曾振基，陳逸湘，凌宏通，王志達(dá)，梁文慶，李 挺，宋 斌

(1.梅州市微生物研究所，梅州市梅微生物技術(shù)研究開(kāi)發(fā)中心，廣東 梅州 514071;2.梅州市華康生物有限公司，廣東 梅州 514000;3.廣東省微生物研究所，廣東省菌種保藏與應(yīng)用重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，廣東省華南應(yīng)用微生物重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室－省部共建國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室培育基地;廣東省微生物應(yīng)用新技術(shù)公共實(shí)驗(yàn)室，廣東 廣州 510070)

室內(nèi)靈芝 (Ganoderma lucidum)栽培技術(shù)具有投資少、生產(chǎn)條件易控制、產(chǎn)品質(zhì)量較穩(wěn)定等特點(diǎn)，是中國(guó)南方農(nóng)村地區(qū)常見(jiàn)的一種靈芝生產(chǎn)方式。采用密封方式的孢子粉收集方式，能獲得質(zhì)量較好的靈芝孢子粉，受到梅州地區(qū)農(nóng)村靈芝種植戶的歡迎［1，2］。有研究表明，靈芝孢子粉和子實(shí)體產(chǎn)量與孢子粉收集方式有關(guān)，較好的收粉架是不銹鋼培養(yǎng)架、白紙和組合木架、白繃布［3］。本文對(duì)室內(nèi)靈芝栽培的孢子粉收粉架密封材料影響靈芝孢子粉產(chǎn)量和子實(shí)體產(chǎn)量與質(zhì)量進(jìn)行對(duì)比試驗(yàn)，為進(jìn)一步提升農(nóng)村室內(nèi)靈芝產(chǎn)業(yè)的發(fā)展水平提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 供試菌株

供試的靈芝菌種是作者單位試驗(yàn)篩選出適合梅州地區(qū)氣候栽培的赤靈芝優(yōu)良菌株ML1。

1.2 母種的制作及測(cè)試方法

按常規(guī)方法制備PDA培養(yǎng)基，配方:馬鈴薯200 g、葡萄糖20 g、瓊脂20 g、蛋白胨4 g、維生素B15片，水1 000 mL，pH自然偏酸 (5～6)，分裝入18 mm×180 mm試管中，每管10 mL，121℃滅菌0.5 h，取出后擺斜面。2010年11月24日，在超凈工作臺(tái)內(nèi)定量接入平板尖端菌絲，每個(gè)菌株接20支，25℃恒溫培養(yǎng)。

1.3 原種的制作及菌絲測(cè)試方法

原種培養(yǎng)基配方為玉米 (不粉碎)99%、石膏1%，料水比為1∶1.2(含水量約60%)，pH值為8。

方法:玉米粒清洗，除雜除壞后，水浸泡12 h～13 h，水煮至用手按開(kāi)玉米粒里面不糊為宜，晾干至表面無(wú)水，加入石膏粉，混合裝袋。每袋重500 g。121℃滅菌1.5 h，冷卻后在超凈工作臺(tái)內(nèi)定量接入平板尖端菌絲，每個(gè)原種栽培袋接種2處，25℃恒溫培養(yǎng)。2010年12月23日，原種全部長(zhǎng)齊。

1.4 培養(yǎng)料配制、接種及菌絲培養(yǎng)測(cè)試

栽培試驗(yàn)培養(yǎng)料配方:雜木屑78%、玉米粉6%、麥麩15%、石膏粉1%。

調(diào)配培養(yǎng)料時(shí)，先將雜木屑預(yù)濕堆制24 h，再將各種輔料充分拌勻，然后加入到雜木屑中，料水比為1∶1.2(含水量約60%)，最后用石灰水調(diào)節(jié)pH值至8。試驗(yàn)以規(guī)格大小為17 cm×35 cm、厚5 mm的聚丙烯袋裝料，每袋裝培養(yǎng)料 (干重計(jì))350 g，裝好后用常壓滅菌方式滅菌，保持102°C下恒溫16 h～18 h，滅菌后將菌包搬入已經(jīng)消毒的接種室，降至室溫后接種，接種時(shí)嚴(yán)格按無(wú)菌操作規(guī)程進(jìn)行接種。

接種時(shí)間為2011年1月12日～21日，一共接種1 000個(gè)菌包左右，將菌包搬入培養(yǎng)室排放在干凈地上，于常溫下培養(yǎng)發(fā)菌，室內(nèi)保持黑暗，早上、中午、晚上各通風(fēng)1 h，培養(yǎng)過(guò)程中發(fā)現(xiàn)受污染的菌包，及時(shí)將其清理出培養(yǎng)室。

1.5 子實(shí)體培養(yǎng)階段

2011年4月16日，當(dāng)白色菌絲基本長(zhǎng)滿菌袋時(shí)，在栽培袋口旁邊開(kāi)1個(gè)十字形狀寬1 cm的小口，栽培室的溫度保持在26℃～30℃，保持濕度85%～90%，菌包開(kāi)始長(zhǎng)靈芝子實(shí)體。靈芝原基形成初期不要澆水，待原基開(kāi)傘轉(zhuǎn)黃后增加室內(nèi)濕度，天氣晴朗氣溫高時(shí)可直接澆水。

