王際英李培玉宋志東,臧元奇李寶山喬洪金柳旭東馬晶晶張利民

(1. 山東省海洋資源與環(huán)境研究院, 山東省海洋生態(tài)修復(fù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室, 煙臺(tái) 264006; 2. 山東升索漁用飼料研究中心,煙臺(tái) 265500)

飼料中添加絲蘭提取物對(duì)大菱鲆幼魚(yú)生長(zhǎng)和生理及水環(huán)境的影響

王際英1李培玉2宋志東1,2臧元奇1李寶山1喬洪金1柳旭東2馬晶晶1張利民1

(1. 山東省海洋資源與環(huán)境研究院, 山東省海洋生態(tài)修復(fù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室, 煙臺(tái) 264006; 2. 山東升索漁用飼料研究中心,煙臺(tái) 265500)

用絲蘭提取物添加量為0.00% (D0)、0.05% (D1)、0.10% (D2)、0.20% (D3)和0.40% (D4)的實(shí)驗(yàn)飼料投喂大菱鲆幼魚(yú)[(42.20±0.06) g] 60d, 研究其對(duì)大菱鲆幼魚(yú)生長(zhǎng)性能、體組成、血清免疫代謝指標(biāo)及養(yǎng)殖水質(zhì)指標(biāo)的影響。結(jié)果顯示, 在飼料中添加絲蘭提取物對(duì)大菱鲆幼魚(yú)增重率(WGR)、特定生長(zhǎng)率(SGR)、飼料系數(shù)(FCR)、臟體比(VSI)、肝體比(HSI)、肥滿度(CF)均無(wú)顯著影響(P＞0.05)。全魚(yú)、肌肉及肝臟中水分、粗蛋白、粗脂肪含量變化無(wú)顯著性差異(P＞0.05)。D3組幼魚(yú)血清溶菌酶顯著高于其他各組(P＜0.05), 而D4組各免疫指標(biāo)明顯低于對(duì)照組(P＜0.05); D3和D4組幼魚(yú)血清的谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)活力顯著低于對(duì)照組。除A1-6h組外各實(shí)驗(yàn)組水體氨氮含量均顯著低于對(duì)照組(P＜0.05), 各實(shí)驗(yàn)組亞硝酸鹽含量均顯著高于對(duì)照組(P＜0.05), 各實(shí)驗(yàn)組總氮、總磷、磷酸鹽含量均與對(duì)照組無(wú)顯著性差異(P＞0.05)。研究證明, 在飼料中適量添加絲蘭提取物能夠顯著增強(qiáng)大菱鲆幼魚(yú)非特異性免疫能力, 并顯著降低養(yǎng)殖水體氨氮含量,對(duì)大菱鲆生長(zhǎng)及體組成無(wú)顯著影響。以非特異性免疫及水體氨氮含量為綜合評(píng)定指標(biāo), 大菱鲆幼魚(yú)飼料中絲蘭提取物的適宜添加量為0.20%。

絲蘭提取物; 大菱鲆; 生長(zhǎng); 體組成; 生理指標(biāo); 水環(huán)境

絲蘭(Yucca schidigera)俗名洋菠蘿, 是龍舌科絲蘭屬植物, 主要分布于美國(guó)西南和墨西哥沙漠地區(qū), 為多年生常綠灌木[1,2]。目前在我國(guó)也有種植,主要用于城市綠化或觀賞植物。絲蘭屬植物種類有許多種, 其提取物(俗稱雅可)的主要成分是甾體皂苷、自由基皂苷、糖類復(fù)合物等[3]。在國(guó)外絲蘭提取物被廣泛應(yīng)用畜禽養(yǎng)殖, 可減少動(dòng)物氨氣排放,改善畜禽的飼養(yǎng)環(huán)境[4,5]; 增強(qiáng)機(jī)體免疫力, 提高動(dòng)物的生產(chǎn)性能[4]; 還具有調(diào)節(jié)腸道微環(huán)境、促進(jìn)細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)等功能[6]。

