曾 東 李 濤 倪學(xué)勤＊＊ 彭芝榕 沈雪嬌 易 丹

近年來，益生菌作為飼料添加劑在畜禽養(yǎng)殖中的作用已被越來越多的人所認(rèn)可［1－3］。乳酸桿菌作為應(yīng)用最為廣泛的一種微生態(tài)制劑，具有提高畜禽生產(chǎn)性能、預(yù)防及治療腹瀉的作用，是國內(nèi)外公認(rèn)的有效益生菌［4－6］。囊素三肽是存在于禽法氏囊中的一種生物活性物質(zhì)，具有獨(dú)特組成結(jié)構(gòu)，其氨基酸組成順序?yàn)橘嚢彼幔M氨酸－甘氨酸(Lys-His-Gly)，具有促進(jìn)法氏囊發(fā)育、淋巴細(xì)胞分化和抗體生成等作用［7－9］。囊素三肽作為一種新型的免疫增強(qiáng)劑，對其研究主要集中在對畜禽免疫水平的提高及其作用機(jī)制，而對其促進(jìn)動物生長方面的報(bào)道較少，與微生態(tài)制劑聯(lián)合使用的研究還未見報(bào)道。本試驗(yàn)旨在通過在基礎(chǔ)飼糧中添加乳酸桿菌制劑，以及肌肉注射囊素三肽，研究乳酸桿菌和囊素三肽對科寶肉雞生長性能、屠宰性能、肉質(zhì)和血清生化指標(biāo)的影響，為乳酸桿菌制劑和囊素三肽的聯(lián)合應(yīng)用提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

囊素三肽，由專業(yè)公司合成，純度99.9%;植物乳酸桿菌F，由四川農(nóng)業(yè)大學(xué)動物微生態(tài)中心分離制備，活菌數(shù)為 1.0×109CFU/mL。

1.2 試驗(yàn)動物與設(shè)計(jì)

選用1日齡科寶肉雞180只，隨機(jī)分成4組，每組3個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)15只雞。Ⅰ組為對照組，飼喂基礎(chǔ)飼糧;Ⅱ組為囊素三肽組，飼喂基礎(chǔ)飼糧，并在4和7日齡時(shí)肌肉注射囊素三肽(0.01 mg/kg BW);Ⅲ組為乳酸桿菌組，飼喂基礎(chǔ)飼糧+0.1%乳酸桿菌制劑;Ⅳ組為囊素三肽+乳酸桿菌組，飼喂基礎(chǔ)飼糧+0.1%乳酸桿菌制劑，并在4和 7日齡時(shí)肌肉注射囊素三肽(0.01 mg/kg BW)。

1.3 試驗(yàn)飼糧

基礎(chǔ)飼糧為玉米－豆粕型飼糧，其組成及營養(yǎng)水平見表1。

1.4 飼養(yǎng)管理

采用3層籠養(yǎng)，每組按重復(fù)分別分布于上、中、下3層。自由采食與飲水。初始溫度控制在35～37℃。

1.5 測定指標(biāo)及方法

1.5.1 生長性能

試驗(yàn)第42天08:00以重復(fù)為單位空腹稱重，準(zhǔn)確記錄采食量和剩料量，計(jì)算各組平均日增重(ADG)、平均日采食量(ADFI)和料重比(F/G)。

1.5.2 屠宰性能

試驗(yàn)第42天從各組選取體重接近平均值的4只雞進(jìn)行屠宰試驗(yàn)。測定指標(biāo)包括:屠宰率、半凈膛率、全凈膛率、胸肌率和腿肌率。

1.5.3 肉質(zhì)

取宰殺雞的右側(cè)胸肌，用肉色分析儀和pH測定儀分別于屠宰后45 min測定肉色和pH。滴水損失和剪切力參考杜炳旺等［10］的方法測定。

1.5.4 血清生化指標(biāo)

