蘇海波,滕先珍,趙 麗,戴育云

(1.湖南永輝醫(yī)藥有限公司，湖南 長沙410116；2.山東華信制藥集團股份有限公司，山東 菏澤 274009；3.湖州奧泰膜科技有限公司，浙江 湖州 313000)

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復方大青葉注射液膜過濾技術(shù)工藝研究

蘇海波1,滕先珍1,趙 麗2,戴育云3

(1.湖南永輝醫(yī)藥有限公司，湖南 長沙410116；2.山東華信制藥集團股份有限公司，山東 菏澤 274009；3.湖州奧泰膜科技有限公司，浙江 湖州 313000)

目的：優(yōu)選復方大青葉注射液的制備工藝。方法：通過運用水提取，用無機陶瓷膜常溫過濾，最后納濾的工藝技術(shù)。結(jié)果：采用水提取藥液，離心，10萬分子量陶瓷膜粗濾，再用1萬分子量精濾，最后用納濾膜常溫濃縮到工藝需要的配制量，調(diào)pH值，精濾，灌封，滅菌既得。結(jié)論：新工藝充分考慮經(jīng)濟性、可操作性，達到了提高含量及澄明度的目的，保證注射液的穩(wěn)定性，適用于復方大青葉注射液的現(xiàn)代化生產(chǎn)。

復方大青葉注射液；工藝研究；陶瓷膜過濾；納濾技術(shù)

隨著國家對中藥注射液監(jiān)管力度的加大，傳統(tǒng)的工藝技術(shù)，已很難適合現(xiàn)代標準要求[1]。為了保證中藥注射液質(zhì)量可控及安全有效，保障人民身體健康的要求，必須對中藥注射液工藝過程進行改進[2]，使其既能符合中醫(yī)藥理論的特點，又符合現(xiàn)代標準要求。為此，我們與膜過濾廠家聯(lián)合，首先對復方大青葉注射液工藝進行膜過濾試驗，探索新的工藝路線，期望能減少醇沉、水沉工序，降低成本，且最大限度提高含量，保證熱原、樹脂、鞣質(zhì)等符合要求。

1 制作原工藝

處方：大青葉 1 000g，金銀花 500g，羌活 250g，拳參 250g，大黃 250g。制法：以上五味，加水煎煮3次，1h/次，合并煎液，濾過，濾液濃縮至相對密度約為1.20(80℃)，加乙醇使含乙醇量達60%，靜置使沉淀，濾過，濾液濃縮至相對密度約為1.20(80℃)，加適量水使稀釋，冷藏使沉淀，濾過，濾液濃縮至相對密度約為1.20(80℃)，加乙醇使含醇量達85%，冷藏使沉淀，濾過，濾液回收盡乙醇，加適量注射用水，冷藏使沉淀，濾過，濾液用10%氫氧化鈉溶液調(diào)pH值至7.9～8.2，加入無水亞硫酸鈉使?jié)舛冗_2%，煮沸1h，放冷，加活性炭5g，攪勻，靜置，冷藏，濾過，濾液中加入苯甲醇20mL，攪勻，濾過至澄明，加注射用水至1 000mL，灌封，在100℃滅菌30min，即得。

2 原工藝存在的主要問題

①原工藝中需要消耗大量的乙醇，成本增加，而且對環(huán)境造成一定污染；②提取周期長，工時過長造成產(chǎn)品污染概率增加，影響產(chǎn)品質(zhì)量；③大量的有效成分在提取過程中流失，相對成本增加，加大了產(chǎn)品的銷售難度。根據(jù)原處方的分析，我們一直在尋找新的工藝技術(shù)，使產(chǎn)品質(zhì)量提高，成本降低，減少污染。無機陶瓷膜過濾技術(shù)是將中藥煎煮液，直接通過陶瓷膜、超濾膜、納濾膜濃縮等工藝[3]，減少加熱破壞及省去傳統(tǒng)工藝中的兩次酒沉、兩次水沉工藝。提高產(chǎn)品含量，減少有效成分損失，而且能解決一直困擾中藥注射液中的鞣質(zhì)、樹脂難除去和顏色較深的問題，徹底解決中藥的粗、大、黑現(xiàn)象，并且符合中醫(yī)藥理論[4]。膜過濾工藝不使用乙醇等有機溶劑，無污染，還具有安全、高效等特點[5]，且縮短提取周期。我們聯(lián)合膜過濾廠家，做了一系列的工藝試驗，最終找到適合復方大青葉注射液工藝特點的膜過濾技術(shù)，進行如下試驗。

