鄧常春
臨床細(xì)菌感染是細(xì)菌與機(jī)體相互作用的一種主要形式,人體的免疫力是針對(duì)細(xì)菌致病力主要的抑制和抵抗因素,但有時(shí)也是機(jī)體組織損傷的原因之一。致病菌入侵機(jī)體后,主要會(huì)發(fā)生兩種的反應(yīng),一種是在機(jī)體建立感染,另一種是激發(fā)宿主的免疫系統(tǒng)迅速的發(fā)生一系列免疫反應(yīng)以對(duì)抗感染,在這個(gè)過程中,淋巴細(xì)胞是產(chǎn)生免疫應(yīng)答的主要功能細(xì)胞,它在抵抗細(xì)菌感染中發(fā)揮了重要作用。從很大程度上來說,淋巴細(xì)胞的數(shù)量越多,機(jī)體的免疫功能就越強(qiáng),因此淋巴細(xì)胞及其亞群的測(cè)定能夠作為反映機(jī)體免疫功能狀態(tài)的一個(gè)重要指標(biāo),為臨床診斷和治療提供一定的依據(jù)。為了對(duì)不同細(xì)菌種屬感染患者機(jī)體內(nèi)免疫功能的變化進(jìn)行分析和探討,本研究選擇60 例細(xì)菌感染患者,回顧性分析其外周血的淋巴細(xì)胞亞群的測(cè)定情況,并通過分析找出不同細(xì)菌種屬感染患者血液中淋巴細(xì)胞亞群的變化規(guī)律,以期為臨床細(xì)菌感染的治療提供可靠的參考和依據(jù),現(xiàn)將具體臨床研究報(bào)道如下。
1.1 一般資料 隨機(jī)選取2012年8月~2013年3月在韶關(guān)市第一人民醫(yī)院進(jìn)行治療的60 例細(xì)菌感染患者作為感染組,所有患者經(jīng)檢查均符合世界衛(wèi)生組織WHO 診斷標(biāo)準(zhǔn),確診為病原菌感染者,其中男45 例,女15 例,年齡15~60 歲,平均年齡(38±21)歲。本組患者均為常見病毒感染,患者除感染外沒有其它會(huì)對(duì)機(jī)體免疫功能產(chǎn)生影響的疾病,且患者的免疫學(xué)及基因診斷資料和淋巴細(xì)胞亞群檢測(cè)資料都齊全。選擇同期在本院進(jìn)行體檢的健康者400 例作為對(duì)照組,其中男296 例,女104 例,年齡14~61 歲,平均年齡(42±22)歲。2 組研究者在性別、年齡、體質(zhì)量等方面比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,具有可比性。
1.2 主要儀器和試劑 本次研究的儀器采用由法國梅里埃提供的細(xì)菌鑒定/藥敏分析儀V 1TE K 2.Com pact,并選擇由美國貝克曼庫爾特有限公司提供的流式細(xì)胞儀。試劑選擇由法國梅里埃公司提供的革蘭陰性菌鑒定卡GN 和革蘭陽性菌鑒定卡GP,由中山大學(xué)達(dá)安基因股份有限公司提供的各類病毒DNA及RNA 測(cè)定試劑盒,還有由美國BECK-MAN-COULTER公司提供的同型對(duì)照抗體IgG 1-FITC/IgG 1-PE/IgG-PC 5,測(cè)定抗體CD 3-PC 5/CD 16/56-FITC、CD 3-FITC/CD 19-PE 還有CD 3-PC 5/CD 4-FITC/CD 8-PE,以及標(biāo)本預(yù)處理試劑和Flow-Count 標(biāo)準(zhǔn)熒光微球等。
1.3 實(shí)驗(yàn)方法 在晨起后空腹對(duì)所有細(xì)菌感染患者抽取2 mL 靜脈血液置于EDTA.K2 提前抗凝的試管中,然后采用美國貝克曼庫爾特流式細(xì)胞儀對(duì)其進(jìn)行ED-TA-K2抗凝,以參考文獻(xiàn)[2-3]中的具體檢測(cè)方法為參照進(jìn)行操作。
1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 15.0 統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)統(tǒng)計(jì)所得的具體數(shù)據(jù)進(jìn)行分析,所有正態(tài)計(jì)量資料用均t 檢驗(yàn),所有正態(tài)計(jì)量資料用“±s”表示,計(jì)數(shù)資料比較采用χ2檢驗(yàn),P<0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
