劉保磊，常毓文，楊 玲，丁 偉，趙 麗

(1.中國石油勘探開發(fā)研究院，北京100083;2.中國石油集團測井有限公司油氣評價中心，陜西西安710077;3.勝利油田有限公司采油工藝研究院，山東東營257015)

微生物采油是利用微生物自身的有益活動、菌體及其代謝產(chǎn)物作用于油藏和油層流體提高原油采收率的方法。微生物采油技術(shù)大體可分為兩類，一類是地面法，在地面建立發(fā)酵反應(yīng)罐，為微生物提供必需的營養(yǎng)物質(zhì)，使微生物在發(fā)酵罐中產(chǎn)生驅(qū)油所用的代謝產(chǎn)物(主要是生物表面活性劑和生物聚合物)，并將代謝產(chǎn)物注入油層提高原油采收率;另一類是油層法［1］，通過向油層中提供營養(yǎng)物質(zhì)，使微生物以原油為碳源，產(chǎn)生驅(qū)油所用的代謝產(chǎn)物，從而提高原油采收率［2-6］。筆者根據(jù)微生物生長代謝特點及儲層特征，從微生物代謝驅(qū)油產(chǎn)物的角度出發(fā)，結(jié)合物質(zhì)守恒定律及驅(qū)油理論，分析微生物在油層中合成驅(qū)油所用代謝產(chǎn)物的能力，并建立微生物采油所需代謝產(chǎn)物濃度及濃度極限的數(shù)學(xué)方程。

1 微生物驅(qū)油機制及主要驅(qū)油物質(zhì)

1.1 微生物驅(qū)油機制

油層中微生物驅(qū)油機制主要可歸納為以下幾點:①分解原油中的重質(zhì)組分為輕質(zhì)組分，降低原油黏度，改善流動性;②代謝生物表面活性劑，以低相對分子質(zhì)量的醇、脂肪酸、糖脂等降低油水界面張力，改善原油流動性;③代謝生物聚合物，選擇性封堵滲透率較高的儲層，改變流體流動方向，提高驅(qū)替效果;④代謝生物氣體，增加油層壓力，溶解于原油，提高原油的溶解能力和流動性;⑤產(chǎn)生酸性物質(zhì)溶解巖石，改善油層滲流能力。

1.2 微生物代謝產(chǎn)物

生物表面活性劑。生物表面活性劑的分子的極性端或是多羥基的糖類或是氨基酸類，非極性端是長鏈脂肪酸或是脂肪醇等的長鏈烴部分。根據(jù)生物表面活性劑的化學(xué)結(jié)構(gòu)可分為糖脂、含氨基酸類脂、磷脂、脂肪酸中性脂、結(jié)合多糖、蛋白質(zhì)的高分子生物表面活性劑、顆粒生物表面活性劑等［7］。

生物聚合物。生物聚合物是由多糖組成的一類生物高分子聚合物。用于驅(qū)油的生物聚合物主要有:黃原膠、硬葡聚糖、Simusan、AGBP、琥珀聚糖、雜多糖 S-88 等［8］。

生物氣體。微生物的生長代謝可產(chǎn)生多種氣體［9］，主要有二氧化碳(CO2)、氫氣(H2)、氮氣(N2)和甲烷(CH4)等。

2 可供微生物利用的物質(zhì)

油層中微生物生長代謝所需的營養(yǎng)物質(zhì)來源主要包括兩部分:油層中固有的營養(yǎng)物質(zhì)、由地面注入油層的營養(yǎng)物質(zhì)。

2.1 碳源

碳源是微生物生長代謝需要量最大的營養(yǎng)物質(zhì)，根據(jù)微生物采油機制，油層中的石油和添加入油層中的糖類物質(zhì)是目前油層法微生物驅(qū)油的主要碳源［1，10］。

