王靖 朝格圖 李蓓 王志鋼

（內(nèi)蒙古大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，呼和浩特 010021）

乙酰肝素酶及在腫瘤治療中的應(yīng)用

王靖 朝格圖 李蓓 王志鋼

（內(nèi)蒙古大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，呼和浩特 010021）

乙酰肝素酶（Heparanase，Hpa）是哺乳動(dòng)物體內(nèi)唯一能夠裂解硫酸乙酰肝素蛋白多糖的酶。通過破壞細(xì)胞外基質(zhì)及基底膜結(jié)構(gòu)的完整性，釋放胞外基質(zhì)上的各種生長(zhǎng)因子，與腫瘤的轉(zhuǎn)移、侵襲密切相關(guān)。目前的研究表明Hpa在大多數(shù)中晚期腫瘤中都有表達(dá)，尤其在惡性腫瘤中異常高表達(dá)，而Hpa表達(dá)的下調(diào)可以抑制腫瘤細(xì)胞的轉(zhuǎn)移，可以作為一種抗腫瘤轉(zhuǎn)移相關(guān)靶點(diǎn)用于中晚期腫瘤的治療。綜述了Hpa的結(jié)構(gòu)與功能、對(duì)腫瘤轉(zhuǎn)移的促進(jìn)作用及在腫瘤治療中的應(yīng)用情況。

乙酰肝素酶 腫瘤轉(zhuǎn)移 腫瘤治療

1 硫酸乙酰肝素

硫酸乙酰肝素（Heparan Sulfate，HS）又稱肝素，是胞外基質(zhì)（Extracellular matrix，ECM）和基底膜（Basement membrane，BM）中的主要多糖組分之一［1，2］。HS是一種高度硫酸化的鏈狀分子，一端固定于ECM或BM上，多個(gè)HS分子的側(cè)鏈特異性位點(diǎn)可以同各種肝素結(jié)合分子的絲氨酸、甘氨酸殘基共價(jià)連接形成硫酸肝素蛋白多糖（Heparan sulfate proteoglycans，HSPGs）［3，4］，被固定的肝素結(jié)合分子具有相對(duì)穩(wěn)定和局限化的特點(diǎn)，如β-成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子（β-fibroblast growth factor，β-FGF），血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（Vascular endothelial growth factor，VEGF），角蛋白生長(zhǎng)因子（Keratin growth factors， KGF），肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子（Hepatocyte growth factor，HGF），轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β（Transforming growth factor-β，TGF-β），趨化因子（Chemotactic factor，CF）及蛋白酶（Protease）等。HSPGs是在細(xì)胞表面及ECM和BM廣泛存在的特殊生物大分子，HSPGs組成網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，在ECM和BM上儲(chǔ)存肝素結(jié)合分子并發(fā)揮其障礙功能［5］。HS不僅能在其側(cè)鏈特異性位點(diǎn)結(jié)合大量的肝素結(jié)合分子并將其存儲(chǔ)在ECM和BM上，還能通過水解側(cè)鏈來調(diào)節(jié)肝素結(jié)合分子的生物活性、功能、作用方式等［6，7］。肝素結(jié)合分子的釋放對(duì)靶細(xì)胞的生理功能起著重要的調(diào)節(jié)作用。

2 Hpa的分子生物學(xué)特征

乙酰肝素酶又稱類肝素酶，為內(nèi)源性β-葡萄糖

醛酸酯酶，能識(shí)別硫酸乙酰肝素側(cè)鏈的特異位點(diǎn)。通過水解HS側(cè)鏈的糖苷鍵可將HS降解為10-20個(gè)糖單位的短糖鏈。Vlodasky等［8］于1999年首次分離到Hpa基因。

