劉 霖， 劉漢清*， 劉 嘉， 王 進(jìn)， 唐海濤， 張 平

（1.南京中醫(yī)藥大學(xué)， 江蘇 南京 210046； 2.江蘇建康職業(yè)學(xué)院，江蘇 南京 210029；3.江蘇蘇中藥業(yè)集團(tuán)股份有限公司， 江蘇 姜堰 225500）

黃葵膠囊中間體稠膏不同干燥方法的對(duì)比研究

劉 霖1， 劉漢清1*， 劉 嘉2， 王 進(jìn)1， 唐海濤3， 張 平3

（1.南京中醫(yī)藥大學(xué)， 江蘇 南京 210046； 2.江蘇建康職業(yè)學(xué)院，江蘇 南京 210029；3.江蘇蘇中藥業(yè)集團(tuán)股份有限公司， 江蘇 姜堰 225500）

目的 優(yōu)選黃葵膠囊中間體稠膏的干燥方法，為其產(chǎn)業(yè)化提高產(chǎn)品質(zhì)量和生產(chǎn)效率提供依據(jù)。方法 以蘆丁、金絲桃苷、異槲皮苷、楊梅素和槲皮素的干燥前后轉(zhuǎn)移率為評(píng)價(jià)指標(biāo)，結(jié)合干燥時(shí)間、物料的外觀性狀，綜合比較真空帶式干燥、刮板干燥及減壓干燥的效果。結(jié)果 真空帶式干燥、刮板干燥和真空減壓干燥中，蘆丁干燥轉(zhuǎn)移率分別為 89.63% ～93.05%、 80.05% ～80.27%、 69.21% ～73.11%， 金絲桃苷干燥轉(zhuǎn)移率為 94.11% ～94.69%、 78.98%～80.23%、 68.41% ～70.02%， 異槲皮苷干燥轉(zhuǎn)移率為 94.53% ～94.70%、 82.22% ～82.55%、 75.24% ～75.51%，楊梅素干燥轉(zhuǎn)移率為 93.48% ～94.19%、 71.45% ～72.21%、 53.16% ～55.69%， 槲皮素干燥轉(zhuǎn)移率為 93.07% ～96.32%、 90.61% ～92.08%、 72.16% ～85.72%。 結(jié)論 無論干燥物的外觀性狀， 還是指標(biāo)成分的轉(zhuǎn)移率， 真空帶式干燥均優(yōu)于刮板干燥和真空減壓干燥。真空帶式干燥是黃葵膠囊中間體稠膏干燥產(chǎn)業(yè)化宜選用的方法。

黃葵膠囊；中間體稠膏；干燥方法

黃葵膠囊具有抗炎［1-2］和抑菌作用， 能抗血小板聚 集，調(diào)節(jié)免疫［3-4］， 抗氧 化 和消除氧自由基［5］， 抗 腎 小 球 免 疫炎癥反應(yīng)， 消除循環(huán)免疫復(fù)合物， 利 尿和降 低尿蛋白［6-8］，保護(hù)腎小球和腎小管功 能［9-11］等作用。 臨床廣泛 應(yīng)用于慢性腎炎治療等， 療效確切［12-13］。 干燥是黃葵膠囊制備過程中的重要工藝。本實(shí)驗(yàn)比較研究真空帶式干燥、刮板干燥及減壓干燥對(duì)其中間體稠膏的干燥效果，為其產(chǎn)業(yè)化提高產(chǎn)品質(zhì)量和生產(chǎn)效率提供依據(jù)。

1 設(shè)備與試藥

1.1 設(shè)備 MTVBD01-04-01 真 空 帶 式 干 燥 機(jī) （ 上 海 朗 脈科技有限公司）； GT-800 刮板干燥機(jī) （常州市武干干燥設(shè)備有限公司）； FZG-15 型真空干燥機(jī) （ 常州宇通干燥設(shè)備有限公司） ； Dionex ultimate 3000 高效液相色譜儀 （ 美國戴安公司）； RE-2000E旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器 （鄭州市亞榮儀器有限公司）； HH-4 型數(shù)顯恒溫水浴鍋 （金壇市富華儀器有限公司）； 電子分析天平 （METTLER TOLEDO， d=0.01 mg）；LC-300B型超聲波清洗器 （ 山東濟(jì)寧魯超）； BS-6KH電子天平 （上海友聲衡器有限公司制造）； SHZ-D （ Ⅲ） 循環(huán)水式真空泵 （鞏義市予華儀器有限責(zé)任公司）。

