王 程 彭仁欣 歐陽石連 鄭 詩 駱 磊

（長沙醫(yī)學(xué)院，湖南 長沙 410219）

水迷宮是由英國學(xué)者在1981年設(shè)計建立的，現(xiàn)已廣泛應(yīng)用于神經(jīng)學(xué)的研究[1]。丁草胺（Butachlor），一般用作水稻田除草。我國農(nóng)藥使用量一直非常高，同時由于農(nóng)藥的殘留性高且不易降解，會對環(huán)境產(chǎn)生較大污染。據(jù)有關(guān)研究顯示，丁草胺會嚴重影響生物的神經(jīng)系統(tǒng)，并導(dǎo)致學(xué)習(xí)記憶能力下降，另外由于農(nóng)藥殘留還會對食物鏈中各個環(huán)節(jié)的生物產(chǎn)生影響，最終影響人類的健康。本研究針對丁草胺對小白鼠記憶能力的影響進行探討，現(xiàn)做如下報告。

1 資料及方法

1.1 一般資料

選取實驗用健康小白鼠 40 只，體重（30.12±1.03）g，雌雄各 20 只，將全部小白鼠進行編號處理，根據(jù)小白鼠編號進行分組，其中高濃度觀察組（A組）10例，中濃度觀察組（B組）10例，低濃度觀察組（C組）10例，空白對照組（D組）10例，四組小白鼠在性別、周齡等方面的一般資料差異不具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。

1.2 方法

全部小白鼠均用數(shù)量進行適應(yīng)性喂養(yǎng)2周，其中A、B、C三組小白鼠分別以灌胃方式染毒，其丁草胺濃度分別為4.0mg/kg、2.0mg/kg、1.0mg/kg，連續(xù)染毒21日后用水迷宮系統(tǒng)進行實驗，以驗證丁草胺對小白鼠記憶能力的影響，空白對照組以蒸餾水作為對照藥劑。

水迷宮系統(tǒng)：該系統(tǒng)采用直徑2米的圓形水池，其內(nèi)含一個直徑1.5米的小水池，在實驗前給池內(nèi)注入適量黑墨水，以避免小白鼠直接看見平臺，將池內(nèi)劃分為4個象限，在第一象限內(nèi)加入一個平臺，在實驗階段不改變平臺的位置，并在水池內(nèi)設(shè)置指引小白鼠方向的標(biāo)記物，實驗中用簾子隔斷水迷宮系統(tǒng)與外界的聯(lián)系，避免因外界影響而導(dǎo)致實驗誤差[2]。實驗工作人員通過固定攝像頭觀察簾內(nèi)試驗情況。

訓(xùn)練方法：在停止染毒之后對小白鼠進行訓(xùn)練，連續(xù)訓(xùn)練5日，每日每只小白鼠訓(xùn)練4次。首次訓(xùn)練前先將小白鼠放入水池中自由游泳3min，使其熟悉實驗環(huán)境。依次從4個象限將小白鼠放入水池中，放入時小白鼠保持面向池壁，若小白鼠于1min內(nèi)找到平臺則記錄其時間；若小白鼠沒能在1min內(nèi)找到平臺，則由實驗人員將小白鼠陰道至平臺停留5s。

2 結(jié)果

2.1 不同入水次數(shù)對平均逃避潛伏期的影響

實驗中A組、B組、C組小白鼠在入水次數(shù)相同時其平均逃避潛伏期均比D組時間長，除C組第一次入水與D組平均逃避潛伏期無明顯差異外，其他差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。詳見表1。

2.2 不同象限對平均逃避潛伏期的影響

于同一象限入水時，A組、B組、C組的平均逃避潛伏期均比D組長，其數(shù)據(jù)差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。詳見表2。

表1 不同入水次數(shù)的平均逃避潛伏期（x±s）（s）

表2 不同象限的平均逃避潛伏期

3 討論

丁草胺作為常用的農(nóng)田除草劑，在農(nóng)田以及土壤中都會有一定的殘留，并且丁草胺具有降解難的特點[3]。

本研究結(jié)果表明高、中、低不同劑量的除草劑丁草胺均會使小鼠的記憶能力下降而導(dǎo)致平均逃避潛伏期和平均游泳距離變長，隨著除草劑丁草胺濃度的增加影響更為顯著 （建立在與對照組相比的基礎(chǔ)上），這說明一定濃度下的丁草胺對小鼠產(chǎn)生較大的毒害影響，與上述相關(guān)研究結(jié)論一致。評估丁草胺對小鼠記憶功能的影響時，第1次入水和遠離目標(biāo)象限的象限入水所測定的數(shù)據(jù)更具可信性，因為第1次入水反映更多的是小鼠的短時記憶或長時記憶。而遠離目標(biāo)象限的象限入水所得的數(shù)據(jù)，也能降低了小鼠找到逃避平臺的隨機偶然性對實驗結(jié)果的影響。

［1］方松,余化霖.Morris水迷宮實驗中海馬相關(guān)空間學(xué)習(xí)記憶的研究進展[J].國際病理科學(xué)與臨床雜志,2010,04(11)：321-326.

［2］李愛萍,趙慧,李韶,樸花,孫長凱.不同鼠種在Morris水迷宮學(xué)習(xí)記憶行為中的種屬差異[J].中國行為醫(yī)學(xué)科學(xué),2009,01(03)：35-37.

［3］劉忠珍.丁草胺與土壤及土壤組分作用機理的研究[D].杭州：浙江大學(xué),2009.