2.1.1 石油

石油是復(fù)雜的烴類化合物，主要由碳和氫兩種元素組成。其中碳的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為83% ～87%，氫的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為11% ～14%;石油組成中還有硫、氮、氧等次要元素，根據(jù)某些原油的元素組成［11］計算元素的摩爾含量(表1)。

表1 中國某些原油的元素組成Table 1 Elemental composition of some crude oil in China

2.1.2 糖類

注入油層的糖類物質(zhì)主要為糖蜜、淀粉、蔗糖(C12H22O11)、葡萄糖等。糖蜜中的甘蔗糖蜜含蔗糖約24% ～36%，其他糖約12% ～24%;甜菜糖蜜所含糖類幾乎全為蔗糖，約為47%［12-13］。

2.2 其他營養(yǎng)物質(zhì)

在營養(yǎng)要素水平上，除微生物生長代謝所需的碳源外，氮源、能源、無機鹽、生長因子和水也是微生物所需的物質(zhì)。營養(yǎng)物質(zhì)主要以有機和無機化合物的形式存在，此外，還有小部分營養(yǎng)物質(zhì)以分子態(tài)的氣體形式提供，如氧氣。進行油氣開采的油層中的氧氣主要為存在于液相中的溶解氧，天然水中的溶解量一般為5～10 mg/L，即 1.56×10－4～3.13×10－4mol/L［14-15］。

3 驅(qū)油物質(zhì)產(chǎn)量控制方程

微生物驅(qū)油有兩個主要特點:一是油層中代謝產(chǎn)物濃度的積累需要一定的時間，其遵循微生物的生長代謝規(guī)律;二是微生物生長代謝所需的營養(yǎng)物質(zhì)到達油層中微生物所在區(qū)域才能保證微生物的生長繁殖。因此，營養(yǎng)物質(zhì)的及時供給與代謝產(chǎn)物濃度的合理控制是確保微生物驅(qū)油效果發(fā)揮的關(guān)鍵因素。

3.1 代謝產(chǎn)物濃度方程

若微生物代謝生成產(chǎn)物Dc時，需要原油Y、外部碳源W、其他營養(yǎng)物N的參與，則代謝產(chǎn)物濃度為cx時，有效利用的原油Y、外部碳源W、其他營養(yǎng)物N的質(zhì)量分別為 Wx、Yx、Nx:

式中，MDc為微生物合成的代謝產(chǎn)物總質(zhì)量;M1為原油Y參與合成的代謝產(chǎn)物質(zhì)量;M2為外部碳源W參與合成的代謝產(chǎn)物質(zhì)量;c1為利用原油Y合成的代謝產(chǎn)物濃度;c2為利用外部碳源W合成的代謝產(chǎn)物濃度;ρc為油藏中代謝產(chǎn)物溶液密度;So為油藏原油飽和度;Sori為微生物消耗油藏原油后的剩余油飽和度;vini為原油轉(zhuǎn)化效率;vex為外部碳源轉(zhuǎn)化效率;gq為其他營養(yǎng)物需求率;Vφ為儲層巖石的孔隙體積。

