李威 賀雪丹 梅燦輝

摘要[目的]研究食物中硒元素的準(zhǔn)確測(cè)定方法。[方法]對(duì)枸杞和枸杞酒中微量硒的測(cè)定過程中，不同前處理方法對(duì)測(cè)定結(jié)果的影響進(jìn)行分析。[結(jié)果]研究表明，消解酸及消解方法的選擇對(duì)枸杞和枸杞酒中硒含量的測(cè)定結(jié)果無顯著差異（P>0.05）。綜合考慮試驗(yàn)條件，食物中微量硒的測(cè)定中最適合的前處理方法是以硝酸-過氧化氫為消解液的微波消解法。[結(jié)論]研究可為食物中微量硒的準(zhǔn)確測(cè)定提供參考依據(jù)。

關(guān)鍵詞硒；枸杞；枸杞酒；前處理

中圖分類號(hào)S609.9文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼A文章編號(hào)0517-6611（2014）23-07988-02

作者簡(jiǎn)介李威（1984- ），男，河南開封人，碩士，從事功能食品的開發(fā)研究。*通訊作者。

收稿日期20140710微量硒是人和動(dòng)物以及部分植物必需的微量元素，是紅細(xì)胞谷胱甘肽過氧化物酶的組成部分，主要參與了酶的合成，保護(hù)細(xì)胞膜的結(jié)構(gòu)和功能免受過度氧化損傷[1]。

當(dāng)前保健品發(fā)展的方向也包含了開發(fā)和研制富集硒的功能性食品。枸杞是一個(gè)易得的草本植物，而且食用簡(jiǎn)單，含硒量也較高，是人們獲得硒的重要來源。富硒枸杞及富硒枸杞酒的硒含量測(cè)定備受人們的關(guān)注，也成為當(dāng)今科研工作的熱點(diǎn)話題。因此，研究食物中硒元素的準(zhǔn)確測(cè)定方法，具有重要的現(xiàn)實(shí)意義。

1材料與方法

1.1材料

1.1.1樣品。該試驗(yàn)所用的樣品材料是寧夏枸杞（康美藥業(yè)股份有限公司）和葉老根枸杞酒（珠海青龍酒業(yè)有限公司）。

1.1.2主要試劑。除特殊說明外，該試驗(yàn)所用試劑均為優(yōu)級(jí)純或分析純，試驗(yàn)用水為去離子水。硝酸（HNO3）、高氯酸（HClO4）、過氧化氫（H2O2）、鹽酸（HCl）、鐵氰化鉀[K3Fe（CN）6]，均來源于廣州化學(xué)試劑廠。

鐵氰化鉀[（K3Fe（CN）6]溶液（100 g/L）的配制： 準(zhǔn)確稱取10.00 g 鐵氰化鉀，用二級(jí)水定容至100 ml，混勻備用；硒標(biāo)準(zhǔn)溶液（100 μg/ml） ： 國家有色金屬及電子材料分析測(cè)試中心制；混合酸1的配制：5 ml硝酸（HNO3）+1 ml高氯酸（HClO4）；混合酸2的配制：5 ml硝酸（HNO3）+1 ml過氧化氫（H2O2）；鹽酸1+1（6 mol/L）的配制：濃鹽酸（HCl）與二級(jí)水等比例混合即可。

還原劑為0.5%的氫氧化鈉和1.2%的硼氫化鉀。氫氧化鈉（NaOH）、硼氫化鉀（KBH4），均來源于廣州化學(xué)試劑廠。

1.1.3主要儀器。MARS微波消解儀，美國培安公司；超純水裝置，艾科浦；EH20A型不銹鋼數(shù)顯電熱板，北京萊伯泰科儀器有限公司；水浴鍋，上海宜昌儀器沙篩廠；電子天平，賽多利斯科學(xué)儀器北京有限公司；移液槍，Dargonlab；AFS930 原子熒光光度計(jì)，北京吉大天鵝儀器有限公司；硒空心陰極燈，北京有色金屬研究總院。

