黃顯春

（重慶市渝北區(qū)第二人民醫(yī)院檢驗科，重慶 401147）

乙型肝炎病毒的臨床檢驗

黃顯春

（重慶市渝北區(qū)第二人民醫(yī)院檢驗科，重慶 401147）

目的討論定量檢測和定性檢測乙型肝炎病毒五項血清學(xué)標(biāo)志物的結(jié)果，為臨床檢驗提供一定的理論依據(jù)。方法對從2011年8月至2013年7月到我院住院或門診就診乙型肝炎100例患者進(jìn)行乙型肝炎病毒五項血清學(xué)標(biāo)志物得定量與定性檢測，進(jìn)行回顧性分析。結(jié)果乙型肝炎五項指標(biāo)中HBsAg、HBsAb、HBeAg、HbcAb的定量檢測優(yōu)于定性檢測，但在例數(shù)上無顯著性差異（P>0.05），HBeAb的定量和定性檢測結(jié)果具有顯著性差異（P<0.01）。結(jié)論CLIA定量分析靈敏性和特異性更高，可以很好的彌補乙型肝炎定性檢驗的不足，具有一定的臨床實用價值和發(fā)展前景。

乙型肝炎；乙型肝炎五項；定量檢測；定性檢測

乙型肝炎是由乙型肝炎病毒（HBV）引起的一種肝臟炎性病變，廣泛流行于世界各國，有文獻(xiàn)報道全球約1/2的人口生活在乙型肝炎病毒高流行區(qū)，約20億人被證實有HBV感染，3～4億人為HBV慢性感染，每年約有100萬人死于HBV感染所致的肝衰竭、肝硬化和原發(fā)性肝細(xì)胞癌（HCC）[1-4]，其顯然已成為嚴(yán)重威脅世界人類健康的疾病，也是當(dāng)前流行最為廣泛、危害性最為嚴(yán)重的一種疾病。乙型肝炎分急性和慢性兩種，急性患者在成年人中90%可自愈，而慢性患者則可分為慢性乙型肝炎攜帶者、慢性活動性乙型肝炎、乙型肝炎肝硬化等。

目前乙型肝炎病毒的臨床檢驗最常見的方法是進(jìn)行“乙型肝炎抗原二對半”驗血體檢，二對半包括5項內(nèi)容：乙型肝炎表面抗原、乙型肝炎表面抗體、乙型肝炎e抗原、乙型肝炎e抗體、乙型肝炎核心抗體，簡稱“乙型肝炎五項”。檢驗方法分為可以定性的方法如酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）等，以及可以定量的方法如化學(xué)發(fā)光免疫分析法（CLIA）等。酶聯(lián)免疫吸附試驗只能提供陽性或陰性結(jié)果，且易出現(xiàn)假陰性，干擾臨床診斷；定量檢測乙型肝炎五項則能提供乙型肝炎病毒標(biāo)志物的精確含量，為臨床檢驗提供有益指導(dǎo)，在臨床使用上具有較大的實用性[5,6]?，F(xiàn)就我院從2011年8月至2013年7月住院或門診就診的乙型肝炎患者的臨床檢驗進(jìn)行回顧性分析，將乙型肝炎五項定性檢測與定量檢測的結(jié)果作對比，報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料：選擇從2011年8月至2013年7月到我院住院或門診就診乙型肝炎患者100例。其中男58例，女42例，年齡范圍15～68歲，平均年齡（34.7±6.4）歲。

1.2 方法：分別取5 mL患者靜脈血，立即離心分離，得到血清于-30 ℃環(huán)境下冷凍保存。ELISA法和CLIA法使用的試劑由深圳市安群生物工程有限公司生產(chǎn)。ELISA法使用550酶標(biāo)儀（美國Bio-Rad公司，美國），CLIA法使用KPS-KM化學(xué)發(fā)光免疫分析儀（石家莊康普生科技有限公司，石家莊，中國）。分別使用CLIA法和ELISA法對100例樣本進(jìn)行乙型肝炎病毒五項血清學(xué)標(biāo)志物的定量與定性檢測；設(shè)定乙型肝炎病毒五項血清學(xué)標(biāo)志物第1～5項的順序為：乙型肝炎表面抗原（HBsAg）、乙型肝炎表面抗體（HBsAb）、乙型肝炎e抗原（HBeAg）、乙型肝炎e抗體（HBeAb）、乙型肝炎核心抗體（HBcAb）。