1.6 靈芝孢子粉收集

2011年5月16日，赤靈芝子實(shí)體菌蓋邊緣白色消失，邊緣變赤，與子實(shí)體蓋面色澤一致，用濕布將菌袋抹干凈，上架準(zhǔn)備彈粉。

用16根杉木方制作成長(zhǎng)200 cm、寬100 cm、高100 cm的木框架，木框架內(nèi)地板上 (收粉房的地板要拖洗干凈)鋪1層白紙墊底，白紙上面堆放2排靈芝菌包、菌袋交錯(cuò)放整齊，每排100包菌包，菌蓋之間不相互接觸或碰到別的東西。

菌包堆放好后，在木架四周及頂部分別用不同材料密封:土棉布;17 g的白紙;40 g的白紙;80 g的白紙;塑料薄膜。每種材料密封而成的收粉架內(nèi)放置約200個(gè)靈芝菌包，讓孢子粉在密封的架子內(nèi)彈射。孢子粉收粉房保持干凈、陰涼，并適當(dāng)通風(fēng)。培養(yǎng)至2011年6月28日，揭開(kāi)白紙或薄布等密封材料，用毛刷收集孢子粉，后采摘子實(shí)體。記錄孢子粉與子實(shí)體收成結(jié)果。

2 結(jié)果與分析

2.1 收粉架封閉材料對(duì)孢子粉產(chǎn)量的影響

采用不同密封材料制作的收粉架，所得孢子粉產(chǎn)量見(jiàn)表1。

由表1可見(jiàn)，采用17 g的白紙和土棉布作密封材料時(shí)，孢子粉的產(chǎn)量最高，而采用80 g的白紙和塑料薄膜作密封材料時(shí)，孢子粉產(chǎn)量最低。

表1 收粉架密封材料對(duì)孢子粉產(chǎn)量的影響

2.2 收粉架密封材料對(duì)子實(shí)體產(chǎn)量的影響

采用不同密封材料制作的收粉架，所得子實(shí)體產(chǎn)量見(jiàn)表2。

結(jié)果表明，收粉架密封材料不同對(duì)子實(shí)體產(chǎn)量的影響較少，但密封材料為土棉布、17 g的白紙時(shí)子實(shí)體生長(zhǎng)正常，厚實(shí)，形態(tài)較好。采用80 g的白紙、塑料薄膜時(shí)子實(shí)體出現(xiàn)畸形、長(zhǎng)鹿角，經(jīng)濟(jì)價(jià)值差，采用40 g的紙時(shí)子實(shí)體形態(tài)介于兩者之間。

3 小結(jié)與討論

在本試驗(yàn)條件下，即在菌種、培養(yǎng)基配方和前期管理一致的情況下，收粉架的密封材料對(duì)靈芝孢子粉產(chǎn)量和子實(shí)體外觀形狀有較大的影響，但對(duì)子實(shí)體產(chǎn)量的影響則較小。這一結(jié)果與丘志忠等［3］試驗(yàn)結(jié)果相同。但用于制作收粉架的密封材料，則以17 g的白紙或中密度的土棉布效果最好。在生產(chǎn)實(shí)踐中收粉架密封材料過(guò)厚不利于通風(fēng)透氣且易長(zhǎng)鹿角，并影響到孢子粉產(chǎn)量，青霉污染的概率也明顯增加;而過(guò)薄則容易被風(fēng)雨吹爛，孢子粉飛出，不利于保濕。

目前，靈芝孢子粉是梅州地區(qū)農(nóng)村室內(nèi)靈芝栽培產(chǎn)業(yè)的主要產(chǎn)品，在農(nóng)村農(nóng)民種植的靈芝產(chǎn)業(yè)中所產(chǎn)生的經(jīng)濟(jì)效益約占80%～90%。因此，探索最佳的收集靈芝孢子粉的密封材料，以獲得更高產(chǎn)量、更優(yōu)質(zhì)量的靈芝孢子粉，提高農(nóng)村農(nóng)民經(jīng)濟(jì)收益，對(duì)梅州及周邊地區(qū)的農(nóng)村靈芝產(chǎn)業(yè)具有一定的積極意義。

［1］陳逸湘，凌宏通，曾振基，等.無(wú)公害室內(nèi)靈芝栽培技術(shù) ［J］.中國(guó)食用菌，2012，31(5):20－22.

［2］李忠，鐘瑩瑩，王志達(dá)，等.5個(gè)靈芝菌株在梅州的比較試驗(yàn)［J］.中國(guó)食用菌，2012，31(6):20－23.

［3］丘志忠，何煥清，陳逸湘，等.代料栽培靈芝孢子粉收集方式比較試驗(yàn) ［J］.廣東農(nóng)業(yè)科學(xué)，2008(10):88－90.