劉善峰，徐愛(ài)霞，李葉桓，王海龍

(1.沂南縣中醫(yī)院，山東 沂南 276300;2.沂南縣婦幼保健院，山東 沂南 276300;3.濟(jì)南大學(xué)醫(yī)學(xué)與生命科學(xué)學(xué)院，山東 濟(jì)南 250022)

氟比洛芬(Flurbiprofen，F(xiàn)P)作為一種前列腺素酶抑制劑，為新一代的非甾體抗炎藥物，廣泛用于風(fēng)濕性、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎，骨關(guān)節(jié)炎，強(qiáng)直性脊椎炎，肌肉的扭傷和拉緊等骨骼和關(guān)節(jié)疾病。氟比洛芬在芳基烷酸類解熱鎮(zhèn)痛藥中作用最強(qiáng)，每次劑量120mg可與阿司匹林2g具有同等的功效。但其也具有體內(nèi)生物半衰期短，生物利用度低，易引起消化道潰瘍和出血等缺點(diǎn)，利用緩釋技術(shù)可有效提高藥物的穩(wěn)定性，降低不良反應(yīng)的發(fā)生率，是該藥物劑型發(fā)展的新方向［1，2］。研究表明，丙烯酸樹(shù)脂(Eudragit RL，Endragit RS等)廣泛用于制作不同滲透性能的緩釋材料［3］，利用這一特性將氟比洛芬制成固體分散體，達(dá)到緩釋功能，并可提高其釋放度，是制備其他固體劑型的基礎(chǔ)。本實(shí)驗(yàn)采用溶劑法制備了氟比洛芬固體分散體并對(duì)其體外釋藥特性進(jìn)行了考察。

1 儀器與試藥

1.1 儀器 FA1104B電子分析天平(上海越平科學(xué)儀器有限公司);RE－52AA旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器(上海亞榮生化儀器廠);UV759紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)(上海佑科儀器儀表有限公司);ZRS－4智能溶出試驗(yàn)儀(天津大學(xué)無(wú)線電廠);CDR－1差熱分析儀(日本島津公司);真空干燥箱(上海一恒科學(xué)儀器廠)。

1.2 試劑 氟比洛芬(德國(guó)Knoll制藥公司，藥用級(jí));聚丙烯酸樹(shù)脂RL/RS(德國(guó)羅姆公司，藥用級(jí)，批號(hào):990914);卵磷脂(上海太偉磷脂公司，藥用級(jí));甲醇、乙醇、磷酸二氫鉀(天津市廣成化學(xué)試劑廠，分析純);其他試劑均為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 氟比洛芬固體分散體的制備 固體分散體的制備采用溶劑法，精密稱取氟比洛芬約0.2g和聚丙稀樹(shù)脂RS/RL，加入乙醇作溶劑，使藥物和載體在30～40℃溶解。溶解后的液體用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀40℃左右蒸除溶劑，得白色固體。該固體置真空干燥箱24 h，溫度30℃。干燥后將固體研磨過(guò)60目篩，制得氟比洛芬固體分散體。

2.2 含量測(cè)定方法學(xué)考察

2.2.1 檢測(cè)波長(zhǎng)的選擇 稱取氟比洛芬適量，置50mL量瓶中，先加少量甲醇使溶解，然后加磷酸鹽緩沖液(pH 7.2，亦為體外溶出介質(zhì)，下同)至刻度，制成濃度約 6 μg·mL－1的溶液，在 200 ～400 nm 波長(zhǎng)范圍內(nèi)進(jìn)行紫外掃描，另取聚丙烯酸樹(shù)脂Eudragit RL100、Eudragit RS100及卵磷脂制成濃度約為30 μg·mL－1的溶液，進(jìn)行紫外掃描，氟比洛芬在247 nm處波長(zhǎng)處有最大吸收，聚丙稀樹(shù)脂RL/RS及卵磷脂在此波長(zhǎng)處幾乎無(wú)吸收，不干擾氟比洛芬的測(cè)定，故確定檢測(cè)波長(zhǎng)為247 nm。