目前有關(guān)絲蘭提取物在水產(chǎn)養(yǎng)殖中的應(yīng)用研究還比較少, 僅有少量關(guān)于絲蘭提取物在對(duì)蝦及個(gè)別淡水魚(yú)類養(yǎng)殖中的應(yīng)用研究。Tidwell等1992年首次發(fā)現(xiàn)絲蘭提取物可明顯降低淡水魚(yú)養(yǎng)殖環(huán)境中的總氨氮水平[7]。Ho和Chien試驗(yàn)表明, 和對(duì)照組相比, 絲蘭提取物能降低活魚(yú)運(yùn)輸?shù)暮Ｋ偷锌偘钡絒8]。在對(duì)蝦養(yǎng)殖中, 絲蘭提取物也被證實(shí)具有明顯的降低水體總氨氮的效果[9—11]。除降低水環(huán)境氨氮含量的作用之外, 絲蘭提取物也被證明對(duì)養(yǎng)殖動(dòng)物具有生長(zhǎng)促進(jìn)效果。El-Saidy和 Gaber報(bào)道在尼羅羅非魚(yú)飼料中添加絲蘭提取物, 尤其是在高密度養(yǎng)殖環(huán)境中可作為生長(zhǎng)促進(jìn)劑來(lái)提高生長(zhǎng)性能和飼料利用[12]。Gaber 報(bào)道在尼羅羅非魚(yú)飼料中補(bǔ)充添加絲蘭提取物可增加全魚(yú)蛋白含量[13]。

大菱鲆(Scophthalmus maximus L.)屬鲆科(Bothidae)、菱鲆屬(Scophthalmus), 生長(zhǎng)迅速、肉味鮮美、經(jīng)濟(jì)價(jià)值高[14,15], 是我國(guó)重要的海水養(yǎng)殖品種[16,17]。隨著養(yǎng)殖規(guī)模的擴(kuò)大以及養(yǎng)殖密度的增加,養(yǎng)殖環(huán)境惡化, 疾病發(fā)生率逐漸增加, 嚴(yán)重影響大菱鲆的生產(chǎn), 因此如何提高大菱鲆免疫力、維持養(yǎng)殖環(huán)境健康友好顯得尤為重要。目前有關(guān)飼料添加劑在大菱鲆飼料中的應(yīng)用研究已有諸多報(bào)道, 如肽聚糖[18,19]、葡聚糖等[20,21]。作為一種較新的添加物,絲蘭提取物在大菱鲆配合飼料中的研究尚未見(jiàn)報(bào)道。本文以大菱鲆幼魚(yú)為研究對(duì)象, 通過(guò)在配合飼料中添加不同水平的絲蘭提取物, 研究其對(duì)大菱鲆生長(zhǎng)、生理及養(yǎng)殖水環(huán)境等的影響, 旨在為絲蘭提取物在大菱鲆飼料中的應(yīng)用提供科學(xué)參考和理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)及飼料制作

以基礎(chǔ)飼料為對(duì)照組(D0), 用絲蘭提取物(商品名絲蘭寶, 由純絲蘭屬麟鳳藍(lán)植物提取物加工而成,主要活性成分為多糖、皂角苷及多酚, 上海亙泰實(shí)業(yè)集團(tuán)提供, 墨西哥農(nóng)工公司生產(chǎn))按不同比例替代基礎(chǔ)飼料中0.05% (D1)、0.10% (D2)、0.20% (D3)和 0.40% (D4)的纖維素, 配制五種等氮等能的實(shí)驗(yàn)飼料。飼料原料粉碎過(guò)80目篩, 按比例稱重、混勻,加入魚(yú)油及適量水再次混勻, 經(jīng)螺旋擠壓機(jī)加工成粒徑4 mm的顆粒配合飼料, 烘干, 備用。飼料配方和營(yíng)養(yǎng)組成見(jiàn)表1。

