陳旭斌 綜述，陳 坤，張鐵柱 審校

(廣東醫(yī)學(xué)院，廣東 湛江 524001)

VEGF與口腔鱗狀細(xì)胞癌侵襲轉(zhuǎn)移相關(guān)性的研究進(jìn)展

陳旭斌 綜述，陳 坤，張鐵柱 審校

(廣東醫(yī)學(xué)院，廣東 湛江 524001)

口腔鱗狀細(xì)胞癌是頭頸部較常見的惡性腫瘤，其侵襲性生長及早期頸淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移特性使其預(yù)后較差。血管生成與腫瘤浸潤及轉(zhuǎn)移關(guān)系密切，血管內(nèi)皮生長因子是特異性誘導(dǎo)新生血管形成的細(xì)胞因子，不僅促進(jìn)腫瘤血管生成，還可誘導(dǎo)腫瘤淋巴管形成。近年來，關(guān)于VEGF參與口腔鱗狀細(xì)胞癌侵襲與轉(zhuǎn)移的研究備受關(guān)注，本文對此做一綜述。

OSCC；VEGF；浸襲；轉(zhuǎn)移

口腔癌是口腔頜面部常見的惡性腫瘤，其病理類型95%以上為鱗狀細(xì)胞癌?？谇击[狀細(xì)胞癌(Oral squamous cell carcinoma，OSCC)的生物學(xué)特性主要表現(xiàn)為局部浸潤性生長及頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，而侵襲轉(zhuǎn)移是導(dǎo)致惡性腫瘤患者死亡的主要原因，雖然人類在分子生物學(xué)、放化療及手術(shù)方面取得了長足進(jìn)步，但幾十年來OSCC的五年生存率仍低于50%[1]。目前，對細(xì)胞內(nèi)皮生長因子及其受體的結(jié)構(gòu)特點和生物學(xué)特性的研究證實了VEGF(Vascular endothelial growth factor，VEGF)可以增加微血管通透性，促進(jìn)血管內(nèi)皮細(xì)胞分裂及增殖，參與腫瘤血管和淋巴管的形成。可以說，VEGF與腫瘤生長、侵襲與轉(zhuǎn)移關(guān)系密切。

1 VEGF的研究進(jìn)展

VEGF是1989年Ferrara等[2]從牛垂體濾泡星狀細(xì)胞的體外培養(yǎng)液中首先純化出來的一種能選擇性促進(jìn)血管內(nèi)皮細(xì)胞分裂的蛋白質(zhì)并命名。編碼人VEGF的基因長約14 kb，由8個外顯子和7個內(nèi)含子交替構(gòu)成，屬血小板源生長因子家族。己知的VEGF家族由7個成員組成：VEGF-A、VEGF-B、VEGF-C、VEGF-D、VEGF-E、VEGF-F以及胎盤生長因子(PIGF)，人VEGF-A的基因位于染色體的6p21，3，其具有增加血管通透性，促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞增殖，促進(jìn)血管生成的功能，被認(rèn)為是影響血管生成最有力的因素。VEGF-C又稱相關(guān)蛋白，其基因位于染色體4q34，對淋巴管增生的誘導(dǎo)及對淋巴細(xì)胞內(nèi)皮進(jìn)行有效的調(diào)節(jié)，因此，VEGF-C與腫瘤轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。VEGF-D基因位于染色體Xp22，23，其結(jié)構(gòu)和表達(dá)部位與VEGF-C類似，具有促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞遷移的作用。VEGF-E和VEGF-F是兩種外源性血管內(nèi)皮生長因子，VEGF-E也被稱為病毒血管內(nèi)皮生長因子，VEGF-F是從蛇毒中發(fā)現(xiàn)的血管生長因子。其中VEGF-A通過與受體VEGFR-1、VEGFR-2結(jié)合主要作用促進(jìn)血管生成和增加血管通透性，而VEGF-C、VEGF-D與VEGFR-3結(jié)合主要是調(diào)節(jié)淋巴管的形成。

2 VEGF與腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移的關(guān)系

侵襲轉(zhuǎn)移是惡性腫瘤獨(dú)特的生物學(xué)特性，是一個多因素、多步驟、多基因參與的復(fù)雜過程，而新生的血管和淋巴管是惡性腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移的前提及基礎(chǔ)，實體瘤的生長分為無血管侵襲前期及血管化侵襲生長期，當(dāng)實體瘤直徑大于3 mm時，其中心部位生長需要血管供應(yīng)氧及營養(yǎng)物質(zhì)，VEGF及其受體表達(dá)可促進(jìn)新生血管形成，為腫瘤的生長、增殖、浸潤及轉(zhuǎn)移提供基礎(chǔ)。

