劉 楠， 王云紅， 張傳輝， 柯秀梅， 周文杰， 楊榮平*

(1.成都中醫(yī)藥大學(xué)，四川 成都 611137；2.重慶市中藥研究院重慶市中藥資源學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，重慶 400065)

靛玉紅(Indirubin)為雙吲哚類生物堿成分，臨床主要用于治療慢性粒細(xì)胞白血病(Chronic Myelogenous Leukemia，CML)。早期經(jīng)中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院對(duì)中成藥當(dāng)歸蘆薈丸進(jìn)行拆方研究確定青黛中的靛玉紅為治療CML的有效成分，對(duì)腫瘤細(xì)胞具有明顯的抑制作用[1-2]。靛玉紅片為重慶市中藥研究院制藥廠早期產(chǎn)品，多年臨床應(yīng)用表明其對(duì)CML有明顯療效，但由于靛玉紅的水溶性與脂溶性均較差，存在生物體內(nèi)溶解度低、生物利用度差、腸胃刺激性較大等問題而限制其臨床應(yīng)用[3-4]。

自乳化給藥系統(tǒng)(Self-emulsifying Drug Delivery System，SEDDS)是由藥物、油相、乳化劑和助乳化劑組成的固體或液體劑型，口服后能在胃腸道蠕動(dòng)或環(huán)境溫度(37℃)及溫和攪拌的條件下自發(fā)形成水包油型乳劑，能夠顯著提高難溶性藥物的溶解和溶出，提高口服給藥的相對(duì)生物利用度[5-9]。本實(shí)驗(yàn)在文獻(xiàn)報(bào)道基礎(chǔ)上，通過測(cè)定靛玉紅在輔料中的溶解度，篩選增溶效果較好的油相、表面活性劑、助表面活性劑，繪制三元相圖并結(jié)合星點(diǎn)設(shè)計(jì)優(yōu)化獲得最佳自乳化處方，并對(duì)比原料藥設(shè)計(jì)相關(guān)自乳化制劑體外溶解度和溶出度試驗(yàn),并對(duì)其驗(yàn)證，初步探討自乳化制劑的增溶機(jī)制，為制劑開發(fā)提供方向，也為自乳化釋藥系統(tǒng)的機(jī)理研究奠定一定基礎(chǔ)。

1 儀器與試藥

1.1 儀器 高效液相色譜儀(安捷倫 1200 Series，VWD 檢測(cè)器190～600 nm，在線脫氣，二元泵，安捷倫公司)；BS-224S電子天平(十萬分之一，賽多利斯公司)；Anke TGL-16 C高速離心機(jī)(上海安亭儀器廠)；SK-1快速混勻器(金壇市城東新瑞儀器廠)；HZ-881S臺(tái)式水浴恒溫振蕩器(江蘇太倉市實(shí)驗(yàn)設(shè)備廠)；DF-101 S 集熱式恒溫加熱磁力攪拌器(鄭州市長(zhǎng)城科工貿(mào)有限公司)；RC 806 溶出試驗(yàn)儀(天津市天大天發(fā)科技有限公司)。

