姜 謐，郭 躍

外睪類吸蟲(Exorchisspp.)屬于隱殖科(Cryptogonimidae)、外睪亞科(Exorchiinae)。本亞科吸蟲以睪丸位于兩腸支外側而有別于其他亞科，是寄生于淡水魚腸道的一類小型吸蟲[1]。迄今為止，已報道的外睪類吸蟲種類有卵形外睪吸蟲(ExorchisoviformisKobayashi，1915)[2]、多卵黃外睪吸蟲(ExorchismultivitellarisPan，1984)[3]、葉巢外睪吸蟲(Exorchisovariolobularis Cao，1990)[4]和洞庭湖外睪吸蟲(ExorchisdongtinghuensisZhang et al，1993)[5]。唐崇惕等(2009a，2009b，2010)[6-8]用在湖南漢壽縣目平湖區(qū)所獲得的外睪類吸蟲蟲卵飼食釘螺, 實驗釘螺切片鏡檢結果顯示96.38%螺體有血淋巴細胞增生現(xiàn)象。其情況與葉巢外睪吸蟲感染湖北釘螺和窄口螺所表現(xiàn)的情況相同, 但葉巢外睪吸蟲所引發(fā)螺體血淋巴細胞反應會更強烈些。除此以外還發(fā)現(xiàn)實驗螺有大量增加體液分泌物情況；釘螺感染該外睪吸蟲后不同時間段分別再感染日本血吸蟲毛蚴，2～82 d對實驗螺作切片觀察, 發(fā)現(xiàn)后入侵的血吸蟲幼蟲全部受到攻擊而發(fā)育異常并死亡： 雙重感染外睪吸蟲和血吸蟲的實驗釘螺, 在感染血吸蟲后時間越長蟲體受害越重；而且隨著時間的推移血吸蟲的蟲數(shù)隨之減少，說明該外睪類吸蟲具控制血吸蟲功能。經比較，該外睪類吸蟲的形態(tài)結構與已報道的洞庭湖外睪吸蟲和葉巢外睪吸蟲有明顯區(qū)別，特對其形態(tài)和生活史詳細的觀察研究。

1 材料與方法

1.1材料 鯰魚均采自湖南省常德市漢壽縣目平湖，經定種為鯰魚Parasilurusasotus。飼養(yǎng)于去氯水的水桶中，水泵通氣，并放入適量冰塊以保持低水溫。

第一中間宿主湖北釘螺(Oncomelaniahupensis)采集自湖南省常德市漢壽縣目平湖羊咯洲，湖北釘螺置平皿水中逸尾蚴，發(fā)現(xiàn)外睪類吸蟲陽性釘螺單獨飼養(yǎng)。

實驗所用第二中間宿主為金魚(Carassiusauratus)，購自廈門大學路觀賞魚之家。所選金魚個體大小為6～8 cm，體型正常，健康狀況良好。實驗用魚的飼養(yǎng)環(huán)境通過加熱棒控制控制，均維持水溫在25℃左右。

1.2方法 剖檢鯰魚，用0.6%生理鹽水進行沖洗鯰魚消化道，收集成蟲及童蟲并清洗干凈。

單只外睪類吸蟲陽性釘螺定期于25 ℃，光照條件下逸尾蚴并計數(shù)，感染第二中間宿主，感染以后的實驗魚定期或一發(fā)現(xiàn)將死即解剖檢查，以獲得外睪類吸蟲的囊蚴或后蚴。

