文睿婷，張漢霆，馮婉玉，梁建輝

環(huán)腺苷酸（cyclic adenosine monophosphate，cAMP）和環(huán)鳥苷酸（cyclic guanosine monophosphate，cGMP）作為普遍存在于生物體內(nèi)的第二信使物質(zhì)，參與介導(dǎo)激素、神經(jīng)遞質(zhì)及多種細(xì)胞外信號(hào)引發(fā)的生物學(xué)效應(yīng)，其表達(dá)水平對(duì)調(diào)節(jié)細(xì)胞的多項(xiàng)生理功能具有重要意義。cAMP和cGMP的胞內(nèi)濃度主要取決于兩類酶的活性，即催化其生成的腺苷酸環(huán)化酶（adenylatecyclase，AC）／鳥苷酸環(huán)化酶 （guanylatecyclase，GC），以及催化其水解的磷酸二酯酶（phosphodiesterase，PDEs）；兩者的平衡可使細(xì)胞內(nèi)cAMP和cGMP水平維持在正常范圍。其中，PDEs是cAMP和cGMP在細(xì)胞內(nèi)降解的唯一途徑，對(duì)兩者的胞內(nèi)濃度起關(guān)鍵性調(diào)節(jié)作用。

PDEs是一個(gè)超級(jí)酶家族，根據(jù)氨基酸序列、酶促動(dòng)力學(xué)特征，以及對(duì)底物的特異性和抑制劑的敏感性，可將其分為11型100余種同工酶［1］。其中，PDE 4、7、8是 cAMP的特異性水解酶，PDE 5、6、9選擇性作用于 cGMP，其它 PDEs對(duì)cAMP和cGMP均可水解。PDEs在不同的組織、細(xì)胞和亞細(xì)胞區(qū)域中表達(dá)，介導(dǎo)特定的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)，精確調(diào)控細(xì)胞的各項(xiàng)生理功能?；赾AMP信號(hào)通路在基因表達(dá)、細(xì)胞生長(zhǎng)、代謝和分裂過程中的重要作用，目前對(duì)其特異性水解酶PDE4的研究最為深入。大量研究提示，PDE4可作為多種疾病的潛在治療靶點(diǎn)。早期研究多集中在炎癥性疾?。òㄏ?、關(guān)節(jié)炎、克羅恩病和多發(fā)性硬化）方向；近年來，PDE4對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)的調(diào)節(jié)功能逐漸受到關(guān)注，選擇性PDE4抑制劑的開發(fā)也為多種神經(jīng)精神疾病的治療提供了新的思路。本文綜述PDE4中樞神經(jīng)系統(tǒng)功能的最新研究進(jìn)展，并探討其作為神經(jīng)精神疾病新型治療靶點(diǎn)的應(yīng)用前景。

1 PDE4概述

PDE4可分為 PDE4A、PDE4B、PDE4C、PDE4D 4個(gè)亞型，分別由相互獨(dú)立的A、B、C、D 4個(gè)基因編碼。根據(jù)N-端序列的差異，上述4種亞型又可各自分為3～11個(gè)次亞型，由此形成至少25種不同的剪接變異體。所有PDE4變異體大致分為4類（Fig 1）：長(zhǎng)形式（long form），短形式（short form），超短形式（super-short form）和極短形式（dead-short form）［2］。長(zhǎng)形式PDE4s含有2個(gè)位于N-端上游區(qū)的保守結(jié)構(gòu)域（upstreamconserved region 1 and 2，UCR1和UCR2）。UCR1包含1個(gè)保守的 cAMP依賴的蛋白激酶 A（protein kinase A，PKA）磷酸化位點(diǎn)，該位點(diǎn)對(duì)cAMP的水解具有正性調(diào)控作用，是cAMP信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路去敏感化的重要機(jī)制；短形式PDE4s（如 PDE4B2、PDE4D1、PDE4D2）含有完整的 UCR2，但缺少UCRl；超短形式僅含有部分 UCR2，此型 PDE4s包括PDE4A1、PDE4B5、PDE4D6和近期發(fā)現(xiàn)的 PDE4D10；極短形式PDE4s（如PDE4A7）中，UCR1和UCR2全部缺失，且其他形式PDE4中所含有的高度同源C-端水解催化結(jié)構(gòu)域，在極短形式PDE4s中，N-端和 C-端均有部分缺失。除 PDE4A外，其他PDE4s在其催化結(jié)構(gòu)域均含有細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶（extracellular signal-regulated kinase，ERK）磷酸化位點(diǎn)，此位點(diǎn)的水解功能根據(jù)其所在的變異體而有所不同。ERK磷酸化可抑制長(zhǎng)形式PDE4s活性，微弱抑制或不改變超短形式PDE4s活性，并增加短形式PDE4s活性。這是通過改變PDE4活性調(diào)控細(xì)胞內(nèi)cAMP信號(hào)通路功能的又一重要機(jī)制。PDE4s的特異性結(jié)構(gòu)及其對(duì)ERK活化的不同反應(yīng)機(jī)制提示PDE4各亞型和剪接變異體可能參與調(diào)控不同的細(xì)胞功能。

