姜迎春,李含薇,李詠梅,曲 莉,黃相道

(1.北華大學口腔醫(yī)學院口腔內(nèi)科教研室,吉林吉林 132013; 2.北華大學公共衛(wèi)生學院勞動衛(wèi)生學教研室,吉林吉林 132013)

銀杏葉提取物對牙齦卟啉單胞菌的體外抑菌作用

姜迎春1,李含薇1,李詠梅1,曲 莉2,黃相道1

(1.北華大學口腔醫(yī)學院口腔內(nèi)科教研室,吉林吉林 132013; 2.北華大學公共衛(wèi)生學院勞動衛(wèi)生學教研室,吉林吉林 132013)

目的:探討銀杏葉提取物對牙齦卟啉單胞菌的體外抑菌活性,為研制開發(fā)治療牙周病的新型純中藥抗菌藥物提供藥理學依據(jù)。方法:本實驗分為陰性對照組、亞胺培南對照組和不同濃度及劑型的銀杏葉提取物組。采用溶劑提取法制取銀杏葉提取物,采用打孔法和試管法在厭氧環(huán)境下檢測銀杏葉提取物對牙齦卟啉單胞菌的體外抑菌活性,并與金黃色葡萄球菌和大腸埃希菌對比。通過觀察抑菌環(huán)直徑和測定最小抑菌濃度(MIC)衡量銀杏葉提取物的體外抑菌作用。結(jié)果:在抑菌環(huán)實驗中,銀杏葉提取物、銀杏葉片和銀杏葉軟膠囊的原液和1∶4的稀釋液作用于牙齦卟啉單胞菌,抑菌環(huán)直徑隨著濃度的降低而減小,銀杏葉提取物的最大抑菌直徑為16.5 mm,銀杏葉片和軟膠囊最大抑菌直徑分別為15.3和14.5 mm,銀杏葉提取物抑菌直徑明顯大于銀杏葉片和銀杏葉軟膠囊(P＜0.05),銀杏葉片與銀杏葉軟膠囊抑菌直徑比較差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05);大腸埃希菌組和金黃色葡萄球菌組得到同樣的結(jié)果。MIC測定,銀杏葉提取物組內(nèi)比較,銀杏葉提取物濃度高于1.95 mg·L－1時,試管內(nèi)均無牙齦卟啉單胞菌生長,而大腸埃希菌和金黃色葡萄球菌仍可以生長,濃度高于6.25和12.5 mg·L－1時大腸埃希菌和金黃色葡萄球菌不生長,銀杏葉提取物對牙齦卟啉單胞菌的抑菌作用優(yōu)于大腸埃希菌和金黃色葡萄球菌。結(jié)論:銀杏葉提取物對牙齦卟啉單胞菌具有抑菌作用。

銀杏葉提取物;抑菌作用;牙齦卟啉單胞菌;金黃色葡萄球菌;大腸埃希菌

銀杏(Ginkgo Biloba L.)是我國特有植物,其藥用價值最高的部分是銀杏葉,銀杏葉提取物(extract of Ginkgo biloba leaves,EGb)含有多種活性成分,如銀杏黃酮、銀杏內(nèi)酯和銀杏酸等[1],其中具有抗炎作用的主要成分是銀杏總黃酮(total flavone of ginkgo,TFG)[2],現(xiàn)廣泛用于臨床治療心腦血管疾病,具有抗氧化、拮抗血小板活化因子和改善血液流變特性等藥理活性,對心血管疾病、哮喘和外周血管閉塞性疾病等有顯著臨床療效[3-5],同時具有解痙抗過敏和抑制金黃葡萄球菌、綠膿桿菌、變形鏈球菌、真菌以及抗病毒等作用[6-8]。目前國內(nèi)外研究焦點主要集中在銀杏葉提取物的化學成分及藥理活性和抑制需氧菌方面,對其抑制牙周厭氧菌的研究報道尚不多見。而牙周主要致病菌是牙齦卟啉單胞菌(Porphyromonas gingivalis),本研究旨在探討銀杏葉提取物對牙齦卟啉單胞菌的體外抑菌活性,為尋找中藥牙周抗菌制劑、開發(fā)我國豐富的銀杏葉資源提供科學的理論依據(jù)和實驗數(shù)據(jù)。