2.1 VEGF-A與腫瘤相關(guān)研究 VEGF-A可以與血管內(nèi)皮細(xì)胞受體進(jìn)行特異性的結(jié)合，進(jìn)而促進(jìn)血管內(nèi)皮細(xì)胞進(jìn)行有絲分裂，導(dǎo)致內(nèi)皮細(xì)胞大量增生，逐漸形成了血管雛形，最后形成新的血管；同時VEGF-A對微血管的作用表現(xiàn)在能夠增強(qiáng)其滲透性，血管滲透性增高后可導(dǎo)致血液成分的外漏，可改變了腫瘤組織周圍的環(huán)境，為其侵襲轉(zhuǎn)移打下“物質(zhì)”基礎(chǔ)。Salajegheh等[3]研究證實VEGF-A與VEGF-C可促進(jìn)甲狀腺癌新的血管及淋巴管形成，并發(fā)現(xiàn)VEGF-A與VEGF-C同其病理分級及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移程度有關(guān)；唐智等[4]研究發(fā)現(xiàn)VEGF的表達(dá)與鼻腔鼻竇鱗狀細(xì)胞癌的侵犯范圍、組織學(xué)分級和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)，并發(fā)現(xiàn)VEGF和腫瘤微血管密度(MVD)可以用來評估鼻腔鼻竇鱗狀細(xì)胞癌的進(jìn)展和預(yù)后；Imai等[5]通過實驗證明轉(zhuǎn)染的脫氧核苷酸(ODNs)可與低氧誘導(dǎo)因子(HIF-1)結(jié)合，通過減低VEGF的生成從而有效調(diào)控腫瘤的生長及侵襲轉(zhuǎn)移。

2.2 VEGFCC及VEGF-D與腫瘤相關(guān)研究 目前研究認(rèn)為腫瘤組織周圍淋巴管是為腫瘤細(xì)胞提供浸潤和轉(zhuǎn)移的直接通道，VEGF-C或VEGF-D與其位于淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞上的酪氨酸激酶受體VEGFR-3結(jié)合后，通過一系列復(fù)雜的細(xì)胞內(nèi)信號傳遞，最終引起淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞增殖和淋巴管生成。Xie等[6]對人類腫瘤組織的臨床研究發(fā)現(xiàn)，VEGF-C或VEGF-D表達(dá)水平與腫瘤患者淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和不良預(yù)后相關(guān)；杜日昌等[7]對甲狀腺乳頭狀瘤(PTC)研究證實VEGF-C在有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者比無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者表達(dá)更高，說明VEGF-C與PTC淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)，發(fā)現(xiàn)VEGF-C還與PTC的MVD相關(guān)，說明VEGF-C亦參與了腫瘤的血管的生成，可能通過促進(jìn)脈管生成引起腫瘤淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移。

3 VEGF與OSCC侵襲轉(zhuǎn)移的關(guān)系

OSCC主要生物學(xué)行為特點為浸潤性生長，破壞相鄰組織結(jié)構(gòu)，易局部復(fù)發(fā)和早期頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移。OSCC侵襲轉(zhuǎn)移的差異除受其組織及解剖結(jié)構(gòu)不同影響外主要受VEGF的調(diào)控，VEGF是一個多功能的細(xì)胞因子，能夠刺激內(nèi)皮細(xì)胞的遷移和分裂，改變它們的基因表達(dá)模式，促進(jìn)血管形成，并抑制細(xì)胞的凋亡和衰老。

3.1 VEGF單因素影響OSCC侵襲轉(zhuǎn)移的研究 金曉明等[8]研究發(fā)現(xiàn)VEGF可使OSCC細(xì)胞穿透硝酸纖維素膜基質(zhì)的能力增強(qiáng)，同時VEGF可以降低OSCC細(xì)胞彼此間同質(zhì)性粘附，能夠誘導(dǎo)OSCC細(xì)胞的侵襲能力增強(qiáng)。馮正虎等[9]以D2-40作為淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞標(biāo)志物，檢測OSCC組織中淋巴管生成情況，結(jié)果顯示OSCC組織淋巴管主要分布于腫瘤邊緣區(qū)(腫瘤間質(zhì))，呈不同程度的擴(kuò)張狀態(tài)，淋巴管密度明顯高于正常組織，且淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移陽性組的淋巴管密度較無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者明顯增加，從而證明VEGF-C與OSCC的侵襲轉(zhuǎn)移有關(guān)；同時Jaiswal等[10]通過ELISA實驗研究OSCC組織和血清中VEGF的水平，發(fā)現(xiàn)VEGF與OSCC的TNM分期及病理分級有關(guān)，因而認(rèn)為VEGF與OSCC的侵襲轉(zhuǎn)移有關(guān)。