Fig 1 Structure and classification of PDE4（Zhang，2009）［2］

PDE4在體內(nèi)主要存在于炎性細(xì)胞和神經(jīng)細(xì)胞，這樣的組織分布提示它與免疫系統(tǒng)和中樞神經(jīng)系統(tǒng)的功能密切相關(guān)。目前，PDE4抑制劑的抗炎功效已被廣泛認(rèn)可，眾多學(xué)者認(rèn)為它還可能成為多種神經(jīng)精神疾病候選藥物。深入了解PDE4在腦內(nèi)的分布情況，對(duì)于探索其中樞神經(jīng)系統(tǒng)功能具有重要意義。

PDE4在哺乳動(dòng)物（如大小鼠、猴和人等）腦內(nèi)的分布基本相似，Perez-Torres等［3］通過原位雜交免疫組化和放射自顯影的方法，分別觀察了大鼠、猴和人腦內(nèi)PDE4各亞型的分布特點(diǎn)。結(jié)果顯示，大鼠腦組織中PDE4A和PDE4D分布基本一致，均高表達(dá)于大腦皮層、嗅覺系統(tǒng)、黑質(zhì)、海馬和腦干中；PDE4B在伏隔核、杏仁核、丘腦及下丘腦中具有優(yōu)勢(shì)表達(dá)，在皮層、嗅覺系統(tǒng)、海馬和腦干中的表達(dá)不及PDE4A和PDE4D。然而，PDE4B是唯一存在于白質(zhì)束、軟腦膜和室管膜細(xì)胞等非神經(jīng)元細(xì)胞的PDE4亞型；PDE4C被發(fā)現(xiàn)僅存在于嗅球中，更多地在外周組織表達(dá)。值得注意的是，PDE4D在極后區(qū)和孤束核的表達(dá)較高，推測(cè)其可能與PDE4抑制劑所致的惡心、嘔吐等癥狀有關(guān)。神經(jīng)功能學(xué)的研究結(jié)果與PDE4亞型的分布相互映證：PDE4D在抗抑郁［4］、學(xué)習(xí)記憶［5］進(jìn)程中發(fā)揮重要作用，而PDE4B參與調(diào)節(jié)精神分裂癥［6］、焦慮［7］等應(yīng)激相關(guān)障礙。與低等動(dòng)物不同，PDE4A、PDE4B和PDE4D在人腦中的分布差異較小，3者廣泛分布于大腦皮層、基底神經(jīng)節(jié)、海馬、丘腦、小腦和腦干等結(jié)構(gòu)中，以PDE4B和PDE4D的表達(dá)水平較高；PDE4C僅低表達(dá)于皮層、小腦和丘腦的一些核團(tuán)。猴腦中PDE4各亞型分布與人腦基本類似，但PDE4C的表達(dá)更為局限。由此可見，PDE4各亞型的中樞分布特點(diǎn)可能是其不同調(diào)節(jié)機(jī)制的神經(jīng)解剖學(xué)基礎(chǔ)。

