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        6—BA濃度對(duì)桔梗胚珠愈傷組織分化率的影響

        2014-05-30 10:48:04徐芳芳趙麗莉荀洋等
        安徽農(nóng)業(yè)科學(xué) 2014年9期
        關(guān)鍵詞:塊數(shù)胚珠桔梗

        徐芳芳 趙麗莉 荀洋等

        摘要[目的]研究6BA濃度對(duì)桔梗胚珠愈傷組織分化率的影響。[方法]以桔梗未受精胚珠為外植體,利用N6+1.0 mg/L 2,4D+01 mg/L KT培養(yǎng)基誘導(dǎo)出的愈傷組織作為接種材料,分別接在0.5 mg/L NAA與不同6BA濃度的分化培養(yǎng)基上,對(duì)其愈傷組織分化率進(jìn)行研究。[結(jié)果]6BA濃度在0.25、1.25和1.00 mg/L(即3種分化培養(yǎng)基為N6+0.5 mg/L NAA+0.25 mg/L 6BA、N6+0.5 mg/L NAA+1.25 mg/L 6BA、N6 +0.5 mg/L NAA + 1.00 mg/L 6BA)時(shí)的分化率高,分別為88.3%、85.0%和80.0%。[結(jié)論]6BA濃度為0.25 mg/L 時(shí)有利于桔梗未受精胚珠愈傷組織的分化。

        關(guān)鍵詞桔梗;胚珠;愈傷組織;分化率; 6BA

        中圖分類(lèi)號(hào)S682.1+9文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼A文章編號(hào)0517-6611(2014)09-02552-02

        作者簡(jiǎn)介徐芳芳(1989- ),女,吉林白城人,碩士研究生,研究方向:作物遺傳育種。*通訊作者,副教授,博士,從事中藥材桔梗的栽培和育種方面的研究。

        桔梗[Platycodon grandiflorum(Jacq.) A.DC.]為桔??平酃伲≒latycodon)多年生直立草本植物,別名道拉基、綠花根、鈴鐺花、四葉菜等。桔梗既是一種資源植物又是一種藥、食、觀賞兼用的經(jīng)濟(jì)植物[1]。近年來(lái),國(guó)內(nèi)外市場(chǎng)對(duì)桔梗的需求量急增,導(dǎo)致價(jià)格上漲,由此也推動(dòng)了桔梗生產(chǎn)的發(fā)展。但是目前,桔梗生產(chǎn)中存在的主要問(wèn)題是質(zhì)量上不去,造成上等品緊缺,次等品積壓。造成這種局面的主要原因是品種混亂和種子質(zhì)量低劣等。

        桔梗是異花授粉植物,主要進(jìn)行有性繁殖,自然界中和生產(chǎn)上推廣的桔梗是混雜的群體,到目前為止還沒(méi)有純系,這嚴(yán)重影響著桔梗遺傳規(guī)律的研究和雜種優(yōu)勢(shì)的利用。而通過(guò)花藥培養(yǎng)和胚珠培養(yǎng)獲得單倍體,采用秋水仙素進(jìn)行染色體加倍的途徑可以培育出桔梗純系,可為今后桔梗自交系的培育提供理論依據(jù)和試驗(yàn)材料。

        以桔梗種子萌發(fā)的無(wú)菌苗葉片、莖段和莖尖為外植體進(jìn)行組織培養(yǎng)已有報(bào)道[2-3],但以桔梗未受精胚珠作為外植體誘導(dǎo)組培苗的研究報(bào)道卻很少見(jiàn)。筆者以未受精桔梗胚珠為試驗(yàn)材料,N6作為基本培養(yǎng)基,以1.0 mg/L 2,4D + 0.1 mg/L KT為誘導(dǎo)培養(yǎng)基誘導(dǎo)出的愈傷組織作為分化培養(yǎng)的接種材料,將其分別接在添加0.5 mg/L NAA與不同6BA濃度組合的分化培養(yǎng)基中,以篩選出適于桔梗胚珠愈傷組織的分化培養(yǎng)基,從而為今后桔梗未受精胚珠組織培養(yǎng)研究提供依據(jù)。

