摘 要：為了了解掌握甘肅省豬口蹄疫的感染分布情況以及O型口蹄疫的抗體水平，2009～2012年對全省14個州市定期采集樣品，并進行O型口蹄疫抗體水平、非結(jié)構(gòu)蛋白抗體ELISA以及RT-PCR的檢測。結(jié)果表明：2009～2012年O型口蹄疫免疫合格率分別為：2009年72.8 %、2010年78.38 %、2011年75.7 %、2012年82.05 %。病原學RT-PCR檢測未見陽性；非結(jié)構(gòu)蛋白抗體ELISA檢測結(jié)果表明：2009、2010、2011、2012年口蹄疫非結(jié)構(gòu)蛋白抗體陽性率分別為5.24 %、3.67 %、3.42 %、3.95 %、四年平均陽性率3.89 %；規(guī)模場、散養(yǎng)戶、屠宰場口蹄疫非結(jié)構(gòu)蛋白抗體陽性率分別為：3.22 %、2.90 %、0。

關(guān)鍵詞：豬口蹄疫；抗體水平監(jiān)測；病原學監(jiān)測

中圖分類號：S851.31 文獻標識碼：C 文章編號：1001-0769（2014）04-0057-02

1 材料和方法

1.1 試驗材料

1.1.1 試驗動物

定期在規(guī)模場、散養(yǎng)戶、屠宰場采集血清樣品，在屠宰場采集心、肝、脾、腎、淋巴結(jié)、扁桃體等內(nèi)臟樣品組織，發(fā)生疫情時在發(fā)病地點采集病料，送實驗室進行病原檢測。

1.1.2 試劑

O型口蹄疫正向間接血凝試驗抗原及標準血清、非結(jié)構(gòu)蛋白抗體3abc ELISA試劑盒購自中國農(nóng)業(yè)科學院蘭州獸醫(yī)研究所；口蹄疫RT-PCR檢測試劑盒購自北京世紀元亨公司。

1.1.3 主要儀器

生化培養(yǎng)箱、生物安全柜、可調(diào)式電動移液器、酶標分析儀、不銹鋼手提式壓力蒸汽滅菌器、自動洗板機等。

2 試驗方法

參照口蹄疫診斷技術(shù)（GB/T18935-2003），并結(jié)合試劑盒說明書使用以下方法對所采集病料進行實驗室檢測。

① O型口蹄疫正向間接血凝試驗；

② 非結(jié)構(gòu)蛋白抗體ELISA3ABC試驗；

③ 口蹄疫RT-PCR試驗。

3 試驗結(jié)果

3.1 正向間接血凝

利用正向間接血凝對2009～2012年所采集的樣品進行O性口蹄疫抗體水平檢測，檢測結(jié)果大于等于1∶32判定為陽性合格，結(jié)果見表1

3.2 口蹄疫非結(jié)構(gòu)蛋白抗體ELISA方法、RT-PCR方法

利用口蹄疫非結(jié)構(gòu)蛋白抗體ELISA方法、RT-PCR方法對2009～2012年全省豬口蹄疫感染情況進行實驗室檢測，結(jié)果見表2、3。

4 討論與分析

4.1 O型口蹄疫防控的最大困難

O型口蹄疫陽性樣品在甘肅不同地域、豬群、養(yǎng)殖方式中普遍存在，且感染地域廣泛，這是該病防控的最大困難。預(yù)示著O型口蹄疫隨時可能發(fā)生，因而該病的威脅實際上非常大，但由于病原的大面積污染，使得凈化難度非常大。

4.2 不同的地域間差別巨大

全省480個規(guī)模場，1946個散養(yǎng)戶，104個屠宰場豬口蹄疫RT-PCR檢測未見陽性；非結(jié)構(gòu)蛋白抗體ELISA檢測結(jié)果表明：2009、2010、2011、2012年口蹄疫非結(jié)構(gòu)蛋白抗體陽性率分別為5.24 %、3.67 %、3.42 %、3.95 %、四年平均陽性率 3.89 %；規(guī)模場、散養(yǎng)戶、屠宰場口蹄疫非結(jié)構(gòu)蛋白抗體陽性率分別為：3.22 %、2.90 %、0；各市州口蹄疫非結(jié)構(gòu)蛋白抗體陽性率0 %～12.93 %。 可見，2009～2012年在規(guī)模、散養(yǎng)豬群中都有口蹄疫非結(jié)構(gòu)蛋白抗體陽性豬，而且不同的地域間差別很大。

4.3 病原廣為散播的原因

一是重養(yǎng)輕防的人為因素。當前甘肅省個別扶貧、民政、甚至獸醫(yī)部門和規(guī)模養(yǎng)殖場主的疫病防制意識比較淡薄，重養(yǎng)輕防，只抓引種、飼養(yǎng)和銷售，一味擴大生產(chǎn)規(guī)模卻不重視疫病防制；很多小型規(guī)模豬場沒有專職獸醫(yī)。這都是管理者防病意識淡薄，認識不足的表現(xiàn)，因而不能給疫病防制給予足夠的重視。二是生豬的市場交易混亂等社會環(huán)境因素。在市場管理和檢疫制度執(zhí)行不徹底的情況下，也給畜禽疫病防制帶來了一定的負面影響。三是國家免疫預(yù)防為主的防疫政策中，對豬群發(fā)生疫情時，雖有補助，但補助較少，還不及時，造成養(yǎng)殖戶上報疫情的積極性降低，有隱瞞發(fā)病豬群的可能。四是規(guī)?；i場的管理欠缺，如：免疫程序不科學，消毒工作不規(guī)范、不徹底，沒有嚴格的種源凈化措施，環(huán)境污染和有害生物的控制滯后等。五是獸醫(yī)防制技術(shù)方面的因素，如生豬的病原檢測方法，在豬瘟、藍耳病等的凈化中，對活體的采樣以及檢測方法的敏感性，都需要進一步改進。