試驗(yàn)第42天09:00從各組隨機(jī)選取9只雞(每個(gè)重復(fù)3只)，頸靜脈采血，3 000 r/min離心10 min分離血清，－20℃保存?zhèn)溆?。采用JS200全自動生化分析儀測定血清中的總蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、尿素氮(UN)、總膽固醇(TC)以及甘油三酯(TG)含量。

1.6 統(tǒng)計(jì)分析

用SPSS 19.0軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行方差分析，結(jié)果以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示，各組間的平均值采用Duncan氏法進(jìn)行多重比較，以P＜0.05作為差異顯著的判斷標(biāo)準(zhǔn)，P＜0.01作為差異極顯著的判斷標(biāo)準(zhǔn)。

表1 基礎(chǔ)飼糧組成及營養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))Table 1 Composition and nutrient levels of the basal diet(air-dry basis) %

2 結(jié)果與分析

2.1 乳酸桿菌和囊素三肽對肉雞生長性能的影響

由表2可知，Ⅱ和Ⅳ組平均日采食量極顯著高于Ⅰ和Ⅲ組(P＜0.01);與Ⅰ組相比，其他3組平均日增重分別提高了 8.41%、3.82%和3.38%，但組間差異均不顯著(P＞0.05);Ⅲ組料重比最低，為1.75，Ⅳ組最高，為 1.91，但組間無顯著差異(P＞0.05)。

表2 乳酸桿菌與囊素三肽對肉雞生長性能的影響Table 2 Effects of Lactobacilli and bursin on growth performance of broilers

2.2 乳酸桿菌和囊素三肽對肉雞屠宰性能的影響

由表3可知，Ⅲ組屠宰率最高，為89.58%，其次為Ⅱ組，但組間差異均不顯著(P＞0.05)。Ⅱ和Ⅲ組半凈膛率極顯著高于Ⅰ組(P＜0.01)，Ⅰ與Ⅳ組差異不顯著(P＞0.05)。與Ⅰ組相比，Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ組全凈膛率、胸肌率和腿肌率均有所提高，但組間差異均不顯著(P＞0.05)。

表3 乳酸桿菌與囊素三肽對肉雞屠宰性能的影響Table 3 Effects of Lactobacilli and bursin on slaughter performance of broilers %

2.3 乳酸桿菌與囊素三肽對肉雞肉質(zhì)的影響

由表4可知，Ⅱ和Ⅲ組紅度分別極顯著(P＜0.01)和顯著(P＜0.05)高于Ⅰ組。Ⅱ組黃度顯著高于Ⅰ組(P＜0.05)，Ⅲ和Ⅳ組黃度極顯著高于Ⅰ組(P＜0.01)。Ⅱ組亮度顯著高于Ⅰ組(P＜0.05)，Ⅲ組極顯著高于Ⅰ組(P＜0.01)，Ⅰ與Ⅳ組差異不顯著(P＞0.05)。Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ組pH均高于Ⅰ組，但組間差異不顯著(P＞0.05)。Ⅰ和Ⅲ組滴水損失極顯著低于Ⅱ和Ⅳ組(P＜0.01)。與Ⅰ組相比，Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ組剪切力均極顯著降低(P＜0.01)。

表4 乳酸桿菌與囊素三肽對肉雞肉質(zhì)的影響Table 4 Effects of Lactobacilli and bursin on meat quality of broilers

2.4 乳酸桿菌和囊素三肽對肉雞血清生化指標(biāo)的影響

由表5可知，與Ⅰ組相比，Ⅲ組血清中總蛋白和白蛋白含量顯著升高(P＜0.05)，Ⅱ和Ⅳ組也有升高的趨勢，但差異不顯著(P＞0.05)。各組間血清中尿素氮和總膽固醇含量差異均不顯著(P＞0.05)。Ⅲ和Ⅳ組血清中甘油三酯含量比Ⅰ組分別降低了 40.00%和 25.71%，差異顯著(P＜0.05)，Ⅱ組與其余各組間差異均不顯著(P＞0.05)。

