■ 肖長(zhǎng)峰 朱明芬 潘雪男 盧永紅

(1.上海市農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧獸醫(yī)研究所，上海201106;2.上海市農(nóng)業(yè)科學(xué)院莊行綜合試驗(yàn)站，上海201415)

霉菌是一類真菌，含有菌絲狀結(jié)構(gòu)(絲狀或線狀)，或者形成孢子體。在水分高于12%、溫度為25～30℃、濕度達(dá)到80%、通風(fēng)有氧以及較長(zhǎng)的儲(chǔ)存期等適宜環(huán)境下，霉菌就會(huì)生長(zhǎng)繁殖，并產(chǎn)生霉菌毒素[1]。

霉菌毒素種類多達(dá)數(shù)百種，飼料中常見(jiàn)的霉菌毒素主要有黃曲霉毒素B1(AFB1)、玉米赤霉烯酮(ZEN)、嘔吐毒素(DON)、T-2毒素、煙曲霉毒素(FUM)、赭曲霉毒素 A(OTA)等[2-3]。

谷物等飼料原料在田間、收獲、儲(chǔ)藏、加工等諸多環(huán)節(jié)均可受到霉菌感染，因此飼料受霉菌毒素污染的現(xiàn)象十分普遍，導(dǎo)致畜禽死亡、生產(chǎn)力下降、繁殖機(jī)能障礙等畜禽霉菌毒素中毒事件屢有發(fā)生。同時(shí)，霉菌毒素在畜禽產(chǎn)品中殘留，給人類健康帶來(lái)極大的安全隱患。因此，防止霉菌生長(zhǎng)，去除霉菌毒素成為國(guó)內(nèi)外研究的熱點(diǎn)。

1 飼料中霉菌毒素污染現(xiàn)狀

美國(guó)食品和農(nóng)業(yè)組織(FAO)估測(cè)顯示，全球大約有25%的谷物受到霉菌毒素的污染。Bara(2008)[4]調(diào)查發(fā)現(xiàn)，75%的谷物和53%的玉米結(jié)塊樣品檢出AFB1；雛雞、青年期和產(chǎn)蛋期雞飼料AFB1檢出率分別為60%、46%和37%。陳心儀(2011)[5]采集全國(guó)18個(gè)省(市)的飼料原料、配合飼料等共計(jì)171份，使用酶聯(lián)免疫法測(cè)定樣品中AFB1、OTA、T-2、ZEN、FUM及DON含量，發(fā)現(xiàn)6種霉菌毒素檢出率均為100%。王金勇等（2013）[6]抽取全國(guó)各地841份飼料和原料樣品檢測(cè)，結(jié)果顯示豬料、禽料中DON、FUM和ZEN污染較為嚴(yán)重，AFB1和OTA污染程度較低；奶牛精料中DON、FUM和ZEN陽(yáng)性檢出率較高，OTA較低；水產(chǎn)料中DON污染比較嚴(yán)重。此外，如小麥、玉米、麩皮、餅粕等飼料原料都受霉菌毒素污染較為嚴(yán)重，而且不同原料所受霉菌毒素污染的種類也不同，不同產(chǎn)區(qū)的污染程度差異很大。王政等(2013)[7]對(duì)上海浦東地區(qū)飼料及原料的調(diào)查顯示，本地區(qū)霉菌毒素污染主要以DON、OTA和ZEN為主，同時(shí)被2～3種霉菌毒素污染的樣品達(dá)到65.02%。

2 霉菌毒素對(duì)畜牧業(yè)的影響

2.1 對(duì)飼料營(yíng)養(yǎng)價(jià)值的影響

飼料被霉菌污染后，在適宜條件下，霉菌大量繁殖并產(chǎn)生霉菌毒素；霉菌會(huì)消耗有價(jià)值的飼料養(yǎng)分，如維生素和氨基酸，并將能量轉(zhuǎn)化為水和CO2。霉菌可消耗飼料或谷物中的碳水化合物，導(dǎo)致飼料和谷物溫度升高[1]。飼料霉變后會(huì)降低飼料的營(yíng)養(yǎng)素含量，影響適口性，導(dǎo)致動(dòng)物采食量下降，嚴(yán)重者甚至完全喪失營(yíng)養(yǎng)價(jià)值。