1.2 試藥 靛玉紅對(duì)照品(飛宇生物科技有限公司，批號(hào)FY 11830306，純度 98.30%)；靛玉紅原料藥(杭州華東醫(yī)藥集團(tuán)康潤制藥有限公司，批號(hào)120101，純度>90%)；中鏈甘油三酸酯(MCT，鐵嶺北亞藥用油有限公司)；蓖麻油(Castor Oil，成都科龍化工試劑廠)；吐溫-80(Tween-80，成都科龍化工試劑廠)；吐溫-20(Tween-20，成都科龍化工試劑廠)；吐溫-85(Tween-85，成都科龍化工試劑廠)；聚乙二醇-200(PEG-200，成都科龍化工試劑廠)；聚乙二醇-400(PEG-400，成都科龍化工試劑廠)；無水乙醇(成都科龍化工試劑廠)；丙二醇(成都科龍化工試劑廠)；玉米油(Corn Oil，上海寶曼生物科技有限公司)；薄荷油(Mint Oil,西安悅來醫(yī)藥科技有限公司)；油酸(Oleic Acid，國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司)；油酸乙酯(Ethyl Oleate，國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司)；油酸正丁酯(Butyl oleate，國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司)；乳化劑-OP(OP，國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司)、肉豆蔻酸異丙酯(IPM，國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司)；棕櫚酸異丙酯(IPP，國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司)；聚氧乙烯蓖麻油(Cremophor EL，上海運(yùn)宏化工制劑輔料技術(shù)有限公司)；油酸聚乙二醇甘油酯(Labrafil M 1944CS，法國嘉法獅公司)；辛/癸酸聚乙二醇甘油酯(Labrasol，法國嘉法獅公司)；二乙二醇單乙基醚(Transcutol P，法國嘉法獅公司)；聚甘油油酸酯(Oleique CC497，法國嘉法獅公司)；甲醇為色譜純，其余試劑均為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 靛玉紅含量測(cè)定方法

2.1.1 色譜條件 Waster XTerra C18色譜柱(250 mm×4.6 mm，5 μm)；流動(dòng)相甲醇-水(75∶25)；檢測(cè)波長(zhǎng)290 nm；體積流量1 mL/min；柱溫35 ℃；進(jìn)樣量10 μL。

2.1.2 對(duì)照品溶液的制備 精密稱取靛玉紅對(duì)照品 13.12 mg于 100 mL棕色量瓶中，加乙酸乙酯溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得對(duì)照品母液(每1 mL含靛玉紅0.131 2 mg)，備用。

2.1.3 供試品溶液的制備 取 1 g 靛玉紅自乳化乳，精密稱定，置10 mL量瓶，加乙酸乙酯溶解并稀釋至刻度，配制成一定質(zhì)量濃度的供試品溶液，搖勻，即得。

2.1.4 空白溶液的制備 按處方比例稱定 油酸聚乙二醇甘油酯、聚氧乙烯蓖麻油、二乙二醇單乙基醚置37℃恒溫振蕩箱震蕩 48 h，制得空白自乳化乳。取空白自乳化乳 1 g，按“2.1.3”項(xiàng)方法制備空白輔料溶液。

2.1.5 方法專屬性考察 分別取空白溶液、靛玉紅對(duì)照品溶液、供試品溶液，按上述色譜條件進(jìn)樣測(cè)定，結(jié)果見圖1。如圖可見，輔料對(duì)靛玉紅的測(cè)定無干擾。

圖1 空白溶液(A)、靛玉紅對(duì)照品溶液(B)、供試品溶液(C)的HPLC色譜圖

2.1.6 線性關(guān)系考察 精密吸取“2.1.2”項(xiàng)靛玉紅對(duì)照品溶液 0.2、0.5、1、1.5、2、3、4 mL置 10 mL棕色量瓶中，加乙酸乙酯至刻度，搖勻，濾過，配制成系列對(duì)照品溶液。分別精密吸取10 μL注入高效液相色譜儀，于上述色譜條件下測(cè)定，記錄峰面積。以對(duì)照品質(zhì)量濃度(μg/mL)為橫坐標(biāo)(x)，峰面積為縱坐標(biāo)(y)進(jìn)行線性回歸，得標(biāo)準(zhǔn)曲線方程為y=54.917x+1.063 4，r=0.999 95。表明在 2.624～52.48 μg/mL范圍內(nèi)，靛玉紅濃度與其峰面積呈良好的線性關(guān)系。

2.1.7 精密度及穩(wěn)定性試驗(yàn) 分別精密吸取質(zhì)量濃度為 2.624、19.68、39.36 μg/mL的靛玉紅對(duì)照品溶液 10 μL，注入高效液相色譜儀連續(xù)測(cè)定6次，記錄峰面積并計(jì)算；取同一供試樣品溶液，分別于0、2、4、6、8、12、24 h 按色譜條件進(jìn)樣測(cè)定，記錄峰面積并計(jì)算。結(jié)果精密度 RSD 分別為 0.30%、0.22%、0.23%，表明儀器的精密度良好；供試品溶液 24 h內(nèi)穩(wěn)定性的 RSD 值為 0.17%，表明靛玉紅在室溫避光保存24 h內(nèi)基本穩(wěn)定。