1.2 試藥 蘆丁對(duì)照品 （100080-200707）、 金絲桃苷對(duì)照品 （ 111521-201004）、 槲 皮 素 對(duì) 照 品 （ 100081-200907 ），均供含量測(cè)定用，購自中國食品藥品檢定研究院 （純度≥97.0%）； 楊梅 素對(duì) 照 品 （201008）、 異 槲 皮 苷 對(duì) 照 品（201010）， 均供含量測(cè)定用， 購自四川維克奇生物科技有限公司 （純度≥98%）。

黃葵膠囊中間體稠膏 3 批， 批號(hào) 20120903 （相對(duì)密度1.27， 60 ℃）， 批號(hào) 20120912 （相對(duì)密度 1.26， 60 ℃），批號(hào) 20120928 （相對(duì)密度 1.27， 60 ℃）； 乙腈為色譜純；水為重蒸餾水，磷酸等試劑均為分析純。

2 方法和結(jié)果

2.1 不同方法干燥條件

2.1.1 帶式真空干燥 稱取黃葵膠囊中間體稠膏 2 kg， 置于真空帶式干燥機(jī)中，設(shè)定加熱水溫度前區(qū)、中區(qū)、后區(qū)，冷卻區(qū)分別為： 120 ℃、 120 ℃、 90 ℃、 25 ℃， 干燥面溫度約為 70 ℃， 真空度為 12 ～15 mbar（1 mbar=100 Pa），干燥至物料含水為 5% ～6%時(shí)停止。

2.1.2 刮板干燥 稱取黃葵膠囊中間體稠膏 2 kg， 置于刮板干燥機(jī)中， 設(shè)定刮板加熱溫度為 152 ℃， 壓力為 0.6 MPa， 干燥至物料含水為 5% ～6%時(shí)停止。

2.1.3 減壓干燥 稱取黃葵膠囊中間體稠膏 2 kg， 置于真空減壓干燥機(jī)中， 設(shè)定加熱溫度為 70 ℃， 真空度 -0.08 MPa， 干燥至物料含水為 5% ～6%時(shí)停止。

2.2 蘆丁、 金絲桃苷、 異槲皮苷、 楊梅素及槲皮素測(cè)定方法［14］

2.2.1 對(duì)照品溶液的制備 按文獻(xiàn) ［5］ 方法制備即得含蘆丁0.031 2 mg/mL、 金絲桃苷0.118 3 mg/mL、 異槲皮苷0.088 0 mg/m L、 楊 梅 素 0.037 2 mg/m L、 槲 皮 素 0.011 0 mg/mL的混合對(duì)照品貯備液。 將制得的混合對(duì)照品貯備液逐級(jí)稀釋制得濃度分別為初濃度 1/1、 1/2、 1/4、 1/8、 1/ 10、 1/16 的系列混合對(duì)照品溶液。

2.2.2 樣品溶液制備 稱取不同干燥方法的待測(cè)樣品約1.15 g， 精密稱定， 置 50 mL量瓶中， 加 70%乙醇約 40 mL， 超聲 30 min， 放至室溫， 用 70% 乙醇定 容， 搖勻，再精密量取 1 mL至 25 m L量瓶中， 70%乙醇定容至刻度，溶液過 0.45 μm微孔濾膜， 取續(xù)濾液即得。

2.2.3 色譜 條 件 Thermo scientific Hypersil GOLD色譜柱（250 mm×4.6 mm， 5 μm）； 流動(dòng)相為乙腈 （ A） -0.2%磷酸水 （ B）， 采 用 梯 度 洗 脫 （ 0 ～10 min， 90% ～87%B；10 ～20min， 87% ～84%B； 20 ～65 min， 84% ～75%B；65 ～70 min， 75% ～90%B） ； 體積流 量 0.8 mL/min； 檢測(cè)波長 360 nm； 柱溫 30 ℃； 進(jìn)樣量 10 μL。 色譜峰記錄時(shí)間為 70 min。 在此色譜條件下， 對(duì)照品及成品各峰分離度均良好 （見圖1）。

圖1 對(duì)照品 （A） 及稠膏 （B） HPLC圖

2.2.4 線性關(guān)系考察 分別精密吸取 “2.2.1” 項(xiàng)下制得的系列混合對(duì)照品溶液適量，在本實(shí)驗(yàn)色譜條件下，各質(zhì)量濃度對(duì)照品溶液分別進(jìn)樣 10.0 μL。 以質(zhì)量濃度 μg/mL（X） 為橫坐標(biāo)， 峰面積值 A（Y） 為縱坐標(biāo)進(jìn)行線性回歸，5種待定量的物質(zhì)，峰面積與質(zhì)量濃度呈線性關(guān)系，回歸方程、 相關(guān)系數(shù)及線性范圍結(jié)果見表 1。 結(jié)果表明各成分在各自質(zhì)量濃度范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。