        1材料與方法

        1.1材料誘導(dǎo)培養(yǎng)基是以N6作為基本培養(yǎng)基,添加1.0 mg/L 2,4D + 0.1 mg/L KT;瓊脂為7 g/L,蔗糖為50 g/L,pH值為5.8。取單核胚囊期[4](1.7 cm左右的花蕾)的胚珠消毒,將消毒好的花蕾用解剖刀剖離,取出胚珠接到誘導(dǎo)培養(yǎng)基上,在溫度為25 ℃,12~14 h光照條件下培養(yǎng)40 d,以此愈傷組織作為分化培養(yǎng)的接種材料。

        1.2分化培養(yǎng)基的配方分化培養(yǎng)基以N6為基本培養(yǎng)基,生長(zhǎng)素為0.5 mg/L NAA,細(xì)胞分裂素為不同濃度的6BA,8種組合如表1所示。各組培養(yǎng)基加入瓊脂為7 g/L,蔗糖為50 g/L,pH值為5.8。

        1.3接種方法將誘導(dǎo)出的愈傷組織分別接在添加0.5 mg/L NAA與不同6BA濃度組合的8種培養(yǎng)基上,每種處理設(shè)置3次重復(fù),每次重復(fù)接種10塊愈傷組織,50 d后統(tǒng)計(jì)分化出苗的愈傷組織塊數(shù),并計(jì)算分化率。分化率(%)= 長(zhǎng)出幼苗的愈傷組織塊數(shù)/接種愈傷組織塊數(shù)×100。

        2結(jié)果與分析

        2.1不同6BA濃度處理下的愈傷組織分化率對(duì)8組處理數(shù)據(jù)進(jìn)行方差分析,結(jié)果表明重復(fù)間F值是0.095,差異不顯著(P>0.05)。處理間F值為31.638,大于F0.05和F0.01,說(shuō)明各個(gè)處理間存在極顯著差異(P<0.01)。

        為比較不同6BA濃度對(duì)桔梗胚珠愈傷組織分化率的影響,采用新復(fù)極差法(LSR)進(jìn)行多重比較,結(jié)果見(jiàn)表3。無(wú)論在5%和1%顯著水平上,處理1、5、4之間差異不顯著(P>0.05)。它們的分化率分別為88.3%、85.0%和80.0%。處理6除了與處理3、7之間差異不顯著外(P>0.05),與其他處理均差異顯著(P<0.05),其分化率為65.0%。最低的是處理8,其分化率僅為35.0%,且顯著小于其他所有處理(P<0.05)。

        參考文獻(xiàn)

        [1] 高文遠(yuǎn),李志亮,肖培根.桔?,F(xiàn)代研究進(jìn)展[J].基層中藥雜志,1996,10(2):48-50.

        [2] 吳京姬,吳基日,嚴(yán)一字,等.培養(yǎng)基組成對(duì)桔梗組織培養(yǎng)的影響[J].延邊大學(xué)農(nóng)學(xué)學(xué)報(bào),2006,28(1):18-23.

        [3] 舒孌,高山林.桔梗的組織培養(yǎng)[J].植物資源與環(huán)境學(xué)報(bào),2001,10(3):63-64.

        [4] 張美萍.桔梗(Platycodon grandiflornm A.DC)胚胎學(xué)研究[J].吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào),1992,14(2):25-30.

        [5] 武沖,唐樹(shù)梅,張勇,等.植物花粉培養(yǎng)研究進(jìn)展[J].農(nóng)業(yè)基礎(chǔ)科學(xué),2008,24(11):146-149.

        [6] 王桂梅,賀美忠,楊富.桔梗組織培養(yǎng)技術(shù)的研究[J].安徽農(nóng)學(xué)通報(bào),2012,18(7):70-71.

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