將上述單只外睪類吸蟲陽性釘螺壓碎，以獲得該釘螺內的外睪類吸蟲幼蟲期蟲體。

上述獲得的外睪類吸蟲的成蟲、童蟲、釘螺內的幼蟲期蟲體、囊蚴和后蚴均在剖檢收集保存，顯微鏡觀察并用生物描繪器繪圖，文中測量單位為mm。

2 結 果

2.1蟲種鑒定 目平湖外睪吸蟲Exorchismupingensissp. nov., 2011 見圖1之1.1、1.2和1.3。

終末宿主：鯰魚Parasilurusasotus

寄生部位：胃幽門與腸道交界處

發(fā)現(xiàn)地點：湖南省常德市漢壽縣目平湖

模式標本存放處：廈門大學生命科學學院寄生動物研究室。

蟲體描述：蟲體梨形、瓜子形及橢圓形，前端稍突出，后端鈍圓，平均長寬比：1.53～1.78。體表有小棘，咽兩側各有一個眼點色素。蟲體大小為：(0.342～0.908)mm×(0.260～0.532)mm，口吸盤在頂端，(0.078～0.142)mm× (0.072～0.142)mm，咽緊接在口吸盤后(0.036～0.084)mm×(0.028～0.072)mm。食道極短0.002～0.016 mm，兩腸支到達蟲體末端處。腹吸盤在體前1/3～2/5部位，大小為(0.042～0.105)mm×(0.046～0.107)mm。卵巢(0.041～0.140)mm×(0.040～0.189)mm，分葉小。陰莖囊缺，儲精囊大，分為前后兩個部分，前儲精囊(0.067～0.135)mm×(0.052～0.149)mm，后儲精囊(0.056～0.189)mm×(0.040～0.188)mm，生殖孔開口于腹吸盤前。兩側睪丸(0.113～0.202)mm×(0.069～0.167)mm及(0.106～0.208)mm×(0.081～0.163)mm，位于腹吸盤水平位置，體中位線前，在兩睪丸的上頂端分別引出一條彎曲的輸精管，向體內側下方延伸，到后儲精囊的后1/3或1/4部分水平處匯合成一短總管通入后儲精囊。受精囊為一大的圓囊，位于后儲精囊的后方，大小為(0.033～0.098)mm×(0.029～0.092)mm，從囊前端引出一條向前直伸的小管，于卵模附近稍為折彎或直接通入其附近的輸卵管中。卵黃腺兩側分為多條縱向長條，從體前端延伸到體后端。卵黃橫管兩端各聯(lián)于兩側卵黃腺的基部(位于二睪丸上部內側)，在卵巢附近匯合成卵黃總管，在受精囊管與卵模之間通入輸卵管。子宮盤曲在體后部，其末端上行與儲精囊的輸精管一起開口于腹吸盤前方的生殖孔。成熟成蟲體后部子宮內充滿蟲卵，蟲卵大小為(0.019～0.027)mm×(0.012～0.019)mm。排泄囊為不典型V形(即包括V形和倒三角形短主干Y形)。

2.2生活史

2.2.1童蟲：見圖1之1.4、1.5和1.6。

同成蟲一起檢獲于鯰魚的胃幽門與腸道交界處，體梨形、瓜子形及橢圓形，大小為(0.308～0.579)mm×(0.212～0.474)mm，平均長寬比：1.35～1.81?？谖P在頂端，(0.081～0.140)mm×(0.071～0.148)mm，咽緊接在口吸盤后(0.038～0.089)mm×(0.029～0.068)mm。食道極短0.002～0.014 mm，兩腸支到達蟲體末端處。腹吸盤在體前1/3～2/5部位，大小為(0.069～0.087)mm×(0.067～0.096)mm。卵巢(0.051～0.112)mm×(0.047～0.135)mm，分葉小。陰莖囊缺，儲精囊大，分為前后兩個部分，前儲精囊(0.042～0.152)mm×(0.040～0.131)mm，后儲精囊(0.052～0.135)mm×(0.040～0.100)mm，生殖孔開口于腹吸盤前。兩側睪丸(0.075～0.180)mm×(0.058～0.128)mm及(0.075～0.194)mm×(0.060～0.128)mm，位于腹吸盤水平位置，體中位線前，在兩睪丸的上頂端分別引出一條彎曲的輸精管，向體內側下方延伸，到后儲精囊的后1/3或1/4部分水平處匯合成一短總管通入后儲精囊。受精囊為一大的圓囊，位于后儲精囊的后方，但相對于成蟲來說較小且囊內為空，無活躍的精子，大小為(0.027～0.077)mm×(0.028～0.065)mm，從囊前端引出一條向前直伸的小管，于卵模附近稍為折彎或直接通入其附近的輸卵管中。卵黃腺未見。排泄囊也和成蟲一樣為不典型V形。

2.2.2雷蚴 圖1.7。成熟雷蚴位于釘螺消化腺和生殖腺內，呈臘腸型，無領圍，大小為(0.325～1.025) mm×(0.094～0.279) mm。球形的咽大小為(0.017～0.038)mm×(0.015～0.038)mm，其后部有一短小的腸管，大小為(0.009～0.029)mm×(0.007～0.025)mm。生產孔靠近咽部，為肌質性，產孔直徑平均0.019 mm，生產道平均長0.026 mm。 產道壁上有細胞結構。雷蚴體內體內含有10到30個不同發(fā)育階段的尾蚴胚體。

