王淑明,鞠貴春,張志明,胡大偉
(1 大連名威貂業(yè)有限公司,遼寧 大連116100;2 吉林農(nóng)業(yè)大學 中藥材學院,吉林 長春130118)
水貂屬于哺乳綱、食肉目、鼬科、鼬屬的一種小型珍貴毛皮動物。水貂所產(chǎn)毛皮因具有毛絨充足、靈活、平齊、具光澤、富有彈性和防寒保暖性能好等特征而素有“裘皮之王”的美譽。在野生狀態(tài)下,水貂主要棲息在河邊、湖畔和小溪,以捕捉小型嚙齒類、鳥類、兩棲類、魚類、鳥蛋和某些昆蟲為食。水貂聽覺、嗅覺靈敏,活動敏捷,善于游泳和潛水,常在夜間以偷襲的方式獵取食物,性情兇殘,除交配和哺育仔貂期間外,均單獨散居。水貂每年繁殖1次,2-3月交配,4-5月產(chǎn)仔,一般胎產(chǎn)仔5~6只。仔貂9~10月齡性成熟,2~10年內(nèi)具有生育能力,壽命12~15年。每年換毛2次,春秋季各換毛1次[1]。
水貂的門齒短小,犬齒非常發(fā)達而尖銳,臼齒的咀嚼面不發(fā)達。因此,水貂的牙齒不適合磨碎植物的莖葉和纖維素[2]。水貂消化道比較短(僅是體長的4倍)、無盲腸、胃容積小(60~100 mL),飼料在體內(nèi)停留的時間短(90~240 min),主要依靠酶消化[3],其消化系統(tǒng)成熟相對較晚,仔貂蛋白酶、胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶活性和數(shù)量從出生到12周逐漸增加,所以早期仔貂對蛋白質(zhì)的消化率較低[4]。水貂消化腺分泌的淀粉酶較少[5-6],對碳水化合物酶解活化的能力有限。水貂的物質(zhì)代謝水平在一年四季里有所差異,一般秋季和初冬物質(zhì)代謝水平比春、夏低,體質(zhì)量較大;夏季代謝最強,體質(zhì)量最輕;而冬季代謝最弱、體質(zhì)量最重[7]。
1934年,Todd等[8]用大鼠試驗,首次證實鋅是一種動物體所必需的微量元素,它幾乎存在于機體所有組織和器官中,主要存在于肝臟、骨骼、肌肉、心臟、腎臟和皮膚中,但同一器官組織中的鋅含量因動物種類、年齡等的不同而有差異。飼料中的鋅大多數(shù)以結(jié)合態(tài)存在,主要與蛋白質(zhì)、氨基酸、核酸和植酸結(jié)合,鋅必須從這些化合物中釋放出來才能被組織器官吸收。鋅在動物體內(nèi)主要以酶的必需成分或激活劑參與一系列生理生化反應。目前添加到動物飼料中的鋅主要有3種:無機鋅、簡單有機鋅和鋅的氨基酸、蛋白質(zhì)螯合物。鋅作為飼料添加劑在畜禽方面的應用報道很多,但在水貂方面尚未見報道。本試驗研究了不同鋅源及鋅水平對水貂血清生化指標和臟器中微量元素含量的影響,以期探明蛋氨酸鋅能否代替硫酸鋅及其適宜的鋅添加水平。
1.1.1 試驗動物 在大連名威貂業(yè)有限公司,隨機選擇60日齡健康雄性金州黑公貂70只,用于試驗。
1.1.2 鋅源飼料添加劑 蛋氨酸鋅(Zn-Met,Zn≥17%),哈爾濱德邦飼料有限公司生產(chǎn);硫酸鋅(ZnSO4·7H2O,Zn≥22%),天津市光復科技發(fā)展有限公司生產(chǎn)。
1.1.3 試驗日糧及其配制 日糧以大連名威貂業(yè)有限公司冬毛生長期水貂的飼料配方作為基礎日糧?;A日糧配比及營養(yǎng)水平見表1。
表 1 水貂的日糧配比及日糧營養(yǎng)成分
試驗基礎日糧與大連名威貂業(yè)有限公司其他水貂日糧一同配置,大型攪拌罐攪拌,試驗動物的基礎日糧定量(400 g),按量取出放入食盤中再次攪拌均勻;試驗用鋅添加:按每只水貂的不同添加水平,稱取不同質(zhì)量鋅源,加入5 mL蒸餾水,完全溶解后,與基礎日糧再次攪拌均勻后,飼喂試驗水貂。