2.1.8 重復(fù)性實(shí)驗(yàn) 取靛玉紅自乳化乳約 0.5 g，精密稱定，置 5 mL量瓶中，平行 6 份，分別加乙酸乙酯至刻度，搖勻，濾過，分別精密吸取10 μL，注入液相色譜儀，記錄峰面積并計(jì)算。結(jié)果靛玉紅平均含量為 324.3 μg/g，RSD 為0.23%，表明重復(fù)性較好。

2.1.9 回收率試驗(yàn) 取靛玉紅自乳化乳 0.5 g，精密稱定，置10 mL量瓶，平行 6 份，分別加入“2.1.2”項(xiàng)靛玉紅對(duì)照品溶液 1.2 mL，加乙酸乙酯至刻度，搖勻，濾過，即得。按色譜條件進(jìn)樣測(cè)定靛玉紅含量并計(jì)算回收率。結(jié)果平均回收率為 100.64%，RSD 為 0.92%，表明該方法準(zhǔn)確度良好。

2.2 靛玉紅自乳化制劑的制備

2.2.1 空白自乳化處方的篩選

2.2.1.1 模型藥物在各輔料中溶解度測(cè)定 分別取不同的油相、表面活性劑、助表面活性劑約 2 mL于具塞刻度試管中,加入過量的靛玉紅原料藥，渦旋分散，于 37 ℃恒溫振蕩箱震蕩48 h，10 000 r/min 離心 10 min，取上清液用乙酸乙酯適量稀釋，按照“2.1”項(xiàng)下建立的方法測(cè)定靛玉紅在各種輔料中的溶解度，結(jié)果見表1。

表1 靛玉紅在不同油相、乳化劑、助乳化劑中的溶解度

如表1所示，靛玉紅在油酸聚乙二醇甘油酯、蓖麻油、中鏈甘油三酸酯、辛/癸酸聚乙二醇甘油酯、吐溫-80、聚氧乙烯蓖麻油、聚乙二醇-400、二乙二醇單乙基醚中的溶解較高，因而擬選用這些輔料做進(jìn)一步篩選。

2.2.1.2 三元相圖的繪制 文獻(xiàn)報(bào)道[10]自乳化處方中油相一般占 25%～70%、表面活性劑>25%、助表面活性劑 0%～25%。本研究限定自乳化處方各相篩選范圍油相0%～30%，表面活性劑20%～80%，助表面活性劑范圍 0%～30%。

在如上限定范圍內(nèi)，分別稱取不同比例的油相、表面活性劑、助表面活性劑，渦旋混勻。于室溫放置 24 h，將不分層且呈均一透明狀的處方乳進(jìn)行下一步篩選。結(jié)果篩選出符合條件的如下7個(gè)處方：