3 藥液提取

①煎煮藥液，以大青葉計50kg；②處方：按原處方；③加水煎煮3次，1h/次，加水量分別為400、300、300kg，藥液量約為1000kg；④將煎煮液過濾，減壓濃縮至500kg，高速離心；⑤將煎煮藥液分批進行膜過濾試驗，考察不同規(guī)格膜過濾的通量，以及含量提高和雜質(zhì)、熱原除去情況，以探索最佳工藝過程。

4 試驗

4.1 第一批次試驗

我們做第一批膜過濾試驗，具體情況如下：取大青葉備用液原液300kg，溫度50℃，原液pH5.83，選用20萬、15萬分子量，及10萬、5萬分子量膜，分成兩組分別做試驗。

4.1.1 第一組試驗 20萬、15萬分子量膜過濾液結(jié)果，見表1。

4.1.2 第二組試驗 10萬、5萬分子量膜過濾液結(jié)果，見表2。

表1 20萬、15萬分子量膜過濾液結(jié)果

注：+為合格，-為不合格。

表2 10萬、5萬分子量膜過濾液結(jié)果

從以上試驗來看，用陶瓷膜過濾后再超濾，可以除去樹脂、鞣質(zhì)等。膜濃縮藥液，其透析液含量很少，說明用納濾膜可以起到濃縮藥液、而含量幾乎不損失的作用，濃縮效果較好，可以采用。其含量轉(zhuǎn)移率低，有以下幾種原因：①甙糖在熱水中溶解好，試驗做到最后，藥液放冷庫，溫度已很低，甙糖被膜部分截留；②大黃素轉(zhuǎn)移率低，與其難溶于水有關(guān)，可加大透析水用量；③根據(jù)大黃素性質(zhì)，藥液pH偏低。

4.2 第二批試驗

根據(jù)以上分析，重新制定第二批試驗方案如下：將藥液溫度加熱到60℃，pH值調(diào)到8.0，再用陶瓷膜過濾。加大透析用水量，每次都加到藥液一倍量或更多，使有效成分充分被透析，且透析水溫度也要加熱到與藥液相同溫度。根據(jù)第一批試驗結(jié)果及數(shù)據(jù)分析和制定的試驗方案，做第二批試驗。根據(jù)試驗一結(jié)果，本次試驗選15萬、10萬陶瓷膜，一萬超濾膜及納濾膜做試驗。

4.2.1 第一組試驗 陶瓷膜過濾試驗，結(jié)果見表3。

4.2.2 第二組試驗 一萬分子量超濾試驗，結(jié)果見表4。

表3 陶瓷膜過濾試驗結(jié)果

注：樹脂、鞣質(zhì)項：+為合格，-為不合格。

表4 一萬分子量超濾試驗結(jié)果

注：內(nèi)毒素、樹脂、鞣質(zhì)項：+為合格，-為不合格。

本批試驗最終結(jié)果內(nèi)毒素、雜質(zhì)等都合格，含量也合格。納濾液為處方量的2倍，可以降低成本。各階段轉(zhuǎn)移率較第一批高，含量有所提高，且內(nèi)毒素、雜質(zhì)都合格，所以選用膜材料，應(yīng)選第二批膜材料為好。在此基礎(chǔ)上，再優(yōu)化工藝條件，可以達到高質(zhì)量、低成本的要求。從原液到濃縮液，其含量總轉(zhuǎn)移率結(jié)果見表5。

表5 溶液含量總轉(zhuǎn)移率

取1 000mL備用液，測pH5.62，用NaOH溶液調(diào)pH7.85。加Na2SO3為2g搖勻，再加苯甲醇20mL，搖勻，測pH8.15。用0.65μm濾膜過濾3遍，灌封在1mL安瓿中，100℃30min消毒滅菌。送化驗室全檢，結(jié)果如下：①樹脂、鞣質(zhì)、蛋白質(zhì)合格；熱原合格、異常毒性合格；②含量測定：甙糖為26mg/支(應(yīng)≥24mg/支)，大黃素為0.036mg/支(應(yīng)≥0.03mg/支)；③pH值為7.95。

