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        通過了解植酸酶的特性來區(qū)別不同的產(chǎn)品

        2014-04-29 00:00:00潘雪男
        國外畜牧學(xué)·豬與禽 2014年1期

        目前,商用植酸酶在其特性方面明顯不同,使得進(jìn)行直接比較非常困難。最近市場上推出的多種新產(chǎn)品僅增加了這種多樣性,而且增加了需要對(duì)供應(yīng)產(chǎn)品進(jìn)行鑒別的終端用戶的挑戰(zhàn)。

        中圖分類號(hào):S816 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:C 文章編號(hào):1001-0769(2014)01-0020-02

        雖然植酸酶按照標(biāo)準(zhǔn)劑量添加后其在磷(Phosphorus,P)的釋放上的主要區(qū)別與每種植酸酶公布的營養(yǎng)基質(zhì)有關(guān),但在較高添加水平或超劑量添加以消除作為抗?fàn)I養(yǎng)因子的植酸時(shí),這種情況則沒有多大的關(guān)聯(lián)性。大多數(shù)的終端用戶很大程度上仍依賴于動(dòng)物試驗(yàn)來區(qū)別不同的產(chǎn)品,由于這些試驗(yàn)通常在非理想條件下進(jìn)行,因此會(huì)導(dǎo)致出現(xiàn)潛在的誤差,對(duì)隨后的產(chǎn)品購買決策產(chǎn)生負(fù)面影響。

        我們需要的是一種比較植酸酶的新方法,并可能對(duì)每種植酸酶的各種特性有一個(gè)更好的理解,其它們的相互作用可能是關(guān)鍵。去年12月在羅馬舉行的第二屆植酸酶國際峰會(huì)上,這種思路得到了一些報(bào)告的支持,這些報(bào)告強(qiáng)調(diào)了在分析植酸酶的潛在性能時(shí),植酸酶的一些特性是非常重要的。

        例如,相對(duì)于傳統(tǒng)上來自隔孢伏革菌(Peniophora lycii,P. lycii)和黑曲霉(Aspergillus niger,A. niger)的商用真菌類植酸酶,來自大腸桿菌(E. coli)的產(chǎn)品通常更耐高溫、耐酸以及更具蛋白酶抗性。它們在酸性pH環(huán)境下也具有較高的活性,通常發(fā)現(xiàn)其在動(dòng)物腸道中發(fā)揮作用。

        更重要的是,這些特性在第2和3代大腸桿菌類植酸酶中得到了進(jìn)一步的增強(qiáng)。人們認(rèn)為,目前第3代增強(qiáng)型大腸桿菌類植酸酶已經(jīng)提升了“熔點(diǎn)”(一種用于測定酶開始變性時(shí)的溫度的簡單實(shí)驗(yàn)室方法),從60 ℃提高到了89 ℃。這顯著提高了植酸酶的熱穩(wěn)定性。

        由于眾多原因,這種特性具有潛在的重要性,因此當(dāng)需要分解大量的植酸時(shí),這種特性更加重要。較高的熱穩(wěn)定性便是一個(gè)很好的例子,并可以不必使用會(huì)推遲植酸酶在胃或砂囊中釋放的包被技術(shù)。任何這樣的推遲會(huì)降低植酸酶的功效,尤其是在超劑量添加時(shí)(當(dāng)每增加二次破壞植酸是有價(jià)值時(shí)),因此在評(píng)估和比較不同植酸酶的性能潛力時(shí),這種特性變得至關(guān)重要。

        植酸酶在胃腸道內(nèi)的作用效果也存在差異。植酸在胃或砂囊的酸性環(huán)境中很容易遭到破壞,因此,植酸酶在pH 2~4范圍內(nèi)的活性是其效率的另一個(gè)有用的度量值。

        然而,近年出現(xiàn)的會(huì)影響植酸酶性能的最重要的特性是Km值,其定義為酶達(dá)到其最大作用能力的50 %時(shí)所需的植酸濃度。Km值低,表明植酸酶能夠在低濃度植酸的日糧中發(fā)揮作用,而且這會(huì)產(chǎn)生多項(xiàng)非常重要的影響。

        首先,當(dāng)可用植酸在胃中的濃度隨著進(jìn)食上升時(shí),Km值低的商用植酸酶產(chǎn)品發(fā)揮作用會(huì)更快,而且隨著植酸的降解,它會(huì)繼續(xù)發(fā)揮作用,最終濃度開始下降。圖2比較了2種植酸酶的活性,在植酸含量低時(shí),第3代E. coli植酸酶(Km=5 μm)明顯比第1代產(chǎn)品(Km=150 μm)具有更高的活性。