1.油酸聚乙二醇甘油酯—吐溫-80—二乙二醇單乙基醚

2.油酸聚乙二醇甘油酯—聚氧乙烯蓖麻油—二乙二醇單乙基醚

3.蓖麻油—辛/癸酸聚乙二醇甘油酯—二乙二醇單乙基醚

4.蓖麻油—吐溫-80—二乙二醇單乙基醚

5.蓖麻油—聚氧乙烯蓖麻油—二乙二醇單乙基醚

6.中鏈甘油三酸酯—吐溫-80—二乙二醇單乙基醚

7.中鏈甘油三酸酯—聚氧乙烯氫化蓖麻油—二乙二醇單乙基醚

分別取各處方中不同比例0.5 mL 空白乳，加入到 100 mL 37 ℃ 恒溫的雙蒸水中，磁力攪拌，觀察是否成乳。分別以表面活性劑、助表面活性劑、油相各為一邊，將能形成澄清透明、半透明及淡藍(lán)色乳光或牛奶狀乳且無漂浮油滴的比例確定為相圖中有效自乳化區(qū)域，繪制三元相圖，結(jié)果見圖 2(黑點(diǎn)：實(shí)驗(yàn)點(diǎn)；黑線內(nèi)區(qū)域：有效自乳化區(qū))。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果：在限定范圍內(nèi)處方 1、2 成乳面積較大，處方4～7 成乳區(qū)較小，處方 3 不能成乳。其中 2 號(hào)處方成乳面積最大，其成乳區(qū)的油相范圍 20%～80%，表面活性劑范圍 20%～80%，助表面活性劑范圍 0%～30%。同時(shí)結(jié)合組成處方的個(gè)輔料對(duì)藥物的溶解度，選擇 2 號(hào)處方進(jìn)行優(yōu)化。

2.2.2 星點(diǎn)設(shè)計(jì)-效應(yīng)面法優(yōu)化處方

圖 2 三元相圖

2.2.2.1 星點(diǎn)設(shè)計(jì) 在三元相圖基礎(chǔ)上進(jìn)行處方優(yōu)化，以油相質(zhì)量X1、表面活性劑質(zhì)量X2、助表面活性質(zhì)量X3為自變量因素，以靛玉紅載藥量Y1、自乳化時(shí)間Y2、總評(píng) OD 值Y3為指標(biāo)，利用 Design Expert 統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行三因素、五水平的星點(diǎn)設(shè)計(jì)，實(shí)驗(yàn)因素水平、設(shè)計(jì)及結(jié)果見表 2 和表 3。按照星點(diǎn)設(shè)計(jì)表比例稱取油酸聚乙二醇甘油酯、聚氧乙烯蓖麻油、二乙二醇單乙基醚，并加入過量的靛玉紅原料藥漩渦混勻，置 37 ℃ 振蕩儀中振蕩 48 h，取出，10 000 r/min 離心 10 min，稱取上清乳液用乙酸乙酯適量稀釋后按“2.1”項(xiàng)下方法測(cè)定溶解度。同時(shí)在溶出試驗(yàn)儀上，取上述含藥乳 0.2 mL 加入到 400 mL 37 ℃ 去離子水中，用槳法以槳轉(zhuǎn)速 50 r/min 輕微攪拌使自乳化，目測(cè)法用秒表記錄乳化時(shí)間，結(jié)果見表 3。

表 2 星點(diǎn)設(shè)計(jì)的因素及水平

2.2.2.2 模型擬合 數(shù)據(jù)處理分析引入 OD 值，采用“歸一化法”。采用Hassan[11-13]方法分別進(jìn)行數(shù)學(xué)轉(zhuǎn)換求“歸一值”dmin和dmax，dmin=(ymax-yi)/(ymax-ymin),dmax=(yi-ymin)/(ymax-ymin)；OD=(d1d2…dn)1/n,n為指標(biāo)數(shù)。以總評(píng) OD 值為效應(yīng)進(jìn)行優(yōu)化，最后得到綜合效應(yīng)最佳的處方配比。

運(yùn)用 Design Expert 8.0.5 軟件，對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行多元線性、兩因素相互作用(2FI)、二次多項(xiàng)式或更高次項(xiàng)的模型擬合非線性擬合處理，以相關(guān)系數(shù)(r)和置信度(P)為模型判定標(biāo)準(zhǔn)。結(jié)果表明，實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)采用二項(xiàng)式模型有極顯著性差異，相關(guān)系數(shù)較高，擬合度好。二次項(xiàng)方程如下：

表 3 星點(diǎn)設(shè)計(jì)與結(jié)果

2.2.2.3 結(jié)果分析 根據(jù)二次多項(xiàng)式模型方程擬合結(jié)果作出 OD 值對(duì)三個(gè)因素中任意兩個(gè)因素的效應(yīng)面三維圖和二維等高線圖(見圖 3～5)，利用效應(yīng)面和等高線分析各因素的相互作用。等高線的密度和形狀可以反映因素對(duì)響應(yīng)值的影響大小和因素之間的交互強(qiáng)弱[14]。從圖 3～5 可以看出油相X1、表面活性劑X2、助表面活性劑X3各因素間交互作用顯著。減小油相X1比例，OD 值增大；增大表面活性劑X2比例，OD 值增大；隨著助表面活性劑X3比例增加，OD 值呈現(xiàn)出先增大后減小的趨勢(shì)。根據(jù)效應(yīng)面預(yù)測(cè)，三因素的較佳范圍為：X1：20～35；X2：51～80；X3：12～17。