1 材料與方法

1.1 藥物、菌株、主要試劑和儀器

新鮮銀杏葉于2012年5月采集于吉林省吉林市林業(yè)局院內(nèi)銀杏葉樹;銀杏葉片(每片220 mg,含總黃酮醇甘19.2 mg、萜類內(nèi)酯4.8 mg,唐山福樂藥業(yè)有限公司生產(chǎn),生產(chǎn)批號:130605);銀杏葉軟膠囊(商品名金保通,每粒0.5 g,相當于銀杏葉提取物40 mg,石家莊市華新藥業(yè)有限公司生產(chǎn),生產(chǎn)批號:101202);亞胺培南(粉針劑: 0.5 g/瓶,印度蘭伯西實驗室有限公司)。牙齦卟啉單胞菌厭氧干凍菌株,其模式株為ATCC33277,購于首都醫(yī)科大學口腔微生物實驗室;金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)和大腸埃希菌(Escherichia coli,E.coli)由北華大學醫(yī)學部微生物教研室提供。胰蛋白胨、大豆蛋白胨、酵母浸膏、氯化鈉、L-半胱氨酸、瓊脂、雙蒸水、氯化血紅素、氫氧化鈉、VK1和脫纖維羊血(長春鼎國生物技術(shù)有限責任公司);厭氧指示劑、厭氧發(fā)生袋、厭氧培養(yǎng)袋;索氏抽提器(上海啟前電子科技有限公司);H H恒溫水浴鍋(江蘇金壇中大儀器廠); 721分光光度計(上海第三分析儀器廠);ZFQ-5A真空干燥箱(天津玻璃儀器廠),厭氧培養(yǎng)箱(南京斯特試驗設(shè)備有限公司)。

1.2 銀杏葉藥物提取和成品配制及菌液、厭氧血瓊脂培養(yǎng)基(CDC)的配制

1.2.1 實驗用各種溶液配制 銀杏葉提取物的獲得:將新鮮銀杏葉片去雜,水洗,晾干,粉碎,稱20 g,置于濾紙桶中,放在索氏抽提器中,用20%乙醇充分溶解,在80℃水浴箱抽提,時間48 h,得墨綠色浸膏,用中性濾紙(Φ12.5 cm)過濾,濾速為中速,型號為102,得棕褐色溶液,分別置于60℃恒溫水浴箱中干燥10 d,再置于真空干燥箱,得棕褐色干粉,稱質(zhì)量為2 321.1 mg。取2.2 g, 用4.4 m L、75%乙醇配成乙醇溶液500 mg·L－1備用。銀杏葉片乙醇溶液的配制:取銀杏葉片10粒,去被膜研磨成粉末,稱質(zhì)量為2.2 g,用4.4 m L、75%乙醇配成乙醇溶液500 mg·L－1備用。銀杏葉軟膠囊中銀杏葉提取物的濃度相當于80 g·L－1,用75%乙醇配成500 mg·L－1溶液備用。亞胺培南溶液的配制:粉劑加滅菌生理鹽水配成濃度為100μg·L－1溶液備用。

1.2.2 CDC和肉湯培養(yǎng)基的制備 胰蛋白胨1.5 g,大豆蛋白胨0.5 g,酵母浸膏0.5 g,氯化鈉0.5 g·L－1,半胱氨酸40 mg,瓊脂1.6 g,雙蒸水100 m L,調(diào)p H值至7.5,高壓滅菌15 min,冷卻至50℃,在無菌室內(nèi)加入無菌脫纖維羊血5 m L,氯化血紅素50μL,VK11μL。分別配制成CDC和肉湯培養(yǎng)基備用。

