張彩,楊華元
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經(jīng)皮穴位電刺激對(duì)過度訓(xùn)練大鼠性腺軸的影響及機(jī)制研究
張彩,楊華元
(上海中醫(yī)藥大學(xué),上海 201203)
觀察經(jīng)皮穴位電刺激(transcutanclus electrical acupoint stimulation,TEAS)對(duì)過度訓(xùn)練大鼠性腺軸(HPG)的調(diào)控作用,并探討其機(jī)制。將32只雄性SD大鼠,隨機(jī)分為空白對(duì)照組、造模前干預(yù)組、造模后干預(yù)組和模型組,每組8只。采用遞增強(qiáng)度的跑臺(tái)建立過度訓(xùn)練大鼠模型。兩個(gè)干預(yù)組分別在造模前和造模后進(jìn)行TEAS干預(yù)。實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)取全血、下丘腦、垂體、杏仁核進(jìn)行檢測。熒光定量PCR檢測下丘腦促性腺激素釋放激素(Gonadotropin-releasing hormone,GnRH)mRNA與垂體GnRH-R mRNA的表達(dá);ELISA法檢測黃體生成素(Luteinizing Hormone, LH)、睪酮(Testosterone,T)濃度;ELISA法檢測杏仁核蛋白激酶C(Protein kinase C, PKC)、環(huán)磷酸鳥苷(cyclic Guanosine Monophosphate,cGMP)活性。與空白對(duì)照組比較,模型組垂體GnRH-R mRNA表達(dá)顯著下降(<0.05),T明顯降低(<0.05)提示實(shí)驗(yàn)中所采用的訓(xùn)練方案抑制了HPG軸的功能。造模前干預(yù)組與模型組比較,可以顯著增加垂體GnRH-R mRNA的表達(dá)(<0.05);造模后TEAS干預(yù)可以顯著增加運(yùn)動(dòng)機(jī)體下丘腦GnRH mRNA的表達(dá)與T水平(<0.05,<0.01)。與模型組比較,造模前干預(yù)組可以顯著提高杏仁核PKC活性(<0.01)。造模后干預(yù)組杏仁核cGMP活性顯著高于模型組(<0.05)。過度訓(xùn)練大鼠HPG軸功能處于抑制狀態(tài)。TEAS干預(yù)過度訓(xùn)練機(jī)體,可以提高HPG軸功能,但不同時(shí)間段進(jìn)行干預(yù),所影響的HPG軸的靶點(diǎn)有所不同。造模前TEAS干預(yù)運(yùn)動(dòng)機(jī)體是通過增加杏仁核PKC活性調(diào)整HPG功能,而造模后干預(yù)是通過加強(qiáng)杏仁核cGMP活性而調(diào)整HPG軸功能。
針刺療法;經(jīng)皮穴位電刺激;杏仁核;大鼠;過度訓(xùn)練;性腺軸;運(yùn)動(dòng)性疲勞(肌肉疲勞)
隨著全球經(jīng)濟(jì)的飛速發(fā)展,競技體育逐漸成為國家強(qiáng)盛的一個(gè)重要標(biāo)志,比賽競爭越來越激烈,各個(gè)訓(xùn)練隊(duì)、運(yùn)動(dòng)員為了追求成績而不斷增加訓(xùn)練負(fù)荷與強(qiáng)度,所以過度訓(xùn)練的現(xiàn)象在運(yùn)動(dòng)隊(duì)中非常普遍。過度訓(xùn)練是運(yùn)動(dòng)負(fù)荷與機(jī)體機(jī)能不相適應(yīng),以至疲勞連續(xù)累積而引起的一系列功能紊亂或病理狀態(tài)[1]。過度訓(xùn)練不僅會(huì)降低運(yùn)動(dòng)員的成績,甚至?xí)p傷運(yùn)動(dòng)機(jī)體,斷送運(yùn)動(dòng)員的運(yùn)動(dòng)生涯。如何防治過度訓(xùn)練成為體育科學(xué)與運(yùn)動(dòng)醫(yī)學(xué)的重要研究方向。運(yùn)動(dòng)與機(jī)體下丘腦-垂體-性腺軸(hypothalamic pituitary-gonad axis, HPG)關(guān)系密切,過度訓(xùn)練會(huì)抑制HPG軸功能[2-3]。而采用中藥、針灸等中醫(yī)手段可以調(diào)整HPG軸的功能,提高運(yùn)動(dòng)機(jī)能,防治過度訓(xùn)練的發(fā)生[2,4]。但中藥存在成分不明確、口味較苦的弊端,針刺又是一種微創(chuàng)的干預(yù)方法,很多運(yùn)動(dòng)員不愿意接受。經(jīng)皮穴位電刺激(transcutanclus electrical acupoint stimulation, TEAS)是將經(jīng)皮電神經(jīng)刺激療法(transcutanclus electrical nerve stimulation,TENS)與針灸穴位相結(jié)合的新型針灸治療方法,其克服了中藥與針灸的弊端。本研究以過度訓(xùn)練大鼠為研究對(duì)象,觀察TEAS對(duì)過度訓(xùn)練機(jī)體HPG軸的影響。并從調(diào)控下丘腦分泌功能的杏仁核內(nèi)信息轉(zhuǎn)導(dǎo)的變化[5-7],探究TEAS調(diào)控HPG軸的機(jī)制。
