晉月萍，蘇雪梅

他汀類藥物是目前臨床最常用的調(diào)脂藥物，通過抑制膽固醇合成過程中的限速酶3－羥基－3－甲基戊二酰輔酶A（HMG－CoA）還原酶，而發(fā)揮其強大的調(diào)脂作用。瑞舒伐他汀可對心血管系統(tǒng)發(fā)揮有益影響［1］。瑞舒伐他汀具有抵制心肌梗死后心臟重構(gòu)，改善左室功能的作用［2］，改善冠狀動脈血流緩慢的糖尿病患者冠狀動脈血流儲備［3］?？梢允鎻埓笫箅x體主動脈［4，5］，那么瑞舒伐他汀是否有可能通過舒張冠狀動脈，增加冠脈血流呢？目前有關(guān)瑞舒伐他汀對冠狀動脈作用如何還未見報道。因此，本研究通過離體血管張力實驗觀察瑞舒伐他汀對大鼠冠狀動脈的作用及其可能的機制，為瑞舒伐他汀在臨床治療中的合理應(yīng)用提供試驗依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 實驗動物 雄性Wistar大鼠，由山西醫(yī)科大學(xué)實驗動物中心提供，合格證號為醫(yī)動字第070102。

1.2 試劑 瑞舒伐他汀，L－NAME，iberiotoxin，格列本脲，4－氨基吡啶和氯化鋇購自Sigma公司；其余試劑均為國產(chǎn)試劑純。1.2 生理性營養(yǎng)液 正常生理鹽營養(yǎng)液（PSS）成分為：NaCl 144mmol／L，KCl 5.8mmol／L，MgCl21.2mmol／L，CaCl22.5 mmol／L，Glucose 11.1mmol／L，HEPES 5。上述營養(yǎng)液均用1 mmol／L NaOH 將pH 值調(diào)至7.4，預(yù)熱至37℃。實驗中所述濃度均為浴管內(nèi)試劑的終濃度。

1.3 離體大鼠腎動脈血管環(huán)的制備 大鼠擊頭致暈后，立即取出腎臟，浸入4 ℃的PSS液中。冠狀動脈血管環(huán)的制備：用大頭針分別固定心臟的心尖端和升主動脈端于平皿，在左心耳下面尋找冠狀動脈，順著冠狀動脈的走向鈍性分離，在前降支處剪取2mm 的血管環(huán)。將兩根直徑為40μm 的鎢絲穿入管腔，固定血管環(huán)在Multi Myograph System－610M 浴槽內(nèi)傳感器上，浴槽內(nèi)含有溫度控制在37 ℃，持續(xù)通以100%O2的PSS 5 mL。標(biāo)本平衡穩(wěn)定60 min 后開始實驗，平衡期間每隔15 min 用37℃預(yù)熱的新鮮PSS更換浴槽內(nèi)液體一次。血管環(huán)的張力變化通過DMT 換能系統(tǒng)采集，并用Chart 5.3生物信號采集分析軟件記錄在計算機上。

1.4 瑞舒伐他汀對大鼠冠狀動脈的舒張作用 在基礎(chǔ)狀態(tài)下，向浴槽內(nèi)加入苯腎上腺素（Phe，10－5mmol／L）。待血管環(huán)收縮穩(wěn)定，達到平臺后，向浴槽內(nèi)累積加入瑞舒伐他?。?0－7mmol／L～3×10－5mmol／L），使其在浴槽中的終濃度0.5個對數(shù)級倍增高，建立瑞舒伐他汀的累積對數(shù)濃度反應(yīng)曲線（LCCRC），觀察瑞舒伐他汀對Wistar大鼠冠狀動脈的舒張作用。

