張宗美，柴勇，孟霞.辣椒新品種‘艷椒425’中辣椒素及二氫辣椒素含量測(cè)定[J].南方農(nóng)業(yè)，2014，8(1):54－55

摘 要 以辣椒新品種‘艷椒425’為材料，采用高效液相色譜法測(cè)定其辣椒素和二氫辣椒素含量，結(jié)果表明該品種辣椒素含量平均值為2433.9 mg/kg，二氫辣椒素含量平均值為1145.4 mg/kg，均高于對(duì)照‘朝天148’，為辛辣味較重的加工型辣椒，適宜在重慶及西南地區(qū)推廣種植。

關(guān)鍵詞 辣椒；艷椒425；高效液相色譜法；辣椒素；二氫辣椒素

中圖分類號(hào)：S641.3；TS207.3 文獻(xiàn)標(biāo)志碼: A 文章編號(hào): 1673-890X(2014)01-054-02

辣椒又稱辣子，屬茄科辣椒屬植物，具有抗癌、消炎鎮(zhèn)痛、調(diào)節(jié)體溫等作用，是人們餐桌上不可缺少的調(diào)味品和菜肴[1－2]。評(píng)價(jià)辣椒品質(zhì)，除評(píng)價(jià)辣椒果實(shí)中的營(yíng)養(yǎng)成分，果實(shí)色澤以及外形以外，更重要的是辛辣程度，因而辣椒素的測(cè)定已經(jīng)成為辣椒品質(zhì)鑒定、品種選育的主要指標(biāo)之一。辣椒中的主要呈辣物質(zhì)是辣椒堿，它包括5種物質(zhì)，即辣椒素、二氫辣椒素、降二氫辣椒素、高辣椒素和高二氫辣椒素，其中辣椒素和二氫辣椒素占辣椒堿總量的90%，二者的含量越高表明辣味越強(qiáng)[3]。本文采用高效液相色譜法對(duì)辣椒新品種‘艷椒425’中辣椒素和二氫辣椒素的含量進(jìn)行測(cè)定分析[4－5]，為選育加工型辣椒新品種提供科學(xué)依據(jù)。

1材料與方法

1.1儀器和試劑

1.1.1 儀器

（1）高效液相色譜儀，沃特斯公司生產(chǎn)，帶熒光檢測(cè)器；（2）天平，感量為0.0001 g；（3）超聲波提取器，WH－600型，40 kHz，濟(jì)寧萬和超聲電子設(shè)備有限公司生產(chǎn)；（4）高速粉碎機(jī)，Pulverisette14，德國(guó)FRTSCH分析儀器公司生產(chǎn)；（5）電子恒溫不銹鋼水浴鍋，HHS－4S型，上?？德穬x器設(shè)備有限公司生產(chǎn)；（6）0.45 μm有機(jī)溶劑過濾膜。

1.1.2 試劑

（1）甲醇，HPLC級(jí)；（2）四氫呋喃，分析純；（3）水，HPLC級(jí)；（4）甲醇－四氫呋喃溶液(1＋1)，取200 mL甲醇和200 mL四氫呋喃混合均勻備用；（5）無水硫酸鈉，分析純，用前400℃烘干30 min，磨碎；（6）辣椒素標(biāo)準(zhǔn)品，購(gòu)于中國(guó)食品藥品檢定研究院，純度大于95%；（7）二氫辣椒素標(biāo)準(zhǔn)品，購(gòu)于中國(guó)食品藥品檢定研究院，純度大于90%；（8）測(cè)試樣品為干制樣品‘艷椒425’，對(duì)照樣品為干制樣品辣椒‘朝天148’，由重慶市農(nóng)業(yè)科學(xué)院蔬菜花卉研究所辣椒室提供。

1.2方法

1.2.1 標(biāo)準(zhǔn)溶液制備

稱取25 mg辣椒素(純度95%)和25 mg二氫辣椒素(純度90%)，放入經(jīng)甲醇洗滌過的燒杯中，加入少量甲醇溶解，然后將溶液轉(zhuǎn)入25 mL容量瓶中，用甲醇定容，作為標(biāo)準(zhǔn)貯備液。再分別量取辣椒素、二氫辣椒素標(biāo)準(zhǔn)貯備液各l mL置入10 mL容量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻作為標(biāo)準(zhǔn)溶液。