油層中微生物利用原油合成的代謝產(chǎn)物質(zhì)量最大值Mmax1、濃度最大值cmax2可分別表示為

式中，α為原油消耗率，微生物利用的原油質(zhì)量 /原油飽和度為So時的質(zhì)量;ρo為原油密度;ρw為油層水密度。

油層中微生物利用外部碳源合成所需的代謝產(chǎn)物，其代謝產(chǎn)物質(zhì)量最大值Mmax2、濃度最大值cmax1可分別表示為

式中，β為外部碳源消耗率，即微生物消耗的外部碳源質(zhì)量/注入時的外部碳源質(zhì)量;ρex為油層中外部碳源的密度。

油層中微生物利用原油和外部碳源等營養(yǎng)物質(zhì)合成的代謝產(chǎn)物總質(zhì)量Mmax、濃度最大值cmax分別為

則其他營養(yǎng)物N的最大需求質(zhì)量Nxmax為

式中，γ為其他營養(yǎng)物利用率，即微生物利用的營養(yǎng)物N的質(zhì)量 /營養(yǎng)物N的總質(zhì)量。

若微生物驅(qū)油需要的代謝產(chǎn)物濃度creq≤cmax時，則微生物驅(qū)具有提高原油采收率的前提條件，反之，難以提高原油采收率。

3.2 代謝物產(chǎn)量限制性方程

微生物合成驅(qū)油代謝產(chǎn)物需要某些物質(zhì)的參與，該類物質(zhì)在油層水相中的溶解度有限，將制約微生物合成某種代謝產(chǎn)物的濃度［16］。若油層中微生物利用其他營養(yǎng)物質(zhì)N生成代謝產(chǎn)物Dc時，需要水相中物質(zhì)U的參與，則油層中營養(yǎng)物質(zhì)N充足時，物質(zhì)U在水相中的溶解度cU越大，代謝產(chǎn)物Dc的生成量越多。因此，微生物驅(qū)油的代謝產(chǎn)物濃度cx=creq時，水相中物質(zhì)U的需求濃度為cUr:

式中，Ux為物質(zhì)U的需求質(zhì)量;fN為物質(zhì)N的需求率。

油藏中物質(zhì)U的吸附、滯留及與其他物質(zhì)的相互反應(yīng)等，使物質(zhì)U隨驅(qū)替時間的增長逐漸損耗，設(shè)瞬時消耗率為KU，則

則時間t時物質(zhì)U的溶解度為

若油層中物質(zhì)U以恒定速率KU=K0消耗，則可得到時間t時物質(zhì)U的溶解度:

物質(zhì)U的溶解度消耗至溶解度cUr時的時間為

若水相中營養(yǎng)物質(zhì)N的質(zhì)量為No，U的質(zhì)量為UUo且fUNo≥UUo≥Ux，注入井附近，生成代謝產(chǎn)物Dc范圍，滿足以下關(guān)系:

式中，R為注入井附近代謝產(chǎn)物的合成半徑;ri為注入井井筒半徑;Q為注入井流量。

即以注入井為圓周中心，距離大于半徑R時，cx＜cUr，不能生成所需濃度的代謝產(chǎn)物Dc。

因此，可根據(jù)水相中U的溶解度及其消耗速率求出需要補充的營養(yǎng)物質(zhì)N的質(zhì)量及受物質(zhì)U制約的代謝產(chǎn)物Dc的生成半徑;若物質(zhì)U的溶解度大小有限，消耗速率過快，合成代謝產(chǎn)物時對U的需求量過大，補充油層中物質(zhì)U的含量也難以擴大生成代謝產(chǎn)物Dc的半徑范圍。油藏條件下儲層大部分處于厭氧環(huán)境，氧氣及氧原子含量將制約微生物代謝生產(chǎn)有利驅(qū)油物質(zhì)的數(shù)量。

4 驅(qū)油物質(zhì)產(chǎn)量理論分析

若代謝產(chǎn)物Dc分子某組成部分中的原子T完全由營養(yǎng)物N分子中的原子T提供，當(dāng)1 mol代謝產(chǎn)物 Dc分子某組成部分中的原子T為a mol，1 mol營養(yǎng)物N分子中原子T為b mol時，則合成c mol代謝產(chǎn)物Dc，營養(yǎng)物N的有效需求率gq為

