楊柳 陰長發(fā) 高宏珍等

摘要[目的] 揭示不同含油量油菜品種LEC1基因的遺傳多樣性。[方法]測定不同含油量品種不同發(fā)育時期LEC1基因的表達量及含油量。[結(jié)果]甘藍型油菜LEC1基因與含油量密切相關(guān)，其相對表達量在花期和角果期均與含油量呈顯著正相關(guān)，且花期的相關(guān)系數(shù)大于角果期相關(guān)系數(shù)。[結(jié)論]該研究為選育高含油量油菜品種提供理論依據(jù)。

關(guān)鍵詞LEC1基因；相對表達量；含油量；相關(guān)分析

中圖分類號S188文獻標識碼A文章編號0517-6611（2014）23-07702-01

基金項目863 計劃課題（ 2012AA101107）；湖南省教育廳優(yōu)秀青年項目（13B051）；湖南省作物種質(zhì)資源與創(chuàng)新利用重點實驗室科學(xué)基金開放項目（11KFXM08）。

作者簡介楊柳（ 1982- ），女，湖南湘陰人，實驗師，碩士，從事油菜育種研究。*通訊作者。

收稿日期20140707油菜籽含油量對于保障采油供應(yīng)具有十分重要的意義，含油量提高1%，相當于增產(chǎn)2.3% ～ 2.5%[1]。三酰甘油是油菜種子最主要的儲藏脂類。油菜種子含油量具有數(shù)量性狀的遺傳特點，主要由遺傳因素決定，控制基因具有加性和顯性效應(yīng)，同時也受環(huán)境因素的影響，存在基因型與環(huán)境之間的互作[2-4]。LEC1是脂肪酸合成過程中的關(guān)鍵調(diào)控因子，MU等[5]研究表明，擬南芥LEC1基因的過表達導(dǎo)致脂肪酸合成基因表達量整體水平的增加，而這些基因參與縮合、碳鏈延伸、去飽和化等脂肪酸合成中的關(guān)鍵反應(yīng)，在LEC1過表達的轉(zhuǎn)基因植株中，超過58%已知的參與質(zhì)體脂肪酸合成途徑的酶基因表現(xiàn)出正調(diào)控。

筆者通過測定不同含油量品種不同發(fā)育時期LEC1基因的表達量及含油量，揭示不同含油量油菜品種LEC1基因的遺傳多樣性，研究其表達量與含油量的關(guān)系，為選育高含油量油菜品種提供理論依據(jù)。

1材料與方法

1.1材料選擇甘藍型油菜高代自交系高含油量材料（H145.25%、H246.10%）和低含油量材料（L138.15%、L238.64%），2011年秋季在湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)耘園播種，播種密度為51萬株/hm2，各種栽培管理條件相同。

1.2方法參照WANG等[6]方法，采用TRNzol法提取苗期葉片、盛花期葉片和角果期（開花23 d）種子RNA，BnLEC1基因的相對表達量測定使用ABI 7300熒光定量PCR儀，SYBR Green染料法測定，Primer 5.0軟件設(shè)計引物[7-9]。索氏法[10]測定成熟種子含油量。Quant cDNA第一鏈合成試劑盒、RealMasterMix（SYBR Green）試劑盒均采購于TIANGEN公司。采用Primer 5.0軟件設(shè)計引物并進行檢測，得到特異性強、無引物二聚體、無非特異擴增的引物。以BnActin基因作內(nèi)參，采用2^（-△△Ct）法分析BnLEC1基因在各個材料中的相對表達情況。

1.3數(shù)據(jù)分析統(tǒng)計分析采用DPS13.01軟件。

2結(jié)果與分析

2.1各品種LEC1基因不同生育時期相對表達量分析由表1可知，同一品種LEC1基因相對表達量相差不大，苗期較低，花期略有增加，角果期發(fā)生突增達到最高點，表達量是苗期或花期的上百倍。高、低含油量品種間在花期和角果期LEC1基因的相對表達量差異較大，特別是角果期高含油量品種明顯高于低含油量品種?？梢姡琇EC1基因與油菜油脂的形成有很大關(guān)系。

3小結(jié)與討論

甘藍型油菜LEC1基因與含油量密切相關(guān)，其相對表達量在花期和角果期均與含油量呈顯著正相關(guān)，且花期的相關(guān)系數(shù)大于角果期相關(guān)系數(shù)。這一結(jié)果可以應(yīng)用于油菜育種，通過LEC1基因的表達量預(yù)測油菜的含油量，縮短油菜育種