摘要：目的 檢測(cè)單核細(xì)胞趨化蛋白（Monocyte chemotactic protein 1 ，MCP-1）和內(nèi)脂素/前B細(xì)胞克隆因子（Visfantin ormer B cell cloning ，Visfantin/PBEF）在妊娠高血壓綜合征產(chǎn)婦和正常產(chǎn)婦胎盤組織中的表達(dá)，探討二者在妊娠高血壓綜合征發(fā)生發(fā)展過程中的意義。方法 收集經(jīng)臨床診斷證實(shí)為妊娠高血壓綜合征產(chǎn)婦及正常產(chǎn)婦的胎盤組織各30例，分娩方式順產(chǎn)、剖宮產(chǎn)均可，采用免疫組化學(xué)法檢測(cè)標(biāo)本組織中MCP-1和Visfantin/PBEF倆因子的表達(dá)水平。結(jié)果 在妊娠高血壓綜合征產(chǎn)婦胎盤組織中MCP-1、Visfantin/PBEF的表達(dá)較正常產(chǎn)婦的胎盤組織中MCP-1、Visfantin/PBEF高（P<0.05）；MCP-1、Visfantin/PBEF在妊娠高血壓綜合征產(chǎn)婦胎盤組織中的表達(dá)呈明顯正相關(guān)（r=0.436，P<0.01）。結(jié)論 MCP-1、Visfantin/PBEF在妊娠高血壓綜合征產(chǎn)婦胎盤組織中高表達(dá)，且二者的表達(dá)水平呈明顯正相關(guān)；MCP-1、Visfantin/PBEF表達(dá)異?？赡芘c妊娠高血壓綜合征發(fā)生發(fā)展有關(guān)。

關(guān)鍵詞： MCP-1；Visfantin/PBEF；妊娠高血壓綜合征

妊娠高血壓綜合征是妊娠20w左右母體合并的一組以高血壓、蛋白尿?yàn)橹饕R床表現(xiàn)的疾病，簡(jiǎn)稱妊高癥，該病在產(chǎn)科發(fā)病率較高，是妊娠期嚴(yán)重危害母兒生命的一個(gè)特發(fā)疾病，是產(chǎn)婦死亡的第二大原因[1]。其發(fā)病機(jī)制至今尚未闡明，MCP-1和Visfantin/PBEF作為肥胖、高血壓、心血管疾病、動(dòng)脈硬化、糖尿病、自身免疫性疾病及代謝綜合征等方面的熱點(diǎn)，在妊高癥的發(fā)病方面也收到了廣泛的關(guān)注。但目前國(guó)內(nèi)外有關(guān)于上述二因子在妊高癥產(chǎn)婦血清或胎盤中的相關(guān)性表達(dá)研究甚少，為了進(jìn)一步研究MCP-1和Visfantin/PBEF在妊高癥發(fā)病機(jī)制中的作用，本研究應(yīng)用免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)了正常胎盤組織和妊娠期高血壓疾病胎盤組織中MCP-1和Visfantin/PBEF的表達(dá)情況，探討了這兩種蛋白與妊娠期高血壓疾病的關(guān)系。

1 資料與方法

1.1一般資料 收集正常產(chǎn)婦胎盤組織（30例）為對(duì)照組、妊高癥產(chǎn)婦胎盤組織（30例）為研究組，順產(chǎn)、剖腹產(chǎn)均可，其中妊高癥組患者在分娩前均經(jīng)過降壓以及硫酸鎂治療，均為輕中度子癇前期，未發(fā)生子癇抽搐。兩組孕婦年齡、孕周、孕次、身高、體重比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

1.2標(biāo)本采集 選分娩30min內(nèi)的新鮮胎盤組織取正中1cm見方大小的胎盤組織，注意避開出血、梗死及鈣化區(qū)生理鹽水漂洗3次后，置10%中性福爾馬林溶液中固定24～48h，常規(guī)石蠟包埋，連續(xù)組織切片成5μm厚，進(jìn)行免疫組織化學(xué)染色。

1.3主要試劑 兔抗人MCP-1多克隆抗體，鼠抗人Visfantin/PBEF單克隆抗體，即用型鏈酶親和素-生物素-過氧化酶復(fù)合物免疫組化試劑盒，DAB顯色試劑盒。

1.4結(jié)果判斷 MCP-1和Visfantin/PBEF陽(yáng)性表達(dá)以胎盤絨毛上皮細(xì)胞及間質(zhì)細(xì)胞的細(xì)胞核被染呈棕黃色或棕褐色為陽(yáng)性細(xì)胞，無著色為陰性細(xì)胞，染色強(qiáng)度評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)：不著色0分，黃色為1分，棕黃色為2分，棕褐色為3分。每張切片隨機(jī)觀察10個(gè)高倍視野，計(jì)數(shù)細(xì)胞總數(shù)和陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)。陽(yáng)性細(xì)胞百分率評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)：陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)<10%為0分，10%～40%為1分，40%～70%為2分，>70%為3分。兩項(xiàng)評(píng)分相加作為該切片的最終評(píng)分，0～1分記為（-），2分記為（+），3～4分記為（++），5～6分記為（+++）。

1.5統(tǒng)計(jì)方法 統(tǒng)計(jì)結(jié)果分析應(yīng)用SPSS17.0軟件對(duì)所有數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，等級(jí)資料用秩和檢驗(yàn)檢驗(yàn)進(jìn)行比較。MCP-1和Visfantin/PBEF之間的相關(guān)性分析采用Spearman相關(guān)分析。