1.2.3 菌種復蘇和菌液配制 消毒菌種安瓶口,用砂輪打開,吸200μL CDC肉湯培養(yǎng)基加入安瓶溶解菌種,分別吸50 m L已溶解的菌種分別加入2支裝有CDC和肉湯培養(yǎng)基的試管中,滴加CDC平板2滴涂開,置于有厭氧發(fā)生袋和厭氧指示劑的厭氧培養(yǎng)袋中,在厭氧培養(yǎng)箱中培養(yǎng)5 d,觀察菌落生長。用滅菌0.9%NaCl制成1×106～1×107CFU·m L－1菌液備用。另取已培養(yǎng)的金黃色葡萄球菌和大腸埃希菌菌落,用無菌生理鹽水制成1×106～1×107CFU·m L－1的菌液備用。

1.3 實驗操作過程

1.3.1 銀杏葉提取物對牙齦卟啉單胞菌的體外抑菌活性 參考美國國立臨床實驗室標準化委員會(NCCLS)推薦的藥敏試驗(AST)標準[5]進行判斷,以抑菌環(huán)直徑＞20 mm為極敏,抑菌環(huán)直徑15～20 mm為高敏,抑菌環(huán)直徑10～14 mm為中敏,抑菌環(huán)直徑＜10 mm為低敏,無抑菌環(huán)為耐藥。將CDC在裝有厭氧培養(yǎng)箱的潔凈工作臺操作,制成4個培養(yǎng)皿,每個培養(yǎng)基取菌液50μL,用無菌涂布棒涂勻,待自然干燥后,用滅菌的打孔器在培養(yǎng)基上打孔,中間1個孔,周圍1個孔,中間孔為1號,周圍孔為2號,4個培養(yǎng)基的1號孔分別滴入銀杏葉提取物的藥物原液15μL、銀杏葉片原液15μL、銀杏葉軟膠囊原液15μL、亞胺培南15μL;2號孔分別滴入上述4種藥物的1∶4的稀釋液,以注入孔內(nèi)平培養(yǎng)基平面為宜。4個培養(yǎng)基均置于厭氧培養(yǎng)袋內(nèi),置于37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)16 h,觀察抑菌環(huán)直徑并記錄,每組藥物平行重復8次實驗。

1.3.2 銀杏葉提取物對牙齦卟啉單胞菌的體外最小抑菌濃度(MIC) 洗后的試管121℃高壓滅菌,平均分為4組,每組分成1～10號,用記號筆標明,其中10號為空白陽性對照,即不加各種藥品,只加菌液和等量液體培養(yǎng)基。采用微量液體稀釋法,將藥品原液進行對倍梯度稀釋,用無菌微量加樣器吸取呈梯度稀釋的各種藥液自1～9號按其濃度遞減加入試管中,加入的藥物分別是銀杏葉提取物、銀杏葉片、銀杏葉軟膠囊和亞胺培南,放于厭氧培養(yǎng)袋內(nèi),置于37℃厭氧培養(yǎng)箱中培養(yǎng)48 h,觀察細菌生長情況,確定無菌生長的最低藥物濃度,即MIC。

1.3.3 銀杏葉提取物對金黃色葡萄球菌和大腸埃希菌的體外抑菌活性 用上述2種方法分別測定銀杏葉提取物的原液和1∶4的稀釋液對金黃色葡萄球菌和大腸埃希菌的抑菌作用,亞胺培南作為對照組。

1.4 統(tǒng)計學分析

應(yīng)用SPSS 13.0統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計學分析。抑菌環(huán)直徑以±s表示,組間比較采用單因素方差分析。

2 結(jié)果

2.1 銀杏葉提取物對牙齦卟啉單胞菌體外抑菌效果

銀杏葉提取物原液和1∶4的稀釋液抑菌環(huán)直徑分別為16.5和16.2 mm(圖1A,見插頁五);銀杏葉片原液和1∶4的稀釋液抑菌環(huán)直徑分別為15.3和15.1 mm(圖1B,見插頁五);銀杏葉軟膠囊原液及1∶4的稀釋液抑菌直徑分別為14.5和13.2 mm(圖1C,見插頁五);亞胺培南原液及1∶4的稀釋液抑菌環(huán)直徑分別為25.5和20.3 mm(圖1D,見插頁五)。

