鄭煒華　吳學(xué)周　張愛鵬

[摘要] 目的 觀察冠心病患者血液中miR-126表達的變化，探討其與冠脈病變、血脂相關(guān)的臨床意義。方法 收集2011年3月～2013年6月我院心內(nèi)科診治的冠心病患者98例，另取本院同期健康體檢者40例作為對照組。miR-126表達使用熒光定量PCR檢測。結(jié)果 對照組miR-126和HDL-C顯著高于冠心病組 （P <0.05），對照組TC 和LDL-C顯著低于冠心病組 （P <0.05）。miR-126、TC 、LDL-C和HDL-C表達在單支病變組、雙支病變組和多支病變組之間存在顯著性差異 （P <0.05）。miR-126與TC表達呈顯著負相關(guān)（r=-0.324， P <0.05），與LDL-C表達亦呈顯著負相關(guān)（r=-0.381， P <0.05），而與HDL-C表達呈顯著正相關(guān)（r=0.416，P <0.05）。 結(jié)論 冠心病患者中miR-126與TC和LDL-C表達呈顯著負相關(guān)，與HDL-C表達呈顯著正相關(guān)，miR-126表達隨著冠脈病變分支的增加而逐漸下調(diào)，miR-126的檢測可用于冠心病患者冠脈病變程度的評估。

[關(guān)鍵詞] 冠心?。籱iR-126；血脂

[中圖分類號] R587.2 [文獻標識碼] B [文章編號] 1673-9701（2014）12-0088-02

[Abstract] Objective To detect the expression of plasma circulating miR-126 and explore its clinical significance in patients with coronary atherosclerotic heart diease （CHD）. Methods A total of 98 patients with CHD were enrolled in this study. Another 40 healthy person were collected as control. The expression of miR-126 was detected with Real time-PCR assay. Results The expression of miR-126 and HDL-C in control group was higher than that in CHD group（P <0.05）. The expression of miR-126， TC， LDL-C and HDL-C were significant difference among single-vessel group， double-vessel group， and many-vessel group（P <0.05）. The expression of miR-126 was significantly negative correlation with TC （r = -0.324， P <0.05） and LDL-C（r = -0.381， P <0.05）. The expression of miR-126 was significantly positive correlation with HDL-C（r = 0.416， P <0.05）. Conclusion The low-level expression of miR-126 is found in CHD patients. The expression of miR-126 is gradually reduced according to increased coronary artery branch lesion. Detection of miR-126 may be used for early diagnosis and evaluation of CHD.

[Key words] Coronary atherosclerotic heart diease（CHD）； The miR-126； Lipid

microRNA（miRNA）是一類長約18～24 個核苷酸的小分子非編碼單鏈RNA，其通過與靶基因互補配對，在翻譯水平調(diào)控基因的表達[1]。miRNA廣泛表達于各種組織和器官，在細胞的增殖和凋亡、器官形成、血液形成、發(fā)育進程等生命過程中發(fā)揮著重要的作用[2]。miR-126是與血管內(nèi)皮細胞以及血管功能密切相關(guān)的一種miRNA，定位于表皮生長因子樣結(jié)構(gòu)域7基因7號內(nèi)含子區(qū)[3，4]。以動脈粥樣硬化病變?yōu)榛A(chǔ)的冠心?。╟oronary heart disease，CHD）是嚴重威脅人類健康的常見心血管疾病，本研究觀察了CHD患者血液循環(huán)中miR-126表達的變化，并探討其相關(guān)臨床意義。

1 材料與方法

1.1 臨床資料

收集2011年3月～2013年6月我院心內(nèi)科診治的冠心病患者98例，其中男52例，女46例，年齡51～75歲，平均（61.4±11.3）歲，所有冠心病患者均經(jīng)冠狀動脈造影檢查確診。根據(jù)冠脈病變范圍分為：30例單支病變組、36例雙支病變組、32例多支病變組。另取本院同期健康體檢者40例作為對照組，四組受試者在性別、年齡等一般臨床資料方面差異無統(tǒng)計學(xué)意義，具有可比性（P>0.05）。

1.2 血脂的檢測

總膽固醇（TC）、低密度脂蛋白 （LDL-C）、高密度脂蛋白（HDL-C）生化指標的檢測由檢驗科完成。

1.3 miR-126表達的熒光定量PCR（Real time-PCR）檢測

參照鄭志偉等[5]的方法，采集受試者靜脈血2 mL，3000 r/min 15min分離上清，加入Trizol（大連寶生物科技有限公司），按照試劑說明提取細胞總RNA，逆轉(zhuǎn)錄莖環(huán)引物和M-MLV逆轉(zhuǎn)錄酶（北京天根生物科技技術(shù)有限公司）反轉(zhuǎn)錄，TaqDNA聚合酶、Has-miR-126莖環(huán)引物和SYBR Green熒光染料（上海吉瑪生物科技技術(shù)有限公司）定量檢測miR-126的表達量。Has-miR-126莖環(huán)引物序列為5'-TATCCAGTGATTCCGACCGCCGCATGGAGTCTG-3'（sence）和5'- TCCGCTCTTGGTGTGGTGTGAGTCGC-3'（antisence），miR-126的表達量使用2-△Ct評估。endprint