至今發(fā)現(xiàn)的人類Hpa基因有兩種：Hpa1和Hpa2。Hpa1即為通常所說的乙酰肝素酶，Hpa1基因位于4q21.3，從血小板和胎盤中克隆得到，基因全長(zhǎng)約39 kb，由14個(gè)外顯子和13個(gè)內(nèi)含子組成，中間序列高度保守，其cDNA全長(zhǎng)1 629 bp，編碼543個(gè)氨基酸殘基組成的相對(duì)分子質(zhì)量61.2 kD的多肽鏈。在Hpa1前體中，前導(dǎo)肽由35個(gè)氨基酸殘基組成（前導(dǎo)肽，Met1-Ala35）。Hpa1前體轉(zhuǎn)移到內(nèi)質(zhì)網(wǎng)后，6' N-糖基化位點(diǎn)處糖基化。在組織蛋白酶L的作用下，前體的Ser110-Gln157線性區(qū)域被切除，產(chǎn)生50 kD（Lys158-Ile543）和8 kD（Gln36-109）的兩個(gè)亞基。這兩個(gè)亞基非共價(jià)連接形成異源二聚體即為具有活性的Hpa，Glu225和 Glu343為其活性中心［9］。Hpa2基因位于10q23-24，由乳腺組織的cDNA中克隆得到，與Hpa1基因的同源性為35%。Hpa2基因轉(zhuǎn)錄后可被剪接成3種不同的mRNA，分別編碼含592、534和480個(gè)氨基酸殘基的多肽，但這3種多肽均為胞內(nèi)結(jié)合蛋白，沒有降解HS的活性。

3 Hpa的生理功能

在人正常組織中，Hpa主要分布在角質(zhì)細(xì)胞、胎盤和脾臟、淋巴結(jié)、胸腺等免疫組織細(xì)胞，其他非免疫組織中不表達(dá)，但幾乎在人類所有惡性腫瘤中Hpa有較高水平表達(dá)，尤其在一些侵襲轉(zhuǎn)移性強(qiáng)的惡性腫瘤中表達(dá)水平更高［10］。此外，Hpa還參與增生性病變、炎癥發(fā)生、損傷性修復(fù)、傷口愈合、免疫反應(yīng)、胚胎形成等多種病理、生理過程。Hpa的生理活性與環(huán)境pH密切相關(guān)［11］，在pH4.0-7.5的環(huán)境中有活性，最佳活性pH在5.5-5.8，大于8.0則會(huì)失活。隨著局部環(huán)境pH值的變化，Hpa既可以為酶，也可以為黏附分子。在酸性條件下，Hpa以酶的形式發(fā)揮作用，降解HSPGs中的HS側(cè)鏈；當(dāng)pH值高于7.0時(shí)，Hpa表現(xiàn)為黏附活性，與HS結(jié)合。在生理狀態(tài)pH條件下，Hpa以無活性狀態(tài)連接到ECM或細(xì)胞表面，當(dāng)pH下降時(shí)則變的有活性并且裂解它連接的HSPGs。

HSPGs降解則可釋放結(jié)合在HS側(cè)鏈上的生長(zhǎng)因子、趨化因子和蛋白酶等活性物質(zhì)，產(chǎn)生一系列生物學(xué)效應(yīng)：（1）降解ECM和BM。破壞了細(xì)胞轉(zhuǎn)移的屏障，降解HSPGs產(chǎn)生的HS片段可激活HS受體CD44v3，發(fā)出細(xì)胞內(nèi)遷移信號(hào)，促使細(xì)胞變形、運(yùn)動(dòng)；（2）釋放結(jié)合在HS上的生長(zhǎng)因子（VEGF、FGF等）。導(dǎo)致細(xì)胞和新血管的增生，同時(shí)組織特異性生長(zhǎng)因子的釋放能驅(qū)動(dòng)細(xì)胞呈器官選擇性游動(dòng)；（3）降解正常組織屏障中的HSPGs。有利于腫瘤細(xì)胞游出，單獨(dú)或協(xié)同VEGF促進(jìn)腫瘤微血管的生成，促進(jìn)細(xì)胞的侵襲及轉(zhuǎn)移［10］；（4）調(diào)節(jié)胚泡滋養(yǎng)層細(xì)胞。通過裂解肝素及肝素結(jié)合蛋白的2-O-硫基團(tuán)清除子宮內(nèi)膜局部的黏液糖蛋白，使胚泡更容易粘附和植入子宮內(nèi)膜；（5）通過水解肝素側(cè)鏈，釋放出各種肝素結(jié)合分子。促進(jìn)滋養(yǎng)細(xì)胞侵入血管基底膜，使新生血管形成，為胚胎組織生長(zhǎng)發(fā)育奠定基礎(chǔ)；（6）釋放HSPGs，促進(jìn)毛囊干細(xì)胞的生長(zhǎng)、分化和遷移，進(jìn)而促進(jìn)哺乳動(dòng)物毛發(fā)生長(zhǎng)。