式中，mMo為代謝產(chǎn)物Dc的摩爾質(zhì)量;mN為營養(yǎng)物質(zhì)N的摩爾質(zhì)量。

4.1 生物表面活性劑產(chǎn)量

以目前研究較多、較充分的鼠李糖脂表面活性劑為例，對油層中微生物代謝鼠李糖脂的濃度進行理論分析。鼠李糖脂親水基由1－2分子的鼠李糖環(huán)構(gòu)成，疏水基由1－2分子不同碳鏈長度的飽和或不飽和脂肪酸構(gòu)成。銅綠假單胞菌可代謝四種主要的鼠 李 糖 脂 (Rhamnolipid1、Rhamnolipid2、Rhamnolipid3、Rhamnolipid4)［17］。一般情況下，Rl和R3的含量較高，約占糖脂總量的70% ～80%。R1是單鼠李糖脂，化學(xué)式為C26H48O9，R3是雙鼠李糖脂，化學(xué)式為C32H58O13，它們的相對分子質(zhì)量分別為504和650。據(jù)報道鼠李糖脂混合的臨界膠束濃度cCMC為 40 ～ 50 mg/L［18-19］，單鼠李糖脂混合物的cCMC約50 mg/L［20］，雙鼠李糖脂混合物的cCMC為50～ 75 mg/L［21-23］。

4.1.1 疏水基的合成

根據(jù)烷烴生物降解機制，在烷烴的微生物氧化中必須有分子氧的參與［1，7，10］。烷烴首先氧化成長鏈醇，然后經(jīng)由中間體醛，進一步氧化成相應(yīng)的脂肪酸，因此，長鏈醇的生成是疏水基形成的重要因素，而疏水基的形成是合成生物表面活性劑的前提。

(1)假設(shè)理想情況下，1 mol氧氣中2 mol氧原子參與生成1 mol羧基(—COOH)，長鏈脂肪酸分子式只含一個羧基時，可生成1 mol長鏈脂肪酸(R—COOH):

R—CH2—CH3+O2→ R—CH2—COOH，

生成1 mol鼠李糖脂R1或R3時氧氣的需求率:

式中，MR為鼠李糖脂R1或R3的質(zhì)量;mR為鼠李糖脂R1或R3的摩爾質(zhì)量;mo為氧氣的摩爾質(zhì)量。

則氧氣利用率γ=1，水中溶解氧量可生成鼠李糖脂R1或R3的質(zhì)量為

式中，no為溶解氧物質(zhì)的量。

若水中溶解氧為1.56×10－4～3.13×10－4mol/L時可參與生成 7.81×10－5－1.56×10－4mol/L鼠李糖脂R1或R3，若生成的鼠李糖脂全部為R1，則大約為39.38～78.75 mg/L，若生成的鼠李糖脂全部為R3，則大約為50.78～101.56 mg/L。

(2)假設(shè)理想情況下，1 mol氧氣參與生成1 mol醇羥基(—OH)，1 mol醇羥基與1 mol氧氣參與生成1 mol羧基(—COOH)，則1 mol氧氣參與生成0.5 mol羧基，長鏈脂肪酸分子式只含一個羧基時，可生成0.5 mol長鏈脂肪酸:

則氧氣利用率γ=0.5，水中溶解氧量可生成鼠李糖脂R1或R3的質(zhì)量為

水中溶解氧可參與生成鼠李糖脂R1約為19.69～39.38 mg/L，鼠李糖脂R3約為25.39～50.78 mg/L。

因此，水中溶解氧參與合成的鼠李糖脂量約為其臨界膠束濃度值。

4.1.2 氧原子數(shù)量守恒

若代謝產(chǎn)物Dc分子中的原子T完全由營養(yǎng)物N分子中的原子 T提供，參考式(19)、(20)、(21)，結(jié)合原子數(shù)量守恒求取營養(yǎng)物質(zhì)的需求量。

(1)若鼠李糖脂中的氧原子全部由水中的溶解氧提供，則1.56×10－4～ 3.13×10－4mol/L的溶解氧可參與生成3.47×10－5～6.94×10－5mol/L即17.50～35 mg/L的R1或生成2.40×10－5～4.81×10－5mol/L即15.63 ～ 31.25 mg/L的R3。

(2)若鼠李糖脂中的氧原子全部由蔗糖的氧原子提供，則1 mol蔗糖中的氧原子可參與生成約1.22 mol的R1或0.85 mol的R3;蔗糖濃度為10 g/L［12］時，可提供氧原子約為0.32 mol/L，參與組成R1約為18 g/L或組成R3約為16 g/L，產(chǎn)量較高。

