摘要：目的 應用CLSIC28-A2 文件對四川邁克試劑在日立HITACHI 7180全自動生化分析儀檢測系統(tǒng)中進行參考區(qū)間的驗證，確定其是否滿足臨床的要求。方法 運用免疫增強速率比濁法，采用我院門診健康體檢1280例個體標本進行測定，比較參考值和原始參考之間的可比性。結(jié)果 儀器測定HbAlc，1280例參考個體中60歲以內(nèi)，有59例（或5%）的觀測值在原始報告的參考限之外，廠商或提供參考區(qū)間的實驗室報告的95%參考區(qū)間可以接受。60歲以上須建立本實驗室的參考區(qū)間。結(jié)論 我們認為，使用四川邁克試劑在日立HITACHI 7180全自動生化分析儀檢測系統(tǒng)中進行檢測，其廠家提供的參考區(qū)間（3.50±5.85%）在一定范圍內(nèi)可接受，但存在年齡差異，需要建立各年齡組的參考區(qū)間。

關(guān)鍵詞：全自動生化分析儀；參考區(qū)間；糖化血紅蛋白

隨著各種全自動生化儀器使用，同一檢驗項目，采用不同的方法和不同的檢驗系統(tǒng)進行檢驗，必須使用適當?shù)姆椒▉磉M行檢驗結(jié)果的可比性，如果檢驗結(jié)果不可比就必須建立不同儀器、不同方法、不同檢測系統(tǒng)的參考區(qū)間。我們依據(jù)美國國家臨床實驗室標準化研究所（CLSI）28-A2 文件的要求[1]，對本實驗室日立HITACHI 7180全自動生化分析儀檢測糖化血紅蛋白參考區(qū)間進行實驗評價，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 檢測組為2013年1月～3月本院健康體檢1280名人員，并同時進行肝功能、腎功能、血糖、血脂、血常規(guī)測定。HbAlc用（x±s）表示，參考區(qū)間按x±1.96s計算。男650人、女630人，年齡15～85歲。

1.2儀器與試劑 儀器為HITACHI 7180全自動生化分析儀；試劑盒由四川邁克生物有限公司（批號0413021），質(zhì)控品 日本生研（高低值分別為18.5% 4.5%，批號299021），校準品 四川邁克（批號0413021），四個濃度值分別為5.0%、8.5%、12.4%、16.5%。

1.3方法

1.3.1儀器熟悉階段 包括熟悉儀器的日常操作程序，保養(yǎng)程序，樣品準備校準以及檢測程序。

1.3.2方法熟悉階段 在進行參考值研究前，應對分析方法的性能進行驗證評價。其內(nèi)容包括總不精密度，不超過1/3CLIA88允許誤差，不準確度偏倚不超過1/2CLIA88允許誤差[2]，最低檢測限，線性范圍，回收率和影響因素等。如果使用同一型號分析儀器的重復測量，在建立參考區(qū)間時還要考慮批間差異，技術(shù)人員產(chǎn)生的變異以及儀器之間的變異。無論是建立參考區(qū)間還是日?；颊邩吮镜臋z驗，都必須用控制品進行常規(guī)質(zhì)量控制。保證同一檢驗項目結(jié)果的統(tǒng)一性，準確可靠性。

1.3.3樣品 采用抗凝血2ml，靜置3h后，以2500rmp離心2min，取血細胞層20ul，加入R4（溶血液）1ml并溶血，采用免疫增強速率比濁法檢測糖化血紅蛋白，試劑盒由四川邁克生物有限公司提供，嚴格按試劑盒說明書操作。

1.4統(tǒng)計學方法 采用SPSS 13.0 軟件對結(jié)果進行數(shù)據(jù)統(tǒng)計。數(shù)據(jù)以均數(shù)，標準差表示， 組間差異采用兩樣本均數(shù)比較t檢驗，以P<0.05為差異有統(tǒng)計學。

2 結(jié)果

不同性別HbAlc的分布未發(fā)現(xiàn)明顯差異，男850人（4.75±0.56），女590人（4.78±0.57），（t=1.282，P=0.20）；不同年齡分組HbAlc的均值存在統(tǒng)計學差異，以60歲為分界年齡（t=3.45，P=<0.001）；HbAlc的參考值：<60歲為3.47%～5.83%，>60歲為3.72%～6.18%；HbAlc與年齡（r=0.359，P<0.01）均相關(guān)。儀器測定HbAlc，1134例參考個體中60歲以下不超過59例（或5%的結(jié)果）的觀測值在原始報告的參考限（3.45%～5.85%）之外，廠商或提供參考區(qū)間的實驗室報告的95%參考區(qū)間可以接受，60歲以上須建立各實驗室的參考值。采用我院健康體檢1280例個體標本在日立HITACHI 7180生化儀檢測糖化血紅蛋白的測定結(jié)果見表1。

3 討論

3.1生物參考區(qū)間是解釋檢驗結(jié)果，分析檢驗信息的一個基本尺度和依據(jù)，它是確定臨床醫(yī)學中的基本問題[3]，臨床檢驗對象是患者，由于年齡，性別，民族，地域的原因差異，因而其參考區(qū)間也應有差異[4]。因此，引進新儀器或使用新試劑必須對檢測項目進行參考區(qū)間的驗證。

3.2生物參考區(qū)間的驗證必須在穩(wěn)定，準確的檢測系統(tǒng)及方法上進行，避免由于檢驗誤差造成驗證結(jié)果的符合程度，在驗證工作前按說明書要求進行分析性能的評價，制定質(zhì)量目標保證檢驗結(jié)果的統(tǒng)一性和準確性，確定一個可靠的參考區(qū)間非常重要。隨著愈來愈多新的檢驗項目或方法引入實驗室，要求每個實驗室，無論其規(guī)模大小，都必須對廠商提供的參考值進行驗證以確定自己的參考區(qū)間。因此，本研究采用CLSIC28-A2推薦方法對HITACHI 7180全自動生化分儀器測定HbAlc進行驗證，1280例參考個體中60歲以下不超過59例（或5%的結(jié)果）的觀測值在原始報告的參考限之外，廠商或提供參考區(qū)間的實驗室報告的95%參考區(qū)間可以接受。本研究表明60歲以上須建立本實驗室的生物學參考區(qū)間。因此HbAlc的值水平存在年齡差異，必須對其適用性進行驗證，不同實驗室需要建立各自的參考范圍。

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