根據(jù)AST標準進行判斷,牙齦卟啉單胞菌對銀杏葉提取物、銀杏葉片原液和其1∶4稀釋液均表現(xiàn)為高敏;對銀杏葉軟膠囊原液及稀釋液均表現(xiàn)為中敏;對亞胺培南原液及稀釋液均表現(xiàn)為極敏。

2.2 銀杏葉提取物對牙齦卟啉單胞菌的體外MIC

肉眼觀察陽性對照管有細菌生長(混濁)用“＋”表示,陰性對照管無菌生長(透明)用“－”表示,實驗組無菌的最高稀釋度所對應(yīng)的抗(抑)菌劑濃度為該藥物對受試菌的MIC。測定銀杏葉提取物、銀杏葉片、銀杏葉軟膠囊對牙齦卟啉單胞菌的MIC, 在10個試管中銀杏葉提取物第8個試管混濁、銀杏葉片第6個試管混濁、銀杏葉軟膠囊第4個試管混濁,而亞胺培南在第9個試管混濁,第10個試管為空白陽性對照均為混濁狀,故上述MIC分別是小一號試管中的藥液濃度,即銀杏葉提取物、銀杏葉片、銀杏葉軟膠囊和亞胺培南MIC的試管號分別為第7、5、3和8,所對應(yīng)的藥物濃度分別是1.95、7.81、31.25和0.04 mg·L－1。見表1。

表1 銀杏葉提取物、銀杏葉片、銀杏葉軟膠囊及亞胺培南對牙齦卟啉單胞菌的MICTab.1 MIC of extract of Ginkgo biloba leaves,Gingko biloba leaf tablet,Ginkgo biloba soft capsule and imipenem for Porphyromonas gingivalis[ρB/(mg·L－1)]

2.3 銀杏葉提取物對金黃色葡萄球菌和大腸埃希菌的體外抑菌效果

銀杏葉提取物原液和1∶4的稀釋液對金黃色葡萄和大腸埃希菌抑菌效果的實驗結(jié)果顯示:金黃色葡萄球菌對銀杏葉提取物原液表現(xiàn)為高敏、大腸埃希菌表現(xiàn)為中敏。兩者對銀杏葉提取物稀釋液均表現(xiàn)為低敏,對亞胺培南原液和稀釋液均為極敏。見表2。

銀杏葉提取物對金黃色葡萄球菌和大腸埃希菌的MIC實驗結(jié)果顯示:銀杏葉提取物試管中,金黃色葡萄球菌1～4號管未長菌,從5號管開始長菌;大腸埃希菌只有1～3號管未長菌,從4號管開始長菌。結(jié)果表明:銀杏葉提取物對金黃色葡萄球菌和大腸埃希菌有抑菌作用,其對金黃色葡萄球菌的MIC為6.25 mg·L－1,對大腸埃希菌的MIC 為12.5 mg·L－1。見表3。

表2 銀杏葉提取物對金黃色葡萄球菌和大腸埃希菌的體外抑菌效果Tab.2 Bacteriostatic effect of Ginkgo biloba extract on Staphylococcus aureus and E.coli in vitro(l/mm)

