羅俊霞　肖海娜　徐為霞　劉萃　趙建波

摘 要： 為了探索建立固相萃取-氣相色譜法-電子捕獲檢測器同時(shí)測定黃瓜中的六氯苯等多種農(nóng)藥和除草劑殘留的方法，樣品用乙腈提取，經(jīng)SPE小柱（弗羅里硅土）凈化，采用電子捕獲檢測器進(jìn)行測定，外標(biāo)法定量，分別對黃瓜進(jìn)行3個(gè)水平（0.02、0.04、0.08 mg·kg-1）（敵稗和丁草胺在0.04、0.08、0.16 mg·kg-1）的添加回收試驗(yàn)。結(jié)果表明，平均添加回收率為68.0%～120.3%，RSD為2.0%～20.8%，方法的最低檢測限為0.000 9～0.027 4 mg·kg-1，在103的范圍內(nèi)線性較好，相關(guān)系數(shù)r≥0.998 7。該方法靈敏度高、重復(fù)性好，可以作為測定蔬菜中這幾種農(nóng)殘的測定方法。9種農(nóng)藥在黃瓜基質(zhì)中存在不同程度的基質(zhì)效應(yīng)，其中敵稗和丁草胺存在較強(qiáng)的基質(zhì)抑制效應(yīng)，其他幾種存在較弱的基質(zhì)增強(qiáng)效應(yīng)。

關(guān)鍵詞： 黃瓜； 氣相色譜； 離心； 過濾； 基質(zhì)效應(yīng)

前些年，為了節(jié)省勞力，在生產(chǎn)中較多地使用有機(jī)氯類除草劑。有機(jī)氯農(nóng)藥是一類曾被世界各國廣泛使用的高效、廣譜殺蟲劑。雖然禁用多年，但由于其半衰期長、不易降解，所以長期積存于植物和土壤中，至今仍有檢出[1-2]。七氯、艾氏劑、狄試劑、異狄氏劑是氯化環(huán)戊二烯殺蟲劑、六氯苯和氯硝胺是殺菌劑、敵稗和丁草胺是除草劑、胺菊酯是擬除蟲菊酯，這些農(nóng)藥和除草劑對動物具有致畸、致癌和致突變等毒性[3]。目前對這類農(nóng)藥的檢測較普遍的使用氣相色譜法[4-6]、氣相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法[7-8]；在NY/T 761-2008的標(biāo)準(zhǔn)中[9]列舉了用GC-ECD檢測的農(nóng)藥種類，但是卻沒有具體的測定數(shù)據(jù)。為了快速對這幾種農(nóng)藥進(jìn)行測定，我們進(jìn)行了固相萃取-氣相色譜法-電子捕獲檢測器同時(shí)測定黃瓜中的六氯苯等多種農(nóng)藥殘留的試驗(yàn)，以期對檢測工作有所幫助。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)儀器與試劑

瓦里安CP3800，配8400自動進(jìn)樣器和ECD檢測器，其色譜柱為VF-5，30 m×0.32 mm，液膜厚0.25 μm；WH-861型漩渦混合器；天孚牌電子計(jì)數(shù)天平（DT 500A）；德國產(chǎn)的Heidolph牌SilentCrusher M型均質(zhì)機(jī)；美國產(chǎn)的N-EVAPTM-112型氮吹儀，美國產(chǎn)的固相萃取裝置。

乙腈、正己烷、丙酮為CNW品牌試劑，（HPLC級）；NaCl為天津市科密歐化學(xué)試劑開發(fā)中心生產(chǎn)的綠環(huán)牌試劑（分析純級）；農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品七氯（Heptachlor）、艾氏劑（Aldrin）、狄試劑 （Dieldrin）、異狄氏劑（Endrin）、六氯苯（Hexachlorobenzene）、氯硝胺（Dichloran）、敵稗（Propanil）、丁草胺 （Butachlor）和胺菊酯（Tetramethrin），濃度均為100 mg·kg-1，由農(nóng)業(yè)環(huán)境保護(hù)科研檢測所生產(chǎn)。

1.2 GC條件

進(jìn)樣口溫度：220 ℃。檢測器溫度：300 ℃。柱溫箱—程序升溫：起始溫度150 ℃，保持0.5 min，以20 ℃·min-1升至200 ℃，保持2 min，以0.8 ℃· min-1升至210 ℃，保持2 min，以50 ℃·min-1升至260 ℃，保持10 min。柱流量2 mL·min-1；分流比：1∶10；進(jìn)樣量為1 μL。