1.2硒含量測(cè)定的2種前處理方法

1.2.1枸杞和枸杞酒的濕法消解。稱取2份1.00 g左右枸杞樣品分別放在已標(biāo)號(hào)的50 ml三角瓶?jī)?nèi)，加12 ml混合酸，蓋上小漏斗冷消化過夜。次日于電熱板上低溫加熱，并及時(shí)補(bǔ)加混酸。當(dāng)溶液變?yōu)榍辶翢o色并伴有白煙時(shí)，再繼續(xù)加熱至剩余體積2 ml左右，切不可蒸干，冷卻，再加5 ml 6 mol/L鹽酸，繼續(xù)加熱至溶液變?yōu)榍辶翢o色并伴有白煙出現(xiàn)，以完全將六價(jià)硒還原成四價(jià)硒。冷卻，轉(zhuǎn)移用水定容于25 ml容量瓶中。吸取10 ml樣品消化液于25 ml比色管中，加濃鹽酸2 ml，鐵氰化鉀溶液1 ml，混勻待測(cè)（原子熒光法）。同時(shí)做空白試驗(yàn)。

稱取2份10.00 g左右枸杞酒樣品分別放在已標(biāo)號(hào)的150 ml三角瓶?jī)?nèi)，加12 ml混合酸， 蓋上小漏斗冷消化過夜。次日于電熱板上低溫加熱，并及時(shí)補(bǔ)加混酸。當(dāng)溶液變?yōu)榍辶翢o色并伴有白煙時(shí)，再繼續(xù)加熱至剩余體積2 ml左右，切不可蒸干，冷卻，再加5 ml 6 mol/L鹽酸，繼續(xù)加熱至溶液變?yōu)榍辶翢o色并伴有白煙出現(xiàn)，以完全將六價(jià)硒還原成四價(jià)硒。冷卻，轉(zhuǎn)移用水定容至25 ml容量瓶中。吸取10 ml樣品消化液于25 ml比色管中，加濃鹽酸2 ml，鐵氰化鉀溶液1 ml，混勻待測(cè)（原子熒光法）[2]。同時(shí)做空白試驗(yàn)。

1.2.2枸杞和枸杞酒的微波消解。稱取2份1.00 g左右枸杞于高壓微波消解罐中，分別加入硝酸5 ml和雙氧水1 ml，搖勻，蓋好內(nèi)蓋，旋緊外套，置微波消解儀中，按的消解程序進(jìn)行微波消解；消解程序完成后，取出高壓微波消解罐，放冷，消化液于電熱板上低溫加熱。當(dāng)溶液變?yōu)榍辶翢o色并伴有白煙時(shí)，再繼續(xù)加熱至剩余體積2 ml左右，切不可蒸干。冷卻，再加5 ml 6 mol/L鹽酸，繼續(xù)加熱至溶液變?yōu)榍辶翢o色并伴有白煙出現(xiàn)，以完全將六價(jià)硒還原成四價(jià)硒。冷卻，轉(zhuǎn)移用水定容至25 ml容量瓶中。吸取10 ml樣品消化液于25 ml比色管中，加濃鹽酸2 ml，鐵氰化鉀溶液1 ml，混勻待測(cè)（原子熒光法）。同時(shí)做空白試驗(yàn)。

稱取2份10.00 g左右枸杞酒樣品于高壓微波消解罐中， 置于90 ℃的水浴鍋中蒸發(fā)至剩下2 ml左右，分別加入硝酸5 ml和雙氧水1 ml，搖勻，蓋好內(nèi)蓋，旋緊外套；置微波消解儀中，按 的消解程序進(jìn)行微波消解；消解程序完成后，取出高壓微波消解罐，放冷，消化液于電熱板上低溫加熱，并及時(shí)補(bǔ)加混酸。當(dāng)溶液變?yōu)榍辶翢o色并伴有白煙時(shí)，再繼續(xù)加熱至剩余體積2 ml左右，切不可蒸干。冷卻，再加5 ml 6 mol/L鹽酸，繼續(xù)加熱至溶液變?yōu)榍辶翢o色并伴有白煙出現(xiàn)，以完全將六價(jià)硒還原成四價(jià)硒。冷卻，轉(zhuǎn)移用水定容至25 ml容量瓶中。吸取10 ml樣品消化液于25 ml比色管中，加濃鹽酸2 ml，鐵氰化鉀溶液1 ml，混勻待測(cè)（原子熒光法）。同時(shí)做空白試驗(yàn)[3- 5]。