2.4 銀杏葉提取物對不同細菌的抑菌效果比較

不同劑型的藥物與不同細菌的各個組間比較:牙齦卟啉單胞菌組,銀杏葉提取物、銀杏葉片和銀杏葉軟膠囊的抑菌環(huán)直徑均大于陰性對照組(P＜0.05),銀杏葉提取物組抑菌環(huán)直徑大于銀杏葉片和銀杏葉軟膠囊組(P＜0.05),銀杏葉片組與銀杏葉軟膠囊組抑菌環(huán)直徑比較差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05);大腸埃希菌組和金黃色葡萄球菌組得到同樣的結(jié)果。銀杏葉提取物組組內(nèi)比較顯示:銀杏葉提取物對牙齦卟啉單胞菌的抑菌環(huán)直徑大于大腸埃希菌和金黃色葡萄球菌(P＜0.05),而銀杏葉提取物對大腸埃希菌和金黃色葡萄球菌的抑菌環(huán)直徑比較差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05);銀杏葉片組組內(nèi)比較顯示:銀杏葉片對大腸埃希菌的抑菌環(huán)直徑大于金黃色葡萄球菌(P＜0.05),而對牙齦卟啉單胞菌和大腸埃希菌的抑菌環(huán)直徑比較差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05);銀杏葉軟膠囊組組內(nèi)比較結(jié)果顯示:銀杏葉軟膠囊對3種菌其均有明顯的抑菌作用,對大腸埃希菌最明顯,對牙齦卟啉單胞菌次之,對金黃色葡萄球菌的抑菌作用最差。見表4。

3 討論

牙周病是口腔的常見病和多發(fā)病,其主要致病菌是引起牙周圍組織慢性破壞性疾病的始動因子。牙齦卟啉單胞菌是目前公認的牙周致病菌,是牙周微生物領(lǐng)域重點研究的厭氧菌之一,其細菌的抗原成分、各種酶、毒素和許多代謝產(chǎn)物可直接刺激和破壞牙周組織,或引起牙周組織局部的免疫和炎癥反應(yīng),造成牙周組織損傷[9]。前列腺素E2 (prostaglandin E2)是巨噬細胞、漿細胞等炎性細胞被激活時分泌的炎性介質(zhì)之一,廣泛存在于各病變牙周組織中,與牙周病的發(fā)生、發(fā)展有密切關(guān)系。臨床上多選擇性地采用抗菌藥物作為牙周病的輔助治療,常用的藥物主要為抗生素類的化學制劑,如硝基咪唑類藥物、四環(huán)素族藥物等,而中藥制劑應(yīng)用較少。朱彩蓮等[10]研究了17種中藥對牙周可疑致病菌的體外抑菌作用,其中包括銀杏葉提取物,但并未做進一步的研究和論證。本研究選取不同劑型銀杏葉提取物,檢測其對牙齦卟啉單胞菌、金黃色葡萄球菌和大腸埃希菌的體外抑菌效果,并進行對比,旨在發(fā)現(xiàn)新的牙周抗菌中藥制劑。

表3 銀杏葉提取物對金黃色葡萄球菌和大腸埃希菌的MICTab.3 MIC of Ginkgo biloba extract for Staphylococcus aureus and E.coli[ρB/(mg·L－1)]

表4 銀杏葉提取物對3種細菌的抑菌環(huán)直徑Tab.4 Bacteriostatic ring diameters of extract of Ginkgo biloba leaves for three kinds of bacterial species (n＝8,±s,d/mm)

表4 銀杏葉提取物對3種細菌的抑菌環(huán)直徑Tab.4 Bacteriostatic ring diameters of extract of Ginkgo biloba leaves for three kinds of bacterial species (n＝8,±s,d/mm)

?P＜0.05 compared with Ginkgo biloba extract group;△P＜0.05 compared with negative control group;＃P＜0.05 compared with Prophyromonas gingivalis;○P＜0.05 compared with Staphylococcus aureus;▲P＜0.05 compared with E.coli.