1.4 統(tǒng)計學(xué)分析

應(yīng)用SPSS12.0統(tǒng)計軟件處理數(shù)據(jù)，計量資料以均數(shù)±標準差表示，兩樣本均數(shù)比較采用t檢驗，多組均數(shù)間的比較采用方差分析，Pearson相關(guān)性分析檢測各檢測指標的相關(guān)關(guān)系，P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 冠心病患者miR-126表達及其與血脂的關(guān)系

從表1可見，對照組miR-126和HDL-C顯著高于冠心病組（P < 0.05），對照組TC 和LDL-C顯著低于冠心病組（P < 0.05）。

3 討論

冠心病的發(fā)病機制目前尚未完全明了，因此臨床上也缺乏有效的防治手段，探尋冠心病的發(fā)病機制一直是學(xué)者們努力研究的方向[6]。血液循環(huán)中miRNA的變化與心血管疾病發(fā)病中的作用近年來逐漸受到關(guān)注，并已有研究使用循環(huán) miRNA作為心血管疾病診斷及藥物療效評價的生物標志物[7]。本研究采用莖環(huán)逆轉(zhuǎn)錄-熒光定量的方法檢測了98份冠心病患者血漿循環(huán)中miR-126的表達，與40份健康對照的血漿樣本比較，發(fā)現(xiàn)冠心病組miR-126表達顯著低于對照組，提示了miR-126表達的下調(diào)可能參與了冠心病的發(fā)生、發(fā)展過程。血脂的升高導(dǎo)致局部血管壁的脂質(zhì)沉積是冠心病動脈粥樣硬化病變的主要成因[8]， TC和LDL-C是致動脈粥樣硬化病變的主要血液因子，HDL-C是致動脈粥樣硬化病變保護因子，相關(guān)性分析顯示，miR-126與TC和LDL-C表達呈顯著負相關(guān)，與HDL-C表達呈顯著正相關(guān)，提示了miR-126可能調(diào)控著某些脂質(zhì)代謝相關(guān)的基因，冠心病患者中miR-126表達的下調(diào)可能導(dǎo)致了患者脂質(zhì)代謝的紊亂，其具體的作用機制還有待進一步的研究[9]。

本研究顯示了冠心病患者外周血液循環(huán)中miR-126表達有隨著冠脈病變分支的增加而逐漸減低的趨勢，提示了miR-126檢測可用于冠心病病變程度的評估。有研究顯示，miR-126可以調(diào)控血管內(nèi)皮生長因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）的表達[10]，大量的研究已證實VEGF在動脈粥樣硬化斑塊的增殖和活化中起著重要作用[11]，例如可以促進動脈粥樣硬化斑塊增殖過程中滋養(yǎng)血管的生長，以及巨噬細胞和單核細胞遷移到動脈粥樣硬化斑，參與到血管壁的慢性炎癥中[12]，這可能也是miR-126表達的下調(diào)致血管粥樣病變發(fā)展的一個機制。endprint

1.4 統(tǒng)計學(xué)分析

應(yīng)用SPSS12.0統(tǒng)計軟件處理數(shù)據(jù)，計量資料以均數(shù)±標準差表示，兩樣本均數(shù)比較采用t檢驗，多組均數(shù)間的比較采用方差分析，Pearson相關(guān)性分析檢測各檢測指標的相關(guān)關(guān)系，P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 冠心病患者miR-126表達及其與血脂的關(guān)系

