摘要：目的 研究α-平滑肌肌動蛋白(α-SMA)、單核細(xì)胞趨化蛋白（MCP-1）在成人原發(fā)性腎病綜合征（INS）患者腎組織中的表達(dá)，探討α-SMA、MCP-1在INS患者耐藥中的作用及介導(dǎo)耐藥的可能機(jī)制，以期篩選出有利于早期預(yù)警并診斷激素抵抗型腎病綜合征（SRNS）的生物學(xué)標(biāo)記志。方法 采用免疫組化SP法，檢測41例成人INS患者腎穿刺活檢組織中α-SMA、MCP-1的表達(dá)，并按其對GC的治療反應(yīng)分激素敏感型（SSNS）和激素激素抵抗型（SRNS）。結(jié)果 ①SRNS組患者腎組織中α-SMA、MCP-1的表達(dá)水平均高于SSNS組（P<0.05）；②腎組織中α-SMA、MCP-1成正相關(guān)。結(jié)論 α-SMA、MCP-1可能參與SRNS的發(fā)病機(jī)制，均可作為一種早期預(yù)警SRNS的指標(biāo)，兩者聯(lián)合使用，可增強(qiáng)早期預(yù)警SRNS的準(zhǔn)確性。

關(guān)鍵詞：原發(fā)性腎病綜合征；α-平滑肌肌動蛋白；單核細(xì)胞趨化蛋白

原發(fā)性腎病綜合征（INS）是成人臨床常見的腎臟疾病，是一組由多種原因引起的腎小球?yàn)V過膜通透性增加，導(dǎo)致血漿內(nèi)大量蛋白質(zhì)從尿中丟失，臨床表現(xiàn)為大量蛋白尿（>3.5g/d）、低白蛋白血癥(<30g/L)、水腫和（或）高脂血癥的臨床綜合征。INS的病因和發(fā)病機(jī)制尚未明確，糖皮質(zhì)激素(GC)是INS的首選和基礎(chǔ)用藥，臨床上以INS使用常規(guī)劑量（強(qiáng)地松1mg/kg/d）的GC治療8~12w（局灶節(jié)段性腎小球硬化癥為16周）的臨床療效分激素敏感型腎病綜合征(SSNS)與激素抵抗型腎病綜合征（SRNS），這樣不但延誤了激素抵抗型腎病綜合征（SRNS）患者的治療時機(jī)，還導(dǎo)致一些不必要的藥物毒副作用，因此亟需尋找早期預(yù)警并診斷SRNS的生物學(xué)標(biāo)記。文獻(xiàn)報道在實(shí)驗(yàn)大鼠腎組織中發(fā)現(xiàn)α-SMA與腎功能正相關(guān)[1~3]；單核細(xì)胞趨化因子-1(MCP-1)主要是趨化和激活中性粒細(xì)胞、單個核細(xì)胞或某些T細(xì)胞亞群，刺激成纖維細(xì)胞、角化細(xì)胞的產(chǎn)生[4]，在NS起關(guān)鍵作用[5] 。本研究擬分析各組腎組織中α-SMA和MCP-1蛋白表達(dá)的差異，尋找可早期預(yù)警并診斷SRNS的生物學(xué)標(biāo)記，指導(dǎo)臨床醫(yī)生科學(xué)地為INS患者選擇治療方案，提高治療效果，減少根據(jù)激素臨床療效評判的滯后性。

1資料與方法

1.1一般資料選取選擇廣西壯族自治區(qū)人民醫(yī)院腎內(nèi)科2010年8月~2012年4月住院治療的41例成人INS患者。SSNS22例，SRNS19例。男21例，女20例，年齡18~55歲，平均年齡28.4歲，兩組在年齡，性別方面無明顯差異，有可比性。均為治療前腎穿刺活檢。

1.2方法采用鏈霉菌抗生物素蛋白過氧化物酶（streptavidin-perosidase SP）法免疫組化技術(shù)。α－SMA酶聯(lián)免疫分析試劑盒購自福州邁新，MCP-1酶聯(lián)免疫分析試劑盒購自武漢博士德，具體實(shí)驗(yàn)步驟參照操作說明書進(jìn)行。

