李博然，黃志軍，，向陽(yáng)，陳鵬，徐紹新，翟莉

(1.武漢理工大學(xué)化學(xué)工程學(xué)院，武漢 430070；2.武漢健民藥業(yè)集團(tuán)股份有限公司，武漢 430052)

脈君安膠囊中氫氯噻嗪的溶出度研究

李博然1，黃志軍1，2，向陽(yáng)2，陳鵬2，徐紹新2，翟莉2

(1.武漢理工大學(xué)化學(xué)工程學(xué)院，武漢 430070；2.武漢健民藥業(yè)集團(tuán)股份有限公司，武漢 430052)

目的 建立脈君安膠囊中氫氯噻嗪的溶出度測(cè)定方法。方法采用小杯法,以鹽酸溶液為溶出介質(zhì)、轉(zhuǎn)速50 r·min-1測(cè)定溶出度,采用高效液相色譜法測(cè)定有效成分氫氯噻嗪的溶出量。結(jié)果氫氯噻嗪在2.48～12.40mg·L-1濃度內(nèi)線性關(guān)系良好(r=0.999 9),平均回收率為99.1%。結(jié)論該方法簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確、重復(fù)性好,可用于該藥的溶出度測(cè)定。

脈君安膠囊；溶出度；小杯法；色譜法,高效液相

脈君安膠囊為中西藥復(fù)方制劑,具有平肝熄風(fēng)、解痙鎮(zhèn)痛的功效,臨床用于高血壓癥、頭痛眩暈、頸項(xiàng)強(qiáng)痛、失眠心悸、冠心病。氫氯噻嗪為處方中的化藥活性成分,由于難溶于水,故在體內(nèi)的有效溶出是保證制劑生物利用度的關(guān)鍵之一。目前,對(duì)于中藥膠囊還只限于測(cè)定崩解時(shí)限,僅能反映藥物是否崩解,而不能反映出藥物的溶出量。因此筆者通過(guò)對(duì)脈君安膠囊中氫氯噻嗪溶出度的研究,建立了適宜的溶出系統(tǒng),并采用高效液相色譜(HPLC)法測(cè)定氫氯噻嗪的體外溶出度,為評(píng)價(jià)和控制脈君安膠囊的質(zhì)量提供了依據(jù)。

1 儀器與試藥

1.1 儀器 ZRS-8G智能溶出實(shí)驗(yàn)儀(天津大學(xué)無(wú)線電廠)；Shimadzu 10A型高效液相色譜儀(日本)；BP211D型1/10萬(wàn)電子分析天平(德國(guó)Sartorius公司)。

1.2 試藥 脈君安膠囊(武漢健民中藥工程有限責(zé)任公司,批號(hào):060701,060702,060703)；氫氯噻嗪對(duì)照品(中國(guó)食品藥品檢定研究院,批號(hào):100309-200702)；鹽酸(分析純,武漢市亞泰化工試劑有限公司)；乙腈(色譜純,美國(guó)Tedia公司)。

2 方法與結(jié)果

2.1 溶出度測(cè)定方法的建立

2.1.1 色譜條件 色譜柱為Hypersil BDS C18柱(4.6 mm×250 mm,5μm)；流動(dòng)相為乙腈-0.06 mol·L-1磷酸二氫銨溶液(用磷酸調(diào)節(jié)pH至2.5)(10∶90)；檢測(cè)波長(zhǎng)為272 nm；柱溫為30℃；流速為1 mL·min-1［1-2］。在此色譜條件下測(cè)定陰性樣品、氫氯噻嗪對(duì)照品及脈君安膠囊樣品,色譜圖見(jiàn)圖1,待測(cè)指標(biāo)成分與其他成分分離度良好。

