何來鵬，張遠之，王 欣

(1.廣東醫(yī)學(xué)院第二臨床醫(yī)學(xué)院，廣東 東莞 523808;2.廣東醫(yī)學(xué)院醫(yī)學(xué)檢驗學(xué)院，廣東 東莞 523808)

近年來，隨著我國老齡化社會的進程，我國腦血管疾病發(fā)病率和死亡率逐年上升，并且均明顯高于心血管病，已成為三大致死原因之一。其中腦梗死發(fā)病率為110/10萬人口，約占全部腦卒中的60% ～80%，極大地威脅了人民的生命健康。本研究采用流式細(xì)胞術(shù)(FCM)檢測血小板膜GPⅡb/Ⅲa復(fù)合物和P－選擇素在腦梗死急性期患者體內(nèi)的變化，并觀察阿司匹林和奧扎格雷鈉對其表達的影響，以期為指導(dǎo)腦梗死患者的臨床用藥和一、二級預(yù)防提供客觀指標(biāo)和理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 研究對象

1.1.1 病例組均為2012年7月～2014年1月東莞常安醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科住院病人，共85例，其中男性59例，女性26例，年齡36～86歲。

1.1.2 病例組納入標(biāo)準(zhǔn) 符合1996年第四屆全國腦血管病會議制定的診斷標(biāo)準(zhǔn);通過CT或MRI證實為腦梗死，排除顱內(nèi)出血患者;急性腦梗死發(fā)病6～72 h內(nèi)入院治療。

1.1.3 病例組排除標(biāo)準(zhǔn) 腦血管畸形，風(fēng)心病，房顫等心臟疾病，自身免疫性疾病，肝、腎疾病及惡性腫瘤患者;發(fā)病前2周應(yīng)用過抗血小板藥物;發(fā)病2周內(nèi)患感染性疾病或有明顯感染跡象者或外周血WBC＞10×106·L－1。

1.2 實驗方法

1.2.1 干預(yù)方法 A組腦梗死患者選用阿司匹林100mg qd po;B組腦梗死患者選用奧扎格雷鈉80mg加入0.9%氯化鈉注射液 250mL，bid，ivgtt，控制血糖、血脂，調(diào)整血壓，余治療給予改善循環(huán)藥物并酌情使用神經(jīng)營養(yǎng)和脫水劑等。

1.2.2 檢測GPⅡb/Ⅲa復(fù)合物和P－選擇素 患者入院第1、14天進行樣本采集，用大號針頭采血，不扎止血帶，于10min之內(nèi)完成血小板染色步驟。在對照管中加入CD41－PC5、IgG－FITC、IgM －PE 各 5μL，在試驗管中加入 CD41－PC5、PAC －FITC、CD62p－PE 各 5μL，兩支試管各加入血標(biāo)本5μL。孵育、固定后，30min內(nèi)上流式細(xì)胞儀分析。

1.2.3 神經(jīng)功能評分(NIHSS) 根據(jù)美國國立衛(wèi)生研究院卒中量表(the NIH Stroke Scale，NIHSS)的標(biāo)準(zhǔn)進行評分對所有患者于治療前及治療14 d的神經(jīng)功能進行評分。

2 結(jié)果

2.1 藥物對腦梗死急性期患者血小板膜GPⅡb/Ⅲa復(fù)合物和P－選擇素表達的影響

2.1.1 阿司匹林治療前后腦梗死急性期患者血小板膜標(biāo)志物的表達變化 A組腦梗死患者選用阿司匹林治療第14天，血小板膜GPⅡb/Ⅲa復(fù)合物和P－選擇素比治療前有所下降，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)，結(jié)果見表1。

表1 阿司匹林對腦梗死急性期患者血小板膜GPⅡb/Ⅲa復(fù)合物和P－選擇素表達的影響()

注:與治療前相比，*P ＜0.05，＊＊P ＜0.05，△為失訪6例

組別 n GPⅡb/Ⅲa P －選擇素A組治療前46 2.49% ±1.39% 4.15% ±1.76%A組治療后 40△ 1.80% ±1.14%* 3.22% ±1.52%＊＊