雄性SD大鼠32只,清潔級(jí),體重(250±10) g,由中國科學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供,動(dòng)物許可證編號(hào)[SCXK(滬2008-0016)]。訓(xùn)練過程中剔除出現(xiàn)以下兩種情況的動(dòng)物,①連續(xù)3 d都不能適應(yīng)跑臺(tái)的大鼠;②在訓(xùn)練過程中嚴(yán)重受傷的大鼠。
大鼠環(huán)磷酸鳥苷(cyclic guanosine monophosph- ate,cGMP)、大鼠蛋白激酶C(protein kinase C,PKC)、大鼠促黃體生成素(luteinizing hormone,LH)及酶聯(lián)免疫分析試劑盒,美國R&D公司提供;大鼠血清睪酮(testosterone,T)放射免疫試劑盒,北京北方生物技術(shù)研究所提供;Trizol,美國Invitrogen公司提供;逆轉(zhuǎn)錄cDNA合成試劑盒,立陶宛MBI公司(Fermentas)提供;SYBR Green PCR試劑盒,捷瑞生物科技公司提供;引物設(shè)計(jì)合成,捷瑞生物科技公司提供。
韓氏穴位神經(jīng)刺激儀(北京普康醫(yī)藥科技發(fā)展公司,型號(hào)LH402);六通道動(dòng)物跑臺(tái)(東西儀器科技有限公司,型號(hào)SLY-RTML);PCR儀(美國ABI公司,型號(hào)Step one Plus PCR);智能化g計(jì)數(shù)器(北京核儀器廠,型號(hào)FT646A3);多功能細(xì)胞定量分析儀(德國BEC KMAN公司,型號(hào)QUANTA SC);透射電子顯微鏡(荷蘭Philips,型號(hào)Tecnai-12 Biotwin);酶標(biāo)儀(美國BIO TEK公司,型號(hào)Bio-tek Synergy HT)。
1.4.1 訓(xùn)練模式
參考既往過度訓(xùn)練方案[8-11],本課題采用跑臺(tái)的運(yùn)動(dòng)方式,進(jìn)行遞增強(qiáng)度的模式,建立過度訓(xùn)練大鼠模型。大鼠適應(yīng)性喂養(yǎng)6 d后開始訓(xùn)練,訓(xùn)練持續(xù)8星期。運(yùn)動(dòng)方案見表1。
表 1 大鼠過度訓(xùn)練模型運(yùn)動(dòng)方案
1.4.2 實(shí)驗(yàn)分組方法
32只SD雄性大鼠隨機(jī)分為空白對(duì)照組、造模前干預(yù)組、造模后干預(yù)組和模型組,每組8只??瞻讓?duì)照組不訓(xùn)練、不干預(yù),常規(guī)飼養(yǎng);造模前干預(yù)組在TEAS干預(yù)2星期后,按照訓(xùn)練表1訓(xùn)練計(jì)劃進(jìn)行訓(xùn)練;造模后干預(yù)組按表1訓(xùn)練計(jì)劃訓(xùn)練8星期,再進(jìn)行TEAS干預(yù)2星期;模型組按表1訓(xùn)練方案進(jìn)行訓(xùn)練8星期,建立過度訓(xùn)練大鼠模型。
1.4.3 經(jīng)皮穴位電刺激干預(yù)方法
經(jīng)過文獻(xiàn)篩選,最終選擇雙側(cè)后三里(后肢內(nèi)踝高點(diǎn)直上10 mm處)與三陰交(后肢膝關(guān)節(jié)處下方約5 mm)。取穴方法參照《大鼠穴位圖譜》[12]。將大鼠穴位局部毛剃除,后三里直刺7 mm,三陰交直刺5 mm。將電極固定于相應(yīng)部位。治療參數(shù)為連續(xù)波,頻率為2 Hz,強(qiáng)度為5 mA,治療20 min。
1.4.4 動(dòng)物處理方法
實(shí)驗(yàn)干預(yù)后,大鼠經(jīng)0.4%戊巴比妥腹腔注射進(jìn)行麻醉,麻醉后左心室取血,取血后暴露心臟,左心室插管,剪開右心耳,先以生理鹽水迅速灌沖,再灌注4%多聚甲醛進(jìn)行固定,取出下丘腦、垂體、杏仁核,液氮保存。
1.4.5 指標(biāo)檢測方法