圖1目平外睪吸蟲新種的發(fā)現(xiàn)與鑒定之一

Fig.1DiscoveryandidentificationofExorchismupingensissp.nov.—Ⅰ

1.1目平外睪吸蟲新種梨形成蟲(The pear-shaped adult ofExorchismupingensissp. nov., scale bar=0.1 mm)；

1.2目平外睪吸蟲新種的瓜子形成蟲(The equsi-shaped adult ofExorchismupingensissp. nov. scale bar=0.1 mm)；

1.3目平外睪吸蟲早期成蟲橢圓形個體(The oval early stage adult ofExorchismupingensissp. nov., scale bar=0.1 mm)；

1.4目平外睪吸蟲新種梨形童蟲(The pear-shaped adolescaria ofExorchismupingensissp. nov., scale bar=0.1 mm)；

1.5目平外睪吸蟲新種的瓜子形童蟲(The equsi-shaped adolescaria ofExorchismupingensissp. nov., scale bar=0.1 mm)；

1.6目平外睪吸蟲新種橢圓形童蟲。(The oval adolescaria ofExorchismupingensissp. nov., scale bar=0.1 mm)；

1.7目平外睪吸蟲新種成熟雷蚴，具比咽小的腸囊(The redia ofExorchismupingensissp. nov. with smaller intestinal cyst than the pharynx, scale bar=0.1 mm)；

1.8目平外睪吸蟲新種早期尾蚴胚體(The early stage immature cercaria ofExorchismupingensissp. nov, scale bar=0.1 mm)；

1.9目平外睪吸蟲新種尾蚴胚體(The immature cercaria ofExorchismupingensissp. nov., scale bar=0.1 mm)；

1.10目平外睪吸蟲新種尾蚴(The early stage cercaria ofExorchismupingensissp. nov., scale bar=0.1 mm)。

表1 目平外睪吸蟲新種與本屬其它種主要特征的比較

2.2.3尾蚴 圖1.8、1.9和1.10 由胚球形成的尾蚴胚體，體部中有口吸盤雛形, 數(shù)個穿刺腺的細胞體及在腺管和排泄囊部位出現(xiàn)有規(guī)則排列的顆粒。

尾部較長的未成熟尾蚴, 體內顯現(xiàn)各器官雛形，體前端兩眼點及尾部排泄管的結構也已顯明，穿刺腺細胞可見到7對。

成熟尾蚴有兩個眼點，為具有尾鰭膜的單尾尾蚴，尾蚴體部大小為(0.128～0.221)mm× (0.091～0.164)mm，尾部大小為(0.256～0.406 )mm× (0.033～0.050)mm，尾鰭膜厚度0.015 mm～0.021 mm，體部前端有微小的棘，體兩側后部有感覺毛10根?？谖P直徑0.025 mm～0.038 mm，兩個棕黑色的眼點位于口吸盤的兩側，腹吸盤位于排泄囊前方，略小于口吸盤，直徑0.025 mm～0.038 mm，較不明顯。7對穿刺腺細胞位于腹吸盤前方兩側，腺管兩束在眼點之間向前延伸，至口吸盤后緣時又分為兩小束，內束四條管，外束三條管，繼續(xù)前行終止于口吸盤北緣。排泄囊為圓形，直徑0.015 mm～0.023 mm，排泄管具有很厚的囊壁細胞，長度為0.046 mm～0.062 mm，排泄孔開口于近尾基部，排泄管在尾部約尾長前方1/5.8處分叉。生殖原基細胞位于腹吸盤之下，排泄囊之上。

2.2.4囊蚴和后蚴(圖2.1至2.8)。

感染后12至24 h解剖金魚，在其體部，尾鰭，鰓部均發(fā)現(xiàn)囊蚴，在顯微鏡下可見，蟲體為一層薄膜所包圍，薄膜即為囊壁，此期間囊壁不斷增厚，腹吸盤增大變明顯，排泄囊上皮細胞腫大。