2.2.2.4 最優(yōu)處方預(yù)測(cè)與驗(yàn)證 本研究先以載藥量大、自乳化時(shí)間最短對(duì)靛玉紅自乳化制劑處方組成進(jìn)行預(yù)測(cè)的最佳處方質(zhì)量配比為：X1(油酸聚乙二醇甘油酯)=25，X2(聚氧乙烯蓖麻油)=80，X3(二乙二醇單乙基醚)=12.83，預(yù)測(cè)載藥量 337.9 μg/g，自乳化時(shí)間為 7.66 min；再以 OD 值最佳對(duì)靛玉紅自乳化制劑處方組成進(jìn)行預(yù)測(cè)，得最佳處方質(zhì)量配比：X1(油酸聚乙二醇甘油酯)=25，X2(聚氧乙烯蓖麻油)=80，X3(二乙二醇單乙基醚)=15.41，預(yù)測(cè)載藥量 325.9 μg/g，自乳化時(shí)間為 6.49 min。兩種方式預(yù)測(cè)結(jié)果相差不大，說明采用歸一化法進(jìn)行多指標(biāo)綜合評(píng)定方法可行。

圖3 油相A、表面活性劑B對(duì)OD值的三維效應(yīng)面圖及等高線圖

圖4 油相A、助表面活性劑C對(duì)OD值的三維效應(yīng)面圖及等高線圖

圖5 表面活性劑B、助表面活性劑C對(duì)OD值的三維效應(yīng)面圖及等高線圖

以 OD 值最佳預(yù)測(cè)的處方比例按“2.2.2(1)”項(xiàng)下操作進(jìn)行驗(yàn)證試驗(yàn)，結(jié)果各指標(biāo)的偏差絕對(duì)值均 < 5%，證實(shí)所建數(shù)學(xué)模型預(yù)測(cè)性良好，結(jié)果見表 4：

表 4 星點(diǎn)設(shè)計(jì)-效應(yīng)面優(yōu)化法的驗(yàn)證

2.3 靛玉紅自乳化釋藥系統(tǒng)的體外初步評(píng)價(jià)

2.3.1 外觀性狀 按星點(diǎn)優(yōu)選處方比例稱取油酸聚乙二醇甘油酯 20 g，聚氧乙烯蓖麻油 80 g,二乙二醇單乙基醚 15.41 g,漩渦混勻,加入40 g 靛玉紅原料藥，置 37 ℃ 振蕩儀中振蕩 48 h，制得靛玉紅自乳化乳，取適量對(duì)其外觀性狀進(jìn)行評(píng)價(jià)。

結(jié)果：該自乳化制劑的外觀為紫紅色均勻透亮的油狀液體。在體外溶出實(shí)驗(yàn)中，該自乳化制劑完全乳化后形成均一澄明透亮的淡紫色溶液且無藥物析出現(xiàn)象。

2.3.2 溶解度

2.3.2.1 靛玉紅自乳化制劑在不同分散介質(zhì)中溶解度的測(cè)定 稱取 4 份 1 g 靛玉紅自乳化乳，分別以水、pH 1.2鹽酸溶液、pH 4.5、pH 6.8 磷酸緩沖液為分散介質(zhì)，稀釋 10 倍(v/m)，混勻，取 2 mL溶液，加入過量的靛玉紅，渦旋 5 min，按“2.1”項(xiàng)下方法測(cè)定溶解度。