1.2.1 試驗設計與飼養(yǎng)管理 1)試驗設計。將供試的70只金州黑公貂隨機分為7個處理組,每處理10個重復,每個重復1只水貂,處理組水貂初始體質(zhì)量差異不顯著(P>0.05)。試驗于2009-07-31-2009-11-26在大連名威貂業(yè)有限公司進行,2009-08-21-2009-08-26為正試期,其中對照組飼喂大連名威貂業(yè)有限公司的日糧,6個試驗組分別飼喂添加20,30和40 mg/kg硫酸鋅或蛋氨酸鋅的日糧。
2)飼養(yǎng)管理。試驗水貂飼養(yǎng)管理與大連名威貂業(yè)有限公司的金州黑貂飼養(yǎng)管理相同。試驗水貂均單籠(40 cm×40 cm×60 cm)飼養(yǎng),每日14:30飼喂1次,自由采食、飲水,每日記錄實際采食量。
1.2.2 樣本采集與處理 在水貂取皮的同時,從每組中選擇體質(zhì)量相近的健康金州黑貂4只,禁食24 h后處死,采用心臟采血法采血,將血液于4 000 r/min 離心20 min后,吸取血清,放入-20 ℃冰箱中保存。同時,采集水貂的全心及同側(cè)的肝臟并編號,裝入取樣袋中,于65 ℃烘干成風干樣本備用。
1.2.3 測定指標及方法 血清生化指標的測定由吉林農(nóng)業(yè)大學醫(yī)院完成,堿性磷酸酶(ALP)活性采用磷酸苯二鈉法測定,乳酸脫氫酶(LDH)活性采用L-P反應固定時間法測定,銅鋅超氧化物歧化酶(CuZn-SOD)活性采用鄰苯三酚自氧化法測定。微量元素的測定:取烘干樣品0.5 g,置電爐上碳化后,在馬福爐中550 ℃灰化4 h,冷卻后,用稀酸溶液溶解并定容,用日本島津公司生產(chǎn)的AA-6300原子吸收分光光度計測定Zn、Fe、Cu、Mn含量。
數(shù)據(jù)采用Excel 2003進行分析,統(tǒng)計顯著水平設計為P<0.05。
表2表明,添加不同鋅源及鋅水平時水貂血清CuZn-SOD、ALP和LDH 活性均顯著高于對照組(P<0.05);同一鋅水平下,蛋氨酸鋅組的CuZn-SOD、ALP和LDH活性均顯著高于硫酸鋅組(P<0.05)。當鋅含量為0~40 mg/kg時,隨著鋅水平的增加,硫酸鋅組水貂血清ALP、CuZn-SOD和LDH活性呈上升趨勢,而蛋氨酸鋅組血清ALP、CuZn-SOD和LDH活性呈先上升后下降趨勢。日糧中添加40 mg/kg的硫酸鋅或20 mg/kg的蛋氨酸鋅時, Cu Zn-SOD、ALP和LDH的活性均達到最高。
表 2 不同鋅源及鋅水平對水貂血清酶活性的影響
2.2.1 心臟中微量元素含量 不同鋅源及鋅水平對水貂心臟中微量元素含量的影響見表3。由表3可知,日糧中添加不同水平鋅對心臟微量元素含量有一定影響。試驗各組鐵、銅和錳含量大多顯著高于對照組(P<0.05),硫酸鋅含量為40 mg/kg時,水貂心臟中微量元素的含量均最高;蛋氨酸鋅含量為20 mg/kg時,水貂心臟中微量元素含量均最高。此外,不同鋅源對心臟中微量元素含量有一定影響。當鋅含量為20 mg/kg時,蛋氨酸鋅組心臟中鐵、鋅、銅和錳含量均顯著高于硫酸鋅組(P<0.05);當鋅含量為30 mg/kg時,蛋氨酸鋅組心臟中鐵、鋅和銅的含量顯著高于硫酸鋅組(P<0.05),但兩組錳含量差異不顯著(P>0.05);當鋅含量為40 mg/kg時,兩組心臟中鐵、鋅、銅和錳含量差異均不顯著(P>0.05)。
表 3 不同鋅源及鋅水平對水貂心臟中微量元素含量的影響
2.2.2 肝臟中微量元素含量 由表4可知,日糧中添加不同水平的鋅對肝臟微量元素含量有一定影響。試驗各組鐵、鋅、銅和錳含量大多顯著高于對照組(P<0.05),當日糧中添加40 mg/kg硫酸鋅或20 mg/kg蛋氨酸鋅時,水貂肝臟中微量元素含量均最高。添加不同鋅源對肝臟中微量元素含量有一定影響。當鋅含量為20和30 mg/kg時,蛋氨酸鋅組肝臟中鐵和銅含量均顯著高于硫酸鋅組(P<0.05);當鋅含量為40 mg/kg時,蛋氨酸鋅組肝臟中鐵和銅含量均高于硫酸鋅組,但兩組間差異不顯著(P>0.05);當鋅含量為20~40 mg/kg時,蛋氨酸鋅組肝臟中鋅含量均高于硫酸鋅組,但兩組間差異不顯著(P>0.05)。