(3)若鼠李糖脂中的氧原子全部由原油中的氧原子提供，則每升原油中的氧原子數(shù)(表1)可參與組成較多的鼠李糖脂表面活性劑。

4.2 生物聚合物產(chǎn)量

生物聚合物多為碳水化合物，含有較多的氧原子。以黃原膠為例，黃原膠的平均相對分子質(zhì)量一般在2.0×106～5.0×107道爾頓之間，假設(shè)黃原膠單體中的金屬原子M為鈉原子，則黃原膠單體相對分子質(zhì)量約為979［8］，1 mol黃胞膠分子中的黃原膠單體數(shù)約在2.04×103～5.11×104mol之間。

因此，質(zhì)量為m的聚合物所含的氧原子數(shù)為

式中，n0為聚合物分子物質(zhì)的量(m/M1);n1為單個聚合物分子中的單體數(shù)(M1/N);n2為聚合物單體中氧原子數(shù);m為聚合物質(zhì)量;M1為聚合物分子摩爾質(zhì)量;N為聚合物單體分子摩爾質(zhì)量。

由于黃原膠單體中氧原子數(shù)n2=29，則黃原膠質(zhì)量為m時所含的氧原子數(shù)n=n0n1n2=29n0n1=29m/N，可獲得黃原膠產(chǎn)量。

(1)若黃原膠中的氧原子全部由蔗糖提供，黃原膠質(zhì)量濃度為2000 mg/L時(摩爾濃度在4×10－8－1×10－6mol/L之間)，含有的氧原子摩爾濃度約為0.06 mol/L，所需的蔗糖濃度較低，約為1.83 g/L。

(2)若黃原膠中的氧原子全部由水中的溶解氧提供，水中溶解氧中的氧原子為3.13×10－4～6.25×10－4 mol/L?0.06 mol/L，難以生成較高濃度的黃原膠。

(3)若黃原膠中的氧原子全部由原油中的氧原子提供，則原油中的氧原子數(shù)(表1)可參與組成較多的黃原膠。

4.3 生物氣體量

4.3.1 原油組分形成的氣體量

由氣體成分可知，生成1 mol的甲烷需要4 mol的氫原子;生成1 mol的二氧化碳需要2 mol的氧原子。若僅石油組分中的元素參與氣體的組成，根據(jù)物質(zhì)守恒定律，可計算出每升石油中各組分參與形成的氣體量(表2)。

可見，石油組分中的化學(xué)元素參與形成的CH4、H2量較多;H2S、N2、CO2量較少。而 CO2氣體對驅(qū)油的影響是目前微生物采油機制中考慮的重要因素［1，9］。

表2 原油組分形成氣體量的極限值Table 2 Ultimate amount of gas formed bycrude oil element

4.3.2 CO2氣體的生成量

根據(jù)氧原子數(shù)量守恒分析油層中可生成的CO2量極限值。

(1)若水中的溶解氧全部參與組成CO2，則水中溶解氧為8.60 mg/L時［24］，可參與組成2.69×10－4mol/L的CO2，因此，水中溶解氧中的氧原子參與組成的CO2量很少。

(2)若石油中的氧原子經(jīng)微生物代謝作用全部參與組成CO2，可生成較多的CO2氣體量，見表2。

(3)若營養(yǎng)液中蔗糖的氧原子全部參與組成CO2，則營養(yǎng)液中甜菜糖蜜(營養(yǎng)液密度為1 g/cm3)的質(zhì)量濃度為2% ～10% 時［12］，可全部合成CO2約0.15～1.12 mol/L，若生成的CO2除了全部溶解在原油中外沒有其他損耗，可起到降低原油黏度的作用［25］。

根據(jù)氧原子數(shù)量守恒原則，得到油層中CO2生成量的極限值:

式中，NCO2為油層中CO2的總生成量;NOO為原油中氧原子參與生成的量;NOW為水中溶解氧參與生成的量;NOC為營養(yǎng)液中糖類物質(zhì)參與生成的量;NOH為水分子中氧原子參與生成的量;NOT為其他物質(zhì)中氧原子參與生成的量。

同理，油層中生成其他氣體量的極限值Nx=石油中對應(yīng)氣體元素參與生成的量+營養(yǎng)液中對應(yīng)氣體元素參與生成的量+其他物質(zhì)中對應(yīng)氣體元素參與生成的量。

此外，除了個別石油中的氧元素含量較高外，石油中的氧元素含量一般多在千分之幾范圍內(nèi)波動，它主要集中在石油的高沸點餾分中，尤其在石油的膠質(zhì)和瀝青質(zhì)中富集了約90% ～95%的氧元素［27］，而微生物利用膠質(zhì)瀝青質(zhì)較難，因此石油組分中的氧原子參與組成的代謝產(chǎn)物很少。

5 結(jié)論

(1)儲層中營養(yǎng)物質(zhì)的及時供給與代謝產(chǎn)物濃度的合理控制是確保油層法微生物采油效果發(fā)揮的關(guān)鍵因素;若確定出油藏采取微生物驅(qū)油時所需的代謝產(chǎn)物濃度creq，則可根據(jù)驅(qū)油物質(zhì)產(chǎn)量控制方程推算出微生物代謝產(chǎn)物在儲層中的分布體積，并根據(jù)微生物生長代謝規(guī)律確定出微生物驅(qū)油所需的營養(yǎng)物質(zhì)質(zhì)量和合理的驅(qū)替周期。

(2)營養(yǎng)物質(zhì)在水相中有限的溶解度及在儲層中運移時的較大消耗率，造成營養(yǎng)物質(zhì)進入儲層深部區(qū)域的難度增大，降低了微生物采油提高原油采收率的效果。

(3)以原油為唯一的碳源的微生物采油方法，難以生成足夠量的生物表面活性劑、生物聚合物、CO2氣體等;通過及時向儲層中注入可被微生物利用的營養(yǎng)元素，可在一定程度上提高含該類元素的代謝產(chǎn)物產(chǎn)量。

［1］ 張廷山，徐山.石油微生物采油技術(shù)［M］.北京:化學(xué)工業(yè)出版社，2009:72-74.

［2］ 向廷生，馮慶賢，NAZINA N T，等.本源微生物驅(qū)油機制研究及現(xiàn)場應(yīng)用［J］.石油學(xué)報，2004，25(6):63-67.

XIANG Ting-sheng，F(xiàn)ENG Qing-xian，NAZINA N T，et al.Mechanism of indigenous microbial enhancement of oil recovery and pilot test［J］.Acta Petrolei Sinica，2004，25(6):63-67.

［3］ WILFRED F M，HEAD I M，LARTER S R.The microbiology of hydrocarbon degradation in subsurface petroleum reservoirs:perspectives and prospects［J］.Research in Microbiology，2003，154(5):321-328.

［4］ AITKEN C M，JONES D M，LARTER S R.Anaerobic hydrocarbon biodegradation in deep subsurface oil reservoirs［J］.Nature，2004，431(7006):291-294.

［5］ JONES D M，HEAD I M，GRAY N D，et al.Crude-oil biodegradation via methanogenesis in subsurface petroleum reservoirs［J］.Nature，2008，451(7175):176-180.

［6］ NAZINA T N，SHESTAKOVA N M，GRIGOR’YAN A A，et al.Phylogeneticdiversity and activity of anaerobic microorganisms of high-temperature horizons of the Dagang Oilfield(P.R.China)［J］.Microbiology，2006，75(1):70-81.

［7］ 張?zhí)靹?生物表面活性劑及其應(yīng)用［M］.北京:化學(xué)工業(yè)出版社，2005:8-10.

［8］ 劉一江，劉積松，黃忠橋，等.聚合物和二氧化碳驅(qū)油技術(shù)［M］.北京:中國石化出版社，2001:1-5.