2.1 2 組研究對(duì)象淋巴細(xì)胞亞群檢測(cè)結(jié)果比較分析 對(duì)2組研究對(duì)象感染組淋巴細(xì)胞亞群檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行比較,由表中數(shù)據(jù)可知,感染組患者的T 4 細(xì)胞、T 8 細(xì)胞均明顯高于對(duì)照組,且2組相比差異具有顯著性(P<0.01);而其T 4/T 8 值、DN-T 細(xì)胞數(shù)值也明顯高于對(duì)照組,且2 組相比差異具有顯著性(P<0.05);2 組研究對(duì)象的總T 細(xì)胞、DP-T 細(xì)胞、B 細(xì)胞還有NK 細(xì)胞進(jìn)行比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(見表1)。
2.2 不同細(xì)菌種屬感染患者淋巴細(xì)胞亞群檢測(cè)結(jié)果 感染組患者淋巴細(xì)胞亞群檢測(cè)結(jié)果見表2,由表中數(shù)據(jù)可知,本組30 例細(xì)菌感染患者中,葡萄球菌感染患者有10 例,鏈球菌感染患者有8 例,與對(duì)照組相比,感染組患者各淋巴細(xì)胞亞群間比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;銅綠假單胞菌感染患者有6 例,與對(duì)照組相比,感染組患者的T 8 細(xì)胞、B 細(xì)胞水平較高,而T 4 細(xì)胞、T 4/T 8 值、NK 細(xì)胞數(shù)值則較低,且2 組相比差異具有顯著性(P<0.05);不動(dòng)桿菌感染患者有4 例,與對(duì)照組相比,感染組患者的T 8 細(xì)胞水平較高,T 4 細(xì)胞、T 4/T 8 值、NK 細(xì)胞數(shù)值則較低,且2 組相比差異具有顯著性(P<0.05);克雷伯菌感染患者有12 例,腸桿菌感染患者有8 例,與對(duì)照組相比,感染組患者的T 8 細(xì)胞水平較高,T 4 細(xì)胞、T 4/T 8 值則較低,且2 組相比差異具有顯著性(P<0.05);結(jié)核桿菌感染患者有12 例,與對(duì)照組相比,感染組患者的NK 細(xì)胞水平較高,T 4 細(xì)胞、T 4/T 8 值則較低,且2 組相比差異具有顯著性(P<0.05)。
表1 淋巴細(xì)胞亞群檢測(cè)結(jié)果
表2 不同細(xì)菌種屬感染患者淋巴細(xì)胞亞群檢測(cè)結(jié)果
在機(jī)體免疫功能系統(tǒng)中,淋巴細(xì)胞是最重要的一個(gè)細(xì)胞群,當(dāng)人的身體狀況處于正常水平的情況下,各種淋巴細(xì)胞亞群的數(shù)量和比例都會(huì)保持一定,并通過相互之間的作用進(jìn)行調(diào)節(jié)和平衡,進(jìn)而使機(jī)體能夠維持正常的免疫功能。而如果機(jī)體的淋巴細(xì)胞亞群的數(shù)量或功能出現(xiàn)異常的改變的時(shí)候,機(jī)體的免疫功能就會(huì)受到影響,進(jìn)而出現(xiàn)一系列的病理變化,在這種情況下就為細(xì)菌以及病毒等病原物質(zhì)入侵機(jī)體創(chuàng)造了機(jī)會(huì)。
在本組研究中,60 例S 細(xì)菌感染患者中其中感染菌種最多的是克雷伯菌和結(jié)核桿菌,其次為葡萄球菌、腸桿菌。且患者的機(jī)體免疫功能在不同細(xì)菌種屬感染下有著不同的反應(yīng)表現(xiàn)。由表1我們可以看出,感染組T 4 細(xì)胞低于對(duì)照組,而T 8 細(xì)胞卻高于對(duì)照組,T 8 細(xì)胞是Tc 細(xì)胞介導(dǎo)反應(yīng)的效應(yīng)細(xì)胞,它能夠同時(shí)抑制B 細(xì)胞產(chǎn)生抗體以及Th 細(xì)胞產(chǎn)生IL-2,其數(shù)量的增多表示機(jī)體的免疫受到了抑制;另外,T 4/T 8 的比值所表示的是Th與Ts 之間功能的平衡狀態(tài),感染組與對(duì)照組相比有所下降,這又為機(jī)體免疫功能下降提供了一個(gè)依據(jù),說明細(xì)菌感染會(huì)引起患者自身免疫功能的降低,影響患者的抵抗力。
DN-T 細(xì)胞和DP-T 細(xì)胞這兩種細(xì)胞的作用就是對(duì)細(xì)菌感染后T 細(xì)胞分化發(fā)育及其細(xì)胞的功能狀態(tài)進(jìn)行體現(xiàn)和反映,在本組研究中,與對(duì)照組相比,不動(dòng)桿菌感染者的DN-T 細(xì)胞和DP-T 細(xì)胞有所降低,提示感染組的T 細(xì)胞分化發(fā)育受到抑制,細(xì)胞功能障礙;另外,NK 細(xì)胞降低提示感染者非特異性免疫功能也有所降低。B 細(xì)胞不僅參與抗原提成和分泌細(xì)胞因子凋節(jié)免疫,同時(shí)還可以通過產(chǎn)生抗體作為體液免疫的介導(dǎo),這有利于機(jī)體對(duì)胞外細(xì)菌感染的抵抗作用。