2 PDE4抑制劑

選擇性PDE4抑制劑可特異性作用于細(xì)胞內(nèi)PDE4，阻斷cAMP的降解，使后者胞內(nèi)濃度增高，從而激活PKA，使其C亞基進(jìn)入核內(nèi)，進(jìn)而催化轉(zhuǎn)錄因子cAMP反應(yīng)元件結(jié)合蛋白（cAMP responsive element binding protein，CREB）的絲氨酸殘端磷酸化而活化。磷酸化的 CREB（phosphorylated CREB，pCREB）可與DNA分子上靶基因附近的cAMP反應(yīng)元件（cAMP responsive element，CRE）結(jié)合，從而調(diào)控該基因轉(zhuǎn)錄的起始。選擇性PDE4抑制劑因早期在哮喘和慢性阻塞性肺疾?。╟hronic obstructive pulmonary disease，COPD）的臨床治療中顯示出不凡的功效，成為許多制藥公司的研發(fā)熱點(diǎn)。目前，已開發(fā)的抑制劑按化學(xué)結(jié)構(gòu)共可分為6類：兒茶酚醚類（代表藥物為rolipram）、苯甲酰胺類（代表藥物為roflumilast）、喹唑啉二酮類（nitraquazone類抑制劑）、黃嘌呤類（代表藥物為茶堿）、苯并呋喃類和其他（苯并吡唑化合物等）。其中，rolipram是PDE4第一代抑制劑，極易吸收，可迅速通過血腦屏障，并發(fā)揮強(qiáng)大的抗炎作用。然而，由于在臨床試驗(yàn)中易引起強(qiáng)烈的頭暈頭痛、惡心嘔吐等不良反應(yīng)，rolipram和同為第一代PDE4抑制劑的piclanfilast被中斷試驗(yàn)，目前僅作為工具藥物應(yīng)用于臨床前研究。第二代PDE4抑制劑中，Glaxo SmithKline公司的cilomilast因藥物療效和安全性相關(guān)試驗(yàn)結(jié)果與預(yù)期不一致，也停止進(jìn)一步研發(fā)；而AltanaPharma公司的 roflumilast療效確切，分別于2010和2011年被歐洲藥品管理局（EMEA）和美國(guó)食品藥品監(jiān)督管理局（FDA）批準(zhǔn)用于COPD的治療［8］，是首個(gè)獲得許可用于COPD臨床治療的選擇性PDE4抑制劑。除此之外，在不久前召開的2013年美國(guó)風(fēng)濕病學(xué)年會(huì)（ACR／ARHP）上，Celgene公司發(fā)布了新型PDF4抑制劑apremilast治療銀屑病關(guān)節(jié)炎的3項(xiàng)Ⅲ期研究結(jié)果。根據(jù)其有效性和安全性數(shù)據(jù)，許多專家認(rèn)為apremilast具有出色的風(fēng)險(xiǎn)／收益比，很可能成為銀屑病的一線治療藥物。目前，PDF4抑制劑已發(fā)展到第3代，具有十分廣闊的臨床應(yīng)用前景，基于PDE4及各亞型作用特點(diǎn)的深入研究，可有助于解決生物利用度低，不良反應(yīng)多等問題，而PDE4亞型抑制劑的開發(fā)，也為研制藥理活性與副作用分離的特異性治療藥物提供了新的思路。

