【摘 要】固定相為：TSK·GELG2000SWXL色譜柱（7.8mm×300mm，5μm），0.06mol/L磷酸鹽緩沖液（0.06mol/L磷酸氫二銨溶液，用磷酸調(diào)節(jié)pH值7.0）-乙腈（95：5）流動(dòng)相，檢測波長為280nm；頭孢呋辛酯濃度在0.3～1.5mg/mL范圍內(nèi)內(nèi)呈良好的線性關(guān)系。本法簡便、重現(xiàn)性好，可用于頭孢呋辛酯中高分子聚合物的含量測定。

【關(guān)鍵詞】頭孢呋辛酯；高分子聚合物；測定

頭孢呋辛酯為（6R，7R）-7-2-呋喃基（甲氧亞氨基）乙酰氨基-3-氨基甲酰氧甲基-8-氧代-5-硫雜-1-氮雜雙環(huán)4辛-2-烯-2-羧酸，1-乙酰氧基乙酯[1-4]。頭孢呋辛酯在體內(nèi)水解后釋出頭孢呋辛而發(fā)揮其抗菌活性，對革蘭陰性菌如淋球菌、奇異變形桿菌、流感桿菌、卡他摩拉菌和大腸桿菌科等均有抑制作用[5-7]。頭孢呋辛酯適用于溶血性鏈球菌、流感嗜血桿菌、大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌、奇異變形桿菌等腸桿菌科細(xì)菌敏感菌株所致成人急性咽炎或扁桃體炎、急性中耳炎、急性支氣管炎、單純性尿路感染、皮膚軟組織感染及無并發(fā)癥淋病奈瑟菌性尿道炎和宮頸炎。本文用高效液相法對頭孢呋辛酯中的高分子聚合物的進(jìn)行了含量測定。

1.儀器與試藥

DL-820E超聲波清洗機(jī)（上海高創(chuàng)化學(xué)科技有限公司）； ABS 220-4分析天平（德祥科技有限公司）；RE-5220旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（上海亞榮生化儀器廠）；AT-830制冷、加熱兩用色譜柱溫箱（杭州瑞析科技有限公司）；XYJ-H帕恩特實(shí)驗(yàn)室中央超純水系統(tǒng)（北京湘順源科技有限公司）；SHB-III型臺(tái)式循環(huán)水式多用真空泵（鄭州長城科工貿(mào)有限公司）；LC3100高效液相色譜儀（安徽皖儀科技股份有限公司）；UV-1800紫外/可見分光光度計(jì)（上海美譜達(dá)儀器有限公司）。

磷酸（湖北興銀河化工有限公司）、醋酸（湖北興銀河化工有限公司）、甲醇（徐州賽福化工有限公司）、冰乙酸（杭州米克化工儀器有限公司）、乙腈（廣州振威化工科技有限公司）、磷酸氫二銨（張家港雅瑞化工有限公司）、醋酸銨（濟(jì)南樂奇化工有限公司）、鹽酸（廣州花之王化工有限公司）。

2.含量測定

2.1色譜條件

依據(jù)查閱文獻(xiàn)及考查的結(jié)果，確定色譜條件如下[8-12]。色譜柱為TSK·GELG2000SWXL色譜柱（7.8mm×300mm，5μm）；0.06mol/L磷酸鹽緩沖液（ 0.06mol/L磷酸氫二銨溶液， 用磷酸調(diào)節(jié)pH 值7.0）-乙腈（ 95：5）為流動(dòng)相；檢測波長為280nm；流速0.5mL·min-1；柱溫：30℃。理論板數(shù)按頭孢呋辛酯峰計(jì)算應(yīng)不得低于2000。

2.2供試品溶液的制備

取頭孢呋辛酯適量，研細(xì)，精密稱定至容量瓶內(nèi)，加流動(dòng)相適量超聲溶解，放涼，流動(dòng)相定容，過0.45μm的濾膜，即得。

2.3對照品溶液的制備

精密稱取頭孢呋辛酯對照品適量，置5毫升棕色容量瓶中，用流動(dòng)相超聲波振蕩溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得。

2.4陰性干擾試驗(yàn)