圖1 陰性樣品(A)、對(duì)照品(B)和樣品(C)HPLC色譜圖1.氫氯噻嗪

2.1.2 線性關(guān)系考察 精密稱取氫氯噻嗪對(duì)照品4.96 mg,置200 mL量瓶中,加溶出介質(zhì)振搖使溶解,并定容至刻度,作為對(duì)照品溶液。精密量取對(duì)照品溶液1,2,3,4,5 mL,分別置10 mL量瓶中,加溶出介質(zhì)稀釋至刻度,搖勻,照上述色譜條件分別進(jìn)樣20μL,記錄色譜圖。以峰面積(Y)對(duì)濃度(X)進(jìn)行線性回歸。結(jié)果表明,氫氯噻嗪濃度在2.48～12.40 mg·L-1范圍時(shí),與峰面積呈現(xiàn)良好的線性關(guān)系,回歸方程為: Y=67 843X+2 046.4,r=0.999 9。

2.1.3 回收率實(shí)驗(yàn) 精密稱取氫氯噻嗪對(duì)照品7.52 mg,置100 mL量瓶,加溶出介質(zhì)振搖使溶解,并定容至刻度,搖勻。精密量取0,1,3,5 mL分別置50 mL量瓶中,加氫氯噻嗪陰性對(duì)照液稀釋至刻度,制成陰性溶液和20%,60%,100%溶出濃度的4組溶液各3份,照上述色譜條件分別進(jìn)樣20μL,測(cè)定峰面積,計(jì)算出3個(gè)濃度的回收率(n=3)分別為99.8% (RSD=0.69%),98.7%(RSD=1.35%),98.9% (RSD=1.40%),平均回收率為99.1%。

2.1.4 精密度實(shí)驗(yàn) 取脈君安膠囊45 min溶出液,重復(fù)連續(xù)進(jìn)樣6次,每次20μL,記錄色譜峰面積,RSD為1.33%,表明儀器精密度良好。

2.1.5 穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn) 取脈君安膠囊45 min溶出液,分別在0,2,4,6,8,10 h進(jìn)樣20μL,記錄色譜峰面積, RSD為1.52%,表明溶出液在10 h內(nèi)保持穩(wěn)定。

2.2 溶出實(shí)驗(yàn)條件的選擇

2.2.1 溶出度方法的選擇 在本品處方中,氫氯噻嗪為難溶性有效成分,含量較低,在進(jìn)行溶出度測(cè)定時(shí)考慮到含量測(cè)定方法的線性范圍和檢測(cè)靈敏度的要求,并參考相關(guān)文獻(xiàn)［3］,采用小杯法。

2.2.2 溶出介質(zhì)的選擇 參照《中華人民共和國(guó)藥典》二部中氫氯噻嗪片的溶出度測(cè)定方法［4］,本品選用鹽酸溶液(稀鹽酸24 m L加水至1 000 m L)200 mL作為溶出介質(zhì)。

2.2.3 轉(zhuǎn)速的選擇 取樣品(批號(hào):060701),以鹽酸溶液(稀鹽酸24 mL加水至1 000 mL)200 m L為溶出介質(zhì),分別以25,50,75 r·min-1進(jìn)行實(shí)驗(yàn),經(jīng)45 min時(shí)取樣,進(jìn)行測(cè)定。結(jié)果表明樣品在50 r·min-1即溶出良好,故確定轉(zhuǎn)速為50 r·min-1。

2.3 100%溶出量測(cè)定 取樣品1粒(批號(hào): 060701),置200 m L量瓶中,加溶出介質(zhì)適量,超聲使完全溶解,加溶出介質(zhì)定容至刻度,搖勻,用微孔濾膜(孔徑0.45μm)迅速濾過(guò),取濾液作為100%溶出液。