1.2 飼養(yǎng)管理

養(yǎng)殖實(shí)驗(yàn)在山東省海洋資源與環(huán)境研究院海水循環(huán)系統(tǒng)內(nèi)進(jìn)行。大菱鲆幼魚(yú)[(42.20±0.06) g]在養(yǎng)殖系統(tǒng)中馴養(yǎng) 2周后隨機(jī)分至 15個(gè)圓形養(yǎng)殖桶(80 cm×70 cm)中, 每桶30尾魚(yú), 進(jìn)行為期60d的養(yǎng)殖實(shí)驗(yàn)。在養(yǎng)殖期間, 定期進(jìn)行水質(zhì)檢測(cè), 確保水質(zhì)符合以下條件: 水溫(18.0±0.5) , ℃ 溶氧＞7.0 mg/L,氨氮濃度＜0.05 mg/L。實(shí)驗(yàn)期間每天投喂兩次(08:00, 16:00), 日投喂量占魚(yú)體重 1.5%左右, 并根據(jù)攝食情況作適當(dāng)調(diào)整。投喂30min后從排水口將殘餌排出, 數(shù)顆粒, 記錄殘餌數(shù)量。

1.3 樣品采集

全魚(yú)、組織樣品采集 采樣前禁食24h, 稱每桶魚(yú)總重。每桶隨機(jī)取12尾魚(yú), 其中3尾用作全魚(yú)。剩余9尾經(jīng)MS-222麻醉后, 稱體重、量體長(zhǎng), 尾靜脈處取血, 室溫靜置4h后分離血清(4 ℃, 4000 r/min, 10min)。取血后分離內(nèi)臟、肝胰臟并稱重, 取背部肌肉。采樣結(jié)束后將樣品超低溫凍存(–78 ℃ ), 用于生理指標(biāo)測(cè)定。

水質(zhì)樣品采集 在養(yǎng)殖實(shí)驗(yàn)結(jié)束后, 更換各養(yǎng)殖桶海水并保持容積相等, 每桶20尾魚(yú)進(jìn)行18h封閉實(shí)驗(yàn), 分別于投餌后6h、12h、18h取各養(yǎng)殖桶水樣500 mL, 取樣后立即進(jìn)行水質(zhì)測(cè)定。

1.4 測(cè)定指標(biāo)與方法

式中, W0為實(shí)驗(yàn)開(kāi)始時(shí)魚(yú)體重量(g), Wt為實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)魚(yú)體重量(g), Wv為內(nèi)臟重量(g), Wh為肝臟重量(g), F為攝食量(g), d為養(yǎng)殖周期(d)。

常規(guī)成分 全魚(yú)、肌肉及肝臟中常規(guī)成分的分析均采用AOAC(2000)方法。水分采用105℃烘干恒重法; 粗蛋白采用 FOSS半自動(dòng)凱式定氮儀(KjeltecTM2100); 粗脂肪采用索氏抽提器; 粗灰分采用 550℃灼燒恒重法; 能量采用氧彈儀(PARR 6100)。

腸道消化酶指標(biāo) 腸道脂肪酶(Lipase)采用比色法測(cè)定, 淀粉酶(Amylase)采用淀粉-碘比色法測(cè)定, 胰蛋白酶(Trypsin)采用紫外比色法測(cè)定, 以上試劑盒均購(gòu)自南京建成生物工程研究所。

血清免疫指標(biāo) 血清溶菌酶(LZM)采用空白對(duì)照法比濁法測(cè)定, 一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NOS)、超氧化物歧化酶(SOD)和總抗氧化能力(T-AOC)采用比色法測(cè)定, 以上測(cè)定試劑盒購(gòu)自南京建成生物工程研究所。谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)采用丙氨酸底物法測(cè)定, 谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)采用IFCC速率法測(cè)定, 試劑購(gòu)于北京利德曼生化股份有限公司, 應(yīng)用生化分析儀(7020型, Hitachi)測(cè)定。