4.3 擬實驗方案

根據(jù)以上試驗數(shù)據(jù)分析，擬下次試驗方案如下：①將煎煮藥液濃縮到大青葉的2倍量，高速離心，再做膜濾過試驗；②膜的選用，初步為15萬、10萬陶瓷膜濾過，超濾用一萬分子量膜，納濾用300nm膜濃縮。根據(jù)以上分析結(jié)果，按照擬定的試驗方案，重新開始做一批50kg藥材的膜過濾試驗，具體如下：①藥液提?。篴.煎煮藥液，以大青葉計50kg；b.處方：按原處方進行生產(chǎn)；c.加水煎煮3次，1h/次，加水量分別為400、300、300kg，則藥液量約為1 000kg；d.將煎煮液過濾，減壓濃縮到100kg，高速離心；②膜過濾試驗數(shù)據(jù)：陶瓷膜選用10萬分子量，超濾膜選用1萬分子量，納濾膜選用300nm孔徑，全程過濾，將納濾液灌封，送化驗室檢測，結(jié)果見表6。由表6可知，各項指標均符合注射液標準要求；其配制量為原工藝的2倍，大大降低了成本；其工藝不用乙醇提取，無污染；無加熱過程，有效成分損失小，為清潔生產(chǎn);③將所得樣品在溫度40℃、相對濕度65%的條件下做加速試驗，結(jié)果見表7。經(jīng)過6個月的加速試驗，證明該工藝各項指標均符合國家標準，質(zhì)量穩(wěn)定、可靠。根據(jù)加速試驗結(jié)果，我們制定新的工藝，具體如下：處方：大青葉1 000g，金銀花500g，羌活250g，拳參250g，大黃250g，配制成1 000mL；制法：取處方量的五味藥材，加入水煎煮3次，加水量分別為8、6、6倍，1h/次，合并煎煮液，濾過，濾液濃縮到大青葉藥材的2倍量。將藥液高速離心，用10萬分子量的陶瓷膜過濾，濾液加熱到80℃，調(diào)pH值至8.0，冷至室溫，再用1萬分子量的陶瓷超濾膜過濾，超濾液用300nm的納濾膜過濾濃縮到大青葉的2倍量，檢測含量、樹脂、鞣質(zhì)、蛋白質(zhì)等雜質(zhì)合格，再檢測異常毒性、內(nèi)毒素合格后，灌封。成品配制過程：取備用液過濾，用40%NaOH調(diào)pH值至7.9～8.2，加入配制量的0.2%無水亞硫酸鈉，攪勻，加熱煮沸40min后，加活性炭5g再煮沸20min后，趁熱過濾，濾液加入藥用苯甲醇20mL，攪勻，濾至澄清，加注射用水到處方量，攪勻，灌封，沖N2，100℃、30min，滅菌消毒，即得。

表6 膜過濾試驗數(shù)據(jù)結(jié)果

表7 加速試驗結(jié)果

4.4 穩(wěn)定性試驗

根據(jù)加速試驗結(jié)果，和制定的新工藝，我們又進行3批大生產(chǎn)，對這3批復方大青葉注射液進行了穩(wěn)定性試驗觀察，試驗結(jié)果見表8。

表8 穩(wěn)定性試驗結(jié)果

5 結(jié)論

通過我們的探索和工藝研究發(fā)現(xiàn)，在傳統(tǒng)工藝基礎(chǔ)上，運用現(xiàn)代膜過濾技術(shù)進行復方大青葉工藝的改進是可行的，而且該方法幾乎是在常溫條件下實現(xiàn)，極大地保留了有效成分，除去不必要的雜質(zhì)，達到安全、有效、質(zhì)量可控，符合現(xiàn)代的質(zhì)量標準要求，并且穩(wěn)定性都高于傳統(tǒng)工藝的生產(chǎn)方法。我們認為該方法值得推廣應(yīng)用，對我們中藥注射液走出困境不失為一種好方法。

[1] 沈兆軍.復方大青葉注射液生產(chǎn)工藝的研究[J].齊魯藥事，2005，24(8)：485-486.

[2] 韓麗.應(yīng)用逆流提取與膜分離技術(shù)的中藥注射液新工藝研究——丹參粉針工藝研究[J].成都中醫(yī)藥大學，2003，5(7)：15.

[3] 元英進，劉明言，董岸杰.中藥現(xiàn)代化生產(chǎn)關(guān)鍵技術(shù)[M].北京：化學工業(yè)出版社，2002：145.

(責任編輯：姜付平)

2014-03-15

蘇海波(1973-)，男，湖南永輝醫(yī)藥有限公司中藥師，研究方向為中藥提取工藝。

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1673-2197(2014)11-0031-04