表1 不同物質(zhì)的回歸方程、 相關(guān)系數(shù)及線性范圍

2.2.5 方法學(xué)考察 精密量取 “2.2.2” 項(xiàng)下制得的樣品溶液一份，連續(xù)進(jìn)樣6次，以峰面積計(jì)算各指標(biāo)成分的RSD， 考察方法的精密度， 結(jié)果 5 種成分的 RSD均小于1.8%； 精密量取同一批號(hào)的樣品 6 份， 按照 “2.2.2” 項(xiàng)下方法制備樣品溶液，進(jìn)樣測(cè)定，以峰面積計(jì)算各指標(biāo)成分的 RSD， 考察方法的重復(fù)性， 結(jié)果 5 種成分的 RSD均小于 4.0%； 取 “2.2.2” 項(xiàng)下制備的樣品溶液一份， 分別于0、 2、 4、 8、 12、 24 h 檢測(cè)， 以峰面積計(jì)算各指標(biāo)成分的RSD， 考察方法的穩(wěn)定性， 結(jié)果 5 種成分的 RSD均小于4.3%。 結(jié)果表明該方法的精密度， 重復(fù)性， 穩(wěn)定性均符合要求。

取同一批次已知含有量的黃葵膠囊干浸膏6份，各取 0.5 g， 精密稱定， 分別精密加入一定量的蘆丁、 金絲桃苷、異槲皮苷、楊梅素、槲皮素對(duì)照品，按“2.2.2” 項(xiàng)下方法制備供試液， 按上述色譜條件分別進(jìn)樣 10 μL進(jìn)行分析， 記錄各色譜峰峰面積， 計(jì)算加樣回收率， 結(jié)果見表2。

2.3 結(jié)果 對(duì) 3 種干燥方式的干燥時(shí)間和物料外觀性狀進(jìn)行比較， 結(jié)果見表 3； 按照 “2.2.3” 項(xiàng)下色譜條件對(duì) 3 組樣品 （各3批） 中指標(biāo)成分分別進(jìn)行定量測(cè)定， 并計(jì)算各成分的干燥前后轉(zhuǎn)移率 （干燥前后轉(zhuǎn)移率 =樣品中指標(biāo)成分的含有量/稠膏中指標(biāo)成分的含有量 ×100%）， 結(jié)果見表4。

3 討論

3.1 本研究采用的 3 種方法的干燥條件均為經(jīng)正交試驗(yàn)篩選的結(jié)果。在進(jìn)行真空帶式干燥最優(yōu)工藝驗(yàn)證時(shí)，所得干浸膏的水分質(zhì)量分?jǐn)?shù)穩(wěn)定在 5% ～6%， 經(jīng)考察， 此水分質(zhì)量分?jǐn)?shù)適合后續(xù)的濕法制粒，因此將其定為干燥工藝干燥終點(diǎn)判定指標(biāo)。

3.2 5 種指標(biāo)性成分經(jīng)真空帶式干燥后含有量高于刮板干燥和真空減壓干燥。分析認(rèn)為這是因?yàn)楣伟甯稍餃囟雀哌_(dá)150 ℃以上， 使物料中指標(biāo)性成分受到破壞。 真空減壓干燥時(shí)間較長，不但效率低，對(duì)指標(biāo)成分也有影響。真空帶式干燥過程溫度較低且時(shí)間較短，因而指標(biāo)性成分損失小，物料外觀性狀好，能最大程度地保證浸膏的質(zhì)量；還可與粉碎設(shè)備聯(lián)成一體，干燥物料可直接粉碎，既減少了操作環(huán)節(jié)，有利于防止吸濕，且因均在密閉條件下進(jìn)行，也有利藥劑衛(wèi)生。本研究的結(jié)果表明，真空帶式干燥是一種適合中藥浸膏的新型干燥方法，也是一種值得推廣的適合工業(yè)化生產(chǎn)的高效的干燥技術(shù)。

表 2 加樣回收率試驗(yàn) （n=6）

表 3 不同干燥方法的干燥時(shí)間和物料外觀性狀 （n=3）

表 4 不同干燥方法指標(biāo)性成分的質(zhì)量分?jǐn)?shù)和干燥前后轉(zhuǎn)移率 （n=3）

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2013-02-06

江蘇省重點(diǎn)科研成果產(chǎn)業(yè)化項(xiàng)目 （BA2012131）。

劉 霖 （1989—） ， 女， 碩士生， 從事中藥新劑型新工藝新技術(shù)研究。 Tel： 15052854940， E-mail： liulin198951@126.com

*通信作者： 劉漢清， 男， 教授， 博士生導(dǎo)師， 從事中藥新劑型新制劑新工藝新技術(shù)研究。 Tel： （025） 86595018， E-mail： hqliu636@ yahoo.com.cn