1.3結(jié)果判定 α－SMA、MCP-1染色的主要部位均在腎小管間質(zhì)，光鏡下組織切片呈棕黃色顆粒性沉積區(qū)域?yàn)殛栃匀旧课?。使用奧林巴斯光學(xué)顯微光鏡在放大400倍的視野下，每張切片隨機(jī)選取腎小球、近曲小管及遠(yuǎn)曲小管三個不同視野拍照記錄，運(yùn)用Image-ProPlus6.0圖像分析系統(tǒng)對免疫反應(yīng)物進(jìn)行觀察及平均光密度值測定。陽性表達(dá)越強(qiáng)，則染色越深，平均光密度（IOD）值越大；陽性表達(dá)越弱，則染色越淺，IOD值越小。

1.4數(shù)據(jù)處理 采用SPSS19.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析，統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用t檢驗(yàn)。檢驗(yàn)水準(zhǔn)以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；相關(guān)性用Pearson相關(guān)分析。

2結(jié)果

2.1 SSNS組和SRNS組患者腎組織α-SMA、MCP-1的測定結(jié)果，aP<0.05，bP<0.05（x±s）比較，見表1。

注：SSNS組和SRNS組患者腎組織α-SMA、MCP-1的測定結(jié)果，aP<0.05，bP<0.05。

2.2 INS患者腎組織α-SMA與MCP-1的Pearson相關(guān)分析：α-SMA與MCP-1呈正相關(guān)（y=0.470，P=0.049）。

3 討論

INS迄今仍無特效治療方法，糖皮質(zhì)激素（GC）仍是臨床治療首選藥物，現(xiàn)階段多數(shù)臨床醫(yī)生仍借助腎臟病理類型來預(yù)診斷SRNS，但同一種病理類型的INS患者依然存在對GC治療反應(yīng)的較大差異[6]。本研究中INS患者腎組織α-SMA和MCP-1的表達(dá)SRNS組較SSNS組水平高，且α-SMA和MCP-1具有正相關(guān)性，提示α-SMA、MCP-1可能參與SRNS的發(fā)病機(jī)制，其在腎組織中的表達(dá)水平可作為一種早期預(yù)警SRNS的指標(biāo)，兩項(xiàng)聯(lián)合使用，可增強(qiáng)早期預(yù)警SRNS的準(zhǔn)確性。但因INS患者常合并有繼發(fā)性疾病如腫瘤、糖尿病、肝炎相關(guān)性腎炎、各種感染，嚴(yán)重腎病綜合征出現(xiàn)重度水腫、消化道功能嚴(yán)重失調(diào)影響藥物有效吸收等臨床均可表現(xiàn)為SRNS[7]，所以盡管α-SMA和MCP-1對早期診斷SRNS具有重要意義，仍需深入研究聯(lián)合使用多種生物學(xué)指標(biāo)綜合分析。

參考文獻(xiàn):

[1]易春霞，廖海強(qiáng)，周于祿，等.替米沙坦對糖尿病腎病大鼠腎臟A-SMA表達(dá)影響的實(shí)驗(yàn)研究[J].中南醫(yī)學(xué)， 2006，4(4):259-262.

[2]王瑞英，姚 敏，王 綿，等.2型糖尿病大鼠腎小管上皮細(xì)胞中A-SMA的表達(dá)及其與腎功能的關(guān)系[J].中國老年學(xué)雜志，2006，26(5):647-649.

[3]劉殿閣，劉必成，張春霞.A-平滑肌肌動蛋白在實(shí)驗(yàn)性放射線大鼠腎病組織中的表達(dá)和意義[J].中華病理學(xué)雜志，2005，34(11):743-744.

[4]Wada T，F(xiàn)uruichi K，Saka N，et al．Regulation of monocyte chemoat-tractant protein－1 in tubulo interstitial lesions of human diabet-ic nephropathy[J]．Kidney Int，2000，12(6):1492－1499

[5]Bruce LR，Pedro C，Mapk D，et al．Urinary CTGF as a possible pred-ictor of diabetic nephropathy［J］．Am Soc Nephrol，2003，64(5):457-461.

[6]Rennke HG.How does glomerular epithelial cell injury contribute to progressive glomerular damage? Kidney Int，1994，（Suppl45）:S58－63.

[7]余學(xué)清，祝勝郎.腎上腺皮質(zhì)激素抵抗性腎病綜合征的治療[J].新醫(yī)學(xué)，2003，(10):641-655.

編輯/王海靜