水質(zhì)指標(biāo) 水體氨氮含量采用次溴酸鹽氧化法測(cè)定, 亞硝酸鹽含量采用奈乙二胺分光光度法, 總氮含量采用過(guò)硫酸鉀氧化法, 磷酸鹽含量測(cè)定采用抗壞血酸-磷鉬藍(lán)法, 總磷含量測(cè)定采用Aspila法[22]。

1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析

采用SPSS 18.0軟件進(jìn)行單因素方差分析(One-Way ANOVA), 差異顯著(P＜0.05)時(shí)用Duncan’s檢驗(yàn)進(jìn)行多重比較分析。統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差(Means±SD)或平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤(Means±SE)的形式表示。

2 結(jié)果

2.1 絲蘭提取物對(duì)大菱鲆幼魚(yú)生長(zhǎng)性能的影響

絲蘭提取物對(duì)大菱鲆幼魚(yú)生長(zhǎng)性能的影響見(jiàn)表2。飼料中添加絲蘭提取物對(duì)大菱鲆幼魚(yú)WGR、SGR、FCR、HIS、VSI及CF 均沒(méi)有顯著性影響(P＞0.05)。

2.2 絲蘭提取物對(duì)大菱鲆幼魚(yú)體組成的影響

從表 3可以看出, 飼料中添加絲蘭提取物并不能改變大菱鲆幼魚(yú)全魚(yú)、肌肉及肝臟的基本營(yíng)養(yǎng)組成(P＞0.05)。

2.3 絲蘭提取物對(duì)大菱鲆幼魚(yú)腸道消化酶活力的影響

由表 4可知, 飼料中添加絲蘭提取物對(duì)大菱鲆幼魚(yú)脂肪酶活力無(wú)顯著影響(P＞0.05), 而對(duì)淀粉酶、蛋白酶活力影響顯著(P＜0.05)。隨著絲蘭提取物濃度的增加, 淀粉酶、蛋白酶活力逐漸升高, 并均于 D3組達(dá)到最高活力, 而后隨著絲蘭提取物濃度繼續(xù)升高, 酶活力迅速降至各實(shí)驗(yàn)組最低(P＜0.05)。

2.4 絲蘭提取物對(duì)大菱鲆幼魚(yú)血清免疫、代謝指標(biāo)的影響

由表 5可知, 飼料中添加絲蘭提取物對(duì)大菱鲆幼魚(yú)血清免疫酶、代謝酶活力影響顯著 (P＜0.05)。LZM、NO、NOS、T-AOC均在D4組出現(xiàn)最小值, 且與對(duì)照組及其他實(shí)驗(yàn)組差異顯著(P＜0.05); D3組LZM 最高且與對(duì)照組及其他實(shí)驗(yàn)組差異顯著(P＜0.05), NO、NOS、T-AOC活力D1-D3組均與對(duì)照組無(wú)顯著差異, 但在D3組出現(xiàn)最大值(P＞0.05)。SOD活力在 D3組出現(xiàn)最大值, D4組出現(xiàn)最小值,但均與對(duì)照組無(wú)顯著性差異(P＞0.05)。ALT、AST隨絲蘭提取物的增加活力逐漸降低, 在 D3、D4組顯著低于對(duì)照組(P＜0.05)。

表2 絲蘭提取物對(duì)大菱鲆幼魚(yú)生長(zhǎng)性能和飼料利用效率的影響Tab. 2 Effects of dietary Yucca extract on growth performance and feed utilization of juvenile turbot

表3 絲蘭提取物對(duì)大菱鲆幼魚(yú)常規(guī)成分的影響Tab. 3 Effects of dietary Yucca extract on proximate composition of juvenile turbot (%)

表4 絲蘭提取物對(duì)大菱鲆幼魚(yú)腸道消化酶活力的影響Tab. 4 Effects of dietary Yucca extract on intestinal digestive enzyme activities of juvenile turbot

