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        盾葉薯蕷皂苷元“濕法”提取與含量測(cè)定

        2014-04-29 00:00:00鎮(zhèn)衛(wèi)國(guó)
        今日湖北·下旬刊 2014年4期

        摘 要 自上世紀(jì)七十年代起,我國(guó)在皂苷元生產(chǎn)上采用自然發(fā)酵、酸水解、酶解、微生物法和提淀粉、糖等方法對(duì)薯蕷干品原料處理進(jìn)行分離提取皂苷元。本文對(duì)薯蕷鮮品原料提取皂苷元方法進(jìn)行了探討,以期改進(jìn)生產(chǎn)工藝,提高皂苷元提取效率。

        關(guān)鍵詞 盾葉薯蕷 提取方法 含量測(cè)定

        薯蕷皂苷元是從薯蕷屬植物的根莖中所含甾體皂苷經(jīng)酸水解、萃取獲得。因其具有溶血、降血脂和抗菌等作用而備受重視,是重要的醫(yī)藥化工原料。

        一、試驗(yàn)材料

        鮮品盾葉薯蕷為湖北十堰周邊區(qū)域栽培2~3年的原料。儀器:722S分光光度計(jì)(上海精密科學(xué)儀器有限公司),JJ-2高速組織搗碎機(jī)(金壇市恒豐儀器廠),索氏提取器。試劑:無(wú)水乙醇、乙酸酐、H2SO4、CHCL3、120#溶劑汽油、分析純鹽酸、L.B試劑

        二、試驗(yàn)方法和結(jié)果分析

        1、將鮮品原料用搗碎機(jī)粉碎至1~5毫米顆粒,植物體內(nèi)自身的酶在一定環(huán)境條件下酶解部分淀粉、糖等物質(zhì),同時(shí)可以把皂苷分子從植物組織中游離出來(lái)。在水解過(guò)程中,排除一些水解干擾因素,降低酸的濃度、縮短水解時(shí)間,其回收率高于干品原料。

        2、試驗(yàn)工藝路線

        鮮品→清洗泥沙→勻漿機(jī)粉碎至1~5毫米→發(fā)酵酶解37℃3至5天→酸水解4至6h→水解物洗至中性→干燥→干燥產(chǎn)物用120#溶劑汽油回流10h→粗皂苷元用乙醇結(jié)晶得到薯蕷皂甙元。盾葉薯蕷鮮品按2、方法,做三次提取,每次500g,平均數(shù)為3.93g,占鮮品含量為0.78%,溶點(diǎn)在195℃以上,符合標(biāo)準(zhǔn)要求。

        3、分光光度法做含量測(cè)定

        (1)顯色試劑(Liebermann-Barcharacl)反應(yīng)

        (2)標(biāo)準(zhǔn)溶液吸光度測(cè)定 配成100g/L的標(biāo)準(zhǔn)溶液,從標(biāo)準(zhǔn)液中取1ml,滴入25ml容量瓶中,用CHCl3滴加到刻度,塞上軟木塞放入50℃恒溫水浴40分鐘,取出冷至室溫,用L.B試劑做空白對(duì)照,在460nm處進(jìn)做比色測(cè)定,讀取吸光度。以縱坐標(biāo)為吸光度,橫坐標(biāo)為含量做標(biāo)準(zhǔn)曲線。

        (3)待測(cè)溶液吸光度測(cè)定 取10g鮮品原料粉碎,加入50ml 15%H2SO4,回流4h,過(guò)濾水解物洗至中性烘干。溶于200ml CHCl3回流30分鐘,提取液在1升容量瓶中定容后,取1ml,按(2)方法操作,讀取吸光度。

        4、標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制 精密吸取對(duì)照溶液10~100€?0-6g/ml一組,按(2)方法測(cè)得的吸光度數(shù)據(jù)進(jìn)行處理,以吸光度(y)對(duì)薯蕷皂苷元濃度€%p回歸,得回歸方程:y=0.01988€%p-0.1953,€%\=0.9998。再以(y)為縱坐標(biāo),€%p為橫坐標(biāo)作標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制。線性范圍15~100€?0-6g/ml,標(biāo)準(zhǔn)誤差估計(jì)為0.00103。

        5、標(biāo)準(zhǔn)曲線法測(cè)定結(jié)果分析 按(3)方法將樣品制備得的樣液用(2)方法在460nm處測(cè)定吸收度,依標(biāo)準(zhǔn)曲線繪圖查算其濃度數(shù)值后,以下面公式計(jì)算鮮品盾葉薯蕷中皂苷元的百分含量。

        四、小結(jié)

        “濕法”工藝路線,即薯蕷鮮品生產(chǎn)工藝,一是可以破壞維管束、木栓細(xì)胞、粘液細(xì)胞并容易截短纖維,有利于激活酶作用,粉碎粒度可為1~5mm,打漿粉碎機(jī)功率選用值為800r/min;二是有利于濾棄纖維渣及大分子團(tuán)的淀粉沉降,使水溶性糖苷處于懸浮游離態(tài),利用薯蕷植物內(nèi)源酶和外源酶自然發(fā)酵。發(fā)酵后的上清液回流循環(huán)使用,懸浮液濃縮,發(fā)酵溫度控制在38℃€?℃值和發(fā)酵時(shí)間不易超過(guò)3~5天為最好;最后是減輕涼曬加工的勞動(dòng)強(qiáng)度或霉變損耗,以及減少生產(chǎn)皂素廠家的堆酵場(chǎng)地,而且更有利于縮短水解時(shí)間。

        本試驗(yàn)應(yīng)用了分光光度法檢測(cè)盾葉薯蕷皂苷元的含量分析,筆者認(rèn)為該法可應(yīng)用于商業(yè)性薯蕷原料的等級(jí)分類檢測(cè),以及作為薯蕷生產(chǎn)、科研的快速檢測(cè)方法,以確保薯蕷生產(chǎn)質(zhì)量,提出適時(shí)采挖,是更有效地提高薯蕷植物資源的開(kāi)發(fā)利用和資源保護(hù)的重要措施。

        參考文獻(xiàn):

        [1]郭劍偉.薯蕷皂素提取工藝研究進(jìn)展[J].藥學(xué)專論,2011,20(18):13-15.

        [2]彭司勛.藥物化學(xué)[M].北京:化學(xué)工業(yè)出版社,1998:400-447.

        [3]湯興利.盾葉薯蕷皂素提取工藝及檢測(cè)方法研究進(jìn)展[J].中藥材,2004,27(11):877-880.

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