1.5 L－NAME和鉀通道阻斷劑對瑞舒伐他汀引起大鼠冠狀動脈舒張的影響 在基礎(chǔ)狀態(tài)下，向浴槽內(nèi)加入苯腎上腺素（10－5mmol／L）。待血管環(huán)收縮穩(wěn)定，達到平臺后，向浴槽內(nèi)加入一氧化氮合酶（NOS）抑制劑L－NAME（100μmol／L）和不同鉀通道阻斷劑：iberiotoxin（100nmol／L），格列本脲（glibenclamide，0.1 mmol／L），4－氨 基 吡 啶（4－aminopyridine，1 mmol／L）和 氯 化 鋇（BaCl2，1mmol／L）。血管環(huán)活動再次達到平臺后，向浴槽內(nèi)累積加 入 瑞 舒 伐 他 ?。?0－7mmol／L～10－5mmol／L），觀 察LNAME和不同鉀通道阻斷劑對瑞舒伐他汀引起大鼠冠狀動脈舒張作用的影響。

2 結(jié) 果

2.1 瑞舒伐他汀對離體大鼠冠狀動脈的舒張作用 瑞舒伐他汀可濃度依賴性舒張苯腎上腺素預(yù)收縮的大鼠離體冠狀動脈，其最大舒張效應(yīng)可達（64.31±3.44）%，見圖1。

2.2 L－NAME對瑞舒伐他汀舒張離體大鼠冠狀動脈的影響

瑞舒伐他汀對大鼠冠狀動脈的舒張作用可被NOS抑制劑L－NAME顯著抑制（P＜0.05，見圖1）。

圖1 L－NAME對瑞舒伐他汀舒張大鼠離體冠狀動脈的影響

2.3 鉀通道阻斷劑對瑞舒伐他汀舒張離體大鼠冠狀動脈的影響 為了觀察K＋通道是否參與瑞舒伐他汀的舒血管作用，使用不同亞型K＋通道阻斷劑：iberiotoxin（100nmol／L），格列本脲（0.1 mmol／L），4－氨基吡啶（1 mmol／L）和氯化鋇（BaCl2，1 mmol／L）。在此濃度，這些藥物分別可以特異性阻斷KCa通道，KATP通道，KV 通道及KIR 通道。結(jié)果顯示，iberiotoxin，格列本脲，4－氨基吡啶和BaCl2均可抑制瑞舒伐他汀對大鼠冠狀動脈的舒張作用（P＜0.05，見圖2）。

圖2 鉀通道阻斷劑對瑞舒伐他汀舒張大鼠離體冠狀動脈的影響

3 討 論

他汀類藥物瑞舒伐他汀有直接的降壓作用［4］，并可舒張大鼠主動脈［5，6］。而本研究結(jié)果顯示，瑞舒伐他汀還可舒張大鼠冠狀動脈，并且其舒張作用與NO 及鉀通道有關(guān)。瑞舒伐他汀對離體冠狀動脈的直接作用是舒張，且具有濃度依賴性。在沒有冠狀動脈大血管病變的前提下，瑞舒伐他汀有可能通過調(diào)節(jié)冠狀動脈微血管，改善冠狀動脈血流量，增加心肌供血供氧。

NO 是體內(nèi)重要的舒血管物質(zhì)。NO 在內(nèi)皮NOS的作用下由左旋精氨酸轉(zhuǎn)化而來，通過激活鳥苷酸環(huán)化酶，增加環(huán)磷酸鳥苷（cGMP）含量，抑制細(xì)胞外Ca2＋內(nèi)流和抑制細(xì)胞內(nèi)Ca2＋釋放而使平滑肌舒張。許多藥物通過增加血管內(nèi)皮細(xì)胞NO 生成發(fā)揮舒血管作用［7］。本實驗利用NOS抑制劑L－NAME，觀察瑞舒伐他汀舒張冠狀動脈與NO 的關(guān)系。結(jié)果表明，瑞舒伐他汀對冠狀動脈的舒張作用可被L－NAME明顯抑制，說明瑞舒伐他汀對冠狀動脈的舒張作用是NO 依賴的。