表5 絲蘭提取物對(duì)大菱鲆幼魚(yú)血清免疫、代謝指標(biāo)的影響Tab. 5 Effects of dietary Yucca extract on serum immunity and metabolic indices of juvenile turbot

圖1 絲蘭提取物對(duì)養(yǎng)殖水環(huán)境水質(zhì)指標(biāo)的影響Fig. 1 Effects of dietary Yucca extract on environmental water-quality index of juvenile turbot

2.5 絲蘭提取物對(duì)養(yǎng)殖水環(huán)境水質(zhì)指標(biāo)的影響

飼料中添加絲蘭提取物對(duì)養(yǎng)殖水質(zhì)氨氮、亞硝酸鹽影響顯著(P＜0.05), 對(duì)總氮、磷酸鹽、總磷無(wú)顯著影響(P＞0.05)。在同一取樣時(shí)間下, 氨氮含量隨絲蘭添加物增加而呈現(xiàn)降低趨勢(shì); 亞硝氮含量則呈現(xiàn)升高趨勢(shì), 但最高值均出現(xiàn)在D3組。在同一添加濃度下, 氨氮、亞硝氮均基本呈現(xiàn)隨時(shí)間延長(zhǎng)含量增加的趨勢(shì)。水環(huán)境中總氮、總磷、磷酸鹽含量保持穩(wěn)定, 均與對(duì)照組無(wú)顯著性差異。

3 討論

3.1 絲蘭提取物對(duì)生長(zhǎng)和飼料利用的影響

本實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果表明, 在飼料中添加絲蘭提取物對(duì)大菱鲆幼魚(yú)生長(zhǎng)、飼料系數(shù)等生長(zhǎng)性能無(wú)顯著影響, 這與黃臘鯧 Trachinotus blochii[23]、對(duì)蝦Marsupenaeus japonicus[24]、尼羅羅非魚(yú)Oreochromis rnossambicus×O. niloticus[25]的研究結(jié)果一致。目前關(guān)于絲蘭提取物在水生動(dòng)物生長(zhǎng)及飼料利用的報(bào)道不盡相同, Kelly和 Kohler研究結(jié)果表明飼料中添加絲蘭提取物可以顯著提高斑點(diǎn)叉尾Ictalurus punctatus幼魚(yú)的生長(zhǎng)速度[24], El-Saidy和Gaber報(bào)道集約化養(yǎng)殖條件下以750 mg/kg添加絲蘭提取物可以刺激羅非魚(yú)Oreochromis niloticus (L.)提高生長(zhǎng)及飼料利用率[12]。丁永敏等在飼料中添加一定量絲蘭提取物, 顯著提高了肉雞體質(zhì)量?；士悼档妊芯勘砻? 飼料中添加絲蘭提取物對(duì)牛蛙(Rana catesbeiana)的質(zhì)量增加率、特定生長(zhǎng)率無(wú)顯著影響, 但顯著降低飼料效率和蛋白質(zhì)效率。Tidwell等研究認(rèn)為絲蘭提取物可用于養(yǎng)殖用水前處理, 但不應(yīng)與魚(yú)類直接接觸, 且高濃度下對(duì)魚(yú)類生長(zhǎng)具有明顯的抑制作用[7]。在本研究中, 不同處理組及對(duì)照組之間飼料系數(shù)無(wú)顯著性差異, 這與生長(zhǎng)結(jié)果相一致, 表明在本實(shí)驗(yàn)條件下添加絲蘭提取物對(duì)大菱鲆幼魚(yú)不具有促生長(zhǎng)作用。Kelly和Kohler報(bào)道了在飼料中添加絲蘭提取物飼養(yǎng)兩種不同規(guī)格的斑點(diǎn)叉尾, 在 8周內(nèi)不同添加處理組之間均無(wú)顯著性差異[24], 這與本研究結(jié)果相似, 而在第 12周處理組之間差異顯著。在飼料中添加絲蘭提取物在不同的養(yǎng)殖實(shí)驗(yàn)中,對(duì)養(yǎng)殖魚(yú)類的生長(zhǎng)性能影響不同, 可能是由于絲蘭提取工藝的不同或者養(yǎng)殖周期不同所致。絲蘭提取物包含三種以上皂苷[28], 但是不同提取過(guò)程會(huì)造成終產(chǎn)品中活性化合物明顯不同, 尤其是某些皂苷成分會(huì)在不降低產(chǎn)品氨氮處理能力的條件下被除去[7]。