2 結(jié)果

2.1 MCP-1在胎盤組織中表達(dá)的免疫組化結(jié)果及陽(yáng)性率 MCP-1蛋白的陽(yáng)性染色主要定位于胎盤絨毛細(xì)胞核和細(xì)胞漿內(nèi)，免疫組化結(jié)果顯示出棕黃色顆粒。MCP-1在妊高癥患者胎盤絨毛組織的陽(yáng)性表達(dá)高于正常妊娠產(chǎn)婦，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），見表1。

2.2 Visfantin/PBEF在胎盤組織中表達(dá)的免疫組化結(jié)果及陽(yáng)性率 Visfantin/PBEF在妊高癥患者胎盤絨毛組織的陽(yáng)性表達(dá)高于正常妊娠產(chǎn)婦，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01），見表2。

2.3妊娠期高血壓胎盤組織中MCP-1和Visfantin/PBEF表達(dá)的相關(guān)性 采用Spearman相關(guān)分析對(duì)30例妊高癥產(chǎn)婦胎盤組織中MCP-1和Visfantin /PBEF的表達(dá)進(jìn)行相關(guān)分析，經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，MCP-1和Visfantin/PBEF相關(guān)系數(shù)rs=0.436（P<0.05），說明妊娠期高血壓胎盤組織中MCP-1和Visfantin/PBEF表達(dá)呈正相關(guān)，且有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，見表3。

3 討論

妊娠高血壓綜合征在產(chǎn)科領(lǐng)域發(fā)病率高，在沒有任何臨床干預(yù)治療的情況下，該病的最終轉(zhuǎn)歸為子癇，引起產(chǎn)婦抽搐，昏迷，全身臟器損害，衰竭，乃至產(chǎn)婦生命受到威脅死亡，也可引起胎兒的損害和死亡。妊高癥患者的全身小動(dòng)脈的硬化，MCP-1在動(dòng)脈硬化的發(fā)病過程中起到了很重要的誘導(dǎo)作用，李雪梅等通過實(shí)驗(yàn)研究指出在原發(fā)性高血壓患者的血清中MCP-1蛋白表達(dá)的水平明顯高于正常對(duì)照組，且隨著血壓的增高M(jìn)CP-1有增高的趨勢(shì)。同時(shí)還指出原發(fā)性高血壓患者的頸總動(dòng)脈內(nèi)膜中膜的厚度與MCP-1在血清中的表達(dá)水平呈現(xiàn)正相關(guān)關(guān)系，從而推斷動(dòng)脈硬化的發(fā)生發(fā)展過程中MCP-1起到了很重要的誘導(dǎo)作用。目前，國(guó)內(nèi)外大量的臨床研究均已證實(shí)MCP-1蛋白無論是在妊高癥產(chǎn)婦的血清中，還是胎盤組織中的表達(dá)水平都明顯的高于正常妊娠產(chǎn)婦，說明了MCP-1因子在妊高癥的致病過程中起到了不容忽視的作用。

妊娠高血壓綜合征的病理生理學(xué)特征與代謝綜合征有許多相似的病理生理特征，包括胰島素抵抗，動(dòng)脈粥樣硬化，炎癥反應(yīng)。張高峰等通過體外培養(yǎng)細(xì)胞進(jìn)行的實(shí)驗(yàn)得出如下結(jié)論：Visfantin/PBEF能夠增加巨噬細(xì)胞中TF因子和PAI-1的表達(dá)水平，證明Visfantin/PBEF可以促進(jìn)巨噬細(xì)胞向血栓轉(zhuǎn)化，可能導(dǎo)致了血管粥樣硬化斑塊的發(fā)生。這一結(jié)果與MCP-1因子在妊高癥中導(dǎo)致胎盤螺旋小動(dòng)脈硬化而促進(jìn)了妊高癥的發(fā)病過程遙相呼應(yīng)。

綜上所述，本研究通過免疫組化法檢測(cè)了妊娠期高血壓產(chǎn)婦胎盤組織中MCP-1和Visfantin/PBEF蛋白的表達(dá)情況，并探討了其在妊娠期高血壓發(fā)生發(fā)展中的作用。結(jié)果顯示妊娠期高血壓產(chǎn)婦胎盤組織中MCP-1和Visfantin/PBEF蛋白高表達(dá)，MCP-1和Visfantin/PBEF蛋白在妊娠期高血壓產(chǎn)婦胎盤組織中的表達(dá)水平呈正相關(guān)，提示了MCP-1和Visfantin/PBEF蛋白可能存在相互協(xié)同致病的可能，但其具體的作用機(jī)制仍有待于進(jìn)一步的研究闡明。

參考文獻(xiàn)：

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[2]李雪梅，石惠榮.原發(fā)性高血壓患者血清單核細(xì)胞趨化蛋白1水平與頸總動(dòng)脈內(nèi)膜中膜厚度的關(guān)系[J].中國(guó)動(dòng)脈硬化雜志，2011，07：606-608.

[3]張高峰，許澎.內(nèi)脂素促進(jìn)巨噬細(xì)胞向致血栓表形轉(zhuǎn)化[J].中國(guó)分子心臟病學(xué)雜志，2010，10（6）：356-359.

編輯/哈濤