［9］ AL-SULAIMANI H，JOSHI S，AL-WAHAIBI Y，et al.Microbial biotechnology for enhancing oil recovery:current developments and future prospects［J］.Biotechnol.Bioinf.Bioeng，2011，1(2):147-158.

［10］ 彭裕生.微生物采油基礎(chǔ)及進展［M］.北京:石油工業(yè)出版社，2005.

［11］ 周亞松.石油加工與油料學(xué)［M］.北京:石油工業(yè)出版社，2008:5-8.

［12］ 張正卿.國外微生物提高采收率技術(shù)論文選［M］.北京:石油工業(yè)出版社，1996:3-5.

［13］ 百度百科.糖蜜［EB/OL］.［2013-03-11］.http://baike.baidu.com/view/820453.html.

［14］ ABOWEI J F N.Salinity，dissolved oxygen，pH and surface water temperature conditions in Nkoro River，Niger Delta，Nigeria［J］.Advance Journal of Food Science and Technology，2010，21(1):36-40.

［15］ United States Environment Protection Agency.What is dissolved oxygen and why is it important?［EB/OL］.［2013-03-11］.http://water.epa.gov/type/rsl/monitoring/vms52.cfm.

［16］ BRYANT S L，LOCKHART T P.Reservoir engineering analysis of microbial enhanced oil recovery［R］.SPE 79719，2002.

［17］ LANG S，WULLBRANDT D.Rhamnose lipids-biosynthesis，microbial production and application potential［J］.Appl Microbiol Biotechnol，1999，51(1):22-32.

［18］ ZHANG Y，MILLER R M.Enhanced octadecane dispersion and biodegradation by a pseudomonas rhamnolipid surfactant(biosurfactant)［J］.Appl Environ Microbiol，1992，58(10):3276-3282.

［19］ WEI Y H，CHOU C L，CHANG J S.Rhamnolipid production by indigenous pseudomonas aeruginosa J4 originating from petrochemical wastewater［J］.Biochem Eng J，2005，27(2):146-154.

［20］ BAI G Y，BRUSSEAU M L，MILLER R M.Biosurfactant-enhanced removal of hydrocarbon from soil［J］.J Contam Hydrol，1997，25(1):157-170.

［21］ MATA-SANDOVAL J C，KARNS J，TORRENTS A.High-performance liquid chromatography method for the characterization of rhamnolipid mixtures produced by pseudomonas aeruginosa UG2 on corn oil［J］.J Chromatogr A，1999，864(2):211-220.

［22］ ARANDA F J，ESPUNY M J，MARQUES A，et al.Thermodynamics of the interaction of a dirhamnolipid biosurfactant secreted by pseudomonas aeruginosa with phospholipid membranes［J］.Langmuir，2007，23(5):2700-2705.

［23］ ZHANG Y M，MILLER R.M.Effect of rhamnolipid(Biosurfactant)structure on solubilization and biodegradation of n-Alkanes［J］. Appl Environ Microbiol，1995，61(6):2247-2251.

［24］ WIDDEL F，RABUS R.Anaerobic biodegradation of saturated and aromatic hydrocarbons［J］.Current Opinion in Biotechnology，2001，12(3):259-276.

［25］ 薛海濤，盧雙舫，付曉泰.甲烷、二氧化碳和氮氣在油相中溶解度的預(yù)測模型［J］.石油與天然氣地質(zhì)，2005，26(4):444-449.

XUE Hai-tao，LU Shuang-fang，F(xiàn)U Xiao-tai.Forecasting model of solubility of CH4，CO2and N2in crude oil［J］.Oil＆ Gas Geology，2005，26(4):444-449.

［26］ 岳湘安，王尤富，王克亮.提高石油采收率基礎(chǔ)［M］.北京:石油工業(yè)出版社，2007:171.

［27］ 梁文杰.石油化學(xué)［M］.東營:石油大學(xué)出版社，1996.