結(jié)果：含藥乳在不同分散介質(zhì)中的溶解度分別為(32.72±0.09)、(32.62±0.06)、(31.97±0.13)、(33.66±0.43)μg，RSD 為 2.13%，表明不同分散介質(zhì)對(duì)自乳化制劑的溶解度測(cè)定無明顯影響。

2.2.2.2 稀釋倍數(shù)與溶解度相關(guān)性研究 稱取 5 份 1 g 靛玉紅自乳化乳，以水為分散介質(zhì)，分別以 10、50、100、200、500 倍(v/m)37 ℃的蒸餾水稀釋，混勻，取 2 mL 溶液，加入過量的靛玉紅原料藥，渦旋 5 min，按“2.1”項(xiàng)下方法測(cè)定溶解度：含藥乳在各稀釋倍數(shù)下溶解度分別為(32.72±0.09)、(6.53±0.07)、(3.26±0.06)、(1.63±0.07)、(0.65±0.08) μg/mL，與稀釋倍數(shù)呈反相關(guān)。

2.2.2.3 考察含藥乳和空白乳對(duì)溶解度測(cè)定的影響 各稱取 1 g空白自乳化乳和靛玉紅自乳化乳，分別以 10、200 倍(v/m) 37 ℃的蒸餾水稀釋，混勻，各取 2 mL溶液，加入過量靛玉紅原料藥，渦旋 5 min，8 000 r/min 離心 5 min，按“2.1”項(xiàng)下方法測(cè)定溶解度；另外各取 2 mL 10、200 倍水稀釋的含藥乳溶液，按“2.1”項(xiàng)下方法測(cè)定其中靛玉紅含量。

結(jié)果：含藥乳和空白乳以水稀釋 10、200 倍測(cè)得的平均溶解度分別為32.72和 0.86、1.63 和 0.19 μg/mL，以10、200倍稀釋含藥乳液測(cè)定的溶解度比相應(yīng)空白乳液測(cè)定的溶解度分別高出 38.05；8.58 倍；測(cè)定含藥乳 10、200 倍水溶液的靛玉紅平均質(zhì)量濃度為 32.68 和 1.62 μg/mL。

2.3.3 靛玉紅自乳化制劑在不同分散介質(zhì)中的穩(wěn)定性考察

稱取 4 份 1 g 靛玉紅自乳化乳，分別以水、pH 1.2鹽酸溶液、pH 4.5、pH 6.8 磷酸緩沖液為分散介質(zhì)，稀釋 10 倍(v/m)，分別于 0、2、4、6、8、12、24 h 按“2.1”項(xiàng)下方法測(cè)定峰面積，計(jì)算靛玉紅剩余百分含量及 RSD。

結(jié)果：不同稀釋介質(zhì)中 24 h 內(nèi) RSD 分別為0.52%、0.32%、0.86%、0.28%，表明靛玉紅自乳化制劑在不同釋放介質(zhì)中 24 h 內(nèi)基本穩(wěn)定，結(jié)果見表 5。

表5 靛玉紅自乳化制劑在不同釋放介質(zhì)中24 h穩(wěn)定性(%)

2.3.4 靛玉紅自乳化制劑體外溶出曲線的繪制 由于目前已無市售靛玉紅片，因此采用靛玉紅原料藥與本研究自乳化制劑進(jìn)行體外釋藥性對(duì)比。取等含藥量的自乳化釋藥系統(tǒng)與靛玉紅原料藥，照《中國藥典》2010 年版(二部)附錄XC“溶出度測(cè)定法”第三法，以 200 mL 0.1 mol/L HCl 為溶出介質(zhì)，溫度為(37±0.5)℃，轉(zhuǎn)速為 50 r/min，分別于 3、5、10、15、20、30、45、60、90、120 min 時(shí)取樣 2.0 mL，同時(shí)補(bǔ)充等體積釋放介質(zhì)，測(cè)定并計(jì)算靛玉紅累積溶出百分率，繪制溶出曲線，結(jié)果見圖6。