4 Hpa在腫瘤發(fā)生及轉(zhuǎn)移中的作用

ECM、BM是細(xì)胞和組織的天然屏障，也為細(xì)胞的生長(zhǎng)遷移、分化和生存提供支架，腫瘤細(xì)胞必須突破ECM和血管基底膜才能侵染周圍組織或者轉(zhuǎn)移到其他器官。HS作為ECM的主要成分之一，在細(xì)胞黏附和運(yùn)動(dòng)等方面起著關(guān)鍵作用，腫瘤細(xì)胞的轉(zhuǎn)移潛能與HS降解程度密切相關(guān)，Hpa的活性同腫瘤的轉(zhuǎn)移有密切關(guān)系。早期研究顯示B16黑色素瘤細(xì)胞和T淋巴瘤中發(fā)現(xiàn)Hpa活性升高［12］，腫瘤愈后患者的肝素水平要遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于正常組織［13］，意味著Hpa在愈后患者的體內(nèi)依舊是高表達(dá)的。Hpa基因的過表達(dá)不僅能夠促進(jìn)細(xì)胞遷移，而且還能加速腫瘤生長(zhǎng)所必須的血管網(wǎng)的生長(zhǎng)來促進(jìn)惡性腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)［14］。Doweck等［15］對(duì)頭頸部鱗狀癌細(xì)胞的標(biāo)本進(jìn)行Hpa免疫組織化學(xué)分析發(fā)現(xiàn)，Hpa染色的程度和腫瘤分化程度呈正相關(guān)，與腫瘤的預(yù)后呈負(fù)相關(guān)。Nobuhisa等［16］對(duì)結(jié)腸癌細(xì)胞進(jìn)行RT-PCR研究顯示，Hpa的mRNA在癌細(xì)胞中的轉(zhuǎn)錄要遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于正常組織，mRNA的高表達(dá)還與腫瘤組織血管生成、淋巴管侵襲及病人的生存期有關(guān)。各種肝素結(jié)合分子通過HS結(jié)合并儲(chǔ)存在ECM上，當(dāng)HS被降解時(shí)

這些生長(zhǎng)因子和細(xì)胞因子便被釋放，組織特異性生長(zhǎng)因子的局部釋放和活化為原發(fā)腫瘤的生長(zhǎng)及轉(zhuǎn)移創(chuàng)造了良好條件。

5 Hpa在腫瘤治療中的應(yīng)用

作為一種可以降解ECM和BM上的HSPGs的酶，Hpa與惡性腫瘤轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，這一特性為基于Hpa為靶點(diǎn)的腫瘤治療，特別是抑制腫瘤轉(zhuǎn)移開辟了新途徑，在臨床上具有重要意義。目前主要圍繞兩個(gè)方面開展工作，一是發(fā)現(xiàn)能致Hpa降解或失活的抑制劑，從而保護(hù)HSPGs；二是抑制Hpa的表達(dá)。

5.1 糖抑制劑PI-88

PI-88即磷酸甘露戊糖硫酸脂（Pentose phosphate mannose sulphate，PI-88）是高度硫酸化的甘露聚糖寡聚糖的混合物，其α1，3-糖苷五糖以及α1，2-糖苷四糖組成部分生物活性最強(qiáng)，是Hpa抑制物的有效組分。多種肝素衍生物的研究發(fā)現(xiàn)，硫酸化程度越高，對(duì)Hpa抑制效果越好。PI-88能夠抑制約50%高度侵入性的大鼠乳腺腺癌原發(fā)腫瘤的生長(zhǎng)及減少30%的腫瘤血管形成。臨床試驗(yàn)中PI-88表現(xiàn)出強(qiáng)效的抗血管生成活性［17］。作為一種單一療法或與其他標(biāo)準(zhǔn)化療合用治療非小細(xì)胞肺癌、肝細(xì)胞癌、前列腺癌Hpa的抑制物，PI-88已經(jīng)完成Ⅰ期臨床試驗(yàn)。PI-88抑制了Hpa的活性，干擾了與硫酸肝素結(jié)合的生長(zhǎng)因子的釋放，從而抑制了腫瘤細(xì)胞的轉(zhuǎn)移和腫瘤細(xì)胞周圍血管的形成［18］。PI-88有可能成為第1個(gè)應(yīng)用于臨床抗腫瘤治療的Hpa抑制劑。