3 PDE4的中樞作用

3.1 PDE4的抗抑郁作用 cAMP信號(hào)通路參與調(diào)節(jié)多種藥物的抗抑郁效應(yīng)，被認(rèn)為是傳統(tǒng)抗抑郁劑的共同作用路徑。PDE4對(duì)細(xì)胞內(nèi)cAMP水平的關(guān)鍵調(diào)控作用，使其成為抗抑郁藥物治療的靶點(diǎn)之一，相關(guān)研究始于約30年前。包括rolipram在內(nèi)的PDE4抑制劑已被證實(shí)在多種臨床前動(dòng)物模型中具有抗抑郁藥理活性，如對(duì)利血平誘導(dǎo)的低體溫的翻轉(zhuǎn)作用［9］，對(duì)嗅球切除大鼠的抗攻擊行為作用［10］，以及縮短小鼠強(qiáng)迫游泳的不動(dòng)時(shí)間［11］。隨后，rolipram的抗抑郁作用在臨床試驗(yàn)中得到證實(shí)，rolipram的抗抑郁效應(yīng)具有以下3方面的特點(diǎn)：①對(duì)嚙齒類動(dòng)物、人等多個(gè)物種都具有抗抑郁藥理活性，這對(duì)于將臨床前研究成果轉(zhuǎn)化為臨床治療手段至關(guān)重要；②作用效應(yīng)具有立體特異性［9］。rolipram的（－）－異構(gòu)體比（＋）－形式作用效應(yīng)強(qiáng)10～15倍，提示在新一代PDE4抑制劑的研發(fā)中應(yīng)重視不同異構(gòu)體的作用；③臨床前研究顯示，rolipram的抗抑郁效力較傳統(tǒng)抗抑郁劑（如去甲丙米嗪、丙米嗪）要強(qiáng)得多［9－10］。在低反應(yīng)率差速性增強(qiáng)（dif-ferential-reinforcement-of-low rate，DRL）行為中rolipram的抗抑郁效力是去甲丙米嗪的30余倍。此外，傳統(tǒng)抗抑郁劑、選擇性5-羥色胺再攝取抑制劑（selective serotonin re-uptake inhibitors，SSRIs）、β-腎上腺素受體激動(dòng)劑都可增強(qiáng) rolipram的抗抑郁效應(yīng)［12］，這為研究兼有PDE4抑制和傳統(tǒng)作用機(jī)制雙重效應(yīng)的抗抑郁劑提供了方向。

近年來，學(xué)者們開始關(guān)注參與抗抑郁作用的具體PDE4亞型。在重復(fù)給予rolipram和其他經(jīng)典抗抑郁劑后，動(dòng)物腦內(nèi)海馬和皮層結(jié)構(gòu)中的PDE4A和PDE4D表達(dá)量明顯增加［13］，PDE4B在伏隔核和皮層中表達(dá)增加，在海馬區(qū)域表達(dá)無變化?？紤]到海馬神經(jīng)元對(duì)抗抑郁作用的發(fā)揮至關(guān)重要，因此推測(cè)PDE4A和PDE4D在介導(dǎo)抗抑郁效應(yīng)中發(fā)揮主要作用，而PDE4B并非介導(dǎo)抗抑郁作用的主要PDE4亞型。這一推測(cè)在選擇性PDE4B和PDE4D基因敲除動(dòng)物模型中得到證實(shí)。

3.2 PDE4在學(xué)習(xí)記憶中的作用 前期研究顯示cAMP／PKA／CREB和MAPK／ERK／CREB通路對(duì)突觸可塑性及記憶過程的調(diào)節(jié)起重要作用，PDE4抑制劑對(duì)上述兩條關(guān)鍵通路均可直接激活，從而通過強(qiáng)化長(zhǎng)時(shí)程突觸易化及長(zhǎng)時(shí)程增強(qiáng)（long term potentiation，LTP）影響學(xué)習(xí)記憶過程［14］。Navakkade等［15］的研究表明，rolipram可以明顯延長(zhǎng)早期LTP的維持時(shí)間，并可通過升高cAMP水平和增強(qiáng)PKA活性來誘導(dǎo)晚期LTP。行為學(xué)實(shí)驗(yàn)顯示，rolipram可改善海馬依賴性記憶任務(wù)，如物體識(shí)別任務(wù)、被動(dòng)回避學(xué)習(xí)和恐懼記憶實(shí)驗(yàn)等［16］；同時(shí)，rolipram對(duì)大鼠和猴的前額皮質(zhì)依賴性記憶也有增強(qiáng)作用［17］。基于在海馬 CA1區(qū)的優(yōu)勢(shì)分布［3］，PDE4D被認(rèn)為是與記憶鞏固關(guān)系最密切的PDE4亞型。PDE4D基因敲除小鼠的長(zhǎng)時(shí)程海馬依賴性記憶可出現(xiàn)明顯改善，而且給予 rolipram對(duì)此現(xiàn)象并無明顯作用［5］，提示PDE4D在記憶過程中具有關(guān)鍵作用。相反，PDE4B基因敲除小鼠并無獲得性和鞏固性的認(rèn)知改變，僅出現(xiàn)逆反學(xué)習(xí)的受損。