2.2.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備 精密稱取干燥至恒重的氟比洛芬約20mg置200mL量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為標(biāo)準(zhǔn)貯備液。分別精密量取上述標(biāo)準(zhǔn)貯備液 1、2、3、4、5、6mL 置 6 支 50mL 量瓶中，加磷酸鹽緩沖液(pH 7.2)至刻度，搖勻，于247 nm處測(cè)定吸光度，以氟比洛芬濃度C對(duì)吸光度A進(jìn)行線性回歸，得回歸方程:A=0.0786 C +0.0015，R2=0.9992，表明在2 ～12 μg·mL－1濃度范圍內(nèi)，氟比洛芬濃度與其吸光度呈現(xiàn)良好線性關(guān)系。

2.2.3 穩(wěn)定性試驗(yàn) 精密量取氟比洛芬標(biāo)準(zhǔn)貯備液5mL，置于100mL容量瓶中，加入磷酸鹽緩沖液(pH 7.2)定容，配制 5 μg·mL－1的氟比洛芬溶液，室溫條件下，分別在 0、4、12、24、48、72 h 時(shí)測(cè)定其吸光度數(shù)值，結(jié)果表明，氟比洛芬溶液在72 h內(nèi)其吸光度數(shù)值基本不變，RSD值為1.26%(n=6)，表明其溶液在72 h內(nèi)保持穩(wěn)定。

2.2.4 加樣回收率試驗(yàn) 精密稱取制備好的氟比洛芬分散體約80mg，加入500mL磷酸鹽緩(pH 7.2)沖液，放置過(guò)夜，使氟比洛芬充分溶出，經(jīng)微孔濾膜過(guò)濾后備用。精密量取上述備用溶液9份，每份20mL置25mL量瓶中，3份為一個(gè)劑量組，分別精密加入不同量的氟比洛芬標(biāo)準(zhǔn)貯備液，加磷酸鹽緩沖液(pH 7.2)定容，制成高、中、低三種不同濃度的溶液，在247 nm波長(zhǎng)處測(cè)定加樣前后吸光度數(shù)值，按回歸方程計(jì)算濃度，結(jié)果見(jiàn)明，在加樣量為1.950、7.600、15.220 μg·mL－1的情況下，氟比洛芬的平均回收率為99.7%，RSD為2.38%(n=9)。

2.2.5 精密度試驗(yàn) 精密量取氟比洛芬標(biāo)準(zhǔn)貯備液2、4、6mL，置于50mL 容量瓶中，按”2.2.2”標(biāo)準(zhǔn)曲線制備項(xiàng)下，自“加磷酸鹽緩沖液(pH 7.2)至刻度”起，同法操作。每種溶液每日重復(fù)測(cè)定3次，連續(xù)測(cè)定3 d，計(jì)算日內(nèi)及日間精密度。結(jié)果表明，3種溶液的平均日內(nèi)精密度RSD值為1.03%(n=9)，日間精密度RSD值為1.49%(n=9)，表明所設(shè)計(jì)的方法日內(nèi)、日間精密度良好。

2.3 體外釋藥測(cè)定方法 采用《中國(guó)藥典》2010年版(二部)釋放度測(cè)定的第三法(小杯法)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。轉(zhuǎn)速為100 rpm，溫度為37.5℃，溶出介質(zhì)采用200mL新配制的磷酸鹽緩沖液(pH 7.2)。測(cè)定方法:精密稱取約相當(dāng)于4mg氟比洛芬的固體分散體，放入裝有溶出介質(zhì)的250mL溶出杯中，在0.5、1、2、4、6、8、10 h 等 7 個(gè)規(guī)定時(shí)間點(diǎn)取樣，每次 5mL，同時(shí)向溶出杯中補(bǔ)加5mL溶出介質(zhì)。樣品經(jīng)0.8μm微孔濾膜過(guò)濾后，以磷酸鹽緩沖液pH 7.2為空白，在247 nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度數(shù)值，按“2.2.2”標(biāo)準(zhǔn)曲線制備項(xiàng)下計(jì)算藥物濃度及釋放百分率，并擬合Higuchi方程，計(jì)算藥物釋放半衰期t1/2。

2.4 單獨(dú)聚丙烯樹(shù)脂RL或RS作為載體對(duì)體外釋放結(jié)果的影響 在固體分散體的制備中，曾考察使用單獨(dú)的Eudragit RL或RS作為載體，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，雖然單獨(dú)的藥物－RL和藥物－RS固體分散體的釋放性能高于藥物原粉，但藥物－RS固體分散體釋放過(guò)慢，藥物－RL固體分散體則釋放過(guò)快。因此，單一載體使用不容易達(dá)到理想的釋放效果。兩種載體聯(lián)合使用，通過(guò)改變其配比相互調(diào)節(jié)，能有效地實(shí)現(xiàn)固體分散體釋放緩慢、平穩(wěn)、完全，達(dá)到提高生物利用度的效果。

