朱惠照，鄭化先，王 瑛，李建淼，徐 靖，朱衛(wèi)東，李明焱，，?

（1.浙江壽仙谷醫(yī)藥股份有限公司，浙江武義 321200；2.金華壽仙谷藥業(yè)有限公司，浙江武義 321200；3.浙江省珍稀植物藥工程技術(shù)研究中心，浙江武義 321200）

靈芝品種仙芝1號(hào)的選育

朱惠照1，鄭化先1，王 瑛2，李建淼2，徐 靖3，朱衛(wèi)東1，李明焱1，2，3?

（1.浙江壽仙谷醫(yī)藥股份有限公司，浙江武義 321200；2.金華壽仙谷藥業(yè)有限公司，浙江武義 321200；3.浙江省珍稀植物藥工程技術(shù)研究中心，浙江武義 321200）

以一野生赤靈芝的分離組織為材料，采用紫外線誘變技術(shù)，經(jīng)菌株分離、培養(yǎng)等步驟，育成子實(shí)體和孢子產(chǎn)量高、抗逆性好、品質(zhì)優(yōu)的赤靈芝新品種仙芝1號(hào)。該品種于2009年通過(guò)浙江省非主要農(nóng)作物品種審定。采用袋料栽培，仙芝1號(hào)子實(shí)體鮮品、干品和孢子產(chǎn)量為（61.21±0.93），（19.28±0.47）和（16.05± 0.23）kg，靈芝多糖、三萜酸含量為2.13%±0.01%和0.67%±0.02%；采用段木栽培，仙芝1號(hào)子實(shí)體鮮品、干品和孢子產(chǎn)量為（95.88±0.26），（39.93±0.17）和（24.65±0.22）kg，粗多糖、三萜酸含量為2.47%± 0.08%和0.83%±0.06%。仙芝1號(hào)耐高溫上限為35℃，抗木霉、青霉、根霉和綠霉能力強(qiáng)，成品率達(dá)99%。

赤靈芝；仙芝1號(hào)；紫外線誘變；品種選育；品種比較

靈芝（Ganodermalucidum（Curtis）P.Karst.）又名赤芝、紅芝、靈芝草，入載《中國(guó)藥典》，自古作為“扶正固本，久食長(zhǎng)生”的傳統(tǒng)保健藥物［1］?，F(xiàn)代科學(xué)研究發(fā)現(xiàn)，靈芝富含多糖類、三萜類、肽類、核苷類、甾醇類、生物堿等活性成分，有雙向調(diào)節(jié)機(jī)體功能，具提高免疫力、抗輻射、抗缺氧、抗腫瘤、抗氧自由基、強(qiáng)心及保護(hù)心肌缺血、保肝、鎮(zhèn)靜安神、降壓、降血脂、降血糖、鎮(zhèn)咳、平喘等藥理作用［2－3］。

我國(guó)是靈芝3大主產(chǎn)國(guó)之一，但是主栽品種為日本紅芝、韓芝，缺乏具有自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)的優(yōu)良品種。上述2個(gè)主栽品種早年分別引自日本、韓國(guó)，因?yàn)殚L(zhǎng)期種植，種性已出現(xiàn)嚴(yán)重退化，因此生產(chǎn)上迫切需要新的替代品種。

本團(tuán)隊(duì)自20世紀(jì)90年代開始收集野生種質(zhì)資源，經(jīng)過(guò)十多年的努力，通過(guò)多代的分離、培養(yǎng)并結(jié)合紫外線誘變技術(shù)培育出了優(yōu)良赤芝新品種仙芝1號(hào)［4－5］，該品種于2009年通過(guò)了浙江省非主要農(nóng)作物品種審定?，F(xiàn)將選育過(guò)程和特征特性總結(jié)如下。

1 選育過(guò)程

1999年6月，從武義縣仙童村白洋山采集到一棵野生赤芝，子實(shí)體重1216g。同年，經(jīng)組織分離、培養(yǎng)獲10支試管種，編號(hào)為仙源1號(hào)至仙源10號(hào)。試管培養(yǎng)期間，發(fā)現(xiàn)其中仙源1號(hào)、仙源2號(hào)、仙源5號(hào)、仙源9號(hào)菌絲生長(zhǎng)較好，并進(jìn)行了保留。2000年，對(duì)該4菌株的發(fā)菌速度、成品率、產(chǎn)量等指標(biāo)進(jìn)行比較，發(fā)現(xiàn)仙源5號(hào)表現(xiàn)最優(yōu)。隨后，對(duì)仙源5號(hào)子實(shí)體進(jìn)行紫外線誘變，誘變后的子實(shí)體經(jīng)培養(yǎng)、分離等程序，又獲得15支試管種，編號(hào)為仙芝1號(hào)至仙芝15號(hào)。