阿爾采末?。ˋlzheimer′s disease，AD）是以 β淀粉樣蛋白沉積激活小膠質(zhì)細(xì)胞炎癥為核心病理改變的認(rèn)知障礙性疾病。在此疾病過程中，谷氨酸大量釋放，導(dǎo)致神經(jīng)元持久去極化至最終死亡，從而造成突觸及LTP現(xiàn)象的損傷。在成年小鼠實(shí)驗(yàn)中，PDE4抑制劑可降低海馬LTP的閾值，并逆轉(zhuǎn)AD轉(zhuǎn)基因小鼠模型中 Aβ1-42淀粉肽的損傷，修復(fù)LTP［18］。美國(guó)哥倫比亞大學(xué)的Ottavio Arancio等研究發(fā)現(xiàn)，rolipram可改善AD轉(zhuǎn)基因小鼠模型的突觸可塑性和記憶缺陷，作用持續(xù)停藥后2個(gè)月之久，并且在老齡鼠中作用更明顯，但不能改變淀粉樣沉積的病理改變［19］。以上結(jié)果提示，PDE4抑制劑可能為AD患者的對(duì)癥性治療提供新的方向。

3.3 PDE4介導(dǎo)精神活性物質(zhì)的成癮過程 cAMP信號(hào)通路與藥物獎(jiǎng)賞負(fù)性相關(guān)作用的發(fā)現(xiàn)，促使PDE4抑制劑在精神活性物質(zhì)中的研究不斷增多。Knapp等［20］發(fā)現(xiàn)，PDE4選擇性抑制劑rolipram和Ro 20-1724均可抑制大鼠可卡因自身給藥的起始；Thompson等［21］的研究表明，rolipram可干擾小鼠對(duì)可卡因及嗎啡誘導(dǎo)的條件性位置偏愛的形成，但不影響可卡因引起的紋狀體區(qū)c-fos基因表達(dá)；另有報(bào)道提示rolipram可阻斷甲基苯丙胺誘導(dǎo)的行為敏化作用［22］，并抑制嗎啡所致軀體依賴的形成［23］。最近，美國(guó)弗吉尼亞大學(xué)的張漢霆教授實(shí)驗(yàn)室和本實(shí)驗(yàn)室相繼發(fā)現(xiàn)，rolipram和Ro 20-1724可選擇性抑制 C57BL／6J小鼠［24］及 FH／Wjd大鼠［25］的攝酒行為，對(duì)天然獎(jiǎng)賞無明顯影響，再一次證實(shí)了PDE4在物質(zhì)依賴形成和維持過程中的重要作用。究其作用機(jī)制可能與增強(qiáng)藥物成癮相關(guān)腦區(qū)（如紋狀體、杏仁核）的cAMP信號(hào)通路功能有關(guān)。另有證據(jù)顯示，rolipram可直接增加體外培養(yǎng)的中腦神經(jīng)元及在體紋狀體的多巴胺釋放和（或）生成［26］。基于中腦邊緣多巴胺系統(tǒng)在成癮性物質(zhì)強(qiáng)化和獎(jiǎng)賞過程中的重要作用，推測(cè)PDE4抑制劑的抑制成癮效應(yīng)可能通過對(duì)多巴胺能神經(jīng)傳導(dǎo)的調(diào)節(jié)而實(shí)現(xiàn)，但其具體作用機(jī)制及PDE4各亞型的功能還有待更為深入的研究。