K＋通道在血管平滑肌上分布廣泛，是調(diào)節(jié)血管平滑肌張力的重要機制之一。K＋通道活性的改變可使動脈平滑肌細(xì)胞膜電位去極化或超極化，是參與動脈血管舒縮調(diào)節(jié)的重要機制［8］。目前認(rèn)為血管平滑肌細(xì)胞上主要有四種K＋通道：①電壓依賴性鉀通道：膜去極化時活性升高，為平滑肌細(xì)胞膜電位的重要調(diào)節(jié)因素；②鈣激活鉀通道：與Ca2＋內(nèi)流相關(guān)，可調(diào)節(jié)膜電位，與小動脈張力關(guān)系密切；③內(nèi)向整流鉀通道：調(diào)節(jié)多種類型阻力血管平滑肌細(xì)胞的膜電位，與外部鉀誘導(dǎo)的血管舒張有關(guān)；④ATP 敏感性鉀通道（KATP）：與細(xì)胞代謝的變化相關(guān)，是多種藥物和內(nèi)源性血管活性物質(zhì)的作用靶點。4－氨基吡啶，iberiotoxin，BaCl2和格列本脲分別為它們的特異抑制劑。K＋通道開放，K＋外流，細(xì)胞膜超極化，血管平滑肌張力下降，血管舒張。很多體內(nèi)主要的血管活性物質(zhì)、藥物可通過影響K＋通道而改變血管平滑肌張力［9］。K＋通道可能介導(dǎo)瑞舒伐他汀的舒血管作用。本研究采用離體血管張力實驗探討不同鉀通道是否參與瑞舒伐他汀對冠狀動脈的舒張作用。結(jié)果顯示，iberiotoxin（100 nmol／L）、格列本脲（0.1 mmol／L）、4－氨基吡啶（1 mmol／L）和BaCl2（1mmol／L）均可明顯抑制瑞舒伐他汀對腎動脈的舒張作用。KATP通道、KCa通道、KV 通道、Kir通道可能與瑞舒伐他汀對冠狀動脈的舒張作用有關(guān)。瑞舒伐他汀可舒張大鼠離體冠狀動脈，其舒張作用可能與NO 和K＋通道有關(guān)。

［1］ 葉瑛，賈楠.瑞舒伐他汀的臨床研究進展［J］.中國新藥與臨床雜志，2010，29（11）：813－816.

［2］ 張?zhí)m芳，王占啟，王艷飛，等.不同劑量瑞舒伐他汀對急性心肌梗死未行經(jīng)皮冠狀動脈介入術(shù)患者心室重構(gòu)影響的對比研究［J］.中國全科醫(yī)學(xué)，2011，14（35）：4064－4066.

［3］ 王芳，吳紅玲，黃鎮(zhèn)河，等.瑞舒伐他汀對冠狀動脈血流緩慢的糖尿病患者冠狀動脈血流儲備的影響［J］.中國醫(yī)藥導(dǎo)報，2012，9（4）：46－48.

［4］ 陳林祥，余澤洪，容永怡，等.瑞舒伐他汀對高血壓患者的降壓作用［J］.中國動脈硬化雜志，2012，20（5）：460－462.

［5］ Ana Cecilia PP，Victor Manuel PA，Isabel WF，et al.Mechanism of the relaxant effect of rosuvastatin lactone on rat aortic rings［J］.Front Biosci（Elite Ed），2012，4：1787－1794.

［6］ López J，Mendoza R，Cleva Villanueva G，et al.Participation of K＋channels in the endothelium－dependent and endothelium－independent components of the relaxant effect of rosuvastatin in rat aortic rings［J］.J Cardiovasc Pharmacol Ther，2008，13（3）：207－213.

［7］ Friebe A，Koesling D.Regulation of nitric oxide－sensitive guanylyl cyclase［J］.Circ Res，2003，93（2）：96－105.

［8］ Nelson MT，Quayle JM.Physiological roles and properties of potassium channels in arterial smooth muscle［J］.Am J Physiol，1995，268（4Pt 1）：C799－C822.

［9］ Cairrao E，Alvarez E，Santos－Silva AJ，et al.Potassium channels are involved in testosterone－induced vasorelaxation of human umbilical artery［J］.Naunyn Schmiedebergs Arch Pharmacol，2008，376（5）：375－383.