3.2 絲蘭提取物對(duì)大菱鲆幼魚(yú)體組成的影響

一些研究顯示一定量的植物提取物添加到飼料中并沒(méi)有改變羅非魚(yú)[29]、異育銀鯽Carassius auratus gibelio[30]等魚(yú)類的體組成, 但在飼料中添加黃芪多糖能改變齊口裂腹魚(yú)Schizothorax prenanti體粗蛋白以及粗脂肪含量[31]。在溝鯰和雜交羅非魚(yú)的飼料中添加0.05%—1%的絲蘭提取物改變了其體成分組成[25]; 另有研究顯示以魚(yú)粉為主要蛋白源的飼料中添加0.075%的絲蘭提取物能顯著提高全魚(yú)中蛋白和灰分的含量, 顯著降低脂肪的含量[3]。在本實(shí)驗(yàn)中, 飼料中添加絲蘭提取物并不影響全魚(yú)、肌肉及肝臟的體成分組成。導(dǎo)致這些實(shí)驗(yàn)產(chǎn)生不同的結(jié)論可能與實(shí)驗(yàn)所選用的魚(yú)類以及飼料的組成有關(guān),需要進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)來(lái)對(duì)絲蘭的營(yíng)養(yǎng)學(xué)角色進(jìn)行研究,以闡明其對(duì)機(jī)體組成的影響機(jī)理。

3.3 絲蘭提取物對(duì)大菱鲆幼魚(yú)消化酶活力的影響

目前還未見(jiàn)絲蘭對(duì)魚(yú)類的消化酶影響的相關(guān)報(bào)道, 但是一些研究發(fā)現(xiàn)添加絲蘭能夠提高腸絨毛的高度和黏膜的厚度, 增加成熟上皮細(xì)胞的數(shù)量[32,33],而小腸上皮細(xì)胞是分泌蛋白酶的重要部位[34]。另外絲蘭的提取物可以影響到腸道微生物的組成, 從而可能提高產(chǎn)蛋白酶和淀粉酶的有益菌的數(shù)量, 起到增加外源酶的效果[35]。本實(shí)驗(yàn)的結(jié)果顯示, 添加0.1% 和0.2%的絲蘭能提高蛋白酶和淀粉酶的活力,然而高水平的添加(0.4%)卻降低了蛋白酶和淀粉酶活力, 過(guò)高的絲蘭提取物可能反而干擾了腸道菌群, 對(duì)腸道的正常功能也產(chǎn)生影響。要弄清絲蘭影響魚(yú)體消化酶的機(jī)制, 需要進(jìn)行更為深入和具體的研究。