1.3 統(tǒng)計學(xué)處理：采用SPSS 15.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行統(tǒng)計分析，計數(shù)資料采用χ2檢驗，P<0.05認(rèn)為差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié) 果

乙型肝炎五項指標(biāo)定性與定量檢測結(jié)果詳見表l。由結(jié)果可知，HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBcAb的定量檢測優(yōu)于定性檢測，但在例數(shù)上無顯著性差異（P>0.05），HBeAb的定量和定性檢測結(jié)果具有顯著性差異（P<0.01）。

3 討 論

乙型肝炎病毒五項血清學(xué)指標(biāo)的變化是評估乙型肝炎患者病情轉(zhuǎn)歸的重要依據(jù)，也是考察療效的指標(biāo)之一。乙型肝炎病毒五項標(biāo)志物檢測方法有許多，目前廣泛用于臨床的有酶聯(lián)免疫檢驗法、免疫熒光測定技術(shù)、化學(xué)發(fā)光免疫分析技術(shù)、PCR技術(shù)等。酶聯(lián)免疫檢驗法是一種特殊的試劑分析方法，是在免疫酶技術(shù)的基礎(chǔ)上發(fā)展起來的一種新型的免疫測定技術(shù)。因其具有靈敏度高、特異性強、操作簡便等特點，因此被廣泛應(yīng)用各項臨床檢驗[7,8]。但是，由于ELISA對乙型肝炎五項血清標(biāo)志物只能定性檢測來判斷陰性陽性測定，無法得知其真正的濃度，很容易造成漏檢。一組來自于衛(wèi)生部臨檢中心針對上百家醫(yī)院和血站實驗室檢測的質(zhì)量控制報告數(shù)據(jù)顯示，未使用室內(nèi)質(zhì)控血清實驗室的測定總錯誤率高達(dá)73.6%，其中弱陽性標(biāo)本的測定錯誤率最高，達(dá)68.8%，即便使用了室內(nèi)質(zhì)控血清，弱陽性標(biāo)本的測定錯誤率仍高達(dá)35.2%[9]。

化學(xué)發(fā)光免疫分析是上世紀(jì)70年代中期發(fā)展起來的一項超微量活性物質(zhì)檢測技術(shù)，時至今日，近年來得到了快速的發(fā)展和推廣，成為目前最先進(jìn)的標(biāo)記免疫測定技術(shù)。其原理是將發(fā)光物質(zhì)直接標(biāo)記于抗原、抗體上，經(jīng)氧化劑或催化劑激發(fā)后可快速穩(wěn)定的發(fā)光，其產(chǎn)生的光量子的強度與所測抗原抗體的濃度成比例，從而定量得到待檢物質(zhì)的濃度，廣泛應(yīng)用于各種抗原、抗體、激素、酶、維生素和藥物等的檢測，具有靈敏度高、特異性好、試劑低廉穩(wěn)定、操作簡單等優(yōu)點[10-13]。運用CLIA法對乙型肝炎五項進(jìn)行定量檢測，極大地彌補了酶聯(lián)免疫檢驗法定性檢測的不足。

本組對100例乙型肝炎患者進(jìn)行了ELISA定性和CLIA定量的對比檢驗，結(jié)果表明，乙型肝炎五項指標(biāo)中HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBcAb的定量檢測優(yōu)于定性檢測，但在例數(shù)上無顯著性差異（P>0.05），HBeAb的定量和定性檢測結(jié)果具有顯著性差異（P<0.01），表明CLIA定量分析靈敏性和特異性更高，可以很好的彌補乙型肝炎定性檢驗的不足，具有一定的臨床實用價值和發(fā)展前景。

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表1 乙型肝炎五項指標(biāo)定性與定量檢測結(jié)果（n=100）

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