2001年，將仙芝系列菌株與仙源5號(hào)進(jìn)行比較，因?yàn)椴糠志z生長(zhǎng)力較弱，在發(fā)菌階段即被淘汰，僅剩下1，2，3，5，8，10，12，14，15號(hào)等9個(gè)菌株與仙源5號(hào)進(jìn)行比較，結(jié)果（表1）仙芝1號(hào)綜合農(nóng)藝性狀表現(xiàn)最好，正式定名為仙芝1號(hào)。

2 形態(tài)特征

仙芝1號(hào)的菌蓋呈半圓形或腎形，木栓質(zhì)，紅褐色，富有光澤，有環(huán)狀棱紋和輻射狀皺紋（圖1）；菌柄側(cè)生，不規(guī)則圓柱形，紫褐色，有漆樣光澤（圖2）。

表1 仙芝系列赤靈芝菌株段木栽培農(nóng)藝性狀比較

圖1 靈芝仙芝1號(hào)與3個(gè)對(duì)照品種的菌蓋形態(tài)比較

圖2 靈芝仙芝1號(hào)的植株形態(tài)

3 品種比較

3.1 材料

試驗(yàn)在浙江壽仙谷醫(yī)藥股份有限公司武義縣桃溪灘靈芝栽培基地進(jìn)行，按照仿野生栽培方式種植于設(shè)施大棚內(nèi)。

仙芝1號(hào)、仙源5號(hào)由浙江省珍稀植物藥工程技術(shù)研究中心提供；日本紅芝、韓芝由上海市農(nóng)業(yè)科學(xué)院食用菌研究所提供。

3.2 方法

母種培養(yǎng)。采用PDA培養(yǎng)基，用接種針挑取黃豆大小的菌絲塊，轉(zhuǎn)接于滅菌后的試管斜面培養(yǎng)基中央，置28℃恒溫箱或培養(yǎng)室中避光發(fā)菌，待菌絲長(zhǎng)滿斜面后使用，或置4℃冰箱中先保存。

原種培養(yǎng)。培養(yǎng)基范圍較廣，可根據(jù)情況選用。培養(yǎng)基滅菌后溫度降至30℃以下時(shí)，在接種室（箱）內(nèi)按無(wú)菌操作接入母種，25～28℃下避光發(fā)菌。一般培養(yǎng)20～25d菌絲可長(zhǎng)滿瓶。

栽培種培養(yǎng)。培養(yǎng)基配方為木屑、麩皮、白糖、石膏粉等，含水量60%～65%。高壓滅菌，接種與培養(yǎng)方法同原種。

品種比較。以日本紅芝、韓芝和仙源5號(hào)為對(duì)照品種。試驗(yàn)同時(shí)采用袋料栽培和段木栽培2種方式，袋料栽培150袋，種植面積約16.7m2，段木栽培150段，約26.7m2，重復(fù)3次，2002－2005連續(xù)進(jìn)行4年。

3.3 結(jié)果與分析

3.3.1 子實(shí)體和孢子產(chǎn)量

表2顯示，無(wú)論是子實(shí)體產(chǎn)量還是孢子產(chǎn)量都是仙芝1號(hào)顯著高于對(duì)照。用袋料栽培，150袋仙芝1號(hào)的子實(shí)體鮮品、子實(shí)體干品和孢子產(chǎn)量分別為（61.21±0.93）kg，（19.28±0.47）kg和（16.05± 0.23）kg，比日本紅芝增加12.40%，37.90%和45.30%，比韓芝增加16.99%，40.13%和44.65%，比仙源5號(hào)增加8.92%，17.08%和12.12%；用段木栽培，150段仙芝1號(hào)的子實(shí)體鮮品、子實(shí)體干品和孢子產(chǎn)量分別為（95.88±0.26）kg，（39.93±0.17）kg和（24.65±0.22）kg，比日本紅芝增加26.17%，24.61%和61.92%，比韓芝增加21.54%， 23.32%和56.40%，比仙源5號(hào)增加16.59%，17.26%和15.60%。