2.1.2 奧扎格雷鈉治療前后腦梗死急性期患者血小板膜標(biāo)志物的表達變化 B組腦梗死患者選用奧扎格雷鈉治療第14天，血小板膜GPⅡb/Ⅲa復(fù)合物和P－選擇素比治療前有所下降，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.01)，結(jié)果見表2。

表2 奧扎格雷鈉對腦梗死急性期患者血小板膜GPⅡb/Ⅲa和P－選擇素表達的影響()

表2 奧扎格雷鈉對腦梗死急性期患者血小板膜GPⅡb/Ⅲa和P－選擇素表達的影響()

注:與治療前相比，*P ＜0.01，＊＊P＜0.01;△為失訪5例

組別 n GPⅡb/Ⅲa P －選擇素B組治療前39 2.58% ±1.13% 4.86% ±2.53%B組治療后 34△ 1.18% ±0.52%* 2.01% ±1.49%＊＊

2.1.3 阿司匹林與奧扎格雷鈉治療后腦梗死急性期患者血小板膜標(biāo)志物的比較阿司匹林組與奧扎格雷鈉組患者治療前(即發(fā)病48 h內(nèi))，血小板膜GPⅡb/Ⅲa復(fù)合物和P－選擇素均無明顯差異(P＞0.05)。兩組治療第14天奧扎格雷鈉組的血小板膜GPⅡb/Ⅲa復(fù)合物和P－選擇素均比阿司匹林組下降更明顯(P＜0.05)，結(jié)果見表3。

表3 阿司匹林與奧扎格雷鈉治療后腦梗死急性期患者血小板膜標(biāo)志物的比較()

表3 阿司匹林與奧扎格雷鈉治療后腦梗死急性期患者血小板膜標(biāo)志物的比較()

注:與 A 組相比，*P ＜0.05，＊＊P＜0.05

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2.2 藥物對腦梗死患者神經(jīng)功能評分(NIHSS)的影響 A組腦梗死患者選用阿司匹林治療第14天，NIHSS較治療前有所下降，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。B組腦梗死患者選用奧扎格雷鈉治療第14天，NIHSS較治療前有所下降，差異有顯著統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.01)。阿司匹林組與奧扎格雷鈉組患者治療前NIHSS無明顯差異(P＞0.05);兩組治療第14天，奧扎格雷鈉組NIHSS下降比阿司匹林組更多，差異有統(tǒng)計學(xué)意義P＜0.05)，結(jié)果見表4。

表4 阿司匹林與奧扎格雷鈉對腦梗死急性期患者NIHSS的影響()

表4 阿司匹林與奧扎格雷鈉對腦梗死急性期患者NIHSS的影響()