2.2 對(duì)動(dòng)物免疫機(jī)能的影響

霉菌飼料對(duì)動(dòng)物具有很強(qiáng)的毒副作用。動(dòng)物一次性攝入含有大量霉菌毒素的飼料會(huì)急性中毒，且多為急性肝壞死。攝入低含量的霉菌毒素也會(huì)導(dǎo)致畜禽生長(zhǎng)受阻，免疫機(jī)能降低，繁殖性能下降，長(zhǎng)期少量攝入則會(huì)引發(fā)慢性中毒或癌變。Betina(1984)[3]研究表明，AFB1可引起火雞、肉雞、豬、小白鼠、豚鼠及家兔等動(dòng)物發(fā)生免疫抑制，它能與DNA、RNA結(jié)合，并抑制其合成，引起胸腺發(fā)育不良和萎縮，淋巴細(xì)胞生成減少；影響肝臟和巨噬細(xì)胞的功能，抑制補(bǔ)體C4的產(chǎn)生，抑制T淋巴細(xì)胞產(chǎn)生白細(xì)胞介素及其它淋巴因子；能通過(guò)胎盤(pán)影響胎兒組織器官的發(fā)育。Muller等(1999)[8]研究表明，免疫系統(tǒng)對(duì)OTA的敏感性遠(yuǎn)高于其他器官，是較強(qiáng)的免疫抑制物。Haubeck等(1981)[9]研究表明，5 ng/kg體重的OTA就會(huì)抑制小鼠的免疫反應(yīng)。Muller等(1995)[10]報(bào)道，OTA能引起B(yǎng)淋巴細(xì)胞和T淋巴細(xì)胞介導(dǎo)的免疫反應(yīng)的抑制。對(duì)于體液免疫，OTA能導(dǎo)致IgG、IgA、IgM免疫球蛋白的衰退。

2.3 對(duì)動(dòng)物生產(chǎn)性能的影響

Southern等(1979)[11]給育成豬飼喂含有不同水平(0.02、0.385、0.75、1.48 mg/kg)AFB1的飼糧，當(dāng)AFB1含量在0.385 mg/kg以上時(shí)，平均日增重隨濃度的升高呈線性降低。豬對(duì)DON很敏感，豬攝入0.5 mg/kg體重的DON，5～7 min后即可開(kāi)始嘔吐。當(dāng)飼料中含有1 mg/kg以上的DON時(shí)可引起豬生長(zhǎng)緩慢，采食量顯著下降，飼料攝入量降低與飼料中DON濃度升高呈線性關(guān)系[12]。Glavitis等(1995)[13]研究表明，妊娠母豬采食含ZEN的日糧會(huì)導(dǎo)致死胎、木乃伊胎、流產(chǎn)或新生仔豬死亡，以及產(chǎn)后發(fā)情不正常。Garlich等(1973)[14]研究發(fā)現(xiàn)，AFB1中毒會(huì)導(dǎo)致蛋雞的產(chǎn)蛋量和蛋重的降低，且存在延遲性效應(yīng)。Iqbal等(1983)[15]飼喂白來(lái)航母雞不同水平的AFB1(3個(gè)周期，每個(gè)周期28 d)，飼喂含量達(dá)到2 mg/kg時(shí)，蛋雞的飼料效率下降。Wash?burn等(1985)[16]研究報(bào)道，飼喂蛋雞含AFB15 mg/kg日糧的3周對(duì)蛋殼強(qiáng)度無(wú)不利影響，但蛋重顯著降低。Ogido等(2004)[17]研究報(bào)道，日本鵪鶉飼喂采食含AFB150 μg/kg的飼料140 d，飼料消耗增加，而蛋重下降。Cotter等(1997)[18]研究報(bào)道，肉種雞母雞飼喂含AFB1的日糧可使其孵化率下降。Mohan等(2008)[19]研究報(bào)道，對(duì)未成年的公雞每天每只飼喂AFB1200 μg，連續(xù)35 d，對(duì)睪丸生殖上皮造成了不良影響。