3.4 絲蘭提取物對(duì)大菱鲆幼魚(yú)血清免疫、代謝指標(biāo)的影響

就魚(yú)類非特異性免疫機(jī)制而言, 溶菌酶在疾病防御中行使著廣泛的非特異性免疫功能, 是重要的水解酶類[36,37], NO亦具有殺菌和抑菌作用, 在NOS的催化下能增強(qiáng)機(jī)體對(duì)真菌、病原菌及原生動(dòng)物的殺傷力[38]。SOD在清除氧自由基, 防止自由基對(duì)生物分子損傷方面具有十分重要的作用, 其活性的變化反映了機(jī)體抵制自由基損傷的能力[39,40]。總抗氧化能力(T-AOC)是用于衡量機(jī)體抗氧化系統(tǒng)功能狀況的綜合性指標(biāo), 其大小可代表和反映機(jī)體抗氧化酶系統(tǒng)和非酶促系統(tǒng)對(duì)外來(lái)刺激的代償能力以及機(jī)體自由基代謝的狀態(tài)[41]。本研究選取以上指標(biāo)來(lái)反映絲蘭提取物對(duì)大菱鲆幼魚(yú)免疫狀態(tài)影響。在絲蘭提取物添加濃度為0.1%—0.2%, 隨添加水平的增加血清免疫指標(biāo)呈現(xiàn)不同程度的增強(qiáng); 而當(dāng)0.4%添加水平時(shí), 各免疫指標(biāo)呈現(xiàn)較低水平。研究表明在飼料中添加適當(dāng)?shù)慕z蘭提取物不僅可以提高大菱鲆幼魚(yú)水解系統(tǒng)功能, 同時(shí)對(duì)抗氧化系統(tǒng)也具有明顯增強(qiáng)的效果, 因而對(duì)大菱鲆幼魚(yú)具有免疫增強(qiáng)的作用;而當(dāng)添加水平為 0.4%, 機(jī)體免疫水平較低, 不利于抵御病原入侵以及機(jī)體氧化修復(fù)。

ALT、AST主要參與體內(nèi)的轉(zhuǎn)氨基作用。在正常情況下, 血漿 ALT、AST的活性較低, 而當(dāng)組織細(xì)胞受損或通透性增加時(shí), 大量的AST、ALT進(jìn)入血液, 造成活性升高, 因此血液中這兩種酶可反映肝臟損傷情況[42]。目前大菱鲆血清生化指標(biāo)含量范圍尚無(wú)標(biāo)準(zhǔn), 研究結(jié)論大多依據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果與對(duì)照的差異進(jìn)行比較而得出。在本實(shí)驗(yàn)中, 添加絲蘭提取物各處理組ALT、AST活力均低于或與對(duì)照組無(wú)顯著差異, 說(shuō)明了添加絲蘭提取物的實(shí)驗(yàn)組大菱鲆肝臟比較正常。

3.5 絲蘭提取物對(duì)大菱鲆幼魚(yú)養(yǎng)殖水環(huán)境的影響

在飼料中添加絲蘭提取物對(duì)水環(huán)境氨氮含量具有顯著的影響, 本研究證實(shí)氨氮濃度不僅與絲蘭提取物添加水平有關(guān), 也與取樣時(shí)間有關(guān)。低水平的添加即可對(duì)氨氮含量產(chǎn)生明顯的降低效果, 并能夠維持較長(zhǎng)時(shí)間, 這與Santacruz-Reyes和Chien的研究結(jié)果一致[9—11]。這可能是由于絲蘭提取物中的某些成分可以結(jié)合氨氮, 或者參與其轉(zhuǎn)化為亞硝酸鹽及硝酸鹽。除此之外, 研究證實(shí)絲蘭提取物中的皂苷成分及糖蛋白均具有減少動(dòng)物胃腸道產(chǎn)生氨氮的作用[43,44]。但是, 絲蘭提取物中參與除氨過(guò)程的確切成分及參與程度目前仍有待進(jìn)一步研究闡明。在水體氨氮含量降低的同時(shí), 亞硝酸鹽的含量則呈現(xiàn)隨添加絲蘭提取物水平升高的趨勢(shì), 這與對(duì)黃臘鯧的研究結(jié)果一致[23], 可能是由于絲蘭提取物參與轉(zhuǎn)化氨氮為亞硝酸鹽, 并可能引發(fā)亞硝化作用[23]。氨氮對(duì)養(yǎng)殖水環(huán)境具有重要影響, 目前對(duì)水環(huán)境中降低氨氮的研究主要集中于化學(xué)途徑, 在淡水養(yǎng)殖系統(tǒng)中采用沸石可以降低氨氮含量, 但在海水中存在大量的陽(yáng)離子(比如 Na+)使得的交換效率降低[45];另外采用福爾馬林降低海水養(yǎng)殖系統(tǒng)的氨氮含量,但其對(duì)養(yǎng)殖動(dòng)物具有一定毒性[46]。因而, 本研究證實(shí)絲蘭提取物可以有效降低大菱鲆養(yǎng)殖水體氨氮含量, 這在大菱鲆工廠化養(yǎng)殖生產(chǎn)中具有重要的應(yīng)用前景。

