唐茂妍,和小明,陳旭東
(1.上海正正生物技術(shù)有限公司,上海 200433;2.北京中農(nóng)穎泰生物技術(shù)有限公司,北京100193)
在發(fā)現(xiàn)仔豬飼料中添加乳酸可以減少仔豬糞便中大腸桿菌的數(shù)量、提高生長速度后,飼料酸化劑日益受到關(guān)注、很多研究者認為酸化劑是抗生素的最佳替代品之一[1-5]。多數(shù)試驗表明,乳酸對動物特別是斷奶后仔豬的生產(chǎn)性能、飼料轉(zhuǎn)化效率等均有顯著改善[6-9]。文章旨在從乳酸的結(jié)構(gòu)、化學(xué)特性、體內(nèi)來源及功效進一步說明乳酸在復(fù)合酸化劑中的重要作用,同時為乳酸的合理應(yīng)用提供理論依據(jù)。
乳酸為無味液體,純品為無色,工業(yè)品為無色到淺黃色液體,具有強吸濕性。乳酸密度為1.206 g·mL-1(25/4℃),熔點18℃,沸點122℃(2 kPa)。乳酸可與水、乙醇、甘油混溶,能隨過熱水蒸氣揮發(fā),常壓蒸餾則分解。乳酸濃縮至50%時部分轉(zhuǎn)化為乳酸酐,故85%~90%的乳酸產(chǎn)品中含有乳酸酐10%~15%。
乳酸是世界公認的三大有機酸之一,是自然界中存在的最簡單且最廣泛的一種羥基羧酸。乳酸的結(jié)構(gòu)由Wislicenus在1873年提出,其分子中既有羥基又有羧基,因而乳酸可以進行多種化學(xué)反應(yīng),如氧化反應(yīng)、還原反應(yīng)、縮合和羥基上的取代反應(yīng)等,可制備多種乳酸衍生物,同時也表明乳酸具備在動物體內(nèi)參與多種生物反應(yīng)的特性。
乳酸分子中有一個不對稱的碳原子,所以有兩種旋光異構(gòu)體,即L-乳酸和D-乳酸。哺乳動物只有分解L-乳酸的L-乳酸脫氫酶,而D-乳酸進入機體后,由于不能代謝,使血尿酸度提高,過量的攝入就引起代謝紊亂等不良反應(yīng)。
對于幼齡哺乳動物而言,乳酸是母乳中的乳糖在乳酸菌等細菌的作用下發(fā)酵分解得到的產(chǎn)物。乳酸菌發(fā)酵可分為同型乳酸發(fā)酵和異型乳酸發(fā)酵,同型乳酸發(fā)酵乳糖只產(chǎn)生乳酸,異型乳酸發(fā)酵除產(chǎn)生乳酸外,還生成乙醇、二氧化碳等物質(zhì)。
乳糖是通過透膜酶系統(tǒng)和群移位系統(tǒng)兩種不同的機制而進入乳酸菌細胞的。
透膜酶系統(tǒng):在透膜酶的作用下,乳糖進入乳酸菌細胞內(nèi),經(jīng)β-半乳糖苷酶的作用分解為葡萄糖和半乳糖,因不同乳酸菌對這兩種產(chǎn)物的優(yōu)先代謝順序不同,嗜熱鏈球菌和保加利亞乳桿菌可優(yōu)先利用葡萄糖而代謝產(chǎn)生乳酸,但對游離型半乳糖不能利用,其被排出細胞外或轉(zhuǎn)化成高分子物質(zhì)(膠糖)而蓄積起來。
群移位系統(tǒng):在細胞膜上磷酸轉(zhuǎn)移酶作用下,乳糖經(jīng)磷酸化后進入乳酸菌細胞內(nèi)。之后經(jīng)磷酸β-半乳糖苷酶的作用,分解成葡萄糖和6-磷酸半乳糖。前者經(jīng)糖酵解途徑,后者經(jīng)6-磷酸塔格糖途徑進行代謝。通過這樣的乳糖發(fā)酵代謝途徑,最終產(chǎn)生乳酸及其他一些小分子脂肪酸。這種乳糖代謝機制一般分布在乳酸乳球菌乳酸亞種(乳酸乳球菌)、干酪乳桿菌干酪亞種(干酪乳桿菌)等菌屬中。