1.2.2 樣品溶液提取

將干制樣品用電動(dòng)磨碎機(jī)磨碎，稱取0.2000 g于100 mL錐形三角瓶中，加入25 mL甲醇－四氫呋喃(1＋1)溶液，在60℃水浴條件下，用超聲波提取器提取30 min，過濾后收集濾液。將濾渣連同濾紙重新用25 mL甲醇－四氫呋喃溶液經(jīng)超聲波提取器再提取10 min后，再重復(fù)1次。把3次過濾收集的濾液合并，用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀在70℃下濃縮，甲醇定容至25 mL，在75℃恒溫水浴下濃縮至30 mL左右，轉(zhuǎn)移至50 mL容量瓶，用甲醇－四氫呋喃溶液定容。經(jīng)0.45 μm有機(jī)相濾膜過濾后進(jìn)行色譜分析，記錄色譜圖。

1.2.3 色譜條件

（1）色譜柱C18150 mm×4.6 mm，粒徑5 μm；（2）流動(dòng)相甲醇－水(80∶20)，用前過0.45 μm濾膜，脫氣；（3）流速0.6 mL/min；（4）熒光檢測(cè)器激發(fā)波長(zhǎng)229 nm，發(fā)射波長(zhǎng)320 nm；（5）進(jìn)樣量10 μL。

2結(jié)果與分析

2.1回歸方程、線性范圍和檢出限

將辣椒素、二氫辣椒素標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液分別用甲醇稀釋成質(zhì)量濃度為0.2， 1.0， 10.0， 20.0， 40.0， 80.0， 160.0 mg/mL系列標(biāo)準(zhǔn)工作液，按上述色譜條件測(cè)定。以辣椒素、二氫辣椒素質(zhì)量濃度為縱坐標(biāo)，相應(yīng)的峰面積積分值為橫坐標(biāo)，求得線性回歸方程(見表1)。

2.2準(zhǔn)確性試驗(yàn)

2.2.1 精密度

取適量配制好的混合對(duì)照品溶液，用0.45 μm濾膜微過濾后測(cè)定分析，連續(xù)進(jìn)樣6次，辣椒素和二氫辣椒素2種對(duì)照品分析結(jié)果相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差RSD分別為0.46%和0.80%，表明儀器精密度良好，符合測(cè)定要求。

2.2.2 重復(fù)性

取同一供試樣品溶液，平行測(cè)定3次，考察高效液相色譜儀測(cè)定的重復(fù)性，辣椒素和二氫辣椒素的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差分別為0.57%和0.86%，符合實(shí)驗(yàn)要求。

2.2.3 回收率

取辣椒樣品，分別做2.00， 20.0， 80.0， 200.0， 800.0 mg/kg水平的添加實(shí)驗(yàn)，用上述方法測(cè)定辣椒素、二氫辣椒素含量，可見添加回收率為87.60%～100.02%。

2.3樣品含量測(cè)定

按照材料與方法，樣品溶液各10 μL，重復(fù)3次，測(cè)定峰面積，由線性方程計(jì)算辣椒素及二氫辣椒素的含量(見表2)。

從表2可以看出，‘艷椒425’中辣椒素含量平均值為2433.9 mg/kg、二氫辣椒素含量的平均值為1145.4 mg/kg，均高于對(duì)照‘朝天148’ 辣椒素含量平均值1970.0 mg/kg和二氫辣椒素含量平均值和734.9 mg/kg。

3小結(jié)

根據(jù)以上高效液相色譜法測(cè)定分析結(jié)果可知，辣椒新品種‘艷椒425’中的辣椒素和二氫辣椒素含量高，屬于辛辣味較重的加工型辣椒，較適宜在重慶及西南地區(qū)推廣種植。而對(duì)該品種中辣紅素、干物質(zhì)和脂肪等分析的測(cè)定還需進(jìn)一步研究。

參考文獻(xiàn)

[1]紀(jì)敏慧，李國(guó)偉，郭飛燕，等.海南黃燈籠辣椒中辣椒堿的含量測(cè)定[J].中國(guó)調(diào)味品，2011，36(8):98－101.

[2]Hideki N，Motamed E M，Yasutake S，et al.Capsaicin pretreatment attenuates LPS-induced hypothermia through TRPV1-independent mechanisms in chicken [J].Life Sciences，2008，82(23/24):1191－1195.

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[5]NY/T 1381－2007，辣椒素的測(cè)定 高效液相色譜法[S].

（責(zé)任編輯：敬廷桃）