感染后24至60 h所獲得的囊蚴結構與之前的基本相同，區(qū)別在于排泄囊中的圓形棕黑色顆粒越來越多。

感染后3到7 d獲得的囊蚴可見兩個黑色眼點，蟲體兩側有兩個睪丸，口吸盤明顯，在口吸盤下緊接一個咽，但這些結構均處于初步發(fā)育階段，有些不明顯。感染4 d以后可見咽下接一分叉的腸管(食道極短)，直到蟲體的后端。在本吸蟲的囊蚴發(fā)育期，排泄囊的形狀呈V形、倒三角形末端稍伸長短主干Y形及倒三角形短主干Y形，囊內充滿圓形的棕黑色顆粒。至第9d可見儲精囊內充滿活躍的精子，儲精囊體積開始明顯增大。

感染后18到25 d，后蚴兩側睪丸更加明顯，同時可見卵巢、儲精囊、受精囊，排泄囊呈不典型V型。20到25 d的后蚴已經具備上述本吸蟲童蟲的全部結構，大小為(0.154～0.253)mm×(0.139～0.234)mm?？谖P(0.021～0.029)mm×(0.031～0.040)mm , 咽(0.016～0.030)mm×(0.011～0.025)mm, 食道長0.004 mm～0.005 mm, 腸管延伸到體后端。腹吸盤(0.025～0.026)mm×(0.022～0.031)mm。左睪丸(0.043-0.061)mm×(0.027～0.042)mm，右睪丸(0.040～0.047)mm×(0.0276～0.045)mm。卵巢分葉少，大小為(0.023～0.043)mm×(0.029～0.033)mm。儲精囊呈葫蘆狀，下部(0.038～0.046)mm×(0.028～0.044)mm，上部(0.025～0.040)mm×(0.019～0.033)mm。受精囊大小為(0.016～0.030)mm×(0.023～0.044)mm，內部無精子，位于儲精囊的后方，從受精囊的前端引出一細管，通到卵模前方的輸卵管上。

圖2目平外睪吸蟲新種的發(fā)現(xiàn)與鑒定之二

Fig.2DiscoveryandidentificationofExorchismupingensissp.nov.—Ⅱ

2.1目平外睪吸蟲新種囊蚴，感染后24 h囊蚴，排泄囊V形(Metacercaria ofExorchismupingensissp. nov. with v-shaped excretory bladder, 24 hours after infection , scale bar=0.05 mm)；

2.2目平外睪吸蟲新種囊蚴，感染后48 h囊蚴，排泄囊V形(Metacercaria ofExorchismupingensissp. nov. with v-shaped excretory bladder, 48 hours after infection , scale bar=0.05 mm)；

2.3目平外睪吸蟲新種囊蚴，感染后60 h囊蚴，排泄囊2支干細長，主干倒三角形(Metacercaria ofExorchismupingensissp. nov., for 60 hours after infection, the excretory bladder was provided with two long and thin branches and a inverted triangle main trunk., scale bar=0.05 mm)；

2.4目平外睪吸蟲新種囊蚴，感染后4 d(Metacercaria ofExorchismupingensissp. nov., 4 days after infection , scale bar=0.05 mm)；

2.5目平外睪吸蟲新種后蚴，感染后9 d(Excysted metacercaria ofExorchismupingensissp. nov., 9 days after infection , scale bar=0.1 mm)；

2.6目平外睪吸蟲新種后蚴，感染后18 d(Excysted metacercaria ofExorchismupingensissp. nov., 18 days after infection , scale bar=0.1 mm)；

2.7目平外睪吸蟲新種后蚴，感染后25 d(Excysted metacercaria ofExorchismupingensissp. nov., 25 days after infection , scale bar=0.1 mm)；

2.8目平外睪吸蟲新種后蚴，感染后41 d(Excysted metacercaria ofExorchismupingensissp. nov., 41 days after infection , scale bar=0.1 mm)；

感染后30到41 d，后蚴大小為(0.124～0.198)mm×( 0.152～0.178)mm，體內主要結構相同，口吸盤(0.021～0.037)mm×(0.022～0.038)mm，咽(0.008～0.024)mm×( 0.011～0.013)mm，食道長0.001mm～0.002mm，腸管延伸到體后端。腹吸盤(0.016～0032)mm× (0.015～0.028)mm。左睪丸(0.032～0.061)mm× (0.021～0.041)mm，右睪丸(0.029～0.061)mm× (0.017～0.023)mm。卵巢分葉少，大小為(0.018～0.033)mm×(0.019～0.024)mm。儲精囊呈葫蘆狀，下部(0.015～0.035)mm× (0.013～0.025)mm，上部(0.013～0.022)mm× (0.010～0.023)mm。受精囊大小為(0.010～0.021)mm× (0.004～0.020)mm，內部始終為空，且子宮中內未見蟲卵。