雖然對于哺乳仔豬胃液組成隨時間的變化研究結(jié)論并不一致,但多數(shù)學(xué)者均認為在仔豬出生后的一段時間內(nèi)胃液中無法檢測到游離鹽酸,一般從2~3周才開始出現(xiàn),并隨年齡而增加,60日齡后鹽酸含量開始接近成年豬水平。仔豬哺乳期乳酸幾乎占胃中有機酸的80%~100%,并且為維持胃中低pH起重要作用。胃中乳酸含量與pH成顯著負相關(guān),這也有助于哺乳期豬消化道有益菌(乳酸桿菌等)的繁殖生長,并且較低的pH也有利于乳蛋白的消化。因而,哺乳仔豬胃中乳酸的存在保證了消化道內(nèi)的適宜環(huán)境,從而保持對母乳的良好消化起到重要作用。斷奶后第1周,由于乳糖消失,乳酸濃度下降,揮發(fā)性脂肪酸(VFA)產(chǎn)生增加,鹽酸此時分泌也很少,使胃內(nèi)總酸度較低。隨后,乳酸和VFA不斷減少,鹽酸分泌緩慢增加,直到斷奶后3-4周,鹽酸可占胃內(nèi)總酸度的50%。同時,飼料中一些蛋白質(zhì),尤其是無機陽離子也會與胃酸結(jié)合,降低胃內(nèi)酸度,不利于蛋白質(zhì)消化,并對非乳酸桿菌類細菌繁殖起抑制作用。所以對早期斷奶的仔豬,采取適當措施保證胃內(nèi)一定酸度極為重要。
自報道在畜禽飲水中添加乳酸可使得糞便中有害菌數(shù)量降低以來,研究者對于乳酸的作用與飼料中的應(yīng)用研究越來越多。主要包括食品的防腐保鮮、食品調(diào)味料、釀酒時的發(fā)酵添加劑、風(fēng)味劑和酸度調(diào)節(jié)劑等;在飼料中的應(yīng)用主要包括青飼料貯藏劑、牧草成熟劑、防腐劑和促生長作用等。
由于飼料中的蛋白質(zhì)原料和礦物質(zhì)原料的系酸力較高,可中和動物胃中的鹽酸,使得幼齡動物分泌不足的胃酸更加缺乏。飼料中添加酸化劑的目的是降低飼料pH和系酸力,緩解由于幼齡動物消化道發(fā)育不成熟造成的消化液和消化酶特別是胃蛋白酶活性不足,從而改善動物對植物性飼料蛋白質(zhì)的消化率,降低營養(yǎng)性和細菌性腹瀉發(fā)生率[10-12]。多數(shù)研究認為,飼料系酸力在一定范圍內(nèi)可改善斷奶仔豬消化道食糜酸度,維持消化道菌群平衡,保證消化系統(tǒng)正常生理功能,同時提高斷奶仔豬日增重和飼料效率[13-14]。馮尚連等報道,在基礎(chǔ)日糧中分別添加乳酸0.3%和0.6%,飼料pH分別降低0.20和0.29,系酸力分別降低4.78和3.78U[15]。
酸化劑對有害菌的抑制作用為其替代抗生素提供了可能性[16]。張軍等認為,細菌胞內(nèi)酸根離子的聚集是有機酸抑菌作用的重要決定因素,細菌胞內(nèi)外pH梯度及胞外酸根離子濃度又是影響胞內(nèi)酸根離子聚集的主要因素[17]。有機酸的pKa關(guān)系到其殺菌、抑菌效果的有效性。消化道菌群失衡很容易引起大腸桿菌的過度繁殖和生長,從而造成動物腹瀉和下痢[2]。Maribo等研究發(fā)現(xiàn),在飼料中加入乳酸0.7%可降低胃腸道pH,并且提高盲腸和結(jié)腸乳酸菌密度[18]。Tsiloyiannis等在日糧中添加乳酸1.6%,可使仔豬腹瀉率降低66%,死亡率降低60%,與不添加乳酸的對照組差異顯著(P<0.05)[6-7]。馮尚連等研究表明,在日糧中添加乳酸0.3%和0.6%均可提高回腸乳酸桿菌數(shù)量并降低大腸桿菌數(shù)量[15]。