表2 2002－2005年仙芝1號(hào)品比試驗(yàn)產(chǎn)量表現(xiàn)

3.3.2 靈芝多糖和三萜酸含量

靈芝多糖和三萜酸的含量是靈芝品質(zhì)的重要指標(biāo)。表3表明，用袋料栽培，仙芝1號(hào)子實(shí)體干品中的靈芝多糖、三萜酸含量分別為2.13%±0.01%和0.67%±0.02%，比日本紅芝增加40.13%和30.32%，比韓芝增加13.75%和13.43%，比仙源5號(hào)增加8.54%和6.52%；用段木栽培，仙芝1號(hào)的靈芝多糖、三萜酸含量分別為2.47%±0.08%和0.83%± 0.06%，比日本紅芝增加31.03%和39.04%，比韓芝增加21.20%和20.48%，比仙源5號(hào)增加15.73%和3.74%。

表3 2002－2005年仙芝1號(hào)品比試驗(yàn)子實(shí)體干品功效成分含量

3.3.3 菌株生長(zhǎng)速度、抗逆性

仙芝1號(hào)菌絲生長(zhǎng)速度較快，從接種到滿袋時(shí)間較比日本紅芝、韓芝和仙源5號(hào)分別縮短了6，3和2d；從接種到第1潮芝采收的時(shí)間比日本紅芝、韓芝和仙源5號(hào)分別縮短了3，4和2d。

仙芝1號(hào)抗木霉、青霉、根霉、綠霉能力強(qiáng)，其雜菌污染率為1.0%±0.0%，日本紅芝、韓芝和仙源5號(hào)分別為8.1%±0.1%，11.8%±0.3%和3.3%±0.1%。仙芝1號(hào)耐高溫能力強(qiáng)，在夏天大棚溫度高達(dá)33℃時(shí)，仍能良好生長(zhǎng)，菌蓋外形美觀，而日本紅芝、韓芝、仙源5號(hào)子實(shí)體停止生長(zhǎng)。綜合比較表明，仙芝1號(hào)耐高溫上限分別較日本紅芝和韓芝高3℃和5℃。

4 小結(jié)

紫外線誘變技術(shù)在真菌、細(xì)菌等微生物育種中較為常用，往往能獲得正向突變的菌株。通過(guò)品種比較試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，選育的靈芝新品種仙芝1號(hào)具有產(chǎn)量高、品質(zhì)優(yōu)、抗逆性強(qiáng)等特點(diǎn)，且它的優(yōu)良特性可穩(wěn)定遺傳。仙芝1號(hào)的成功選育將為我國(guó)靈芝種植提供優(yōu)良品種，替代目前已出現(xiàn)種性退化的日本紅芝和韓芝品種，有助于該產(chǎn)業(yè)的健康可持續(xù)發(fā)展。

［1］ 卯曉嵐.中國(guó)蕈菌［M］.北京：科學(xué)出版社，2009：624－625.

［2］ 活潑，馮緯，周利南，等.醬油渣發(fā)酵物對(duì)小鼠免疫功能影響的初步研究［J］.浙江農(nóng)業(yè)科學(xué)，2010（5）：431－433.

［3］ PatersonRR.Ganoderma-atherapeuticfungalbiofactory［J］.Phytochemistry，2006（18）：1985－2001.

［4］ 朱惠照，李明焱，楚桐麗，等.仙芝1號(hào)赤芝新品種鑒定［J］.食用菌學(xué)報(bào)，2009（3）：25－28.

［5］ 朱惠照，李明焱，楚桐麗，等.仙芝1號(hào)赤芝新品種穩(wěn)定性及品比試驗(yàn)［J］.食用菌，2010（2）：22－23.

（責(zé)任編輯：張才德）

S567.3

A

0528-9017（2014）08-1163-03

文獻(xiàn)著錄格式：朱惠照，鄭化先，王瑛，等，靈芝品種仙芝1號(hào)的選育［J］.浙江農(nóng)業(yè)科學(xué)，2014（8）：1163－1165.

2014-05-15

浙江省重點(diǎn)農(nóng)業(yè)科研項(xiàng)目（2006C22079）。

朱惠照（1964－），女，副研究員，主要從事珍稀食藥用菌和名貴中藥材的品種選育、栽培及新產(chǎn)品的研究開發(fā)和推廣工作。

李明焱，研究員。E-mail：zhenhao6＠126.com。