表5 乳酸桿菌和囊素三肽對肉雞血清生化指標(biāo)的影響Table 5 Effects of Lactobacilli and bursin on serum biochemical parameters of broilers

3 討論

3.1 乳酸桿菌與囊素三肽對肉雞生長性能的影響

微生態(tài)制劑在動物腸道內(nèi)繁殖，產(chǎn)生多種生理活性物質(zhì)，促進(jìn)動物對營養(yǎng)物質(zhì)消化、吸收，提高飼料轉(zhuǎn)化率［11］。Kalavathy 等［12］研究表明，飼喂0.1%乳酸菌混合物可顯著提高雛雞1～21 d的平均日增重，降低料重比。徐基利等［13］研究表明，不同乳酸桿菌制劑均能顯著提高肉仔雞平均日增重，降低料重比。與上述結(jié)果不同，本試驗(yàn)中乳酸桿菌提高肉雞平均日采食量，但對平均日增重和料重比無顯著影響，原因可能是本試驗(yàn)所用菌株為非雞源性的乳酸桿菌，與宿主腸道腸黏膜的相互作用不密切，導(dǎo)致其不能發(fā)揮良好的應(yīng)用效果。囊素三肽的促生長作用可能與免疫增強(qiáng)作用有關(guān)，且囊素三肽作為動物體自身分泌的一種氨基酸組成的物質(zhì)，不會引起動物強(qiáng)烈的免疫應(yīng)激，在體內(nèi)分解也具有無毒、無殘留的特點(diǎn)。計(jì)慧琴［14］和田光洪［15］的研究表明囊素三肽可不同程度提高雞的生長速度。本試驗(yàn)結(jié)果表明，囊素三肽單獨(dú)使用和囊素三肽和乳酸桿菌聯(lián)合使用均能提高肉雞平均日采食量，但兩者無論單獨(dú)使用或聯(lián)合使用對平均日增重和料重比均無顯著影響。其原因可能與囊素三肽能夠提高機(jī)體靶細(xì)胞第二信使含量，促進(jìn)細(xì)胞蛋白質(zhì)的合成與轉(zhuǎn)化有關(guān)［16］。而聯(lián)合使用效果不如兩者單獨(dú)使用，是否揭示兩者不存在協(xié)同作用，還有待進(jìn)一步試驗(yàn)論證。

3.2 乳酸桿菌與囊素三肽對肉雞屠宰性能的影響

有研究認(rèn)為，肉雞活體質(zhì)量直接影響胴體質(zhì)量和品質(zhì)，但關(guān)于乳酸桿菌對肉雞屠宰性能影響的報(bào)道并不多。李菊等［17］研究發(fā)現(xiàn)，益生素對肉仔雞屠宰指標(biāo)的影響主要表現(xiàn)在能顯著提高肉仔雞胸肌率，而對肉仔雞的全凈膛率、腿肌率和腹脂率等沒有顯著影響。郭元晟等［18］研究報(bào)道，發(fā)酵乳酸桿菌(L.fermentum F-6)可以顯著提高肉雞的屠宰率和胸肌率，對肉雞全凈膛率和腿肌率有一定的促進(jìn)作用，但無顯著影響。本試驗(yàn)結(jié)果表明，乳酸桿菌能顯著提高肉雞半凈膛率，而對屠宰率、全凈膛率、胸肌率和腿肌率沒有顯著的影響，與上述結(jié)果的差異可能與試驗(yàn)所選的菌種、添加的劑量、飼養(yǎng)環(huán)境條件以及動物自身生理狀態(tài)等有關(guān)，值得進(jìn)一步探討。