2.4 溶出曲線的均一性 取樣品(批號(hào):060701),按照《中華人民共和國(guó)藥典》二部溶出度測(cè)定法第三法,以鹽酸溶液(稀鹽酸24 mL加水至1 000 mL)200 mL為溶出介質(zhì),轉(zhuǎn)速50 r·min-1,每個(gè)溶出杯中加入1粒樣品進(jìn)行實(shí)驗(yàn),共6杯,分別在5,15,30,45,60,90 min時(shí)取樣2 m L(每次取樣后立即補(bǔ)充同體積的溶出介質(zhì)),用微孔濾膜(孔徑0.45μm)迅速濾過(guò),精密吸取濾液20μL,注入液相色譜儀,測(cè)定,計(jì)算累計(jì)溶出量與時(shí)間的溶出曲線,見(jiàn)圖2。結(jié)果表明,樣品溶出度的均一性良好。

2.5 樣品的溶出度測(cè)定結(jié)果 按照《中華人民共和國(guó)藥典》2005年版二部附錄ⅩC第三法(小杯法),以鹽酸溶液(稀鹽酸24 m L加水至1 000 m L)200 mL為溶出介質(zhì),轉(zhuǎn)速50 r·min-1,每個(gè)溶出杯中加入1粒樣品進(jìn)行實(shí)驗(yàn),經(jīng)45 min時(shí)取樣,溶出液用微孔濾膜(孔徑0.45μm)迅速濾過(guò),濾液作為供試品溶液。按上述方法測(cè)定3批脈君安膠囊45 min時(shí)的溶出度,結(jié)果批號(hào)為060701,060702,060703的3批樣品溶出度分別為91.7%(RSD=2.7%),90.2%(RSD=1.9%),92.1% (RSD=3.0%)。

圖2 樣品的溶出曲線

3 討論

脈君安膠囊為中西藥復(fù)方制劑,筆者尚未見(jiàn)其溶出度測(cè)定方法的報(bào)道,建立了以氫氯噻嗪為溶出指標(biāo),并參考有關(guān)文獻(xiàn),采用HPLC法對(duì)目標(biāo)峰進(jìn)行分離,測(cè)定其含量,結(jié)果峰形良好,分離度好,整個(gè)方法簡(jiǎn)單、結(jié)果準(zhǔn)確,可適用于脈君安膠囊的溶出度測(cè)定及質(zhì)量控制。

由于氫氯噻嗪在本品中含量較低,在進(jìn)行溶出度測(cè)定時(shí)采用了小杯法。并參照《中華人民共和國(guó)藥典》二部中氫氯噻嗪片的溶出度測(cè)定方法,選用了鹽酸溶液為溶出介質(zhì)。

加樣回收率實(shí)驗(yàn)采用了空白加入法［5］,以對(duì)照品加入陰性對(duì)照液中,減少了操作和計(jì)算誤差,結(jié)果更加準(zhǔn)確。

［1］張火旺.HPLC法測(cè)定復(fù)方羅布麻片(Ⅱ)中氫氯噻嗪的含量[J].中國(guó)藥事,2007,21(9):727-728.

［2］朱衛(wèi)翔,楊紹華.反相高效液相色譜法測(cè)定珍菊降壓片中氫氯噻嗪和蘆丁的含量[J].中南藥學(xué),2005,3(5):279-281.

［3］譚芳,姜鴿.酚氨咖敏片溶出度測(cè)定方法[J].醫(yī)藥導(dǎo)報(bào), 2007,26(8):950-951.

［4］國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典(二部)[M].北京:化學(xué)工業(yè)出版社,2010:556.

［5］曾彬,易進(jìn)海.左金分散片的溶出度測(cè)定[J].華西藥學(xué)雜志,2006,21(2):190-191.

DOI 10.3870/yydb.2014.01.031

R286;R927

A

1004-0781(2014)01-0106-02

2012-08-13

2012-09-27

李博然(1984-),男,湖北武漢人,碩士,主要從事藥物新劑型與新技術(shù)研發(fā)。電話：(0)13100647537,E-mail：hblbr@sina.com。

向陽(yáng)(1979-),男,湖北武漢人,高級(jí)工程師,碩士,主要從事中藥新藥研發(fā)工作。電話：027-84514002,E-mail：xiangy79@sohu.com。