2.5 正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)與結(jié)果

2.5.1 正交設(shè)計(jì)優(yōu)化處方和工藝 氟比洛芬固體分散體和物理混合物的制備用溶劑法，同前所述。選擇影響藥物溶出速度的三個(gè)因素:藥物－載體的比例、RL/RS的比例、卵磷脂－載體的比例，采用三因素三水平正交設(shè)計(jì)，見(jiàn)表1。

表1 正交試驗(yàn)因素和水平表

2.5.2 正交試驗(yàn)結(jié)果 正交試驗(yàn)篩選結(jié)果及極差分析結(jié)果見(jiàn)表2。由表2可知，各因素對(duì)固體分散體溶出影響的順序?yàn)锳＞B＞C，即藥物載體比例為影響其釋放特性的顯著因素，其次為兩種載體的配比及卵磷脂的濃度。根據(jù)試驗(yàn)結(jié)果，其優(yōu)化后的處方為A3B2C3，即藥物 － 載體比為1∶9，丙烯酸樹(shù)脂RL/RS為2∶1，卵磷脂濃度為0.2%。

表2 正交試驗(yàn)結(jié)果

2.6 正交優(yōu)化處方體外釋放結(jié)果 根據(jù)正交試驗(yàn)結(jié)果選擇優(yōu)化后的處方制備固體分散體，與原料藥、藥物－載體物理混合體的體外釋放效果進(jìn)行比較，結(jié)果見(jiàn)圖1。由圖可知，利用優(yōu)化后的處方得到的固體分散體其釋藥均勻、緩慢，釋放度明顯高于原料藥及未經(jīng)處理的藥物和載體物理混合物。

圖1 處方優(yōu)化后的固體分散體與原料藥、物理混合物體外釋藥性能比較

2.7 固體分散體的鑒別 采用差示掃描熱量法(DSC)進(jìn)行測(cè)定。工作條件為:參比物為 α－Al2O3，氮?dú)?，升溫溫度?0 ℃·min－1，掃描溫度為25～250℃，分別測(cè)定氟比洛芬原料藥，聚丙烯酸樹(shù)脂RS、RL，氟比洛芬載體物理混合物，氟比洛芬固體分散體的DSC曲線，結(jié)果見(jiàn)圖2。由圖可見(jiàn)，物理混合物與氟比洛芬原料在121℃時(shí)有一較寬的吸收峰，認(rèn)定為藥物結(jié)晶的熔解吸收峰。固體分散體中藥物熔解峰的消失說(shuō)明在分散相中不存在結(jié)晶相的氟比洛芬。因此可以認(rèn)為，通過(guò)固體分散技術(shù)，藥物在載體中的物理性質(zhì)發(fā)生了變化，高分子材料和藥物存在相互作用，抑制了藥品結(jié)晶的形成，有利于其均勻釋放。

圖2 氟比洛芬及RL/RS載體、固體分散體差熱分析

3 討論

利用固體分散技術(shù)可將藥物高度分散于載體中，藥物在載體中以微米級(jí)的粒徑存在，可以有效增加難溶性藥物的溶出，提高其生物利用度［4～6］。對(duì)于緩、控釋型固體分散體，其常用的載體除Eudragit外［3］，還有乙基纖維素、蠟脂等［7］。

聚丙烯酸樹(shù)脂類載體(如 Eudragit E、Eudragit RL和Eudragit RS等)，具有胃液中溶脹，腸液中不溶，不能被人體吸收，無(wú)毒無(wú)害等優(yōu)點(diǎn)，廣泛被用作制備緩釋固體分散體的載體。藥物在其中具有不同的穿透性能主要基于其含有季銨基團(tuán)的多少，Eudragit RL和Eudragit RS中，前者含10%氯化三甲胺基甲基丙烯酸酯，后者僅含5%。季銨基含量高者，形成的固體分散體通透性及溶脹性大，故Eudragit RL為高滲型丙烯酸樹(shù)脂，Eudragit RS則為低滲型丙烯酸樹(shù)脂，兩種材料配合使用可獲得理想的釋藥速率。

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