5.2 肝素

肝素，尤其是低分子量肝素能提高晚期腫瘤患者的生存幾率。低分子量肝素通過抑制血液的凝固、抑制血小板和細(xì)胞之間的黏附，進(jìn)而干擾原發(fā)性腫瘤細(xì)胞的轉(zhuǎn)移。4種不同類型的低分子肝素在6個(gè)隨機(jī)對(duì)照試驗(yàn)中，都能夠增加癌癥晚期患者的生存率［19］，直接影響腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)和遷移。但肝素會(huì)抑制血液的凝固，還能促進(jìn)ECM中貯存的各種細(xì)胞因子、生長(zhǎng)因子（如bFGF、VEGF等）、趨化因子的釋放，從而引起一系列的負(fù)性效應(yīng)，普通肝素由于其強(qiáng)大的抗凝血活性限制它作為抗腫瘤轉(zhuǎn)移劑的使用。非抗凝肝素因?yàn)樗鼈兛梢愿邉┝拷o藥，從而充分利用肝素的抗轉(zhuǎn)移功能，還適用于癌癥患者的出血并發(fā)癥，因此具有很大的臨床應(yīng)用潛力，但其作用機(jī)制尚不完全清楚。一種可能是這種外源性肝素與HSPGs上的內(nèi)源性肝素競(jìng)爭(zhēng)Hpa，從而抑制了Hpa活性；另一種可能是通過阻斷血小板的腫瘤細(xì)胞之間的相互作用，從而抑制腫瘤細(xì)胞的聚集體的形成。非抗凝肝素和相關(guān)化合物作為一個(gè)有前途的抑制癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移治療策略。

5.3 PG545

PG545是一種人工合成的硫酸乙酰肝素類似物。一方面PG545可以螯合結(jié)合在ECM的VEGF，抑制腫瘤血管生成；另一方面可以通過抑制Hpa的活性，抑制VEGF、FGF-1、FGF-2的釋放并干擾這些生長(zhǎng)因子的轉(zhuǎn)移。Dredge等［20］的大鼠試驗(yàn)表明，皮下注入PG545能夠抑制20%-30%血管的生成；同時(shí)在體內(nèi)誘發(fā)的乳腺癌、前列腺癌、肝癌、肺癌、結(jié)腸癌、頭頸部癌和黑色素瘤的小鼠模型中也具有抗腫瘤或抗轉(zhuǎn)移效果。在4T1乳腺癌模型中，PG545以劑量依賴的方式顯著抑制原發(fā)性腫瘤的轉(zhuǎn)移。免疫組化檢測(cè)顯示，與正常小鼠肺組織相比，所有4T1乳腺腫瘤和肺組織，Hpa表達(dá)高出36%-43%，而經(jīng)PG545處理后，則顯著降低［21］。硫酸乙酰肝素類似物PG545能夠明顯抑制Hpa的活性，血管生成和腫瘤的發(fā)生、轉(zhuǎn)移［22］。PG545有望成為一種新的臨床抗癌藥物。

5.4 多肽類

Levy-Adam等［23］的研究發(fā)現(xiàn)Hpa上有3個(gè)HS結(jié)合結(jié)構(gòu)域，其中1個(gè)結(jié)構(gòu)域（Lys158-Asn171）結(jié)合在Hpa的50 kD亞基的N末端。核磁共振（NMR）滴定試驗(yàn)證實(shí)HS結(jié)合在Hpa氨基酸殘基Lys158-Asn162。結(jié)合在Lys158-Asn162區(qū)域的的1個(gè)短肽（KKDC）在劑量敏感的人群中能抑制Hpa的活性。此外，特異結(jié)合到Lys158-Asn162部位的中和抗體能抑制Hpa的活性，刪除這一區(qū)域，Hpa不表現(xiàn)出酶活性。刪除第2個(gè)HS結(jié)合結(jié)構(gòu)域序列（Gln270-Lys280）產(chǎn)生了一個(gè)處于非活動(dòng)狀態(tài)的酶，不能與細(xì)胞表面的HS結(jié)合。第3個(gè)HS結(jié)合結(jié)構(gòu)域位于Hpa的50 kD亞基的N末端Lys411-Arg432。此區(qū)域的抗體抑制Hpa的活性，缺乏此區(qū)域不表現(xiàn)出酶活性。試驗(yàn)表明，Lys158-Asn171比其他兩個(gè)結(jié)構(gòu)域與HS結(jié)合更加強(qiáng)

