，標(biāo)準(zhǔn)曲線線性良好。梨子中苯醚甲環(huán)唑添加濃度在10.0～500.0 mg/kg，添加回收率為88.0%～117.0%，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為3.1%～5.0%。該方法測定苯醚甲環(huán)唑具有定量準(zhǔn)確、重復(fù)性好、線性關(guān)系良好、分析速度快等特點，是測定梨子中苯醚甲環(huán)唑較為理想的方法。

[1]王遠(yuǎn)，邢麗杰．高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測定蔬菜中苯醚甲環(huán)唑的殘留量[J]．食品科學(xué)，2011，32(18)：296-299.

[2]王雯，梁穎．液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用檢測番茄中苯醚甲環(huán)唑殘留[J]．江蘇農(nóng)業(yè)學(xué)報，2011，27(3)：668-671.

[3]安晶晶，劉新剛．超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測定土壤、蔬菜及水果中苯醚甲環(huán)唑和丙環(huán)唑殘留[J]．農(nóng)藥，2009,48(7)：506-508.

馬錦陸（1987年7月—），新疆農(nóng)藥檢定所（自治區(qū)農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全監(jiān)督檢驗中心）助理農(nóng)藝師。

2014-10-18