注:與阿司匹林組相比，*P ＞0.05，●P ＜0.05;與治療前相比，△P ＜0.05，▲P＜0.01;☆失訪6例，★失訪5例

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3 討論

腦梗死是一種發(fā)病率、致殘率很高的疾病，嚴(yán)重威脅人們的身體健康。其治療包括溶栓、降纖、抗凝、抗血小板聚集等方面。但是多數(shù)患者就診時已由超早期(發(fā)病1～6 h)進入急性期(6～24 h)階段，患者多已錯過超早期溶栓治療的機會，故目前降纖、抗凝、抗血小板聚集已成為治療腦梗死的重點。阿司匹林是目前臨床應(yīng)用最為廣泛的抗血小板藥物，其用于預(yù)防和治療腦梗死循證醫(yī)學(xué)證實有效。阿司匹林是一種強效的血小板聚集抑制劑，其抗栓作用主要基于對乙?；h(huán)氧合酶(COX－1)活性部分的不可逆性抑制［1］，繼而抑制血小板內(nèi)前列腺素H2(PGH2)的生成，從而阻礙血栓素A2(TXA2)生成作用，而發(fā)揮抗血小板聚集和抗血小板作用。但阿司匹林同時也抑制血管內(nèi)皮細(xì)胞中PG合成酶，使前列腺素I2(PGI2)生成減少，PGI2具有抑制血小板聚集、解聚和擴張血管作用，因而部分抵消了其抗血栓形成作用。奧扎格雷鈉為TXA2合成酶特異性抑制劑，它的主要藥理作用是能阻礙PGH2生成TXA2，促使血小板所衍生的PGH2轉(zhuǎn)向內(nèi)皮細(xì)胞，用以合成PGI2，從而改善TXA2與PGI2之間的平衡異常，而發(fā)揮其抑制血小板聚集的作用，結(jié)果使凝血過程受到抑制。因此奧扎格雷具有高度選擇性，對PGI2無抑制作用，相反可促進PGI2的生成，其抑制血小板作用較阿司匹林強。在本研究中，A組腦梗死患者選用阿司匹林治療第14天，血小板膜GPⅡb/Ⅲa復(fù)合物、P－選擇素均比治療前有所下降，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。說明阿司匹林作為目前唯一有循證醫(yī)學(xué)證據(jù)的用于缺血性腦卒中的抗血板藥物，可以有效地減少血小板活化程度，降低血小板膜GPⅡb/Ⅲa復(fù)合物和P－選擇素的表達，在腦梗死早期治療及二級預(yù)防中有效，從而使其成為治療及預(yù)防血性腦卒中的經(jīng)典藥物。B組腦梗死患者選用奧扎格雷鈉治療第14天，血小板膜GPⅡb/Ⅲa復(fù)合物和P－選擇素均比治療前(2.15% ±1.10%)有所下降，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。且奧扎格雷鈉組的血小板膜GPⅡb/Ⅲa復(fù)合物和P－選擇素均比阿司匹林組下降更明顯(P＜0.05)。說明奧扎格雷鈉降低血小板活化的效果更為突出，值得在臨床推廣使用，尤其是在患者出現(xiàn)“阿司匹林抵抗”或者胃腸不良反應(yīng)和出血傾向時，可以代替阿司匹林用于抗血小板治療。

目前抗血小板藥物用于腦梗死患者有效的研究結(jié)論中，主要著眼于降低死亡率上，而對改善患者神經(jīng)功能方面并未給予足夠的重視，但治療后的生存質(zhì)量對于腦梗死患者而言尤為重要，因此應(yīng)予足夠重視而將其作為判定療效的重要標(biāo)準(zhǔn)。本研究表明阿司匹林治療14 d后，腦梗死患者NIHSS較治療前有所下降(P＜0.05)。奧扎格雷鈉治療14 d后，腦梗死患者NIHSS較治療前有所下降(P＜0.01)。應(yīng)用奧扎格雷鈉14 d后的神經(jīng)功能缺損評分與阿司匹林相比降低更多(P＜0.05)。奧扎格雷鈉治療腦梗死的機制除抑制血小板聚集外，還有促進腦血流量增加，促進血栓溶解;選擇性擴張病變血管，促進神經(jīng)細(xì)胞功能恢復(fù);保護缺血性神經(jīng)細(xì)胞;減輕腦缺血在再灌注后神經(jīng)元損傷及減少缺血性凋亡［2，3］。可以認(rèn)為急性期使用奧扎格雷鈉在改善腦梗死患者神經(jīng)功能缺損癥狀方面，優(yōu)于阿司匹林，具有更高的臨床療效。

綜上所述，本研究結(jié)果證實腦梗死急性期患者應(yīng)用奧扎格雷比阿司匹林更有效抑制血小板活化，并促進神經(jīng)功能恢復(fù)，為臨床應(yīng)用奧扎格雷治療提供了相應(yīng)的實驗室指標(biāo)和理論依據(jù)。FCM檢測血小板膜GPⅡb/Ⅲa復(fù)合物和P－選擇素表達特異、敏感的反映了血小板的活化，對腦梗死的發(fā)生機制、診斷和治療有重要意義，同時還可用于新型抗血小板藥物的篩選及評價。

［1］Bradberry JC，F(xiàn)agan SC，Gray DR，et al.New perspectives on the pharmacotherapy of ischemic stroke［J］.J Am Pharm Assoc(2003)，2004，44(2 Suppl 1):S46－S56.

［2］趙晴，于挺敏，方樂，等.奧扎格雷鈉對大鼠急性全腦缺血再灌注損傷后Bcl－2表達及抑制細(xì)胞凋亡的研究［J］.中國老年學(xué)雜志，2003，23(7):457 －458.

［3］魏麓云，董曉英，陳琳，等.奧扎格雷鈉對恢復(fù)期腦梗死患者顱外頸動脈斑塊的影響［J］.中國臨床康復(fù)，2004，8(22):4596.