烈［24］。因此，開發(fā)Lys158-Asn171識(shí)別域的Hpa抑制劑，可以作為一種治療惡性腫瘤的有效方法。

5.5 蘇拉明

蘇拉明（Suramin）是一種多磺酸萘脲，與HSPG中HS側(cè)鏈相似，具有抗增生活性，可以抑制各種生長(zhǎng)因子與其細(xì)胞表面受體結(jié)合，通過非競(jìng)爭(zhēng)性抑制作用抑制Hpa活性。體外試驗(yàn)中，使用蘇拉明類似物（NF-127、NF-145和NF-171）分別處理高度侵襲性和腦轉(zhuǎn)移性黑色素瘤（70 W）細(xì)胞均發(fā)現(xiàn)Hpa的表達(dá)受到有效抑制并呈現(xiàn)出劑量依賴性。使用涂有Hpa的濾膜和人工基底膜進(jìn)行化學(xué)侵襲的研究表明蘇拉明類似物能夠顯著降低人70 W細(xì)胞的侵襲能力；體內(nèi)血管生成試驗(yàn)表明蘇拉明類似物能夠抑制Hpa導(dǎo)致的血管生成［25］。

5.6 硫酸昆布多糖

硫酸昆布多糖（Laminarin sulphate，LAMS）是一種含硫酸基的多糖，由昆布多糖在人工條件下硫酸化得到。LAMS有多方面的生物活性，包括抗腫瘤、調(diào)節(jié)免疫功能、調(diào)節(jié)血脂、降血糖、抗凝血等作用。LAMS可直接殺傷腫瘤細(xì)胞、抑制血管生成、誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡及調(diào)節(jié)機(jī)體免疫的功能，具有抗腫瘤及抑制腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)擴(kuò)散的作用。另外，昆布多糖硫酸酯能夠干擾bFGF血管生成信號(hào)刺激作用，致使腫瘤組織的血管生成受阻，進(jìn)而抑制腫瘤生長(zhǎng)。體外試驗(yàn)表明可以有效抑制Hpa對(duì)HSPG的降解。給小鼠皮下注射LAMS后再靜脈注入黑素瘤細(xì)胞或乳腺癌細(xì)胞，發(fā)現(xiàn)對(duì)肺擴(kuò)散轉(zhuǎn)移的抑制率達(dá)80%-90%［26］。

5.7 RNAi

RNAi能夠高特異性地使基因轉(zhuǎn)錄后沉默，因此廣泛應(yīng)用于抗腫瘤、病毒、心血管等疾病的研究。通過RNA干擾技術(shù)（RNAi）在轉(zhuǎn)錄后水平阻止Hpa基因的表達(dá)，可以抑制腫瘤細(xì)胞的侵潤(rùn)和轉(zhuǎn)移，為臨床預(yù)防腫瘤細(xì)胞的侵潤(rùn)和轉(zhuǎn)移提供了條件，并為治療腫瘤帶來了希望。Liu等［27］構(gòu)建了靶向Hpa基因的包含短發(fā)夾RNA（Short hairpin RNAs，shRNA序列）和基于HpamiR30的shRNA的慢病毒載體，體內(nèi)和體外條件下分別轉(zhuǎn)染人類惡性黑色素瘤A375，結(jié)果顯示轉(zhuǎn)染72 h后Hpa表達(dá)量下降50%-60%，可以抑制A375黑色素瘤細(xì)胞在體外增殖、黏附、遷移和侵襲。因此，進(jìn)一步研究Hpa加工的具體過程、控制其表達(dá)和活性的調(diào)控因子對(duì)找到攻克腫瘤的突破點(diǎn)具有重要意義。