①血清T采用放射免疫法測量;②下丘腦GnRH mRNA檢測采用熒光定量PCR方法,第一步為組織總RNA的抽提;第二步為逆轉(zhuǎn)錄cDNA。③采用熒光定量法檢測垂體GnRH-R mRNA;④采用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中大鼠促黃體激素(LH)水平;⑤采用酶聯(lián)免疫分析(ELISA)檢測cGMP與PKC。
采用一般描述性分析,并利用SPSS13.0進(jìn)行方差分析,計(jì)量資料采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示。
2.1.1 各組大鼠下丘腦GnRH mRNA表達(dá)比較
造模后干預(yù)組大鼠下丘腦GnRH mRNA的表達(dá)最強(qiáng),與模型組比較,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(<0.05),提示模后進(jìn)行TEAS干預(yù)能增強(qiáng)運(yùn)動(dòng)機(jī)體下丘腦分泌GnRH的趨勢。詳見表2
表 2 各組大鼠下丘腦GnRH mRNA表達(dá)比較 (±s)
注:與模型組比較1)<0.05
2.1.2 各組大鼠垂體GnRH-R mRNA表達(dá)比較
模型組大鼠垂體GnRH-R mRNA表達(dá)顯著低于空白對(duì)照組(<0.05),提示該實(shí)驗(yàn)中的大強(qiáng)度訓(xùn)練一定程度上抑制了垂體GnRH-R基因的表達(dá)。造模前干預(yù)組大鼠垂體GnRH-R mRNA含量顯著高于模型組(<0.05),提示TEAS預(yù)刺激可以促進(jìn)機(jī)體垂體GnRH-R的分泌。詳見表3。
表 3 各組大鼠下丘腦GnRH-R mRNA表達(dá)比較 (±s)
注:與空白對(duì)照組比較1)<0.05;與造模前干預(yù)組比較2)<0.05
2.1.3 各組大鼠血清LH及血清T比較
各組大鼠血清LH含量比較,差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(>0.05)。模型組大鼠血清T含量明顯低于空白對(duì)照組(<0.05),提示本研究所采用的訓(xùn)練方案負(fù)荷過大,抑制了機(jī)體T的分泌。而造模后干預(yù)組大鼠血清T含量與模型組比較,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(<0.05),提示造模后TEAS干預(yù)能提高運(yùn)動(dòng)機(jī)體血清T的含量。詳見表4。
表 4 各組大鼠血清LH及血清T含量比較 (±s)
注:與模型組比較1)<0.05;與空白對(duì)照組比較2)<0.05
2.1.4 各組大鼠杏仁核內(nèi)PKC及cGMP活性比較
表 5 各組大鼠杏仁核內(nèi)PKC及cGMP活性比較 (±s)
注:與模型組比較1)<0.01,2)<0.05
模型組大鼠杏仁核內(nèi)PKC及cGMP含量均低于空白對(duì)照組,但差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(>0.05),提示過度訓(xùn)練可能導(dǎo)致大鼠杏仁核內(nèi)PKC及cGMP活性下降。
造模前干預(yù)組大鼠杏仁核內(nèi)PKC含量與模型組比較,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(<0.01)。造模后干預(yù)組大鼠杏仁核內(nèi)cGMP含量與模型組比較,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(<0.05)。詳見表5。
本課題以防治過度訓(xùn)練為著眼點(diǎn)切入,采用TEAS在實(shí)驗(yàn)的不同時(shí)間段干預(yù)運(yùn)動(dòng)機(jī)體,觀察TEAS對(duì)過度訓(xùn)練機(jī)體HPG軸各級(jí)分泌功能的影響,并研究杏仁核內(nèi)信息轉(zhuǎn)導(dǎo)的變化,探析杏仁核內(nèi)信息轉(zhuǎn)導(dǎo)的變化對(duì)HPG軸的影響。國內(nèi)外研究證實(shí)運(yùn)動(dòng)與HPG軸關(guān)系密切[13],其中與運(yùn)動(dòng)關(guān)系密切的T的分泌便是由HPG軸中第三級(jí)睪丸分泌。HPG軸最上級(jí)為下丘腦,下丘腦分泌GnRH,通過垂體門脈血流到達(dá)腺垂體,與垂體上的GnRH受體結(jié)合,促進(jìn)垂體分泌LH、FSH,LH經(jīng)血液循環(huán)到達(dá)性腺(睪丸),調(diào)節(jié)性腺的分泌T活動(dòng),最終影響機(jī)體的運(yùn)動(dòng)機(jī)能。