中圖分類號：S851.33 文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A文章編號：1001-0769（2014）01-0039-02

摘 要：本研究參照美國國家環(huán)境保護(hù)局（EPA）關(guān)于消毒劑在干燥的非生物表面的抗病毒效果測評方法，評定美國陶氏化學(xué)公司的格利特消毒劑GLUTEX GS2對傳染性支氣管炎病毒的殺毒效力。結(jié)果表明：經(jīng)合成硬水1：256倍稀釋的格利特消毒劑GLUTEX GS2，在與干燥處理的傳染性支氣管炎病毒膜充分接觸10 min后，病毒活性低于0.5個滴度，表明消毒劑對傳染性支氣管炎病毒具有殺滅效力，可用于此病毒的日常消毒中。

關(guān)鍵詞：禽傳染性支氣管炎病毒；抗病毒效果；評測； GLUTEX GS2消毒劑

1 實驗?zāi)康?/p>

本測試旨在測評陶氏化學(xué)公司格利特消毒劑GLUTEX GS2的抗病毒效力。其方法是用稀釋的消毒劑產(chǎn)品溶液處理被病毒附著污染的物體表面后，測定回收病毒的侵染性，根據(jù)病毒侵染性的降低程度來表征消毒劑的抗病毒能力。

2 實驗材料和方法

2.1 測試病毒

試驗所用禽傳染性支氣管炎病毒（ATCC VR-22）來自位于美國馬里蘭州羅克維爾的美國標(biāo)準(zhǔn)菌庫（American Type Culture Collection，ATCC）。該病毒懸浮液儲存在雞胚尿囊液中。

2.2 雞胚

實驗所用受精卵購于美國阿拉巴馬州伯明翰林木農(nóng)場，采用37 ℃孵化。種蛋在入孵當(dāng)天進(jìn)行照蛋，剔除死胚。雞胚在孵化9 d后接種禽傳染性支氣管炎病毒。

2.3 試劑

磷酸鹽緩沖液（PBS緩沖液）按照Dulbecco和Vogt提供的方法配制（實驗醫(yī)學(xué)雜志[J]. 1954， Vol.99：167-182）。合成硬水在使用當(dāng)天配制，配制方法參照AOAC 4.024法[美國公職分析化學(xué)工作者協(xié)會（AOAC），第14版，1984，第70～71頁]。

2.4 消毒劑的制備

每份消毒劑在使用當(dāng)天按照1∶256的比例，用 1 228 mg/kg AOAC合成硬水進(jìn)行稀釋。

2.5 病毒膜的制備

病毒膜通過將0.2 mL未稀釋的病毒懸浮液涂復(fù)在滅菌的皮氏玻璃培養(yǎng)皿底部制作而成。隨后置于室溫（約23 ℃）及環(huán)境濕度下，避免直接光照直至明顯干燥（約45～75 min）。

2.6 用消毒劑處理病毒薄膜

干燥的病毒薄膜在約23 ℃下用2.0 mL消毒劑稀釋液（噴霧）處理，使兩者保持10 min的充分接觸。在接觸一定時間后，用橡膠淀帚刮下培養(yǎng)皿底部物質(zhì)，取出病毒-消毒劑混合物。

2.7 病毒對照薄膜的處理

用消毒劑處理一份病毒薄膜的同時，另一份相同的病毒薄膜懸浮在2 mL的磷酸鹽緩沖生理鹽水中進(jìn)行處理。

2.8 病毒回收分析

每份病毒-消毒劑和對照病毒混合液經(jīng)過稀釋后接種雞胚。每一份稀釋液至少接種4個雞胚，每個胚接種0.2 mL。接種后的雞胚在37 ℃孵化72 h，期間每天檢查雞胚的死亡情況。死亡情況最終結(jié)果。

2.9 細(xì)胞毒性對照

每份已稀釋消毒劑通過磷酸鹽緩沖液進(jìn)行倍比稀釋，隨后與病毒-消毒劑混合液同時接種雞胚。在37 ℃下觀察接種24、48和72 h后雞胚的存活力。

2.10 計算方法

采用Reed和Muench描述的方法（L. J. Reed和H. Muench. 美國衛(wèi)生醫(yī)學(xué)雜志[J].1938，Vol.27：493-497），計算以50 %侵染性的log10（TCID50）和毒性（TD50），以表示病毒效價及細(xì)胞毒性。

3 實驗結(jié)果

4 實驗結(jié)論

陶氏化學(xué)公司格利特消毒劑GLUTEX GS2在測試條件下，能有效殺滅禽傳染性支氣管炎病毒。