1.3 樣品前處理

依照NY/T 761-2008[9]的方法，稱取25 g樣品于250 mL的廣口瓶中，加入50 mL乙腈，用均質(zhì)機(jī)在8 000～12 000 r·min-1的轉(zhuǎn)速下均質(zhì)提取，之后過濾到裝有5～7 g NaCl的100 mL具塞量筒中，劇烈振搖1 min，靜置分層20 min以上，收集濾液60～70 mL（上層乙腈相體積為30～40 mL），移取上層乙腈相10 mL濃縮至近干，用2 mL的正己烷定容，之后用弗羅里硅土SPE小柱凈化，再次濃縮至近干，用正己烷定容至5 mL。根據(jù)保留時(shí)間定性，用基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)溶液校正，外標(biāo)法定量，單點(diǎn)校正。

1.4 標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制

分別準(zhǔn)確吸取1.1中標(biāo)準(zhǔn)溶液各1 mL 至10 mL 的容量瓶中，用正己烷定容至10 mL 刻度線，成為10 mg·kg-1的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液備用。用黃瓜樣品基質(zhì)進(jìn)行稀釋成低濃度標(biāo)準(zhǔn)溶液上機(jī)測定。

1.5 數(shù)據(jù)處理及濃度設(shè)置

分別稱取25 g的黃瓜空白樣品，添加9種混合標(biāo)準(zhǔn)溶液和單標(biāo)，使添加后六氯苯、氯硝胺、七氯、艾氏劑、狄試劑、異狄氏劑、胺菊酯的分別為0.02、0.04、0.08 mg·kg-1，敵稗和丁草胺的濃度分別為0.04、0.08、0.16 mg·kg-1，按照1.3中的步驟進(jìn)行樣品前處理，每個(gè)水平的試樣重復(fù)測定12次，根據(jù)測定結(jié)果計(jì)算添加回收率，在12個(gè)添加回收中棄去2個(gè)離群值。

分別用正己烷配制0.001、0.01、0.1、1、10 mg·kg-1 5個(gè)濃度水平的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，用黃瓜基質(zhì)配制0.01、0.02、0.04、0.08、0.16 mg·kg-1共5個(gè)濃度水平的標(biāo)準(zhǔn)品，根據(jù)測定結(jié)果制作回歸方程。

2 結(jié)果與分析

2.1 基質(zhì)效應(yīng)

由圖1、圖2、圖3可以看出，黃瓜樣品基質(zhì)中存在一些干擾物，在VF-5的柱子上和六氯苯、敵稗和丁草胺分不開，從而對這3種物質(zhì)的測定存在較大的影響。其中在敵稗和丁草胺的保留時(shí)間附近均有一個(gè)較大的倒峰，對二者存在嚴(yán)重的基質(zhì)抑制效應(yīng)，基質(zhì)抑制程度隨著標(biāo)準(zhǔn)品濃度的增大而減??；在六氯苯的保留時(shí)間附近有一個(gè)較小的正峰，使六氯苯有較弱的基質(zhì)增強(qiáng)效應(yīng)。其他幾種農(nóng)藥也存在不同程度的基質(zhì)增強(qiáng)效應(yīng)，有待于進(jìn)一步研究。

2.2 方法的回收率和精密度試驗(yàn)

9種化合物的具體測定結(jié)果見表1。試驗(yàn)結(jié)果表明，本方法的回收率范圍為68.0%～120.3%，精密度為2.0%～20.8% 。表1中六氯苯、氯硝胺、七氯、艾氏劑、狄試劑、異狄氏劑、胺菊酯的檢出限在0.08 mg·kg-1的水平下、敵稗和丁草胺在0.16 mg·kg-1的水平下根據(jù)公式[10]計(jì)算。

DL=[3NCh]

式中：DL代表方法的檢測限（方法可檢測到的最小樣品量）；N 代表基線噪聲；C 代表樣品濃度；h 代表相應(yīng)的農(nóng)藥的峰高。表1表明，9種化合物的檢測限為0.000 9～0.027 4 mg·kg-1，該方法的回收率、精密度和檢測限均滿足多農(nóng)殘檢測分析的要求。

