孫何云 薛邦玉 劉宏斌 馬超鋒

中圖分類號：S858.312.4 文獻標識碼：B 文章編號：1673-1085（2014）12-0040-03

禽流感是禽流行性感冒（Avian influenza，AI）的簡稱。是由正粘病毒科流感病毒屬A型禽流行性感冒病毒引起的一種禽類（家禽和野禽）傳染病。禽流感病毒感染后可以表現為輕度的呼吸道癥狀、消化道癥狀，死亡率較低；或表現為較嚴重的全身性、出血性、敗血性癥狀，死亡率較高。AIV根據其對家禽致病力的不同分為3種，即高致病性、低致病性和無致病性。其中，高致病性禽流感病毒可以直接感染人類，并造成死亡。高致病性禽流感是由H5和H7亞毒株（以H5N1和H7N7為代表）引起的疾病。高致病性禽流感因其在禽類中傳播快、危害大、病死率高，被世界動物衛(wèi)生組織列為A類動物疫病，我國將其列為一類動物疫病。現階段，預防禽流感病毒感染主要依靠H5N1亞型禽流感滅活疫苗免疫。我國從2004年開始對高致病性禽流感實行強制免疫。信陽市政府招標的禽流感疫苗有H5N1高致病性禽流感滅活疫苗（Re-4+Re-6）和H5N1高致病性禽流感滅活疫苗（Re-6）兩種，為了解這兩種禽流感疫苗免疫效果，信陽市動物疫病預防控制中心組織相關人員歷時3個月，對信陽地區(qū)高致病性禽流感防疫狀況進行了深入的調查分析，掌握了信陽市禽流感免疫狀況的第一手資料，以期為信陽市的重大動物疫病防控提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 樣品采集 2014年3月～2014年6月， 各縣區(qū)動物疫病預防控制中心從信陽地區(qū)七縣兩區(qū)規(guī)模養(yǎng)殖場及散養(yǎng)戶，選取健康家禽，共采集血液樣品3653份，通過翅靜脈無菌采集全血2～3ml，冷藏條件下送達實驗室。

1.1.2 樣品的制備 將采集的血液樣品于3500r/min條件下離心10min，取上清液于1.5ml滅菌離心管中，-20℃保存?zhèn)溆么龣z。

1.1.3 檢測試劑盒及儀器設備

1.1.3.1 檢測試劑盒 禽流感H5亞型（Re-4株）（批號：2013005）、（Re-6株）（批號：2013006）血凝抑制試驗診斷抗原和禽流感H5亞型（Re-4株）陰、陽性血清（批號：2013004）及禽流感H5亞型（Re-6株）陰、陽性血清（批號：2013004），購自哈爾濱維科生物技術開發(fā)公司。

1.1.3.2 1%雞紅細胞懸液 采集2～3只無禽流感和新城疫等抗體的健康公雞自行配制。

1.1.3.3 儀器設備 LC-800低速離心機（科大創(chuàng)新股份有限公司中佳分公司）；Eppendorf 10～1000μl單道移液器及25～300μl多道移液器（德國Eppendorf公司）；303系列電熱恒溫培養(yǎng)箱（上海樹立儀器儀表有限公司）。

1.2 方法

1.2.1 禽流感抗體檢測采用血凝抑制試驗（HI），按照國家標準GB/18936-2003進行。

血凝試驗抗體檢測方法判定標準：以完全抑制4單位抗原的最高血清稀釋倍數判為該血清的HI效價。當陽性對照血清的HI效價與已知效價誤差不超過1個滴度，陰性對照血清的HI效價不高于2log2時，試驗方可成立。被檢血清HI效價≤3log2判為陰性；=判為4log2可疑（可疑樣品應重檢，重檢效價≥4log2判為陽性，≤3log2判為陰性）；≥5log2判為陽性。

1.2.2 群體免疫抗體陽性率達到70%判定為群體合格。

1.2.3 疫苗使用情況調查采取現場調查和問卷調查相結合的方式，根據各縣區(qū)疫苗調撥使用情況，對2014年上半年政府招標采購每個中標疫苗生產企業(yè)的每種疫苗開展了臨床免疫安全性調查。主要調查疫苗免疫注射后3d內發(fā)生副反應，包括應激反應、應激發(fā)病、應激死亡、應激流產等。

2 結果

2.1 信陽市H5N1高致病性禽流感滅活疫苗使用情況調查 見表1、表2、表3。

2.2 高致病性禽流感疫苗應用效果調查結果 2014年上半年全市共調查免疫雞只500631只，雞群免疫后3d內出現應激反應的雞只70只，應激反應率為1.40；應激發(fā)病雞只數0只；應激死亡0只。詳見表4。

2014年上半年全市共調查免疫水禽89452只，群體免疫后3d內出現應激反應的水禽15只，應激反應率為1.68；應激發(fā)病水禽數0只；應激死亡0只。詳見表5。

3 分析

3.1 雞H5N1高致病性禽流感滅活疫苗（Re-4+Re-6）檢測情況分析 從圖1可以看到，各縣區(qū)禽流感抗體合格率均在70%以上，符合國家的群體合格率標準。H5N1高致病性禽流感滅活疫苗（Re-4）抗體，息縣、潢川、淮濱、浉河、新縣抗體合格率均為100%，平橋為83.33%，其余縣區(qū)均在90%以上；H5N1高致病性禽流感滅活疫苗（Re-6）抗體息縣、潢川、淮濱、新縣抗體合格率為100%，平橋為86.66%，其余縣區(qū)均在90%以上。

從圖2可以看到，檢測的各個疫苗廠家禽流感抗體合格率均在70%以上，符合國家的群體合格率標準。

3.2 水禽H5N1高致病性禽流感滅活疫苗（Re-6）檢測情況分析 水禽H5N1高致病性禽流感滅活疫苗（Re-6）我市檢測了遼寧益康和乾元浩兩個廠家，抗體合格率分別為80%和92%，均在70%以上，免疫效果良好，特別是乾元浩達到90%以上。

3.3 H5N1高致病性禽流感滅活疫苗免疫的有效性 蛋雞是我市雞群中禽流感疫苗主要的受免對象。從表4看到，我市政府采購的幾個疫苗生產企業(yè)生產的疫苗注射蛋雞后安全性較好，應激發(fā)病、死亡均較少出現。調查中雞群出現應激反應率1.40。像哈維科、哈藥集團、乾元浩的禽流感疫苗注射后的副反應率幾乎為零，蛋雞的產蛋性能受影響較小，在產蛋高峰期之前和之后注射，蛋雞的產蛋率出現短時期的下降，下降3%左右，一星期后能回到產蛋高峰期。

疫苗免疫后有效性好，保護率較高，未出現臨床發(fā)病的情況，疫苗保護力較強，保護效果良好。

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