分別精密吸取頭孢呋辛酯對照品溶液、供試品樣品溶液、和高溫、光照、酸堿和氧化的強(qiáng)制降解樣品溶液各10μL注入液相色譜儀，按“2.1色譜條件”下方法進(jìn)行分析，記錄色譜圖。結(jié)果在該色譜條件下所有強(qiáng)制的條件下降解產(chǎn)物與頭孢呋辛酯的峰相同保留時(shí)間處不存在吸收峰，說明此方法具有較強(qiáng)的專屬性。

2.5標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備

精密稱定頭孢呋辛酯對照品15mg置10ml量瓶中加流動(dòng)相定容.再分別量取1，2，3，4，5mL置5ml量瓶中，加入流動(dòng)相稀釋至刻度，分別精密上述溶液10μL注入液相色譜儀，記錄色譜，以對照品進(jìn)樣量為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。試驗(yàn)表明，頭孢呋辛酯對照品在0.3～1.5mg/mL范圍內(nèi)內(nèi)呈良好的線性關(guān)系。

2.6精密度試驗(yàn)

精密吸取頭孢呋辛酯對照品溶液10μL重復(fù)進(jìn)樣6次，測定峰面積積分值，對照品峰面積積分值的RSD為0.59%。結(jié)果表明，本實(shí)驗(yàn)精密度良好。

2.7重現(xiàn)性試驗(yàn)

分別稱取同批頭孢呋辛酯樣品6份，分別制備成供試品，按色譜條件測定高分子聚合物含量，并計(jì)算樣品的RSD值為0.98%，結(jié)果表明，此含量測定方法的重現(xiàn)性良好。

2.8穩(wěn)定性試驗(yàn)

取供試品溶液和對照品溶液，分別在0，0.5，1，2，3，4h精密吸取供試品溶液注入液相色譜儀，進(jìn)樣測定，對照品峰面積積分值的RSD為0.53%。結(jié)果表明對照品至少在4h內(nèi)穩(wěn)定。供試品溶液在常溫下2h后各個(gè)時(shí)間點(diǎn)其高分子聚合物雜質(zhì)的含量都在明顯地增加，表明供試液在常溫下不穩(wěn)定，須臨用前現(xiàn)配。

2.9樣品含量測定

依照上述含量測定方法，測定頭孢呋辛酯三批樣品中高分子聚合物的含量，結(jié)果三批樣品的含量分別0.86%、0.85%、0.86%。

3.討論

藥物不良反應(yīng)（adverse drug reactions，簡稱ADR）系指正常劑量的藥物用于預(yù)防、診斷、治療疾病或調(diào)節(jié)生理機(jī)能時(shí)出現(xiàn)的有害的和與用藥目的無關(guān)的反應(yīng)。高分子聚合物是引發(fā)不良反應(yīng)的主要成分之一[8-12]。分別考察醋酸鹽的緩沖溶液（pH3.5）-乙腈（90∶10），0.06mol/L磷酸鹽緩沖液（0.06mol/L磷酸氫二銨溶液，用磷酸調(diào)節(jié)pH 值7.0）-乙腈（85：15），0.06mol/L磷酸鹽緩沖液（0.06mol/L磷酸氫二銨溶液，用磷酸調(diào)節(jié)pH 值7.0）-乙腈（95：5），0.2mol/L磷酸（用氨水調(diào)pH至6.0）-乙腈（95：5），磷酸鹽緩沖液（0.01mol/L磷酸氫二銨溶液， 用磷酸調(diào)節(jié)pH 值7.0）-乙腈（90：10）不同比例的流動(dòng)相，結(jié)果0.06mol/L磷酸鹽緩沖液（0.06mol/L磷酸氫二銨溶液， 用磷酸調(diào)節(jié)pH值7.0）-乙腈（ 95：5）為流動(dòng)相，供試品各峰分離效果最好，故選用0.06mol/L磷酸鹽緩沖液（0.06mol/L磷酸氫二銨溶液，用磷酸調(diào)節(jié)pH 值7.0）-乙腈（95：5）為流動(dòng)相。本實(shí)驗(yàn)方法是一種簡便、準(zhǔn)確、安全的測定頭孢呋辛酯中高分子聚合物的含量。 [科]

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