乳酸是重要飼料添加劑,但國內(nèi)外對其作為酸化劑研究較少,多數(shù)集中在檸檬酸、延胡索酸、蘋果酸等的研究。乳酸對豬生產(chǎn)性能研究結(jié)果表明,乳酸對于幼齡動物的生產(chǎn)性能影響正效應(yīng)明顯。日糧中添加乳酸可提高仔豬日增重2%~72%,飼料轉(zhuǎn)化率可降低0.49%~40%,礦物質(zhì)(主要為鈣、磷)消化率分別提高 4%~19%和 10%~19%[6-7,9,15,19-21]。與此相反,Partanen等報道,在斷奶仔豬日糧中添加乳酸0.8%對仔豬總增重、飼料轉(zhuǎn)化率和腹瀉指數(shù)均有不良影響,與對照組相比差異不顯著(P>0.05)[22]。乳酸在豬生產(chǎn)中的作用效果見附表[6-7,9,15,19-23]。從附表可知,在已查閱的試驗數(shù)據(jù)中,乳酸對仔豬生產(chǎn)性能的影響有正向作用。但對仔豬生產(chǎn)性能各指標的影響差異較大,主要是與試驗動物日齡、體重、試驗日糧組成、乳酸添加量等有很大關(guān)系,同時試驗中無法反映出的飼養(yǎng)管理水平也會對試驗結(jié)果造成較大影響。
附表 乳酸在豬生產(chǎn)中的作用效果
乳酸是作為食品、飼料、工業(yè)中應(yīng)用最多的添加劑之一,從發(fā)酵方法到合成方法等生產(chǎn)技術(shù)發(fā)展迅速。工業(yè)生產(chǎn)乳酸方法主要是發(fā)酵法和合成法。乳酸最早是由法國科學(xué)家在1881年通過發(fā)酵方法制得的,因其工藝簡單,原料充足,發(fā)展較早而成為比較成熟的乳酸生產(chǎn)方法,約占乳酸生產(chǎn)的70%。但乳酸發(fā)酵法用時較長,而且不能連續(xù)生產(chǎn),常見的還是間歇或半連續(xù)化生產(chǎn),且我國發(fā)酵乳酸質(zhì)量達不到國際標準。化學(xué)法可實現(xiàn)乳酸的大規(guī)模連續(xù)化生產(chǎn),且合成乳酸也已得到美國食品和藥品管理局(FDA)的認可,但原料一般具有毒性,不符合綠色化學(xué)要求。除了以上兩種常見方法,乳酸生產(chǎn)還有酶法生產(chǎn),但其工藝復(fù)雜,大規(guī)模工業(yè)應(yīng)用還有待于進一步研究。因而,現(xiàn)在飼料用酸化劑還主要依靠發(fā)酵法和化學(xué)合成兩種方法。
發(fā)酵法的原料一般是玉米、大米、甘薯等淀粉質(zhì)原料(也有以苜蓿、纖維素等作原料)。能夠產(chǎn)酸的乳酸菌很多,但產(chǎn)酸質(zhì)量較低,主要是根霉菌和乳酸桿菌等菌系。不同菌系其發(fā)酵途徑不同,實際由于存在微生物其他生理活動,不是單純某一種發(fā)酵途徑。這也是發(fā)酵法得到乳酸純度不高的原因之一。
用于生產(chǎn)乳酸的常見合成法為乳腈法和丙烯腈法。其他的還包括丙酸法、丙烯法等,但因原料或生產(chǎn)過程中有毒物質(zhì)產(chǎn)生,因而不常在乳酸生產(chǎn)中使用。
4.2.1 乳腈法
乳腈法是將乙醛和冷的氫氰酸連續(xù)送入反應(yīng)器生成乳腈(或直接用乳腈作原料),將乳腈再打入水解釜,同時注入硫酸和水,水解乳腈得到粗乳酸。再將粗乳酸送入酯化釜,注入乙醇酯化,經(jīng)精餾、濃縮、分解得精乳酸。
4.2.2 丙烯腈法
丙烯腈法是將丙烯腈和硫酸送入反應(yīng)器中反應(yīng),再水解物注入酯化反應(yīng)器中與甲醇反應(yīng),然后把硫酸氫銨分離出去,剩余物送入蒸餾塔,塔底獲精酯后再送入第二蒸餾塔,加熱分解,塔底得稀乳酸,經(jīng)真空濃縮得乳酸產(chǎn)品。
目前乳酸在飼料中的應(yīng)用已經(jīng)普及,但對于乳酸在動物體內(nèi)的消化代謝機理、對有害菌的抑制機理,在飼料中的適宜添加量、與其他單酸之間的互作效應(yīng)等都需要做深入研究,才能真正發(fā)揮其在飼料和動物體內(nèi)的作用,進而為降低抗生素使用量,替代其促生長作用提供理論基礎(chǔ)。
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