下丘腦中許多神經(jīng)元具有內(nèi)分泌功能,可以分泌激素。GnRH主要由下丘腦的弓狀核、內(nèi)側(cè)視前區(qū)與室旁核等處分泌。GnRH的主要作用是促進(jìn)腺垂體合成和分泌促性腺激素,而下丘腦GnRH mRNA表達(dá)可以直接反應(yīng)下丘腦內(nèi)GnRH的含量。過度訓(xùn)練能反饋性抑制HPG軸的功能,引起下丘腦內(nèi)GnRH mRNA表達(dá)下降[14]。研究選擇足三里與三陰交兩個(gè)穴位,足三里為養(yǎng)生保健常用穴,是多氣多血足陽明胃經(jīng)之合穴,有調(diào)脾胃、養(yǎng)氣血、壯機(jī)體和助消化的作用。很多研究證實(shí)針刺足三里具有緩解運(yùn)動(dòng)性疲勞,提高運(yùn)動(dòng)機(jī)能的作用[15]。三陰交屬足太陰脾經(jīng),是肝經(jīng)、脾經(jīng)、腎經(jīng)的交會(huì)穴,具有健脾、補(bǔ)肝、益腎的功效。沈梅紅等[16]報(bào)道針刺骨折模型大鼠三陰交穴能增高血清T含量。TEAS干預(yù)足三里與三陰交,具有調(diào)補(bǔ)脾胃、補(bǔ)益肝腎的作用,可以緩解或治療“力勞”。而HPG軸的功能與中醫(yī)學(xué)“腎”的功能關(guān)系密切[17],TEAS干預(yù)機(jī)體能夠增強(qiáng)HPG軸的各級(jí)分泌功能。
垂體上的促性腺激素細(xì)胞膜上有GnRH的受體,GnRH與受體結(jié)合后,促進(jìn)下級(jí)激素表達(dá)。GnRH-R是GnRH發(fā)揮生物效應(yīng)的關(guān)鍵介導(dǎo)者,任何影響GnRH受體基因表達(dá)及蛋白表達(dá)量的因素均可影響GnRH的作用,從而影響HPG軸的功能。LH是屬于腺垂體分泌的激素,作用于睪丸,促進(jìn)睪丸分泌T。LH則主要作用于間質(zhì)細(xì)胞,LH還參與激素分泌的調(diào)節(jié),睪丸間質(zhì)細(xì)胞膜上存在LH受體。當(dāng)腺垂體分泌的LH與間質(zhì)細(xì)胞膜上的LH受體結(jié)合后,T合成增加。有研究提示高強(qiáng)度運(yùn)動(dòng)會(huì)抑制機(jī)體垂體分泌LH。本研究結(jié)果顯示,模型組大鼠血清LH低于空白對(duì)照組,但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(>0.05),這主要是因?yàn)榇筘?fù)荷訓(xùn)練抑制垂體LH的分泌。T是一種類固醇激素,由男性的睪丸或女性的卵巢分泌,具有維持肌肉質(zhì)量、維持骨質(zhì)密度及強(qiáng)度及增強(qiáng)體能等作用。T可促進(jìn)同化代謝,促進(jìn)蛋白質(zhì)的合成,使肌肉壯大,刺激紅細(xì)胞合成,加速血紅蛋白的合成,加速體內(nèi)抗體的形成,增強(qiáng)免疫功能和抗感染能力。T對(duì)提高力量、速度和耐力的訓(xùn)練效果均有益處,血清T水平是評(píng)定運(yùn)動(dòng)員機(jī)能狀態(tài)的重要指標(biāo)。過度訓(xùn)練會(huì)引起T水平下降,從而引起人體的運(yùn)動(dòng)機(jī)能下降,所以T下降可以作為機(jī)體過度訓(xùn)練的標(biāo)志。TEAS造模后干預(yù),具有治療過度訓(xùn)練的作用,通過調(diào)補(bǔ)肝腎可以提高大鼠血清T含量,促進(jìn)蛋白合成,增強(qiáng)大鼠的免疫力,增強(qiáng)其運(yùn)動(dòng)能力的作用。綜上分析,模型組大鼠垂體GnRH-R mRNA的表達(dá)顯著下降,垂體分泌的LH有下降趨勢,睪丸分泌的T顯著下降,說明本實(shí)驗(yàn)的訓(xùn)練方案抑制了運(yùn)動(dòng)機(jī)體HPG軸的各級(jí)分泌功能。
在實(shí)驗(yàn)的不同時(shí)間段進(jìn)行TEAS干預(yù)均可以不同程度的提高運(yùn)動(dòng)機(jī)體HPG軸各級(jí)分泌功能,但作用的靶點(diǎn)不同。訓(xùn)練前的干預(yù),即“預(yù)刺激”,可以提高大鼠垂體GnRH-R mRNA的表達(dá),增強(qiáng)垂體分泌LH與睪丸分泌T的功能。造模后TEAS干預(yù),可以增加大鼠下丘腦GnRH mRNA的表達(dá),提高大鼠的血清T與LH。從中醫(yī)學(xué)理論分析,造模前干預(yù),可以預(yù)先激發(fā)機(jī)體的經(jīng)絡(luò)之氣,增強(qiáng)肝脾腎功能,進(jìn)而提高大鼠的運(yùn)動(dòng)機(jī)能。而造模后干預(yù)則對(duì)過度訓(xùn)練大鼠具有治療作用,通過調(diào)補(bǔ)肝腎,調(diào)控改善大鼠的運(yùn)動(dòng)機(jī)能。