微波消解程序升溫過程2結(jié)果與分析

2.12種不同混合酸消解的枸杞樣品硒含量測(cè)定結(jié)果對(duì)比分析對(duì)于食品樣品的處理，多采用混合酸1或混合酸2消解液的消解法等進(jìn)行前處理， 因此，通過試驗(yàn)對(duì)比這2種不同混合酸進(jìn)行選擇。稱取2份1.00 g 左右的枸杞樣品，加入不同的混合酸消解后進(jìn)行測(cè)定，試驗(yàn)數(shù)據(jù)見。

2種不同混合酸消解的枸杞樣品硒含量測(cè)定結(jié)果對(duì)比

處理方法樣品硒含量∥μg/kg重復(fù)1重復(fù)2測(cè)定結(jié)果平

均值∥μg/kg相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)

偏差∥%硝酸-過氧化氫6.016.306.163.33硝酸-高氯酸6.146.266.151.63

由可知，對(duì)于測(cè)定硒元素而言，2種消解液的前處理所得的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差均小于10%，故此測(cè)量?jī)x器的重復(fù)性是滿足要求的。用SPSS軟件對(duì)試驗(yàn)測(cè)定數(shù)據(jù)進(jìn)行單因素方差分析可知，用硝酸-過氧化氫和硝酸-高氯酸做消解液處理樣品并無顯著性差異（P=0.66>0.05），即用硝酸-過氧化氫和硝酸-高氯酸做消解都可以。

2.2濕法消解和微波消解的樣品硒含量測(cè)定結(jié)果對(duì)比分析對(duì)于食品樣品的處理，常采用濕法消解法和微波消解法等進(jìn)行前處理。因此，通過試驗(yàn)對(duì)比這2種前處理方法進(jìn)行選擇。稱取2份1.00 g左右的枸杞樣品和2份10.00 g左右的枸杞酒樣品，加入硝酸-過氧化氫的消解液進(jìn)行處理后上機(jī)測(cè)定。 試驗(yàn)數(shù)據(jù)見。

由數(shù)據(jù)可知，對(duì)于硒元素處理而言，2種樣品的濕法消解和微波消解前處理方法所得的RSD均小于10%，故此測(cè)量?jī)x器的重復(fù)性是滿足要求的。用SPSS軟件對(duì)測(cè)定的數(shù)據(jù)進(jìn)行雙因素方差分析可得，濕法消解和微波消解并無顯著性差異（P=0.14>0.05），也就是說，消解方法的選擇，濕法消解和微波消解都可以。

3結(jié)論

對(duì)于枸杞和枸杞酒樣品硒元素的測(cè)定，常見的前處理方法有干法消化、濕法消解以及微波消解法。干法消化雖能處理較大的樣品量，但是費(fèi)時(shí)，并且硒具有揮發(fā)性，易造成硒的損失，故該研究沒有進(jìn)行干法消解。

濕法消解采用強(qiáng)氧化劑敞口加熱進(jìn)行樣品消解，而微波消解是利用微波的穿透性和激活能力，內(nèi)加熱密閉容器中的試劑和樣品，利用微波輻射的“內(nèi)加熱”作用，能夠加快消解的速度，最大限度地發(fā)揮酸的作用，同時(shí)減少干擾，從而提高效率，而且微波消解是在密閉容器中進(jìn)行的，硒的損失少，空白低。從測(cè)定值也可以看出，雖然2種方法沒有顯著性差異，但濕法消解采用在電熱板中加熱錐形瓶使樣品消解，耗時(shí)長(zhǎng)、易引入污染，也耗費(fèi)人力[6-7]。

綜合試驗(yàn)條件考慮，微量硒的測(cè)定中最適合的前處理方法是以硝酸-過氧化氫為消解液的微波消解法。

參考文獻(xiàn)

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