6 展望

Hpa作為哺乳動(dòng)物體內(nèi)唯一能夠裂解硫酸乙酰肝素蛋白多糖的酶，與腫瘤生長(zhǎng)、侵潤(rùn)、轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，已經(jīng)受到人們?cè)絹碓蕉嗟年P(guān)注。但還有很多問題亟待解決，包括Hpa在腫瘤細(xì)胞中高表達(dá)的機(jī)制；Hpa在腫瘤細(xì)胞中的活性遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于正常組織的原因；在腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移過程中，除了Hpa有沒有其他物質(zhì)共同參與等等。另外，目前以Hpa為靶位點(diǎn)的多種抑制劑均有一定的副作用，因此有必要對(duì)其各種潛在風(fēng)險(xiǎn)進(jìn)行仔細(xì)評(píng)估。此后的研究重點(diǎn)可能會(huì)集中在Hpa對(duì)促進(jìn)不同組織和細(xì)胞腫瘤轉(zhuǎn)移的細(xì)胞生物學(xué)機(jī)制及Hpa的表達(dá)、活性調(diào)節(jié)方面。以Hpa為靶位點(diǎn)抗腫瘤藥物，包括低分子量肝素、PI-88及肝素類似物的臨床應(yīng)用也會(huì)成為今后研究的熱點(diǎn)。隨著對(duì)以Hpa為靶位點(diǎn)抗腫瘤藥物的進(jìn)一步篩選，將為明確腫瘤發(fā)生、轉(zhuǎn)移的機(jī)制提供支持。

［1］ Kjellen L, Lindahl U. Proteoglycans：structures and interactions［J］. Annu Rev Biochem, 1991, 60：443-475.

［2］ Iozzo RV. Matrix proteoglycans：from molecular design to cellular function［J］. Annu Rev Biochem, 1998, 67：609-652.

［3］ Capila I, Linhardt RJ. Heparin-protein interactions［J］. Angew Chem Int Ed Engl, 2002, 41：391-412.

［4］ Lindahl U, Li JP. Interactions between heparan sulfate and proteinsdesign and functional implications［J］. Int Rev Cell Mol Biol, 2009, 276：105-159.

［5］ Vlodavsky I, Friedmann Y. Molecular properties and involvement of heparanase in cancer metastasis and angiogenesis［J］. J Clin Invest, 2001, 108：341-347.

［6］ Gray E, Mulloy B, Barrowcliffe TW. Heparin and low molecularweight heparin［J］. Thromb Haemost, 2008, 99：807-818.

［7］ Lindahl U. Heparan sulfate-protein interactions-a concept for drug design［J］. Thromb Haemost, 2007, 98：109-115.

［8］ Voldavsky I, Friedmann Y, Elkin M, et al. Cloning of heparanase：

gene cloning, expression and function in tumor progression and metastasis［J］. Nat Med, 1999, 5：793.

［9］ Xu X, Ding J, Rao G, et al. Estradiol induces heparanase-1 expression and heparan sulphate proteoglycan degradation in human endometrium［J］. Hum Reprod, 2007, 22：927-937.

［10］ Fux L, Ilan N, Sanderson RD, et al. Heparanase：busy at the cell surface［J］. Trends Biochem Sci, 2009, 34：511-519.

［11］ Vreys V, David G. Mammalian heparanase：what is the message?［J］. Cell Mol Med, 2007, 11：427-452.

［12］ Vlodavsky I, Beckhove P, Lerner I, et al. Significance of heparanase in cancer and inflammation［J］. Cancer Microenviron, 2012, 5：115-132.

［13］ Lazo-Langner A, Goss GD, Spaans JN, et al. The effect of low-molecular-weight heparin on cancer survival［J］. Thromb Haemost, 2007, 5：729-737.

［14］ Lerner I, Baraz L, Pikarsky E, et al. Function of heparanase in prostate tumorigenesis：potential for therapy［J］. Clin Cancer Res, 2008, 14：668-676.

［15］ Doweck I, Kaplan-Cohen V, Naroditsky I, et al. Heparanase localization and expression by head and neck cancer：correlation with tumor progression and patient surrival［J］. Neoplasia, 2006, 8：1055-1061.