目前開展的很多相關(guān)研究從海馬內(nèi)神經(jīng)傳導(dǎo)變化,探究各種干預(yù)措施對(duì)運(yùn)動(dòng)機(jī)體的影響機(jī)制。本研究從杏仁核內(nèi)信息的轉(zhuǎn)導(dǎo),探究TEAS調(diào)控過度訓(xùn)練大鼠HPG軸的中樞機(jī)制之一。杏仁核通過內(nèi)側(cè)核群的神經(jīng)纖維影響下丘腦功能,而HPG軸的中樞部位為下丘腦,所以杏仁核對(duì)HPG軸具有一定的調(diào)控作用。本研究觀察杏仁核內(nèi)PKC、cGMP的活性改變,探究TEAS調(diào)控過度訓(xùn)練大鼠HPG中樞機(jī)制。PKC是杏仁核信息傳遞的中間物質(zhì),其活性增強(qiáng),提示杏仁核內(nèi)信息傳遞增強(qiáng),反之則信息傳遞減慢。而PKC活性下降,又會(huì)影響杏仁核內(nèi)信息傳導(dǎo),進(jìn)而抑制下丘腦分泌功能,從而抑制HPG軸功能。TEAS在不同的時(shí)間段干預(yù)過度訓(xùn)練機(jī)體,均可提高杏仁核PKC活性,尤其是造模前干預(yù),PKC活性高于模型組(<0.01),提示造模前TEAS干預(yù)訓(xùn)練機(jī)體,可以通過增強(qiáng)中樞杏仁核內(nèi)PKC活性,促進(jìn)杏仁核內(nèi)神經(jīng)遞質(zhì)的釋放,增強(qiáng)神經(jīng)突觸可塑性與基因表達(dá)等作用,進(jìn)而影響下丘腦分泌功能,增強(qiáng)HPG軸功能,進(jìn)而最終保護(hù)運(yùn)動(dòng)機(jī)體避免出現(xiàn)過度訓(xùn)練。
cGMP具有信息傳導(dǎo)作用,一般稱為第二信使。cGMP可以通過調(diào)控Ca2+的濃度,影響杏仁核神經(jīng)元的活性,影響下丘腦的分泌功能,最終調(diào)控HPG軸的各級(jí)分泌功能。在不同的時(shí)間段,TEAS干預(yù)運(yùn)動(dòng)機(jī)體,只有在造模后TEAS干預(yù)運(yùn)動(dòng)機(jī)體可以明顯增強(qiáng)cGMP活性。提示造模后TEAS干預(yù),可以提高杏仁核內(nèi)cGMP活性,促進(jìn)杏仁核內(nèi)信息傳遞,加強(qiáng)下丘腦內(nèi)分泌功能,進(jìn)而增強(qiáng)HPG軸的各級(jí)功能,提高運(yùn)動(dòng)能力。
綜上所述,TEAS干預(yù)運(yùn)動(dòng)機(jī)體可以通過調(diào)整HPG軸的各級(jí)分泌功能,防治過度訓(xùn)練的發(fā)生,提高運(yùn)動(dòng)機(jī)能,但造模前與造模后干預(yù)過度訓(xùn)練機(jī)體起作用的靶點(diǎn)與作用機(jī)制有所不同。
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Study of the Effect of TEAS on the HPG Axis and the Mechanism of Its Action in Overtraining Rats
,-.
,201203,
To investigate the regulating effect of transcutanclus electrical acupoint stimulation (TEAS) on the hypothalamic-pituitary-gonadal (HPG) axis and explore the mechanism of its action.Thirty-two male SD rats were randomly allocated to black control, before-model making intervention, after-model making intervention and model groups, 8 rats each. A rat model of overtraining was made by increasing intensity treadmill running. The two intervention groups were given TEAS before and after model