圖6 靛玉紅自乳化制劑及原料藥的溶出曲線

2.3.5 穩(wěn)定性 取適量靛玉紅自乳化乳置離心管中，10 000 r/min 離心10 min，結(jié)果未出現(xiàn)分層現(xiàn)象；取適量靛玉紅自乳化乳用蒸餾水稀釋 100 倍，于室溫密閉避光放置10 d，微乳仍保持均一澄明淡紫色外觀；取適量靛玉紅自乳化乳置安瓿瓶中，于75%濕度、40 ℃條件下密閉避光貯存，每隔一個(gè)月測(cè)定靛玉紅百分含量，結(jié)果3個(gè)月內(nèi)含量依次為(98.47±0.23)%、(97.86±0.36)%、(97.85±0.28)%，且外觀均為均一澄明淡紫色溶液，未有明顯變化。

3 討論

難溶性藥物的口服吸收決定于溶出速率以及藥物在介質(zhì)中的溶解程度，靛玉紅屬于生物藥劑分類系統(tǒng) Ⅳ(BCS Ⅳ)類藥物，其胃腸道吸收機(jī)制屬于被動(dòng)擴(kuò)散過程，其制劑的切入點(diǎn)在于改善其溶解性能及提高黏膜通透性，進(jìn)而提高口服生物利用度。自乳化釋藥系統(tǒng)能提高藥物的溶解度且粒徑小，比表面積大，易于通過胃腸壁的水化層，增加通透性，促進(jìn)藥物體內(nèi)吸收。但有文獻(xiàn)報(bào)道某些自乳化處方口服后由于胃液稀釋以及腸道的消化，自乳化處方中各組分的濃度及比例會(huì)發(fā)生一定變化，降低系統(tǒng)的增溶能力，致使藥物沉淀析出，降低制劑的生物利用度[15]。目前對(duì)于自乳化釋藥系統(tǒng)的增溶機(jī)制尚無統(tǒng)一定論，實(shí)驗(yàn)過程中發(fā)現(xiàn)靛玉紅自乳化制劑的載藥量與其溶解度不同，溶解量大于載藥量，因此猜測(cè)自乳化增溶機(jī)制可能為類似“催化劑”的效應(yīng)，進(jìn)而針對(duì)本假設(shè)進(jìn)行了驗(yàn)證，考察了含藥乳不同稀釋倍數(shù)與溶解度相關(guān)性試驗(yàn)?！?.3.2.2”項(xiàng)實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，在本研究的條件下，自乳化釋藥系統(tǒng)的增溶機(jī)制不是簡(jiǎn)單的“催化劑”效應(yīng)。在此基礎(chǔ)上，又考察含藥乳和空白乳對(duì)溶解度的影響，實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)提示藥物與輔料在自乳化制備過程中的相互作用影響增溶效果，推測(cè)可能為自乳化制備過程中藥物與輔料形成飽和的 o/w 乳，遇水形成 o/w 乳化體系，藥物已經(jīng)被包裹在其中，因此再加入過量的靛玉紅原料藥增溶效果不明顯；而空白乳與水先形成 o/w 乳化體系，再加入過量的靛玉紅原料藥，藥物進(jìn)入不到 o/w 體系內(nèi)核，空白乳稀釋10、200倍測(cè)得的溶解度相差不大，應(yīng)該是自乳化輔料改善了藥物的潤濕性而溶解部分藥物?？梢娺@一增溶過程并非簡(jiǎn)單的物理混勻效果。本研究的假設(shè)及結(jié)果均為自乳化制劑的增溶機(jī)制研究提供一定的思路及方法。

本研究?jī)?yōu)化出的處方載藥量為 324.3 μg/g，自乳化釋藥系統(tǒng)顯著提高了靛玉紅的溶解度和溶出度，由于靛玉紅原料藥的溶解未檢測(cè)出來，因而以本研究中的最低檢測(cè)限計(jì)算，本研究?jī)?yōu)化的自乳化處方將靛玉紅的溶解度至少提高了 4 000倍，達(dá)到了對(duì)其增溶的目的，這為后期靛玉紅自乳化乳進(jìn)一步制劑成型提供一定指導(dǎo)意義。

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