        標(biāo)準(zhǔn)添加水平可以釋放日糧中植酸內(nèi)50 %~60 %的磷,相當(dāng)于使日糧的有效磷(available P,avP)增加0.10 %~0.13 %,這些差異通常并不重要。然而,人們已經(jīng)需要降解更高水平的植酸:高達(dá)70 %~75 %的磷被釋放產(chǎn)生0.15 %~0.17 %的avP,可以進(jìn)一步降低飼料成本;而當(dāng)超劑量添加以消除植酸對(duì)養(yǎng)分消化的負(fù)面影響時(shí),則可以釋放高達(dá)80 %~85 %的磷,因此,Km值非常重要。

        事實(shí)上,鑒于一些植酸不可溶(不可作用),如此高水平的植酸降解可能需要胃中可用的植酸濃度要降至0.05 %或更低。對(duì)高Km值的商用植酸酶產(chǎn)品來說,這是不可能的,在可用的植酸濃度達(dá)到該低水平之前,活性將完全停止。

        另一個(gè)影響會(huì)圍繞超劑量添加,以及當(dāng)植酸變得可用但它在達(dá)到會(huì)對(duì)其它養(yǎng)分產(chǎn)生不利影響的濃度前時(shí)植酸酶有效“中和”植酸的能力。不管這種可溶性植酸的增加是由于飼料的攝入,還是由于當(dāng)胃中可溶性植酸水平下降時(shí)不溶性植酸釋放的增加,這種影響是相同的。

        圖3表明,在日糧中添加2種不同類型的植酸酶(一種具有高Km值,一種具有低Km值)一段時(shí)間后,胃中的可用植酸濃度會(huì)增加。如果對(duì)消化產(chǎn)生負(fù)面影響的點(diǎn)似乎在圖4中的0.6處(紅線處),那么植酸酶能夠馬上開始作用(低Km值),并能夠達(dá)到可滿足植酸釋放速率低于0.6的活性速率將是非常高效的——植酸的臨界濃度將根本無法達(dá)到。

        對(duì)于高Km值的植酸酶產(chǎn)品來說,它們需要更高的植酸濃度以達(dá)到相同的活性速率,植酸釋放與降解之間的平衡可能太高,不管植酸酶添加劑量率有多高都無法阻止植酸對(duì)養(yǎng)分利用率產(chǎn)生的負(fù)面影響。

        結(jié)論是,不是所有能夠釋放0.10 %avP的植酸酶都適合釋放較高水平的avP,甚至極少有植酸酶能夠通過完整的植酸降解來產(chǎn)自超劑量添加的益處。簡單的說,在植酸分解時(shí)植酸酶快速作用植酸以及持續(xù)作用直至幾乎不剩植酸的能力,對(duì)根除日糧中抗?fàn)I養(yǎng)因子的植酸是必不可少的。

        當(dāng)試圖區(qū)別不同的商用植酸酶時(shí),尤其是當(dāng)希望使用高添加率或從潛在的超劑量益處上充分獲準(zhǔn)時(shí),對(duì)這些特性的理解是至關(guān)重要的。同樣的,當(dāng)購買新的植酸酶時(shí),對(duì)公布有關(guān)植酸酶特性的數(shù)據(jù),如熱穩(wěn)定性、pH值和Km值,的需求提高,并且其性能界限將拓展。

        對(duì)終端用戶來說,處于不斷改善之中的植酸酶應(yīng)該是一類更好選擇、更有效的產(chǎn)品,且具有更大的投資回報(bào)。然而,這種商業(yè)上的成功仍將依賴于根據(jù)會(huì)直接影響動(dòng)物生產(chǎn)性能的產(chǎn)品特性進(jìn)行的有效、準(zhǔn)確的比較。

        Mike Bedford博士(圖4)負(fù)責(zé)用于反芻動(dòng)物和非反芻動(dòng)物飼料的酶制劑和酵母產(chǎn)品的研發(fā)。通過在不同研發(fā)團(tuán)隊(duì)的工作,他在飼料添加劑行業(yè)擁有豐富的經(jīng)驗(yàn)。

        在加拿大圭爾夫大學(xué)獲得了家禽營養(yǎng)和生物化學(xué)的博士學(xué)位之后,Bedford博士在加拿大又攻讀了分子生物學(xué)和家禽營養(yǎng)2個(gè)博士后。從那時(shí)起,Mike撰寫或參與了200多篇文章,包括76篇科技論文,92篇會(huì)議論文的摘要。

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