表 4 不同鋅源及鋅水平對水貂肝臟中微量元素含量的影響
Deuk[9]研究得出,動物機體內(nèi)血液中的許多生化參數(shù)受發(fā)育階段、營養(yǎng)水平和內(nèi)分泌狀況等的影響,因而其可作為反映機體生理狀況的指標。ALP是一種在堿性條件下具有較高活性的酶,在機體各組織和血液中廣泛分布。因鋅可作為ALP的輔基,所以通過測定血清ALP活性可判斷機體對鋅的吸收和利用情況,ALP活性提高意味著機體對鋅的利用率較高。ALP活性對日糧鋅水平的變化較敏感,已被列為檢測動物體內(nèi)鋅營養(yǎng)的指標之一,向缺鋅仔豬日糧中添加鋅能顯著提高ALP活性[10-11]。王安等[12]和單安山[13]研究得出,雞飼料中添加鋅,可顯著提高ALP活性。本試驗研究結(jié)果與上述結(jié)論一致,與對照組相比,日糧中添加不同水平鋅時,均顯著提高了血清ALP活性(P<0.05);在同等鋅添加水平下,蛋氨酸鋅組血清ALP活性顯著高于硫酸鋅組。這表明蛋氨酸鋅的利用率比硫酸鋅好,這與王立新等[14]的研究結(jié)果基本一致。
研究表明,鋅還可以消除體內(nèi)異物,還原過氧化物自由基,保護細胞免受氧代謝反應中產(chǎn)生的超氧化自由基損壞的超氧化物岐化酶的活性[15]。SOD是機體內(nèi)的重要抗氧化物酶,其活性反映了機體清除氧自由基的能力。Cao等[16]研究證實,缺鋅使鼠CuZn-SOD活性下降,補鋅后CuZn-SOD活性迅速增強。趙昕紅等[17]在仔豬的日糧中添加3 000 mg/kg 氧化鋅,其血液中CuZn-SOD的活性顯著高于低鋅組。本試驗結(jié)果表明,當鋅含量為0~40 mg/kg時,隨著鋅水平的增加,硫酸鋅組水貂血清CuZn-SOD活性呈上升趨勢,而蛋氨酸鋅組水貂血清CuZn-SOD活性呈先上升后下降趨勢;與對照組相比,日糧中添加不同水平鋅時水貂血清CuZn-SOD活性顯著提高(P<0.05),且同一鋅添加水平下,蛋氨酸鋅組水貂血清CuZn-SOD的活性顯著高于硫酸鋅組(P<0.05)。
本研究中,日糧中添加鋅可顯著提高LDH的活性,LDH活性隨硫酸鋅水平的增加呈上升趨勢,而隨蛋氨酸鋅水平的增加呈先上升后下降趨勢;且同一鋅添加水平下,蛋氨酸鋅組LDH活性顯著高于硫酸鋅組(P<0.05)。
由于肝臟結(jié)構和生理功能的特殊性,大部分微量元素較集中地貯存在動物肝臟內(nèi),因此肝臟有“微量元素庫”之稱。一般而言,肝臟中微量元素較高而且比較穩(wěn)定,它在一定程度上可以反映出環(huán)境微量元素水平。本試驗結(jié)果顯示,日糧中添加不同水平鋅對心臟和肝臟中微量元素含量有一定影響,且不同鋅源的影響有差異,這與Hill等[18]的報道一致。這是因為肝臟是動物體內(nèi)物質(zhì)貯存與代謝的主要場所,對日糧中的鋅比較敏感。Pimentel等[19]比較了無機鋅和蛋氨酸鋅對肉雞的生物學有效性,發(fā)現(xiàn)2種來源鋅對雛雞脛骨和肝臟中鋅含量的影響均無明顯差異,這與本研究結(jié)果不同。由于吸收入血的鋅大部分進入肝臟[20],首先在肝臟、胰臟、脾臟中沉積,只有少量沉積在肌肉和腦中,然后大部分的鋅轉(zhuǎn)運到骨中。因此各組織對鋅的敏感性不同,而在組織中的沉積量也存在差異。有關不同鋅源對水貂臟器中微量元素含量的影響,還有待于進一步深入研究。
日糧中添加鋅,能夠提高水貂血清中ALP、CuZn-SOD、LDH活性,增加鋅、鐵、銅、錳在水貂心臟和肝臟中的沉積。且同一鋅添加水平下,蛋氨酸鋅組以上指標均明顯高于硫酸鋅組。日糧中添加20 mg/kg蛋氨酸鋅時,血清中CuZn-SOD、ALP和LDH活性以及臟器中微量元素含量均較高,可見水貂日糧中適宜添加20 mg/kg的蛋氨酸鋅。
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