making, respectively. At the end of experiment, the whole blood, hypothalamus, pituitary and amygdaloid nucleus were taken for examination. The expressions of gonadotropin-releasing hormone (GnRH) mRNA in the hypothalamus and GnRH-R mRNA in the pituitary were examined by fluorescent quantitative PCR. Luteinizing hormone (LH) and testosterone (T) concentrations and amygdala protein kinase C (PKC) and cyclic guanosine monophosphate (cGMP) activities were measured by ELISA.The expression of GnRH-R mRNA in the pituitary and T concentration decreased significantly in the model group compared with the blank control group (both<0.05), indicating that the training scheme used in the experiment inhibited the function of HPG axis. Pituitary expression of GnRH-R mRNA increased significantly in the before-model making intervention group compared with the model group (<0.05). TEAS intervention after model making significantly increased hypothalamic expression of GnRH-R mRNA and T levels in the moving bodies (<0.05,<0.01). Compared with the model group, amygdala PKC activity increased significantly in the before-model making intervention group (<0.01) and amygdala cGMP activity increased significantly in the after-model making intervention group (<0.05).The function of HPG axis is in an inhibitory state in overtraining rats. TEAS intervention can improve the function of HPG axis in overtraining bodies, but the target of HPG axis it affects is different if the intervention is made in a different time period. TEAS intervention before model making regulates the function of HPG axis by increasing amygdala PKC activity and TEAS intervention after model making regulates the function of HPG axis by increasing amygdala cGMP activity in moving bodies.
Acupuncture therapy; Transcutanclus electrical acupoint stimulation; Amygdaloid nucleus; Rats; Overtraining; Hypothalamic-pituitary-gonadal axis; Exercise-induced fatigue (muscle fatigue)
R2-03
A
10.13460/j.issn.1005-0957.2014.07.0680
1005-0957(2014)07-0680-04
張彩(1979 - ),女,講師
2014-01-28