3 討 論

動物學者認為排泄系統(tǒng)構造的變化受外界影響較小，其形態(tài)構造的不同可作親緣上區(qū)別的重要標志[1]。外睪吸蟲到目前有4種，它們的排泄囊構造有顯著的差異：卵形外睪吸蟲和多卵黃外睪吸蟲的排泄囊均為V形；葉巢外睪吸蟲的排泄囊為主干寬長的Y形；洞庭湖外睪吸蟲成熟后蚴，尤其童蟲和成蟲的排泄囊二支干呈橢圓形又葉狀，主干縮小成小球狀或小管狀。而本吸蟲的排泄囊在童蟲和成蟲均為不典型的V形，即包括V形和倒三角形短主干Y形。此外，本吸蟲在成蟲和幼蟲期與已經報道的外睪吸蟲還存在諸多明顯的差異見表1，故鑒定為新種，命名為目平外睪吸蟲Exorchismupingensissp. nov., 2011。

參考文獻：

[1]Tang CT, Tang ZZ. Trematology in China[M]. Fujian: Fujian Science and Technology Publishing House, 2005: 378-379. (in Chinese)

唐崇惕, 唐仲璋. 中國吸蟲學[M]. 福建: 福建科學技術出版社, 2005: 378-379.

[2]Kobayashi H. On some digenetic trematodes in Japan[J]. Parasitology, 1920, 12(4): 380-410.

[3]Pan JP. The study on theCryptogonimidaeCiureain China, comprising four new species in a new genus[M]. In: The collected papers on Chinese freshwater fishes. Beijing: Agricultural Publishing House, 1984: 115-124. (in Chinese)

潘金培. 中國隱殖科吸蟲CryptogonimidaeCiurea的研究：包括一新屬四新種的描述[M]. 中國淡水魚類論文集. 北京: 農業(yè)出版社, 1984. 115-124.

[4]Cao H. Two new species of trematodes of fishes from coastal area of Fujian, China[J]. Acta Zootaxonomica Sinica, 1990, 15(2): 144-147. (in Chinese)

曹華. 福建沿海魚類吸蟲二新種[J]. 動物分類學報, 1990, 15(2): 144-147.

[5]Zhang RL, Zuo JZ, Liu BX, et al. Description ofExorchisdongtinghuensissp.nov.and it’s life cycle[J]. Acta Zoologica Sinica, 1993, 39(2): 124-129. (in Chinese)

張仁利, 左家錚, 劉柏香, 等. 洞庭湖外睪吸蟲新種及其生活史[J]. 動物學報, 1993, 39(2): 124-129.

[6]Tang CT, Lu MK, Guo Y, et al. Development of larvalSchistosomajaponicumblocked inOncomelaniahupensisby pre-infection with larvalExorchissp[J]. J Parasitol, 2009, 95(6): 1321-1325. DOI:10.1645/GE-2055.1

[7]Tang CT, Lu MK, Guo Y, et al. Comparison between the developments of larvalSchistosomajaponicuminOncomelaniahupensiswith and without pre-infection by larvalExorchis[J]. Chin J Zoonoses, 2009, 25(12): 1120-1134. (in Chinese)

唐崇惕, 盧明科, 郭躍, 等. 日本血吸蟲幼蟲在釘螺及外睪吸蟲釘螺發(fā)育的比較[J]. 中國人獸共患病學報, 2009, 25(12): 1120-1134.

[8]Tang CT, Lu MK, Guo Y, et al. Reactions of snail secretions and lymphocytes toSchistosomajaponicumlarvae inOncomelaniahupensispre-infected withExorchistrematode[J]. Chin J Zoonoses, 2010, 26(11): 989-994. (in Chinese)

唐崇惕, 盧明科, 郭躍, 等. 日本血吸蟲幼蟲在先感染外睪吸蟲后不同時間釘螺體內被生物控制效果的比較[J]. 中國人獸共患病學報, 2010, 26(11): 989-994.