何寶佳，魏 蔚

（皖南醫(yī)學(xué)院，安徽 蕪湖 241000）

不同產(chǎn)地、不同生長期紅景天中總多糖的含量分析

何寶佳，魏 蔚

（皖南醫(yī)學(xué)院，安徽 蕪湖 241000）

目的：測(cè)定不同產(chǎn)地、不同采收期紅景天總多糖含量變化，以確定其最佳采收期.方法：采用蒽酮-硫酸比色法，以葡萄糖作為對(duì)照品，在620nm波長下測(cè)定吸光度，對(duì)不同產(chǎn)地、不同采收期紅景天多糖含量進(jìn)行測(cè)定.結(jié)論：不同產(chǎn)地紅景天的總多糖含量不同，西藏大花紅景天的含量最高，然后依次是青海大花紅景天，西藏圣地紅景天，四川大花紅景天，臨江高山紅景天.臨江不同采收期的高山紅景天的總多糖含量有差異，建議采收高山紅景天的適宜時(shí)間為7-9月，尤以9月左右為宜.從回收率和精密度可看出,蒽酮－硫酸比色法是一種常用的測(cè)定方法，該方法簡便、可靠、易行.

紅景天；總多糖；含量分析

紅景天系薔薇目景天科（Crassulaceae）紅景天屬（Rhodiola），多年生草本或亞灌木植物的干燥根及根莖[1]，紅景天屬植物,素有“高原人參”和“雪山仙草”之稱.長期以來,民間用其根莖熬水、泡酒可消除疲勞,抵御嚴(yán)寒，公元1200年的著名藏醫(yī)經(jīng)典《四部醫(yī)典》中就記載紅景天“性涼、清熱、滋補(bǔ)元?dú)狻?稱紅景天治病具有神效；《晶珠本草》、《藏藥圖鑒》中記載紅景天能治療咳血和婦女白帶等病癥；《本草綱目》草部第20卷中注明紅景天為“草本上品”,主要功效是扶正固本、補(bǔ)氣養(yǎng)血、清熱潤肺[2].在國外前蘇聯(lián)將紅景天作為“適應(yīng)原”樣藥物，用于宇航員、飛行員、潛水員、運(yùn)動(dòng)員等消除疲勞，增強(qiáng)體力.在此啟迪下，近年來國內(nèi)將紅景天作為強(qiáng)身健體的藥物逐步進(jìn)行深入研究和開發(fā)，已有了多種制劑、保健品及飲料[3].現(xiàn)代藥理學(xué)研究也證明紅景天屬植物具有抗輻射、預(yù)防高原反應(yīng)、抗缺氧[4]、抗衰老[5]、抗腫瘤[6]、提高記憶力[7]等作用.王秀清等[48]研究了灌喂紅景天提取物后感染柯薩奇B5病毒的小鼠脾臟NK細(xì)胞活性及血清酶學(xué)變化，發(fā)現(xiàn)紅景天對(duì)柯薩奇B5病毒有一定的抵抗作用.樸花等[8]研究表明紅景天多糖對(duì)增強(qiáng)免疫功能有顯著作用，并認(rèn)為紅景天多糖可作為一種免疫調(diào)節(jié)劑進(jìn)行開發(fā).閻奇等[9]也證實(shí)紅景天多糖對(duì)抗病毒有明顯效果.因此，本文研究不同產(chǎn)地、不同采收期紅景天總多糖的含量變化，以確定其最佳采收期，為更好的開發(fā)利用紅景天資源提供理論依據(jù)，并建立其分析方法,為紅景天藥材的鑒定、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的建立以及質(zhì)量控制提供一定的實(shí)驗(yàn)依據(jù).

1 儀器設(shè)備與試劑

1.1 儀器

722 S分光光度計(jì)(Spectrophotometer)(上海精密科學(xué)儀器有限公司),KQ-250DB型超聲波清洗器(昆山市超聲儀器有限公司),電子計(jì)數(shù)天平(500g/0.001g)(金羊天平儀器廠),百靈LAI14型電子天平(110g/0.0001g)(常熟市百靈天平儀器有限公司) 101-2A型數(shù)顯電熱鼓風(fēng)干燥箱(上海錦屏儀器儀表有限公司通州分公司)

1.2 試劑

蒽酮、葡萄糖、濃硫酸、鹽酸、無水乙醇等，均為分析純.

2 實(shí)驗(yàn)方法

2.1 樣品來源

西藏大花紅景天、青海大花紅景天、西藏圣地紅景天、四川大花紅景天、臨江高山紅景天，臨江不同采收期高山紅景天分別為：8月25日、8月30日、9月5日、9月15日、9月25日、9月30日；以上均由吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)胡全德教授鑒定為景天科（Crassulaceae）紅景天屬（Rhodiola）植物紅景天(Rhodiola crenulata).