3.4 PDE4對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)損傷的調(diào)節(jié)作用 許多研究證實(shí)cAMP不僅可提高神經(jīng)元的存活，還可誘導(dǎo)神經(jīng)元或其軸突的再生，其作用接近多種神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子聯(lián)合應(yīng)用的效果，由此推測(cè)PDE4抑制劑對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)相關(guān)損傷也有一定的緩解作用。通過對(duì)局灶性和全腦缺血／再灌注損傷的動(dòng)物模型研究發(fā)現(xiàn)，rolipram治療能明顯改善該損傷所致的學(xué)習(xí)記憶功能障礙和神經(jīng)元缺失［27］。進(jìn)一步的機(jī)制學(xué)研究表明，缺血／再灌注損傷后的大鼠全腦PDE4活性升高，經(jīng)rolipram治療后PDE4活性有所降低，提示rolipram對(duì)缺血／再灌損傷的抵抗作用可能與其對(duì)PDE4活性的影響有關(guān)［28］。此外，在物理性因素所致的急性脊髓損傷中，rolipram也通過抑制cAMP水平的降低，抑制細(xì)胞凋亡，并起一定的保護(hù)作用［29］。以上保護(hù)作用的機(jī)制可能為以下3方面：① 通過cAMP通路，調(diào)控bcl-2等凋亡相關(guān)基因的表達(dá)，減少細(xì)胞凋亡；②由于上述兩種損傷都涉及炎性因子的參與，因此，rolipram可能通過抗炎機(jī)制發(fā)揮保護(hù)作用；③ 提高cAMP水平可能增強(qiáng)神經(jīng)內(nèi)在生長(zhǎng)能力和加強(qiáng)營(yíng)養(yǎng)因子的作用。

3.5 PDE4其它的中樞作用 除上述發(fā)現(xiàn)外，PDE4抑制劑在臨床前研究中還被證實(shí)具有一定的抗精神病活性［8］，PDE4B可能是介導(dǎo)這一作用的主要PDE4亞型。此外，rolipram還可改善帕金森?。≒arkinson′s disease，PD）動(dòng)物模型中MPTP所致的神經(jīng)毒性損傷，對(duì)大鼠的遲發(fā)性運(yùn)動(dòng)障礙也有一定的抑制作用。另有學(xué)者認(rèn)為，PDE4很可能是治療腦腫瘤的潛在靶點(diǎn)［30］，相應(yīng)的臨床前和臨床研究正在進(jìn)行中。

4 結(jié)語

綜上所述，PDE4可通過對(duì)cAMP信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的調(diào)控，發(fā)揮抗抑郁、改善認(rèn)知記憶、阻斷藥物依賴的形成以及維持和促進(jìn)神經(jīng)細(xì)胞生存等功能。對(duì)PDE4的干預(yù)和調(diào)節(jié)，為治療抑郁癥、AD、藥物濫用及腦缺血等疾病導(dǎo)致的神經(jīng)功能損傷提供了全新的治療思路和用藥策略。深入探討PDE4及其各亞型在中樞神經(jīng)系統(tǒng)中的具體功能和調(diào)控機(jī)制，將會(huì)為神經(jīng)精神疾病的治療帶來新的希望。

參考文獻(xiàn)：

［1］ Bender A T，Beavo J A.Cyclic nucleotide phosphodiesterases：molecular regulation to clinical use［J］.Pharmacol Rev，2006，58（3）：488－520.

［2］ Zhang H T.Cyclic AMP-specific phosphodiesterase-4 as a target for the development of antidepressant drugs［J］.Curr Pharm Des，2009，15（14）：1688－98.