2.4 對(duì)畜禽肉蛋品質(zhì)的影響

Fink(1989)[20]報(bào)道，由于AFB1和OTA代謝較慢，在肉中的檢出率較高，而單端孢霉烯很快代謝，基本沒(méi)有殘留，只有在很高的濃度時(shí)才會(huì)在肉和奶中出現(xiàn)殘留。Trucksess等(1983)[21]在飼喂污染飼料的母雞所產(chǎn)的雞蛋中檢測(cè)到AFB1，去除污染飼料7 d后僅有痕量存在于蛋中；同時(shí)發(fā)現(xiàn)AFB1在腎臟、肝臟、肌肉、血液和卵巢等機(jī)體組織中均存在。Zaghini等(2005)[22]研究報(bào)道，對(duì)產(chǎn)蛋母雞飼喂AFB1含量為2.5 mg/kg的飼料4周，蛋重和蛋殼重降低，蛋清中蛋白質(zhì)含量升高。Madsen等(1982)[23]研究發(fā)現(xiàn)，存在OTA由飼料向肉中轉(zhuǎn)移的現(xiàn)象。

3 霉菌毒素的防治措施

3.1 霉菌毒素的預(yù)防

谷物在收獲、儲(chǔ)存、運(yùn)輸、飼料配制過(guò)程和加工后的調(diào)質(zhì)中的任一階段均可引發(fā)霉菌污染。霉菌在適宜條件下即可生長(zhǎng)繁殖，因此加強(qiáng)飼料的各個(gè)環(huán)節(jié)的監(jiān)管尤為重要。霉菌的生長(zhǎng)繁殖條件主要有溫度、濕度、氧氣、水分和pH值環(huán)境等。防止霉變的主要措施應(yīng)從破壞霉菌的生長(zhǎng)條件著手，以達(dá)到抑制霉菌生長(zhǎng)的目的[24]。首先谷物收割要選擇合適的時(shí)間，嚴(yán)禁陰雨天氣收割，并且要減少收割過(guò)程中對(duì)谷物的損傷，保證原料的完整性。飼料的儲(chǔ)藏過(guò)程中，保證飼料倉(cāng)庫(kù)及加工設(shè)備干凈且無(wú)污染，保持倉(cāng)庫(kù)低溫、通風(fēng)干燥。另外，飼料在加工過(guò)程中(制粒等)易出現(xiàn)升溫現(xiàn)象，因此，必須先進(jìn)行冷卻處理后再包裝和儲(chǔ)存。要定期查看并檢測(cè)飼料，確保早發(fā)現(xiàn)并及時(shí)采取補(bǔ)救措施，防患于未然。

3.2 物理過(guò)篩法

姜淼等(2013)[25]研究發(fā)現(xiàn)，物理過(guò)篩可有效去除含霉菌毒素多的破碎粒和雜質(zhì)，從而降低玉米原料中DON、ZEN和AFB1的含量。在實(shí)際飼料生產(chǎn)中采用物理過(guò)篩法可有效降低玉米原料中霉菌毒素的含量，減少家畜感染疾病的風(fēng)險(xiǎn)。