2.3 方法的檢測限和線性范圍

9種化合物的線性回歸方程、線性范圍和相關(guān)系數(shù)見表2，因?yàn)閿嘲藓投〔莅返捻憫?yīng)較低，在0.001 mg·kg-1濃度水平下幾乎可以視為沒有響應(yīng)，它們在103（0.01～10 mg·kg-1）的范圍內(nèi)相關(guān)系數(shù)分別是0.998 8和0.999 3，其他7種化合物在104的范圍內(nèi)相關(guān)系數(shù)均小于103的相關(guān)系數(shù)，線性均不如在103的范圍內(nèi)的線性好，在103 （0.001～1 mg·kg-1）的范圍內(nèi)相關(guān)系數(shù)均大于0.998 5；用黃瓜空白基質(zhì)配制了0.01、0.02、0.04、0.08、0.16 mg·kg-1共5個(gè)濃度水平的標(biāo)準(zhǔn)品，同樣，敵稗在0.01 mg·kg-1和0.02 mg·kg-1的濃度水平下，因?yàn)榛|(zhì)效應(yīng)，可以視為沒有響應(yīng)，在0.04～0.16 mg·kg-1的范圍內(nèi)相關(guān)系數(shù)是0.991 2，其他8種化合物在0.01～0.16 mg·kg-1的范圍內(nèi)相關(guān)系數(shù)均大于0.993 5 ；可見，用黃瓜空白基質(zhì)作為介質(zhì)配制的標(biāo)準(zhǔn)溶液的線性范圍不如用正己烷試劑作為介質(zhì)配制的標(biāo)準(zhǔn)溶液，但在一定的范圍內(nèi)其線性可以滿足多種農(nóng)藥殘留分析的要求；同時(shí)，在日常檢測工作中為了避免基質(zhì)效應(yīng)帶來的影響可以用相近濃度的基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)溶液來進(jìn)行校正。

3 討論和結(jié)論

在試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，黃瓜基質(zhì)中由于存在干擾物對敵稗和丁草胺影響較大，該其他基質(zhì)中是否存在干擾有待于進(jìn)一步試驗(yàn)。本方法采用固相萃取的前處理技術(shù)，建立了氣相色譜-電子捕獲檢測器測定黃瓜中多種有機(jī)氯和除草劑農(nóng)藥殘留量的方法，獲得了滿意的分離效果和檢測靈敏度，方法的準(zhǔn)確度、精密度、線性范圍、相關(guān)系數(shù)、檢出限等均能滿足多農(nóng)殘分析的要求。但是黃瓜基質(zhì)在VF-5的柱子上對敵稗和丁草胺的影響較大，建議在檢測工作中用相近濃度的基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)溶液來進(jìn)行校正。

參考文獻(xiàn)

[1] 郝麗麗，薛 健. 銀杏葉中18種有機(jī)氯農(nóng)藥的多殘留分析[J].分析化學(xué)，2006，34（2）： 231-234.

[2] 申中蘭，蔡繼寶，高 蕓，等. 基質(zhì)固相分散-加速溶劑萃取-氣相色譜法測土壤中有機(jī)氯農(nóng)藥殘留[J]. 分析化學(xué)，2005，33（9）：1318-1320.

[3] 苗建材，王淑英，張作芳，等. 最新農(nóng)藥使用技術(shù)手冊[M]. 哈爾濱：黑龍江科學(xué)技術(shù)出版社，1992.

[4] 石 杰，楊 靜，劉慧民，等. 超聲波提取-固相萃取凈化-氣相色譜法分析煙草中擬除蟲菊酯類農(nóng)藥及氟節(jié)胺殘留[J]. 分析試驗(yàn)室，2010，29（4）： 22-24.

[5] 朱學(xué)良，戚向陽，岳晶念，等. 基質(zhì)固相分散氣相色譜電子捕獲檢測器測定葡萄酒中5種農(nóng)藥殘留[J]. 分析化學(xué)，2007，35（2）：259-262.

[6] 萬益群，陳宗保.土壤中多種有機(jī)氯及擬除蟲菊酯類農(nóng)藥的GC-ECD測定[J]. 分析試驗(yàn)室，2006，25（9）： 60-63.

[7] 周相娟，趙玉琪，許 華.氣相色譜-質(zhì)譜法測定化妝品中16種有機(jī)氯農(nóng)藥[J]. 分析試驗(yàn)室，2013，32（12）： 74-78.

[8] 顏鴻飛，黃志強(qiáng)，張 瑩，等. 氣相色譜-質(zhì)譜法測定茶葉中29種酸性除草劑的殘留量[J]. 色譜，2009，27（3）： 288-293.

[9] 農(nóng)業(yè)部環(huán)境質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)測試中心（天津），農(nóng)業(yè)部環(huán)境保護(hù)科研監(jiān)測所. NY/T 761-2008蔬菜和水果中有機(jī)磷、有機(jī)氯、擬除蟲菊酯和氨基甲酸酯類農(nóng)藥多殘留檢測方法[S]//中華人民共和國農(nóng)業(yè)部. 北京：中國農(nóng)業(yè)出版社，2008.

[10] 劉虎威. 氣相色譜方法及應(yīng)用[M]. 北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2000.