4 結(jié)論

本實(shí)驗(yàn)研究證明, 飼料中適量添加絲蘭提取物能夠顯著增強(qiáng)大菱鲆幼魚(yú)非特異性免疫能力, 并顯著降低養(yǎng)殖水體氨氮含量, 且對(duì)大菱鲆生長(zhǎng)及體組成無(wú)顯著影響。以非特異性免疫及水體氨氮含量為綜合評(píng)定指標(biāo), 大菱鲆幼魚(yú)飼料中絲蘭提取物的適宜添加量為0.20%。

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EFFECTS OF DIETARY YUCCA SCHIDIGERA EXTRACT ON THE GROWTH PERFORMANCE, BLOOD PHYSIOLOGICAL AND BIOCHEMICAL INDICES OF TURBOT (SCOPHTHALMUS MAXIMUS) AND WATER ENVIRONMENT

WANG Ji-Ying1, LI Pei-Yu2, SONG Zhi-Dong1,2, ZANG Yuan-Qi1, LI Bao-Shan1, QIAO Hong-Jin1,
LIU Xu-Dong2, MA Jing-Jing1and ZHANG Li-Min1
(1. Shandong Provincial Key Laboratory of Restoration for Marine Ecology, Shandong Marine Fisheries Institute, Yantai 264006, China; 2. Shengsuo Fishery Feed Research Centre of Shandong Province, Yantai 265500, China)

In order to assess the effect of Yucca extract on growth performance, nutritional composition, serum immune of juveniles and aquaculture water environment, five formula feeds contained Yucca Extract at levels of 0.00% (D0), 0.05% (D1), 0.10% (D2), 0.20% (D3) and 0.40% (D4) were fed with juvenile Turbot (Scophthalmus maximus). The result showed that, no significant difference occurred in weight gain, specific growth rate, feed conversion ratio, viscerosomatic index, hepatosomatic index and condition factor of fish among all dietary treatments (P＞0.05). Water, crude protein and crude lipid content of whole fish, muscle and liver exhibited no significant difference among groups (P＜0.05). Serum lysozyme was enhanced in fish fed diet D3 significantly, while all immune indices were reduced in fish fed diet D4. The activities of alanine transaminase and aspartate aminotransferase of fish fed diet D3 and D4 were lower than that of the control dietary treatment (P＜0.05). Except D1-6h, Ammonia content of all dietary treatments were significantly lower than that of the control treatment (P＜0.05). Nitrite content of all dietary treatments were higher than that of the control treatment (P＜0.05), while total nitrogen, total phosphorus and phosphate content showed no significant difference to the control treatment (P＞0.05). The optimum content of Yucca Extract for juvenile turbot was 0.20% of weight based on the consideration of non-specific immunity and ammonia nitrogen content in aquaculture water.

Yucca extract; Scophthalmus maximus; Growth performance; Body composition; Physiological index Water environment

S965.3

A

1000-3207(2014)06-1117-10

10.7541/2014.163

2013-07-19;

2014-03-12

國(guó)家海洋公益性行業(yè)科研專項(xiàng)(20120525); 海洋生物產(chǎn)業(yè)水生動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)與飼料創(chuàng)新研發(fā)示范平臺(tái)(201303002); 山東省水生動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)與飼料泰山學(xué)者崗位資助

王際英(1965—), 女, 山東招遠(yuǎn)人; 研究員; 主要從事水生動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)與飼料研究。E-mail: ytwjy@126.com

張利民, 研究員; E-mail: zhanglimin@126.com