［3］ Perez-Torres S，Miro X，Palacios J M，et al.Phosphodiesterase type 4 isozymes expression in human brain examined by in situ hybridization histochemistry and［3H］rolipram binding autoradiography：Comparison with monkey and rat brain［J］.J Chem Neuroanatomy，2000，20（3－4）：349－74.

［4］ Zhang H T，Huang Y，Jin SL，et al.Antidepressant-like profile and reduced sensitivity to rolipram in mice deficient in the PDE4D phosphodiesterase enzyme［J］.Neuropsychopharmacology，2002，27（4）：587－95.

［5］ Li Y F，Cheng Y F，Huang Y，et al.Phosphodiesterase-4D knock-out and RNA interference-mediated knock-down enhance memory and increase hippocampal neurogenesis via increased cAMP signaling［J］.J Neurosci，2011，31（1）：172－83.

［6］ Millar JK，Pickard B S，Mackie S，et al.DISC1 and PDE4B are interacting genetic factors in schizophrenia that regulate cAMPsignaling［J］.Science，2005，310（5751）：1187－91.

［7］ Zhang H T，Huang Y，Masood A，et al.Anxiogenic-like behavioral phenotype of mice deficient in phosphodiesterase 4B（PDE4B）［J］.Neuropsychopharmacology，2008，33（7）：1611－23.

［8］ Giembycz M A，F(xiàn)ield SK.Roflumilast：first phosphodiesterase-4 inhibitor approved for treatment of COPD［J］.Drug Des Devel T-her，2010，21（4）：147－58.

［9］ Wachtel H.Potential antidepressant activity of rolipram and other selective cyclic adenosine 3′，5′-monophosphate phosphodiesterase inhibitors［J］.Neuropharmacology，1983，22（3）：267－72.

［10］Mizokawa T，Kimura K，Ikoma Y，et al.The effect of a selective phosphodiesterase inhibitor，rolipram，on muricide in olfactory bulbectomized rats［J］.Jpn J Pharmacol，1988，48（3）：357－64.

［11］ Przegalinski E，Bigajska K.Antidepressant properties of some phosphodiesterase inhibitors［J］.Pol J Pharmacol Pharm，1983，35：233－40.

［12］Zhang H T，Huang Y，Mishler K，et al.Interaction between the antidepressant-like behavioral effects of beta adrenergic agonists and the cyclic AMP PDE inhibitor rolipram in rats［J］.Psychopharmacology（Berl），2005，182（1）：104－15.

［13］Dlaboga D，Hajjhussein H，O′Donnell J M.Regulation of phosphodiesterase-4（PDE4）expression in mouse brain by repeated antidepressant treatment：comparison with rolipram［J］.Brain Res，2006，1096（1）：104－12.

［14］王 闖，程玉芳，張漢霆，徐江平.磷酸二酯酶抑制劑與學(xué)習(xí)記憶相關(guān)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路研究進(jìn)展［J］.中國(guó)藥理學(xué)通報(bào)，2009，25（7）：844－7.

［14］Wang C，Cheng Y F，Zhang H T，Xu J P.Progress in the relationship of phosphodiesterases inhibitors and signal transduction pathway associated with learning and memory［J］.Chin Pharmacol Bull，2009，25（7）：844－7.

［15］Navakkode S，Sajikumar S，F(xiàn)rey J U.The type IV-specific phosphodiesterase inhibitor rolipram and its effect on hippocampal longterm potentiation and synaptic tagging［J］.J Neurosci，2004，24（35）：7740－77.

［16］Zhang H T，Huang Y，Suvarna N U，et al.Effects of the novel PDE4 inhibitors MEM1018 and MEM1091 on memory in the radial-arm maze and inhibitory avoidance tests in rats［J］.Psychopharmacology（Berlin，Ger.），2005，179（3）：613－9.

［17］Ramos B P，Birnbaum SG，Lindenmayer I，et al.Dysregulation of protein kinase a signaling in the aged prefrontal cortex：new strategy for treating age-related cognitive decline［J］.Neuron，2003，40（4）：835－45.