2.2 紅景天多糖類物質(zhì)的提取

2.2.1 可溶性多糖的提取

精密稱取紅景天粉末(恒重)0.500g,每個(gè)樣品都稱取三份（三次平行）,分別置于100ml具塞三角瓶中，加80%EtoH 45ml，浸泡30min，超聲提取30min，靜置過濾，重復(fù)提取1次，過濾(保存濾渣)，兩次濾液置100ml容量瓶中，以80%EtoH定容至刻度，備用.

2.2.2 粗多糖的提取

將上步中提取后的濾渣蒸干，加2%的鹽酸45m l，置沸水浴中提取lh,充分放冷，于100ml容量瓶中濾過，重復(fù)提取1次，過濾，洗滌濾紙，以2% HC1定容至刻度,備用.

2.3 顯色劑（蒽酮-濃硫酸）的制備

取98%的濃硫酸76m1，稀釋成l00ml溶液；精密稱取蒽酮0.1000g，放入100ml容量瓶中，逐漸加入上述配制的硫酸溶液至刻度并搖勻，冷卻至室溫，備用(需臨用前現(xiàn)配).

2.4 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備

2.4.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線試液的制備

葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)液:將葡萄糖于60℃烘1h，再逐漸升溫至105℃干燥至恒重.精密稱取10.55mg,置100ml容量瓶中,用蒸餾水溶解并稀釋至刻度，取16支試管，除空白試液外,其余5組都做三次平行實(shí)驗(yàn),按表2加試劑，于620nm處測(cè)定吸光度，記錄數(shù)據(jù),見表1，得回歸方程：Y=7.8038X+0.0015，R2= 0.9991.

表1 標(biāo)準(zhǔn)曲線試液的制備(單位:ml)

2.4.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

圖1 標(biāo)準(zhǔn)曲線圖

2.4.3 樣品溶液的制備與測(cè)定

2.4.3.1 可溶性多糖的測(cè)定 各取可溶性多糖提取液5.0ml,分別置于25m1容量瓶中，用80%的乙醇定容至刻度，混勻.分別取1.0ml可溶性多糖提取液加入具塞試管中,再加入蒽酮-濃硫酸試劑5.0ml，混勻.同時(shí)另取一支具塞試管加80%EtoH，再加入蒽酮-濃硫酸試劑5.0m l,作為空白實(shí)驗(yàn).置沸水浴中加熱10min，冷卻至室溫.于620nm處測(cè)定吸光度.

2.4.3.2 粗多糖的測(cè)定 各取粗多糖提取液2.0ml，分別置于25m1容量瓶中，用2%的鹽酸定容至刻度，混勻，分別取1.0ml粗多糖提取液加入具塞試管中,再加入蒽酮-濃硫酸試劑5.0m1,混勻，同時(shí)另取一支具塞試管加入2%的鹽酸1.0m1，再加入蒽酮-濃硫酸試劑5.0ml,混勻,作空白實(shí)驗(yàn).置沸水浴中加熱10min，冷卻至室溫，于620nm處測(cè)定吸光度.

3 結(jié)果

表2 紅景天樣品中不同產(chǎn)地總多糖含量(%)測(cè)定結(jié)果

不同產(chǎn)地不同采收期紅景天可溶性多糖及粗多糖含量比較

不同產(chǎn)地不同采收期紅景天總多糖含量比較

4 討論

4.1 不同產(chǎn)地紅景天的總多糖含量不同，其中西藏大花紅景天的含量最高，然后依次是青海大花紅景天，西藏圣地紅景天，四川大花紅景天，臨江高山紅景天.臨江不同采收期的高山紅景天的總多糖含量有差異，建議采收高山紅景天的適宜時(shí)間為7-9月，尤以9月左右為宜.實(shí)驗(yàn)中9月15日所測(cè)總多糖含量存在較大誤差，粗多糖測(cè)定結(jié)果偏差很大，可重復(fù)平行實(shí)驗(yàn)以校正之.紅景天多糖含量較高，而對(duì)多糖的藥用價(jià)值研究尚淺，值得以后進(jìn)一步研究.

4.2 由于紅景天中其主要有效成分為黃酮類、苷類和多糖，所以不能只通過多糖的含量來評(píng)價(jià)藥材質(zhì)量，應(yīng)以多指標(biāo)綜合評(píng)價(jià)藥材的質(zhì)量.綜合其他實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，從藥用價(jià)值來看，西藏大花紅景天的藥用價(jià)值要優(yōu)于其他產(chǎn)地紅景天，而臨江地區(qū)紅景天的藥用價(jià)值還需要進(jìn)一步深度研究.

4.3 從回收率和精密度可看出,采用蒽酮－硫酸比色法，此方法是一種常用的方法，其原理是利用糖類遇濃硫酸脫水后生成糖醛或其衍生物，可與蒽酮試劑縮合，反應(yīng)后溶液呈藍(lán)綠色，于620nm處有最大吸收，顯色深度與多糖的含量呈線性關(guān)系；該方法簡便，可靠、易行.

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1673-260X（2014）02-0039-03