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        食管鱗狀細(xì)胞癌中VEGF 、P53及Ki-67的表達(dá)及臨床意義

        2014-04-04 16:11:59劉漢忠楊繼洲何慧華
        實用癌癥雜志 2014年4期
        關(guān)鍵詞:鱗狀膠質(zhì)瘤食管癌

        劉漢忠 楊繼洲 肖 蘭 何慧華 王 嵐

        本研究采用免疫組化SP法對43例食管鱗狀細(xì)胞癌和20例食管癌旁組織中VEGF、P53和Ki-67的表達(dá)進(jìn)行檢測,現(xiàn)探討其臨床意義。

        1 資料與方法

        1.1 一般資料

        收集2010年1月-2012年12月活檢食管鱗狀細(xì)胞癌資料完整標(biāo)本43例,其中男性34例,女性9例;患者年齡30~78歲,平均62.5歲。腫瘤分為Ⅰ級(高分化)5例,Ⅱ級(中分化)18例,Ⅲ級(低分化)20例。對照組為食管癌旁組織20例,其中男性15例,女性5例。所有標(biāo)本均用10%中性福爾馬林固定,常規(guī)脫水、石蠟包埋,切片厚度為4 μm,行HE染色,光鏡診斷。

        1.2 免疫組織化學(xué)染色方法

        采用SP法。VEGF、P53和Ki-67工作稀釋度為1∶100,均采用0.01 mol/L枸櫞酸鈉緩沖液(pH6.0)高壓鍋熱修復(fù)方法進(jìn)行抗原修復(fù),過氧化氫(H2O2)封閉后滴加一抗,4 ℃過夜,滴加二抗37 ℃孵育30 min,最后DAB顯色、蘇木精復(fù)染、封片。用已知陽性標(biāo)本作為陽性對照,PBS代替一抗為空白對照。SP試劑盒及VEGF、P53和Ki-67單克隆抗體均購自福州邁新生物技術(shù)有限公司。

        1.3 結(jié)果判定

        VEGF以胞質(zhì)呈棕黃色為陽性。P53蛋白及Ki-67蛋白均定位于細(xì)胞核。陽性染色指顯微鏡下觀察細(xì)胞內(nèi)具有清晰可見定位準(zhǔn)確的黃色、棕黃色或棕褐色顆粒,而且背景清晰。由3位病理醫(yī)生對免疫組化染色進(jìn)行評價,在400倍視野下任意選擇5個視野,每個視野計數(shù)200個細(xì)胞,共計數(shù)1 000個細(xì)胞,計算每張切片陽性細(xì)胞百分率。按陽性細(xì)胞占腫瘤細(xì)胞的比例,分為陰性(-)、弱陽性(+),中度陽性(++)、弱陽性(+++)。

        1.4 統(tǒng)計學(xué)方法

        采用SPSS 13.0統(tǒng)計軟件,P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

        2 結(jié)果

        2.1 VEGF、P53及Ki-67在食管組織中的表達(dá)

        VEGF、P53及Ki-67在食管癌中的陽性表達(dá)率分別為:90.7%(39/43)、88.4%(38/43)、100.0%(43/43),VEGF、P53及Ki-67在癌旁組織中的表達(dá)陽性率分別為:20.0%(4/20)、15.0%(3/20)、5.0%(1/20),兩者比較差異均有顯著性(χ2=31.49、32.34、58.49,P均<0.01)。

        2.2 VEGF、P53及Ki-67表達(dá)強(qiáng)弱與癌組織分化程度的關(guān)系

        VEGF在食管癌中的陽性表達(dá)中(+)3例、(++)17例、(+++)19例,經(jīng)統(tǒng)計學(xué)分析發(fā)現(xiàn)VEGF表達(dá)強(qiáng)弱與癌組織分化程度(γ=0.945,P<0.05)呈正相關(guān)。P53在食管癌中的陽性表達(dá)中(+)4例、(++)13例、(+++)21例,經(jīng)統(tǒng)計學(xué)分析發(fā)現(xiàn)P53表達(dá)強(qiáng)弱與癌組織分化程度(γ=0.963,P<0.05)呈正相關(guān)。Ki-67在食管癌中的陽性表達(dá)率為100.0%,其中(+)5例、(++)16例、(+++)22例,經(jīng)統(tǒng)計學(xué)分析發(fā)現(xiàn)Ki-67 表達(dá)強(qiáng)弱與癌組織分化程度(γ=0.986,P<0.01)呈正相關(guān)。