3.2 VEGF多因素影響OSCC侵襲轉(zhuǎn)移的研究 有研究證明VEGF-C與環(huán)加氧酶-2(COX-2)可誘導(dǎo)OSCC的周圍淋巴結(jié)生成，呈正相關(guān)，并促進(jìn)其頸部淋巴結(jié)的轉(zhuǎn)移[11]；而Li等[12]認(rèn)為血管生成素-2 (Ang-2)及VEGFR-3是血管生成與淋巴管生成的主要調(diào)控者，與OSCC侵襲轉(zhuǎn)移密切相關(guān)；Kammerer等[13]研究發(fā)現(xiàn)，VEGF的單核苷酸多態(tài)性(SNP)+936 Tallele與-2578 C/A單獨(dú)或與其他SNPs一起可調(diào)控OSCC的進(jìn)展，影響OSCC的侵襲轉(zhuǎn)移；胡振宇[14]研究證實組織蛋白酶D(Cath-D)能促進(jìn)VEGF-C和VEGF-D的表達(dá)，促進(jìn)淋巴管的生成，進(jìn)而促進(jìn)OSCC的轉(zhuǎn)移。Nakazato等[15]用RT-PCR技術(shù)檢測VEGFs在OSCC細(xì)胞系(HSC-2，HSC-3，HSC-4及OSC-19)中的表達(dá)情況，結(jié)果發(fā)現(xiàn)VEGF-A及VEGF-C在HSC-2和OSC-19兩個OSCC細(xì)胞系中的表達(dá)高于其他細(xì)胞系，并發(fā)生周圍淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移。

3.3 抑制VEGF及血管形成在OSCC治療中的作用 VEGF及VEGFR在腫瘤新生血管生成及淋巴管形成過程中起主導(dǎo)作用，已有多項研究表明VEGF的遺傳多樣性可以用作抗-VEGF治療的潛在的預(yù)測性的生物標(biāo)志物[16-18]。有學(xué)者通過口腔癌的動物模型發(fā)現(xiàn)，以VEGF為靶因子的抗血管生成的基因治療具有顯著的抗腫瘤細(xì)胞增殖和抑制腫瘤血管生成的效果[18]；Harada等[17]通過細(xì)胞和動物實驗發(fā)現(xiàn)千金藤素可以通過抑制促血管生長的VEGF和白介素8 (IL8)的表達(dá)來抑制口腔鱗狀細(xì)胞癌的生長及其新血管生成；Li[19]通過抑制血管生成的關(guān)鍵步驟來研究VEGF2受體分子的抗癌效果，他們認(rèn)為通過分子靶向腫瘤脈管系統(tǒng)，VEGF2受體分子可提高腫瘤細(xì)胞對放射線的敏感度。Kang等[20]研究認(rèn)為組蛋白去乙?；敢种扑幥乓志匾种萍?xì)胞生長及浸潤，阻斷細(xì)胞周期，誘導(dǎo)體外培養(yǎng)的人舌鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞的凋亡，并認(rèn)為通過抑制HIF1α和VEGF曲古抑菌素有望成為抗腫瘤血管生成的藥物。

4 展望

切斷或控制影響腫瘤細(xì)胞生長的內(nèi)外環(huán)境因素是抑制腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移的根本方法，針對VEGF及VEGFR的靶向研究對揭示人類OSCC血管生成的機(jī)制及抗腫瘤血管生成靶向藥物的研發(fā)都具有重大臨床實用價值，且隨著對腫瘤血管形成過程認(rèn)識的深入以及新檢測技術(shù)的完善，篩選出能夠反映抗VEGF藥物療效的預(yù)測因子，靶向VEGF及VEGFR的腫瘤抗血管生成治療有望成為治療OSCC的新策略。

[1]Siegel R,Naishadham D,Jemal A.Cancer statistics,2013[J].CA Cancer J Clin,2013,63(1):11-30.

[2]Ferrara N,Henzel W J.Pituitary follicular cells secrete a novel heparin-binding growth factor specific for vascular endothelial cells[J]. Biochem Biophys Res Commun,1989,161(2):851-858.

[3]Salajegheh A,Pakneshan S,Rahman A,et al.Co-regulatory potential of vascular endothelial growth factor-A and vascular endothelial growth factor-C in thyroid carcinoma[J].Hum Pathol,2013,44 (10):2204-2212.