Group Bacterostatic ring diameter Porphyromonas gingivalis E.coli Staphylococcus aureus Ginkgo biloba extract 18.29±1.05△16.57±3.65△＃17.08±0.62△＃9.87±0.18?△Ginkgo biloba soft capsule 11.05±0.32?△▲12.59±0.14?△8.97±1.63?△▲Positive control 25.50±0.96 35.21±0.62 36.04±0.95 Negative control 6.21±0.14 6.61±0.87 6.42±0.34 Ginkgo biloba leaf tablet 10.42±1.54?△11.96±1.36?△○

本研究結(jié)果顯示:牙齦卟啉單胞菌對銀杏葉提取物原液、稀釋液和銀杏葉片原液、稀釋液均表現(xiàn)為高敏;對銀杏葉軟膠囊原液、稀釋液表現(xiàn)為中敏;對亞胺培南原液、稀釋液均為極敏。本研究另取銀杏葉提取物原液、稀釋液對金黃色葡萄球菌和大腸埃希菌進行抑菌實驗,結(jié)果顯示:銀杏葉提取物原液對金黃色葡萄球菌表現(xiàn)為高敏、對大腸埃希菌表現(xiàn)為中敏,銀杏葉提取物稀釋液對兩者均表現(xiàn)為低敏,對亞胺培南原液、稀釋液均為極敏。亞胺培南主要成分是亞胺培南和西司他丁鈉,主要用于治療敏感革蘭陽性菌及革蘭陰性桿菌所致的嚴重感染,如敗血癥、感染性心內(nèi)膜炎、下呼吸道感染等,是強有效的抗厭氧菌藥物,但其對肝、腎損害比較大,并且價格貴。銀杏葉是天然藥用植物,不僅無毒副作用,而且資源豐富、價格低廉,提取方法簡單,易于推廣使用。本研究對比不同劑型和濃度銀杏葉制劑對牙齦卟啉單胞菌、金黃色葡萄球菌和大腸埃希菌的抑菌效果,結(jié)果顯示:銀杏葉提取物原液抑菌效果優(yōu)于銀杏葉片,銀杏葉片又優(yōu)于銀杏葉軟膠囊。

本研究結(jié)果顯示:銀杏葉提取物、銀杏葉片、銀杏葉軟膠囊和亞胺培南針對牙齦卟啉單胞菌MIC分別為1.95、7.81、31.25和0.04 mg·L－1。銀杏葉提取物對金黃色葡萄球菌和大腸埃希菌MIC為6.25和12.5 mg·L－1。除了亞胺培南作為對照外,以上3種銀杏葉制劑的MIC為1.95 mg·L－1,表明銀杏葉提取物的抑菌效果相對較強。

銀杏葉提取物有較強的抑菌效果,分析原因可能是銀杏葉提取物總黃酮含量較高。黃酮類化合物指2個苯環(huán)通過中央三碳鏈相互連接而形成的一系列化合物,或以與糖結(jié)合成苷的形式,或以游離苷元的形式廣泛存在于植物界中[11]。黃酮類化合物除了其藥用價值外,也有抑菌效應(yīng)。項昭保等[12]和曲中堂等[13]研究了野生橄欖黃酮的抑菌效應(yīng),發(fā)現(xiàn)其對痢疾桿菌和金黃色葡萄球菌有較強的抑制作用;唐浩國等[14]研究了牡丹總黃酮對幾種常見微生物的抑菌活性,發(fā)現(xiàn)其對大腸桿菌、枯草芽孢桿菌和沙門氏菌有一定的抑制作用,其中對沙門氏菌的抑制作用最為顯著?？傸S酮還具有抑制前列腺素E2的作用。酚類化合物及其衍生物,一般呈弱酸性(p H 6),能使蛋白質(zhì)凝固或變性,故有殺菌和抑菌作用;酚類物質(zhì)可通過破壞細菌壁及細胞膜的完整性,導致微生物細胞釋放胞內(nèi)成分引起膜的電子傳遞、營養(yǎng)吸收、核苷酸合成及ATP活性等功能障礙,從而抑制微生物的生長[11]。黃酮類化合物的化學結(jié)構(gòu)屬于酚類衍生物,因而也具有以上特性,從而表現(xiàn)出一定的抑菌功能。另外銀杏葉聚戊烯醇(GBP)是繼銀杏黃酮、萜內(nèi)酯之后新發(fā)現(xiàn)的一類重要天然活性物質(zhì),由14～24個異戊烯基單元及終端異戊烯醇組成的線性長鏈化合物[15],具有提高免疫功能、促進肝細胞再生、抑制癌細胞轉(zhuǎn)移和輔助放化療等作用[16]。