        3 討論

        血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子(VEGF)是目前已知的活性最強(qiáng)、專屬性最高的血管生成因子,在腫瘤血管形成中處于核心地位,其表達(dá)與多種腫瘤的臨床病理特征和預(yù)后密切相關(guān)。本研究觀察組VEGF陽性表達(dá)率顯著高于對照組,且癌組織的分化程度越低,其表達(dá)強(qiáng)度越高,提示VEGF在食管鱗狀細(xì)胞癌的血管生成中起重要作用。

        腫瘤抑制基因P53 與人類惡性腫瘤相關(guān)性很高。已經(jīng)發(fā)現(xiàn)[1],相當(dāng)高比例的食管癌P53突變和(或)過表達(dá),從而認(rèn)為在食管癌的發(fā)生過程中,P53異常是一種常見的遺傳事件,同時也是因為P53異常出現(xiàn)在早期和癌前病變。本研究發(fā)現(xiàn)在癌旁組織中有3例有表達(dá),細(xì)胞存在異型性,表達(dá)組織與癌組織接近,因此P53檢測可以發(fā)現(xiàn)早期癌和癌前病變。

        Ki-67是細(xì)胞核內(nèi)與細(xì)胞分裂及增殖相關(guān)的核蛋白,其表達(dá)與細(xì)胞增殖狀態(tài)高度相關(guān),是反映細(xì)胞增殖活性的敏感指標(biāo),細(xì)胞增殖是腫瘤生長的前提,腫瘤細(xì)胞增生是否活躍直接影響著臨床治療與預(yù)后[2]。本研究食管癌中Ki-67陽性表達(dá)率為100.0%,明顯高于癌旁組織,而且癌組織分化程度越低,其表達(dá)強(qiáng)度越高,提示Ki-67蛋白標(biāo)記可作為判斷食管鱗狀細(xì)胞癌的分化程度依據(jù),并為評估其預(yù)后提供參考。

        有學(xué)者研究發(fā)現(xiàn)P53蛋白和Ki-67在結(jié)直腸癌中的表達(dá)明顯升高,可作為判斷結(jié)直腸癌惡性程度及預(yù)后的重要參考指標(biāo)[3],腦膠質(zhì)瘤中Ki-67及P53的陽性表達(dá)率與其惡性度相關(guān),均可作為判斷膠質(zhì)瘤惡性程度的指標(biāo)[4]。本研究發(fā)現(xiàn)P53和Ki-67的陽性表達(dá)與食管鱗狀細(xì)胞癌的分化程度相關(guān),可作為判斷食管癌惡性程度的指標(biāo),并為評估其預(yù)后提供參考。關(guān)于不同病理分化程度的食管鱗狀細(xì)胞癌組織中VEGF、P53和Ki-67陽性表達(dá)率有無相關(guān)性,由于本研究組組病例過少,未進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析,有待積累病例進(jìn)一步探討。總之,VEGF、P53、Ki-67在食管鱗狀細(xì)胞癌的發(fā)生、發(fā)展及轉(zhuǎn)移中扮演著重要角色。

        [1] Rosai J著,回允中主譯.ROSAI&ACKERMAN外科病理學(xué)〔M〕.第9版.北京:北京大學(xué)醫(yī)學(xué)出版社,2006:627.

        [2] 常 英,劉貴生,張 軍,等.組織芯片研究胃食管黏膜病變中Ki-67和C-erbB-2的表達(dá)及意義〔J〕.世界華人消化雜志,2008,15(11):1184-1189.

        [3] 葉 斌,王西川,雷 蕾,等.p53和Ki67在結(jié)直腸癌中的表達(dá)及其臨床意義〔J〕.實用癌癥雜志,2013,28(1):42-44.

        [4] 周開甲,張 鳴,劉伯偉,等.Ki-67、p53在腦膠質(zhì)瘤中的表達(dá)及意義〔J〕.實用癌癥雜志,2012,27(6):572-573.

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