［18］Vitolo O V，San′t Angelo A，Costanzo V，et al.Amyloid beta-Peptide inhibition of the PKA／CREB pathway and long-term potentiation reversibility by drugs that enhance cAMP signaling［J］.Proc Natl Acad Sci USA，2002，99（20）：13217－21.

［19］Gong B，Vitolo O V，Trinchese F，et al.Persistent improvement in synaptic and cognitive functions in an Alzheimer mouse model after rolipram treatment［J］.JClin Invest，2004，114（11）：1624－34.

［20］Knapp C M，F(xiàn)oye M M，Ciraulo D A，Kornetsky C.The type IV phosphodiesterase inhibitors，Ro 20－1724 and rolipram，block the initiation of cocaine self-administration［J］.Pharmacol Biochem Behav，1999，62（1）：151－8.

［21］Thompson B E，Sachs B D，Kantak K M，Cherry J A.The type IV phosphodiesterase inhibitor rolipram interferes with drug-induced conditioned place preference but not immediate early gene induction in mice［J］.Eur J Neurosci，2004，19（9）：2561－8.

［22］Iyo M，Bi Y，Hashimoto K，et al.Prevention of methamphetamine-induced behavioral sensitization in rats by a cyclic AMP phosphodiesterase inhibitor，rolipram［J］.Eur J Pharmacol，1996，312（2）：163－70.

［23］Mamiya T，Noda Y，Ren X，et al.Involvement of cyclic AMP systems in morphine physical dependence in mice：prevention of development of morphine dependence by rolipram，a phosphodiesterase 4 inhibitor［J］.Br J Pharmacol，2001，132（5）：1111－7.

［24］Hu W，Lu T，Chen A，et al.Inhibition of phosphodiesterase-4 decreases ethanol intake in mice［J］.Psychopharmacology，2011，218（2）：331－9.

［25］Wen R T，Zhang M，Qin W J，et al.The phosphodiesterase-4（PDE4）inhibitor rolipram decreases ethanol seeking and consumption in alcohol-preferring fawn-hooded rats［J］.Alcohol Clin Exp Res，2012，36（12）：2157－67.

［26］Nishi A，Kuroiwa M，Miller D B，et al.Distinct roles of PDE4 and PDE10A in the regulation of cAMP／PKA signaling in the striatum［J］.J Neurosci，2008，28（42）：10460－71.

［27］劉 旭，程玉芳，張漢霆，徐江平.咯利普蘭對(duì)局灶性腦缺血／再灌注損傷大鼠學(xué)習(xí)記憶及海馬PDE4活性的影響［J］.中國(guó)病理生理雜志，2008，24（6）：1096－100.

［27］Liu X，Cheng Y F，Zhang H T，Xu J P.Effects of rolipram on learn ing and memory and the activity of PDE4 in hippocampus following the focal brain injury induced by ischemia-reperfusion in rats［J］.Chin J Pathophysiol，2008，24（6）：1096－100.

［28］李凌霞，程玉芳，王 闖，等.咯利普蘭對(duì)全腦缺血／再灌注損傷大鼠的影響［J］.中國(guó)藥學(xué)雜志，2009，44（9）：665－9.

［28］Li L X，Cheng Y F，Wang C，et al.Effects of rolipram on global cerebral injury induced by ischemia-reperfusion［J］.Chin Pharm J，2009，44（9）：665－9.

［29］祁 全，畢鄭鋼，張 磊，等.Rolipram對(duì)大鼠急性脊髓損傷的保護(hù)作用［J］.中國(guó)脊柱脊髓雜志，2008，18（10）：766－71.

［29］Qi Q，Bi Z G，Zhang L，et al.Study of Rolipram on the neuroprotection of acute spinal cord injury in rat［J］.Chin J Spine Spinal Cord，2008，18（10）：766－71.

［30］Sengupta R，Sun T，Warrington N M，et al.Treating brain tumors with PDE4 inhibitors［J］.Trends Pharmacol Sci，2011，32（6）：337－44.