在本組研究中,從表1 可以看出,感染組與對(duì)照組的B 細(xì)胞數(shù)相比無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,此現(xiàn)象可能與感染細(xì)菌種屬較多有關(guān);而在表2 中,我們可以看出,銅綠假單胞菌感染的患者其B 細(xì)胞明顯高于對(duì)照組,且差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),這說明感染銅綠假單胞菌的患者在受到細(xì)菌侵染后,機(jī)體內(nèi)部體液免疫的功能有所增強(qiáng)。
NK 細(xì)胞屬于固有免疫細(xì)胞,是抗腫瘤免疫的第一道防線,不需要抗原預(yù)先致敏就可以直接殺傷腫瘤細(xì)胞、病毒及寄生菌感染的靶細(xì)胞,并且還可以通過分泌IFN-γ 和TNF-α 等細(xì)胞因子促進(jìn)機(jī)體的免疫調(diào)節(jié)作用,對(duì)于機(jī)體保持正常也起到了關(guān)鍵作用[5]。從表1 中我們可以看出,感染組患者NK 細(xì)胞水平與對(duì)照組相比無顯著差異,這可能是因?yàn)楸窘M患者均未發(fā)生病毒感染。劉艷華等[6]通過研究指出結(jié)核桿菌感染患者的NK 細(xì)胞水平會(huì)發(fā)生升高,這剛好與本次研究結(jié)果一致。究其原因,可能是因?yàn)榻Y(jié)核桿菌屬于胞內(nèi)寄生菌,主要寄生在細(xì)胞的內(nèi)部,因此會(huì)促使非特異性免疫相對(duì)提高,而體液免疫和細(xì)胞免疫都有所下降[7]。另外,通過研究我們還發(fā)現(xiàn),機(jī)體在遭受大部分細(xì)菌的感染之后其免疫功能都或多或少的受到抑制,但是鏈球菌感染者和葡萄球菌感染者的各淋巴細(xì)胞亞群并沒有受到很明顯的影響,2 組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,這可能是因?yàn)楸敬窝芯繕颖纠龜?shù)較少,建議選擇更多的樣本例數(shù)進(jìn)入深入研究。
淋巴細(xì)胞是免疫功能細(xì)胞,在抗感染尤其是細(xì)菌感染中發(fā)揮了非常重要的作用。當(dāng)機(jī)體處于正常狀態(tài)時(shí),體內(nèi)的淋巴細(xì)胞亞群保持著一定的數(shù)量和比例,使機(jī)體的免疫功能得到平衡和穩(wěn)定。但是在外源性病原微生物的侵襲下,機(jī)體的免疫平衡被打破,致使體內(nèi)的各淋巴細(xì)胞亞群在數(shù)量和比例上出現(xiàn)異常,這就為臨床提供了可靠的治療依據(jù)。
[1]吳麗娟.臨床流式細(xì)胞學(xué)檢驗(yàn)技術(shù)[M].人民軍醫(yī)出版社,2010:81,86-87,121,126.
[2]莫楊,許小東.流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)體液T 淋巴細(xì)胞亞群的臨床應(yīng)用[J].國際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2010,31(11):50-51.
[3]王宏濤,張章,范萌,等.CD 112(Nectin 2/PRR 2)在結(jié)腸癌的表達(dá)及其臨床意義[J].細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志,2010,26(9):477-479.
[4]Tupin E,KinjoY,Kronenberg M .The unique role of natural killer Tcells in the response to microorganisms[J].Natrue Rev Micro,2007,5(5):405-417.
[5]劉艷華,王心靜,曹志紅,等.結(jié)核病患者外周血iNKT 細(xì)胞的數(shù)量顯著降低[J].細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志,2010,26(10):1017-1019.
[6]鄒自英,朱冰,吳麗娟,等.不同種屬細(xì)菌感染患者機(jī)體免疫功能變化的實(shí)驗(yàn)研究[J].實(shí)驗(yàn)與檢驗(yàn)醫(yī)學(xué),2011,29(6):605-608.
[7]包東武.不同細(xì)菌種屬感染患者機(jī)體免疫功能變化分析[J].中國實(shí)用醫(yī)藥,2013,8(11):107-108.