[4]唐 智,孫 瑾,王繼群,等.鼻腔鼻竇鱗狀細(xì)胞癌中血管內(nèi)皮生長因子的表達(dá)及其與微血管和微淋巴管密度的關(guān)系[J].臨床耳鼻咽喉頭頸外科雜志,2013,27(20):1125-1127.

[5]Imai M,Ishibashi H,Nariai Y,et al.Transfection of hypoxia-inducible factor-1 decoy oligodeoxynucleotides suppresses expression of vascular endothelial growth factor in oral squamous cell carcinoma cells[J].J Oral Pathol Med,2012,41(9):675-681.

[6]Xie LX,Zhai TT,Yang LP,et al.Lymphangiogenesis and prognostic significance of vascular endothelial growth factor C in gastro-oesophageal junction adenocarcinoma[J].Int J Exp Pathol,2013,94 (1):39-46.

[7]杜日昌,李宇芳,邱衛(wèi)東,等.甲狀腺乳頭狀癌中HIF-1α、VEGF、COX-2及VEGF-C表達(dá)與侵襲轉(zhuǎn)移的關(guān)系[J].臨床與實驗病理學(xué)雜志,2013,29(9):991-995.

[8]金曉明,李雅馨,劉桂芳,等.血管內(nèi)皮生長因子對口腔鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞侵襲能力的影響[J].現(xiàn)代口腔醫(yī)學(xué)雜志,2005,19(1):67-69.

[9]馮正虎,李春青,張曉慧,等.VEGF-C的表達(dá)與口腔鱗癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的關(guān)系[J].口腔頜面外科雜志,2012,22(2):89-91.

[10]Jaiswal SG,Gadbail AR,Chaudhary MS,et al.Correlation of serum levels of vascular endothelial growth factor with TNM staging,histopathologic grading,and surgical therapy for oral squamous cell carcinoma[J].Quintessence Int,2011,42(9):771-779.

[11]Kono M,Watanabe M,Abukawa H,et al.Cyclo-oxygenase-2 expression is associated with vascular endothelial growth factor C expression and lymph node metastasis in oral squamous cell carcinoma[J].J Oral Maxillofac Surg,2013,71(10):1694-1702.

[12]Li C,Fan J,Song X,et al.Expression of angiopoietin-2 and vascular endothelial growth factor receptor-3 correlates with lymphangiogenesis and angiogenesis and affects survival of oral squamous cell carcinoma[J].PLoS One,2013,8(9):e75388.

[13]Kammerer PW,Toyoshima T,Eletr S,et al.Single nucleotide polymorphisms of the vascular endothelial growth factor gene associated with incidence of oral squamous cell carcinoma[J].J Oral Pathol Med,2010,39(10):786-792.

[14]胡振宇.組織蛋白酶D對口腔鱗癌中VEGF-C和VEGF-D的影響及淋巴管生成作用的研究[J].醫(yī)學(xué)研究雜志,2012,41(1):130-132.

[15]Nakazato T,Shingaki S,Kitamura N,et al.Expression level of vascular endothelial growth factor-C and-A in cultured human oral squamous cell carcinoma correlates respectively with lymphatic metastasis and angiogenesis when transplanted into nude mouse oral cavity[J].Oncol Rep,2006,15(4):825-830.

[16]Formica V,Palmirotta R,Del Monte G,et al.Predictive value of VEGF gene polymorphisms for metastatic colorectal cancer patients receiving first-line treatment including fluorouracil,irinotecan,and bevacizumab[J].Int J Colorectal Dis,2011,26(2):143-151.

[17]Harada K,Ferdous T,Itashiki Y,et al.Cepharanthine inhibits angiogenesis and tumorigenicity of human oral squamous cell carcinoma cells by suppressing expression of vascular endothelial growth factor and interleukin-8[J].Int J Oncol,2009,35(5):1025-1035.

[18]Okada Y,Ueno H,Katagiri M,et al.Experimental study of antiangiogenic gene therapy targeting VEGF in oral cancer[J].Odontology,2010,98(1):52-59.

[19]Li J,Huang S,Armstrong EA,et al.Angiogenesis and radiation response modulation after vascular endothelial growth factor receptor-2(VEGFR2)blockade[J].Int J Radiat Oncol Biol Phys,2005, 62(5):1477-1485.

[20]Kang FW,Que L,Wu M,et al.Effects of trichostatin A on HIF-1alpha and VEGF expression in human tongue squamous cell carcinoma cells in vitro[J].Oncol Rep,2012,28(1):193-199.

R739.85

A

1003—6350（2014）18—2718—03

10.3969/j.issn.1003-6350.2014.18.1066

2014-03-30)

陳 坤。E-mail：zjchenkun@126.com