3.3 物理法

物理法主要是利用霉菌毒素吸附劑吸附霉菌毒素，常用的吸附劑主要有活性炭、硅鋁酸鹽類和甘露聚糖等。飼料中添加5%的膨潤(rùn)土(硅鋁酸鹽類)可消除由T-2毒素引起的動(dòng)物生長(zhǎng)抑制和拒飼現(xiàn)象[26]。在日糧中添加0.5%的水合鋁硅酸鈉鈣可顯著減輕AFB1(含量為7.5 mg/kg)對(duì)蛋雞及肉仔雞的毒害作用[27]。在AFB1含量為922 μg/kg的日糧中添加1%的黏土(鈉基膨潤(rùn)土)可減輕黃曲霉毒素對(duì)斷奶仔豬及生長(zhǎng)豬生長(zhǎng)及礦物質(zhì)代謝的不良影響[28]。在AFB1含量分別為500 μg/kg和800 μg/kg的日糧中添加0.5%的黏土可明顯減輕黃曲霉毒素對(duì)斷奶仔豬的不良作用。但黏土類型不同，其抗毒效果也不同[29]。齊娟等(2012)[30]對(duì)不同酯化葡甘露聚糖體(EGM)外吸附霉菌毒素能力的比較研究發(fā)現(xiàn)，磷酸化EGM1號(hào)對(duì)AFB1、DON、ZEN、FB1的吸附力分別為400.30、182.64、398.19、356.45 μg/g，極顯著高于其他各處理，并優(yōu)于進(jìn)口產(chǎn)品。

活性炭對(duì)霉菌毒素的吸附能力很強(qiáng)，但其選擇吸附能力較差，容易被飼料中的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)占據(jù)吸附位點(diǎn)而失去對(duì)霉菌毒素的吸附能力，且占用飼料容積大，實(shí)用性不強(qiáng)。

3.4 化學(xué)法

化學(xué)法去除霉菌毒素主要是利用氫氧化鈣、單乙胺、臭氧或氨等化學(xué)物質(zhì)對(duì)霉菌毒素的破壞作用。目前國(guó)外廣泛應(yīng)用氨的化合物去除飼料中黃曲霉毒素。但是某種化學(xué)物質(zhì)只能對(duì)某種毒素有效而對(duì)其他毒素不能降解，并且在飼料中的殘留量很高，從而影響飼料的適口性和安全性，易對(duì)動(dòng)物產(chǎn)生不利影響[31-32]。

3.5 生物酶法

由于常規(guī)吸附法、化學(xué)法等均存在某些缺陷，因此高效、專一并對(duì)飼料和環(huán)境不造成污染的生物酶法成為近年的新熱點(diǎn)。暨南大學(xué)微生物技術(shù)研究所的姚冬生教授等發(fā)現(xiàn)并分離出了AFB1解毒酶(又稱AFB1分解酶)，相關(guān)產(chǎn)品“飼用AFB1分解酶”獲得農(nóng)業(yè)部頒布的飼料和飼料添加劑新產(chǎn)品證書(shū)。曹紅等(2010)[33]在含有AFB1的嶺南黃肉仔雞日糧中添加AFB1解毒酶后，通過(guò)肉仔雞的生長(zhǎng)性能和血清指標(biāo)的測(cè)定及對(duì)肝臟組織切片的觀察發(fā)現(xiàn)，AFB1解毒酶能一定程度地改善肉仔雞的平均日采食量、日增重和末重以及血清學(xué)指標(biāo)，并能顯著降低毒素在肝臟和血液中的殘留，減弱毒素對(duì)肝臟的損傷。

隨著研究的不斷深入，更多的霉菌毒素解毒酶將被研制并應(yīng)用到畜牧業(yè)中，而逐漸取代傳統(tǒng)的脫毒法。

4 小結(jié)

飼料霉菌毒素污染不僅導(dǎo)致飼料適口性下降和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)損失，而且導(dǎo)致動(dòng)物的免疫抑制和生產(chǎn)性能下降甚至死亡，嚴(yán)重影響畜牧業(yè)的健康發(fā)展。更為嚴(yán)重的是，由于飼料霉菌毒素在畜產(chǎn)品中殘留而轉(zhuǎn)移至人體，對(duì)人類健康帶來(lái)嚴(yán)重危害。因此，飼料霉菌毒素的預(yù)防、脫毒技術(shù)和產(chǎn)品的研究十分迫切。