綜上所述,銀杏葉提取物對牙齦卟啉單胞菌的體外抑菌效果好,無毒副作用,且銀杏葉天然資源豐富,提取簡便,價格便宜,易于推廣和臨床使用,其合理的組分和劑型將有待于進一步研究和驗證。

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Bacteriostatic effect of extract of Ginkgo Ailoba leaves on Porphyromonas gingivalis in vitro

JIANG Ying-chun1,LI Han-wei1,LI Yong-mei1,QU Li2,HUANG Xiang-dao1
(1.Department of Oral Medicine,School of Stomatology,North China University,Jilin 132013,China; 2.Department of Labor Hygiene,School of Public Health,North China University,Jilin 132013,China)

ObjectiveTo explore the antibacterial activity of extract of Ginkgo biloba leaves on Porphyromonas gingivalis in vitro,and to provid pharmacological reference for developing a new type of antibacterial drugs in the treatment of periodontal disease.MethodsThis experiment was divided into negative control group,imipenem control group and different concentrations and forms of extract of Ginkgo biloba leaves groups.Solvent extraction method was used to extract the extract of Ginkgo biloba leaves,punching method and test tube method were performed to detect the antibacterial activity of extract of Ginkgo biloba leaves in anaerobic environment in vitro and compared with Staphylococcus aureus and E.coli.By observing the antibacterial ring diameter and determination of the minimum bacteriostasis concentration(MIC),the antibacterial activities of extract of Ginkgo biloba leaves in vitro were measured.ResultsIn the experiment of bacteriostatic ring,Porphyromonas gingivalis was treatedwith extract of Ginkgo biloba leaves,Ginkgo biloba leaf tablet and Ginkgo biloba soft capsule concentrate and 1∶4 diluent,the bacteriostatic ring diameters were decreased with the decreasing of the concentration.The maximum bacteriostatic diameter of Ginkgo biloba extract was 16.5 mm,and the maximum bacteriostasis diameters of Ginkgo biloba leaf tablet and soft capsule were 15.3 and 14.5 mm,respectively;the bacteriostatic diameter of the exact of Ginkgo biloba leaves was bigger than those of Ginkgo biloba leaf tablet and Ginkgo biloba soft capsule(P＜0.05), but there was no statistical difference of bacteriostatic diameter between Ginkgo biloba leaf tablet and Ginkgo biloba soft capsule(P＞0.05);E.coli and Staphylococcus aureus groups get the same results.When the concentration of extract of Ginkgo biloba leaves was more than 1.95 mg·L－1,there was no growth of Porphyromonas gingivalis but E.coli and Staphylococcus aureusa still grew;only the concentrations of exact of Girkgo biloba leaves were more than 6.25 and 12.5 mg·L－1,E.coli and Staphylococcus aureus didn’t grow;the bacteriostatic effect of extract of Ginkgo biloba on Porphromonas gingivalis was better than E.coli and Staphylococcus aureus.ConclusionExtract of Ginkgo biloba leaves has antibacterial effect on Porphyromonas gingivalis.

extract of Ginkgo biloba leaves;antibacterial activity;Porphyromonas gingivalis;Staphylococcus aureus;Escherichia coli

R285;R78

A

2013-12-09

吉林省科技廳科技發(fā)展計劃項目資助課題(20130206036YY);吉林省教育廳“十二五”科學技術(shù)研究項目資助課題(吉教科合字[2012]第163號)

姜迎春(1970－),男,吉林省延吉市人,主治醫(yī)師,在讀醫(yī)學碩士,主要從事牙周病學方面的研究。

李含薇(Tel:0432-64608113,E-mail:li65575147＠163.com)

1671-587Ⅹ(2014)05-1018-06

10.13481/j.1671-587x.20140522