［16］ Nobuhisia T, Naomoto Y, Ohkawa T, et al. Heparanase expression correlates with malignant potential in human colon cancer［J］. Cancer Res Clin Oncol, 2005, 131：229-237.

［17］ Raman K, Karuturi R, Swarup VP, et al. Discovery of novel sulfonated small molecules that inhibit vascular tube formation［J］. Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters, 2012, 22：4467-4470.

［18］ Ilan N, Elkin M, Vlodavsky I. Regulation, function and clinical significance of heparanase in cancer metastasis and angiogenesis［J］. Int J Biochem Cell Biol, 2006, 38：2018-2039.

［19］ Borsig L, Wong R, Feramisco J, et al. Heparin and cancer revisited：mechanistic connections involving platelets, P-selectin, carcinoma mucins, and tumor metastasis［J］. Proc Natl Acad Sci USA, 2001, 98：3335-3357.

［20］ Dredge K, Hammond E, Handley P, et al. PG545, a dual heparanase and angiogenesis inhibitor, induces potent anti-tumour and antimetastatic efficacy in preclinical models［J］. British Journal of Cancer, 2011, 104：635-642.

［21］ Hammond E, Brandt R, Dredge K. PG545, a heparan sulfate mimetic, reduces heparanase expressionin vivo, blocks spontaneous metastases and enhances overall survival in the 4T1 breast carcinoma model［J］. PLoS One, 2012, 7：1-11.

［22］ Dredge K, Hammond E, Davis K, et al. The PG500 series：novel heparan sulfate mimetics as potent angiogenesis and heparanase inhibitors for cancer therapy［J］. Invest New Drugs, 2010, 28：276-283.

［23］ Levy-Adam F, Abboud-Jarrous G, Guerrini M, et al. Identification and characterization of heparin /heparan sulfate binding domains of the endoglycosidase heparanase［J］. J Biol Chem, 2005, 280：20457-20466.

［24］ Zetser A, Levy-Adam F, Kaplan V, et al. Processing and activation of latent heparanase occurs in lysosomes［J］. J Cell Sci, 2004, 117：2249-2258.

［25］ Marchetti D, Reiland J, Erwin B, et al. Inhibition of heparanase activity and heparanase-induced angiogenesis by suramin analogues［J］. Int J Cancer, 2003, 104：167-174.

［26］ Miao HQ, Elkin M, Aingorn E, et al. Inhibition of heparanase activity and tumor metastasis by laminarin sulfate and synthetic phosphorothioate oligo deoxynucleo tides［J］. Int J Cancer, 1999, 83：424-431.

［27］ Liu XY, Tang QS, Chen HC, et al. Lentiviral miR30-based RNA interference against heparanase suppresses melanoma metastasis with lower liver and lung toxicity［J］. Int J Bio Sci, 2013, 9：564-577.

（責(zé)任編輯 狄艷紅）

Heparanase and Its Applications in Cancer Therapy

Wang Jing Chao Ge Tu Li Bei Wang Zhigang
（College of Life Science，Inner Mongolia University，Hohhot 010021）

Heparanase（Hpa）is the only endo-glycosidase which cleaves heparan sulfate（HS）in mammalian. The enzyme also can disrupt the integrity of the extracellular matrix（ECM）and basement membrane（BM）, to release various growth factors from the ECM. Hpa is associated with migration and invasion of cancer cells. Recently, a series of studies have indicated that Hpa was expressed in most advanced cancers, especially in malignant cancer, while decreased expression of Hpa is helpful to inhibit the migration of cancer cells. Heparanase can be used as a potential therapeutic target for cancers. This paper reviews the structure and functions of Hpa, its role in promoting cancer metastasis and the application in cancer therapy.

Heparanase Cancer migration Cancer therapy

2013-11-17

國家自然科學(xué)基金項(xiàng)目（31160469，31360561）

王靖，女，碩士研究生，研究方向：基因工程；E-mail：wangjing.8909@163.com

王志鋼，男，教授，研究方向：哺乳動(dòng)物生殖生物學(xué)與生物技術(shù)；E-mail：lswzg@imu.edu.cn