3.3 乳酸桿菌與囊素三肽對肉雞肉質(zhì)的影響

近年來關(guān)于乳酸桿菌對肉雞肌肉品質(zhì)的影響報(bào)道結(jié)果不一。李菊等［17］研究發(fā)現(xiàn)，對肉雞飼喂乳酸菌(CAU6001)，可以提高肉雞胸肌和腿肌紅度和黃度，但對亮度無顯著影響，對肌肉品質(zhì)有一定的改善作用。郭元晟等［18］研究報(bào)道，飼喂L.fermentum F-6對肉雞烹飪損失率、肉色、pH均無顯著影響，但與對照組相比，L.fermentum F-6組的肉色紅度與pH有不同程度增加。然而，Zhu等［19］研究表明唾液乳酸桿菌對肉雞胸肌肉色及肌肉中肌紅色素含量均無顯著影響。林高峰［20］等研究發(fā)現(xiàn)，微生態(tài)制劑組肉色黃度顯著高于對照組和抗生素組，而pH和剪切力組間差異不顯著。本試驗(yàn)結(jié)果表明，乳酸桿菌和囊素三肽均能顯著改善肉色，提高肌肉嫩度，而對pH的影響不顯著。囊素三肽和乳酸桿菌聯(lián)合使用未顯協(xié)同效應(yīng)的原因可能與二者作用的部位和機(jī)理不同有關(guān):囊素三肽主要通過促進(jìn)B細(xì)胞信號傳導(dǎo)，誘導(dǎo)前體B細(xì)胞分化，增加環(huán)磷酸腺苷(cAMP)、環(huán)磷酸鳥苷(cGMP)濃度，從而促進(jìn)B細(xì)胞抗體的合成;而乳酸桿菌作為有效益生菌，在動物腸道內(nèi)定植，通過與有害菌群占位競爭，并產(chǎn)生乳酸菌素等抗菌素抑制病原菌的增殖，維持腸道微生態(tài)平衡，從而達(dá)到促進(jìn)動物生長及提高免疫力的作用。

3.4 乳酸桿菌和囊素三肽對肉雞血清生化指標(biāo)的影響

血清中的總蛋白和白蛋白含量能反映機(jī)體蛋白質(zhì)代謝水平，乳酸桿菌通過產(chǎn)生特殊酶系分解食物中的蛋白質(zhì)，同時(shí)產(chǎn)酸酸化腸道環(huán)境，增加蛋白酶活性來參與蛋白質(zhì)代謝過程。王全溪等［21］證實(shí)，在飼糧中添加100 mg/kg的乳酸菌素能提高28日齡肉雞的血清總蛋白含量。本試驗(yàn)結(jié)果顯示，乳酸桿菌和囊素三肽的單獨(dú)使用和聯(lián)合應(yīng)用有提高肉雞血清總蛋白和白蛋白含量的趨勢，增強(qiáng)機(jī)體對蛋白質(zhì)的代謝能力。血清尿素氮是機(jī)體蛋白質(zhì)代謝的最終產(chǎn)物，可以反映機(jī)體蛋白質(zhì)代謝和氨基酸之間的平衡狀況，平衡良好時(shí)血清尿素氮含量下降，尿素氮含量的降低可以為其他組織的蛋白質(zhì)沉積提供氨基酸等原料。Fukushim等［22］用混合益生菌飼喂大鼠4周后血清總膽固醇含量降低，認(rèn)為益生菌可以抑制膽固醇合成過程中的關(guān)鍵酶，從而降低機(jī)體膽固醇含量。本試驗(yàn)結(jié)果表明，乳酸桿菌和囊素三肽的使用能降低血清總膽固醇含量，這與王全溪等［21］的研究結(jié)果一致，可能是飼糧中添加乳酸桿菌在肉雞前期生長中促進(jìn)了機(jī)體對脂類的吸收，而后期有效地抑制了膽固醇合成過程中關(guān)鍵酶的活性［23］，但其作用機(jī)理還有待進(jìn)一步研究。

4 結(jié)論

乳酸桿菌和囊素三肽在一定程度上有提高肉雞生長性能和屠宰性能的作用，并能改善肉雞肉質(zhì)及血清生化指標(biāo)，但兩者聯(lián)合使用的效果并未優(yōu)于單獨(dú)使用。

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