從表1可見，對照組miR-126和HDL-C顯著高于冠心病組（P < 0.05），對照組TC 和LDL-C顯著低于冠心病組（P < 0.05）。

3 討論

冠心病的發(fā)病機制目前尚未完全明了，因此臨床上也缺乏有效的防治手段，探尋冠心病的發(fā)病機制一直是學(xué)者們努力研究的方向[6]。血液循環(huán)中miRNA的變化與心血管疾病發(fā)病中的作用近年來逐漸受到關(guān)注，并已有研究使用循環(huán) miRNA作為心血管疾病診斷及藥物療效評價的生物標志物[7]。本研究采用莖環(huán)逆轉(zhuǎn)錄-熒光定量的方法檢測了98份冠心病患者血漿循環(huán)中miR-126的表達，與40份健康對照的血漿樣本比較，發(fā)現(xiàn)冠心病組miR-126表達顯著低于對照組，提示了miR-126表達的下調(diào)可能參與了冠心病的發(fā)生、發(fā)展過程。血脂的升高導(dǎo)致局部血管壁的脂質(zhì)沉積是冠心病動脈粥樣硬化病變的主要成因[8]， TC和LDL-C是致動脈粥樣硬化病變的主要血液因子，HDL-C是致動脈粥樣硬化病變保護因子，相關(guān)性分析顯示，miR-126與TC和LDL-C表達呈顯著負相關(guān)，與HDL-C表達呈顯著正相關(guān)，提示了miR-126可能調(diào)控著某些脂質(zhì)代謝相關(guān)的基因，冠心病患者中miR-126表達的下調(diào)可能導(dǎo)致了患者脂質(zhì)代謝的紊亂，其具體的作用機制還有待進一步的研究[9]。

本研究顯示了冠心病患者外周血液循環(huán)中miR-126表達有隨著冠脈病變分支的增加而逐漸減低的趨勢，提示了miR-126檢測可用于冠心病病變程度的評估。有研究顯示，miR-126可以調(diào)控血管內(nèi)皮生長因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）的表達[10]，大量的研究已證實VEGF在動脈粥樣硬化斑塊的增殖和活化中起著重要作用[11]，例如可以促進動脈粥樣硬化斑塊增殖過程中滋養(yǎng)血管的生長，以及巨噬細胞和單核細胞遷移到動脈粥樣硬化斑，參與到血管壁的慢性炎癥中[12]，這可能也是miR-126表達的下調(diào)致血管粥樣病變發(fā)展的一個機制。endprint

1.4 統(tǒng)計學(xué)分析

應(yīng)用SPSS12.0統(tǒng)計軟件處理數(shù)據(jù)，計量資料以均數(shù)±標準差表示，兩樣本均數(shù)比較采用t檢驗，多組均數(shù)間的比較采用方差分析，Pearson相關(guān)性分析檢測各檢測指標的相關(guān)關(guān)系，P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 冠心病患者miR-126表達及其與血脂的關(guān)系

從表1可見，對照組miR-126和HDL-C顯著高于冠心病組（P < 0.05），對照組TC 和LDL-C顯著低于冠心病組（P < 0.05）。

3 討論

冠心病的發(fā)病機制目前尚未完全明了，因此臨床上也缺乏有效的防治手段，探尋冠心病的發(fā)病機制一直是學(xué)者們努力研究的方向[6]。血液循環(huán)中miRNA的變化與心血管疾病發(fā)病中的作用近年來逐漸受到關(guān)注，并已有研究使用循環(huán) miRNA作為心血管疾病診斷及藥物療效評價的生物標志物[7]。本研究采用莖環(huán)逆轉(zhuǎn)錄-熒光定量的方法檢測了98份冠心病患者血漿循環(huán)中miR-126的表達，與40份健康對照的血漿樣本比較，發(fā)現(xiàn)冠心病組miR-126表達顯著低于對照組，提示了miR-126表達的下調(diào)可能參與了冠心病的發(fā)生、發(fā)展過程。血脂的升高導(dǎo)致局部血管壁的脂質(zhì)沉積是冠心病動脈粥樣硬化病變的主要成因[8]， TC和LDL-C是致動脈粥樣硬化病變的主要血液因子，HDL-C是致動脈粥樣硬化病變保護因子，相關(guān)性分析顯示，miR-126與TC和LDL-C表達呈顯著負相關(guān)，與HDL-C表達呈顯著正相關(guān)，提示了miR-126可能調(diào)控著某些脂質(zhì)代謝相關(guān)的基因，冠心病患者中miR-126表達的下調(diào)可能導(dǎo)致了患者脂質(zhì)代謝的紊亂，其具體的作用機制還有待進一步的研究[9]。

本研究顯示了冠心病患者外周血液循環(huán)中miR-126表達有隨著冠脈病變分支的增加而逐漸減低的趨勢，提示了miR-126檢測可用于冠心病病變程度的評估。有研究顯示，miR-126可以調(diào)控血管內(nèi)皮生長因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）的表達[10]，大量的研究已證實VEGF在動脈粥樣硬化斑塊的增殖和活化中起著重要作用[11]，例如可以促進動脈粥樣硬化斑塊增殖過程中滋養(yǎng)血管的生長，以及巨噬細胞和單核細胞遷移到動脈粥樣硬化斑，參與到血管壁的慢性炎癥中[12]，這可能也是miR-126表達的下調(diào)致血管粥樣病變發(fā)展的一個機制。endprint