1 緒論
研究發(fā)現(xiàn),豬對(duì)豬繁殖與呼吸綜合征病毒(PRRSV)的抵抗力具有年齡依賴性。因此,與年齡稍大的豬相比,盡管幼齡豬在抗PRRSV病毒抗體的產(chǎn)生時(shí)間和數(shù)量相似,但它們?nèi)员憩F(xiàn)出較高水平和較長時(shí)間的病毒血癥。大多數(shù)研究抗PRRSV中和抗體的研究以幼齡豬為試驗(yàn)對(duì)象,但我們?cè)陂L時(shí)間暴露在PRRSV多種野毒下的母豬體內(nèi),觀測(cè)到其體內(nèi)含有高水平的中和抗體。
2 試驗(yàn)?zāi)康?/p>
使用高通量的基于ELISA的分析法,檢測(cè)PRRSV的中和抗體應(yīng)答反應(yīng)。筆者試圖辨別出,高水平的抗體滴度是否隨豬首次感染PRRSV時(shí)的年齡而變化,或是否是對(duì)長時(shí)期感染PRRSV多種毒株所產(chǎn)生的反應(yīng)。
3 血清中和抗體檢測(cè)
血清中和抗體檢測(cè)使用96孔平板和PRRSV許可型MARC-145細(xì)胞。血清稀釋液PRRSV VR 2332毒株先在37 ℃下孵育1 h,之后感染細(xì)胞,最后進(jìn)行1 h吸收。感染進(jìn)行24 h,細(xì)胞進(jìn)行固定、滲透和染色,用抗體檢測(cè)PRRS病毒顆粒蛋白。未結(jié)合的抗體用沖洗法進(jìn)行去除。移除自由抗體。通過3,3',5,5'-四甲基聯(lián)苯胺底物中結(jié)合了辣根過氧化酶的次級(jí)抗體介導(dǎo)氧化作用和染色產(chǎn)物品的分光光度測(cè)定法,進(jìn)行檢測(cè)。病毒感染量較對(duì)照相比的減少值作為抑制率。背景值為僅含有細(xì)胞的吸收率。所有值以復(fù)制孔的平均值表示。
抑制率/ %=[1-(樣本值-背景值)/(病毒值-背景值)]×100
4 感染PRRSV多種野毒的母豬體內(nèi)含高滴度的抗體
兩個(gè)不同豬群的豬血清樣本抗PRRS病毒VR2332株的血清中和抗體組成情況和長時(shí)間感染PRRS病毒多種毒株的病史。所得值以“平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差”表示。此二個(gè)豬群中各個(gè)豬只的情況如圖1a、1b所示。
5 接觸多種野生豬繁殖與呼吸綜合征病毒(PRRSV)母豬體內(nèi)含高度抑制抗體滴度
如圖2a、2b所示。
6 與幼齡豬相比,首次感染PRRS病毒的母豬體內(nèi)含低水平的中和抗體
用實(shí)驗(yàn)性感染PRRS病毒JA142毒株的豬的血清分析PRRS病毒VR2332毒株的中和抗體水平。每個(gè)年齡段豬群中選取5頭感染豬;仔豬(3周齡)、肥育豬(15日齡)和母豬(3胎或以上)在感染后第63天進(jìn)行評(píng)估。測(cè)定結(jié)果以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤”表示。
7 結(jié)論
暴露在PRRSV多種野毒下的母豬,其體內(nèi)含有高水平的抗PRRSV VR2332株中和抗體滴度,但實(shí)驗(yàn)接種的母豬體內(nèi)中和抗體滴度很低。
令人驚訝的是,與幼齡豬相比,母豬在首次感染PRRSV時(shí),體內(nèi)抗該病毒的中和抗體滴度較低。
這表明,在商業(yè)生產(chǎn)母豬中所觀察到的高水平抗體滴度可能與病毒持續(xù)感染有關(guān),且此類病毒毒株很可能與首次感染的病毒毒株不同。
中和抗體在預(yù)防隨后的PRRSV感染中所起的作用還有待研究。□□
原題名:Antibody response to PRRSV(英文)
原作者:Sally R Robinson, Michael P Murtaugh